干细胞因子对糖尿病结肠Cajal间质细胞的影响

目的 探讨糖尿病(DM)小鼠干细胞因子(SCF)对结肠Cajal间质细胞(ICC)异常的影响.方法 40只雄性C57/BL6小鼠分为正常对照组,DM组、正常+抗-SCF组、DM+SCF组,每组10只.DM成模后6周处死小鼠,以流式细胞仪、透射电镜、Western印迹法观察近端结肠组织中ICC的变化,以Western印迹、酶联免疫吸附实验(ELISA)检测结肠组织和血清中SCF的表达情况.结果 DM小鼠血清和近端结肠组织中SCF均明显降低,伴有结肠中ICC数量减少、超微结构显著破坏;正常+抗-SCF组,血清和近端结肠组织中SCF均明显降低,并伴有结肠中ICC数量减少、超微结构显著破坏(类似DM组);DM+SCF干预后,血清和近端结肠组织中SCF水平增高,ICC的数量以及超微结构病变得到显著改善.结论 DM小鼠血清和近端结肠组织中SCF水平的下降,可能是DM结肠中ICC数量减少和超微结构破坏的原因;外源性SCF能改善DM相关的胃肠道ICC病变.     

槟榔对小鼠结肠Cajal间质细胞形态学影响的研究

[目的]探讨槟榔对小鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)超微结构的影响及其与肠神经的关系.[方法]60只小鼠随机分为4组,每组15只.对照组、甘草组、槟榔组及莫沙必利组每天分别给予等体积的0.85％氯化钠、甘草溶液(3.75 g/kg)、槟榔溶液(5 g/kg)、莫沙必利溶液(0.4 mg/kg)灌胃,15 d后透射电镜...     

大黄素对结肠Cajal间质细胞毒-效作用的研究

[目的]建立小鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)的体外培养方法,探讨大黄素对体外培养结肠ICC的毒-效作用。[方法]酶解消化法体外培养KM乳鼠结肠ICC,运用免疫荧光法鉴定结肠ICC,并用光学显微镜观察其生长期的形态变化。应用均匀设计法和MTT比色法探索大黄素不同浓度和作用时间对结肠ICC的影响。[结果]大黄素对结肠ICC最大毒性浓度为1%,最小毒性浓度为0.001%;最大药效浓度为0.000 1%,最小药效浓度为0.000 008%。[结论]成功建立了体外培养KM乳鼠的结肠ICC的方法。大黄素对结肠ICC既有毒性又有药效作用,毒性浓度范围为0.001%~1%;药效浓度范围为0.000 008%~0.000 1%。     

干细胞因子对糖尿病小鼠结肠Cajal间质细胞的干预效应

目的:探讨外源性干细胞因子(stem cell factor,SCF)能善糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠结肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)的异常病变.方法:DMd、鼠一次性ip链脲佐菌素(STZ,150mg/kg)造模,将♂ C57/BL6小鼠分为正常对照组(control组)、糖尿病组(DM组)、糖尿病 外源性SCF组(DM SCF组):DM SCF组ip SCF0.2 μg/(kg穌),control组和DM组每天ip等量的磷酸盐缓冲液(pH=7.4),干预6 wk后处死所有小鼠,以Western blot检测远端结肠组织中SCF的表达情况,以免疫组化、透射电镜和Western blot观察远端结肠ICC的变化.结果:DM小鼠远端结肠组织中SCF水平明显降低(178.97±13.51 vs 200.25±16.48,P<0.05),且伴结肠组织中ICC数量减少(72±10 vs 102±12.P＜0.05)、超微结构严重破坏.DM鼠给予外源性SCF干预后,结肠组织中SCF表达(210.14±11.8)上调(P＜0.05),且ICC的数量(87±10,P＜0.05)和超微结构显著改善.结论:外源性SCF对糖尿病相关的结肠ICC异常病变有一定改善或逆转作用.     

舒胃汤对功能性消化不良大鼠Cx43蛋白的分布及Cajal间质细胞的修复与再生的影响

[目的]观察舒胃汤对功能性消化不良（FD）肝郁脾虚型大鼠Cx43蛋白的分布及Cajal间质细胞的修复与再生的影响,探讨舒胃汤治疗FD的机制.[方法]将72只大鼠随机分为对照组、模型组、舒胃汤低剂量组（舒低组）、舒胃汤中剂量组（舒中组）、舒胃汤高剂量组（舒高组）和莫沙比利组（西药组）,每组各12只.舒低组、舒中组、舒高组分别给予舒胃汤0.767 g/ml、1.534 g/ml、3.068 g/ml,西药组予莫沙必利1.37 mg/kg.采用复合病因造模（慢性束缚应激十过度疲劳十饮食失节）,造成FD肝郁脾虚证大鼠模型.造模后第3天各组给予相应药液,对照组和模型组每日予以蒸馏水（10ml/kg）,均为1次/d,持续14 d.第15天处死取胃窦组织和小肠组织做免疫组织化学和荧光双染色观察Cx43蛋白的表达和ICC及神经纤维的形态.[结果]与对照组比较,模型组胃窦组织和小肠组织中Cx43蛋白阳性表达明显下降（P＜0.01）;与模型组比较,舒高组、舒中组和西药组胃窦组织和小肠组织中Cx43蛋白阳性表达明显升高（P＜0.01）;与对照组比较,模型组ICC超微结构损伤明显,胆碱能神经-ICC-SMC网络结构紊乱,ICC和神经纤维数目减少（P＜0.01）,荧光强度明显减弱（P＜0.01）;与模型组比较,舒高组、舒中组和西药组ICC超微结构较为正常完整,胆碱能神经-ICC-SMC网络基本完整,ICC和神经纤维数目明显增多（P＜0.01）,荧光强度明显加强（P＜0.01）.[结论]舒胃汤能够上调Cx43蛋白的表达,修复ICC和促进ICC的再生,增加神经纤维的数目,从而保持胆碱能神经-ICC-SMC网络结构的完整,恢复胃肠动力而有效治疗FD.     

糖尿病慢传输运动结肠Cajal间质细胞和干细胞因子的变化

目的:了解Cajal间质细胞(ICC)、干细胞因子(SCF)在糖尿病大鼠结肠慢传输运动模型中的变化,探讨其作用及可能的调控机制.方法:54只♂ SD大鼠分为糖尿病和正常对照组,经腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,于造模后6,8,10 wk各组分别处死9只大鼠,以免疫组化、透射电镜研究近端结肠组织中ICC的变化,以Western blot方法检测近端结肠组织中膜结合型干细胞因子的表达,以ELISA测定血清中可溶型SCF的浓度,分析他们之间的相关性.结果:糖尿病大鼠血糖随时间增加而升高,而胃肠推进率却降低(P＞0.05).免疫组化结果显示,6,8,10 wk时的糖尿病大鼠肌间ICC表达较对照组明显减少(P＜0.05),且糖尿病大鼠近端结肠ICC数量随时间推移有逐渐降少的趋势.透射电镜显示糖尿病大鼠结肠ICC线粒体肿胀、空泡样变,细胞器数量明显减少.与对照组相比,糖尿病大鼠血清中可溶型SCF显著降低(6 wk:0.93±0.53 μg/L vs 1.87±0.92 μg/L,P＜0.05;8 wk: 0.78±0.21 μg/L vs 1.76±0.94 μg/L,P＜0.05;10 wk:0.73±0.20 μg/L vs1.82±0.96 μg/L,P＜0.05),而结肠组织中的膜结合型SCF无明显差异(P＞0.05),且可溶型干细胞因子与ICC具有相同的变化趋势.结论:糖尿病胃肠动力障碍大鼠存在血清中可溶性干细胞因子浓度下降以及结肠组织中ICC数量减少和结构破坏,这些变化及其可能存在的序贯性调控作用可能是糖尿病出现结肠慢传输变化的基础.     

Cajal间质细胞与胆道系统

Cajal间质细胞(ICC)是一类分布于胃肠道及少部分胃肠外器官,具有胃肠起搏及信号转导等功能的细胞.已有较多报道证实其与一系列胃肠动力性疾病如假性肠梗阻、先天性巨结肠、糖尿病胃轻瘫等疾病的发生密切相关.近年来还发现,ICC在胆道系统的胆囊、胆囊管、Oddi括约肌等多处存在,并参与Oddi括约肌自主节律性运动的调控等活...     

Cajal间质细胞与肠炎性病变

Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)是胃肠道运动的起搏细胞,它们参与起搏电流的传导和介导肠神经元与平滑肌细胞之间的神经信号。研究显示,ICC数目减少或缺乏的小肠和结肠将失去正常蠕动活性。证实ICC的病理学改变与胃肠运动障碍相关。炎症可引起胃肠运动障碍,ICC在其病理生理中的作用开始受到关注。对ICC在疾病状态下的作用进行详尽解释,还需要在生理和药理学方面进行更深入的研究。     

Cajal间质细胞的研究进展

Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)是一类主要分布于胃肠道的间质细胞,是胃肠道的起搏细胞(pacemaker cell)和信号传导细胞,与肌细胞以及末梢神经元有着紧密的关系,具有激发和促进胃肠蠕动的作用.借助于电子显微镜技术,清楚观察到了ICC位置分布和内部精细结构;应用免疫荧光等生化技术,发现了其特殊表达的C-kit蛋白;利用电生理技术,得知多种胃肠动力障碍疾病也与其异常有关.多年来,学者逐渐在胃肠道、胆道、膀胱、子宫等部位发现了ICC的踪迹,并试图阐述其与某些疾病的发生机制.本文就ICC的起源、形态学、受体和功能、以及与其相关的疾病等作一综述.     

谷氨酸诱导大鼠结肠Cajal间质细胞构建自噬模型

目的 通过谷氨酸诱导离体大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)构建细胞自噬模型.方法 使用不同浓度的谷氨酸不同时间点作用于原代培养的大鼠结肠ICC,免疫荧光鉴定大鼠结肠ICC细胞;CCK-8法检测谷氨酸对ICCs活力的影响;Western印迹检测不同浓度谷氨酸在不同作用时点对大鼠结肠ICC自噬蛋白微管相关蛋白轻链(LC)...     

小鼠空肠cajal间质细胞的分离与培养

目的研究CD1小鼠空肠cajal间质细胞(ICC)的分离和培养方法,为进一步研究其生理学特征提供基础。方法无菌条件下取小鼠空肠组织,分离出平滑肌肌条,采取组织块培养法,在24孔培养板中进行原代培养,光镜下观察其形态,用荧光标记的特异性C_Kit抗体进行鉴定。结果倒置显微镜下观察ICC有多个突起,并有次级分支,相互之间形成网络。免疫荧光法可见ICC呈阳性。结论组织块培养法可以简便、有效地培养ICC。所培养的ICC细胞生物学特性有待进一步研究。     

Cajal间质细胞与胃肠动力关系的研究进展

Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)是胃肠慢波的起搏细胞,具有产生慢波、传导慢波电位、调节神经递质等功能,是调节胃肠动力的重要环节。ICC在维持正常胃肠动力方面发挥着重要作用,同时其形态、数量及分布的改变会导致多种胃肠动力障碍性疾病。一些以ICC为靶向治疗胃肠动力性疾病药物的研究也取得一定进展。本文就近年来ICC与胃肠动力关系的研究进展作一概述。     

Dissociation, culture and morphologic changes of interstitial cells of Cajal in vitro

AIM: To study the method of dissociation, culture and investigate its morphologic changes in vitro of interstitial cells of Cajal (ICC). METHODS: Enzymatic digestion and Ficoll density centrifugation were used to dissociate ICC from the ileal segment of mice. Factors including contamination, Ca~(2+), Mg~(2+) and collagenase, and stem cell factor, etc., were investigated. ACK2, the antibody of c-kit, was used to identify the cultured ICC. Both light microscope and fluorescence microscope were used to observe the changes of ICC in vitro. RESULTS: The method for dissociation and culture of ICC in vitro was successfully established. After 24 h, cultured ICC exhibited a few axis-cylinders, and longer axis-cylinders were observed to form synapse of each other after 3 d. More widespread connections formed within 7 d in vitro. The changes of its morphologic character were obvious within 7 d; however, there were no obvious morphologic changes after 30 d. CONCLUSION: Many factors can influence the dissociation and culture of ICC.     

不同时程慢性束缚水浸应激对大鼠胃窦Cajal间质细胞超微结构的影响

目的:研究不同时程慢性束缚水浸应激大鼠胃窦Cajal间质细胞(ICC)的超微结构改变.方法:♂ SD大鼠48只随机分为6组、即实验3、7、28 d组和对照3、7、28 d组,每组8只.实验组每日束缚水浸1 h,对照组自由摄食饮水;于实验第4、8、29天晨禁食12 h后脱颈处死.取胃窦组织2块放入3%戊二醛中固定并电镜下观察ICC超微结构.结果:所有对照组ICC的超微结构均无异常改变,试验3、7、28 d各组ICC的超微结构与同期对照组比较均有明显的损害,主要表现为ICC的缝隙连接减少、细胞器减少等,以肌内ICC(ICC-MY)和肌间ICC(ICC-IM)为主:随着应激时间的延长,ICC的超微结构受损逐渐加重.结论:慢性束缚水浸应激可以损伤大鼠胃窦ICC的超微结构.     

糖尿病结肠动力障碍大鼠结肠Cajal间质细胞凋亡和间隙连接蛋白43的表达

目的 探讨糖尿病结肠动力障碍大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)的凋亡及ICC的间隙连接蛋白43(Cx43)表达的变化在结肠动力障碍发生中的意义.方法 雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠36只,根据体质量及血糖按随机数字表法分为正常6周组、正常10周组、糖尿病6周组、糖尿病10周组,每组9只.腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,检测体质量、空腹血糖及胃肠推进率;HE染色观察ICC;TUNEL法检测ICC的凋亡指数;免疫组化检测ICC的c-Kit、Cx43蛋白表达.结果 (1)糖尿病组较同时间点正常组体质量下降,空腹血糖升高,胃肠推进率降低,ICC的c-Kit、Cx43蛋白表达降低(F=76.68,1397.24,18.87,137.65,87.73,P均＜0.05).(2)糖尿病10周组较糖尿病6周组空腹血糖升高,胃肠推进率降低,ICC的c-Kit、Cx43蛋白表达降低(F=76.68,1397.24,18.87,137.65,87.73,P均＜0.05).(3)糖尿病组ICC的凋亡指数与同时间点正常组相比,差异无统计学意义;糖尿病10周组与糖尿病6周组ICC的凋亡指数差异也无统计学意义(P均＞0.05).结论 ICC数量减少、Cx43蛋白表达降低可能是糖尿病结肠动力障碍的发生机制之一,且上述改变随病程发展而加重;ICC数量减少可能与ICC凋亡无关.     

糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦内ICC和SP变化的实验研究

目的观察Cajal间质细胞和P物质在糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦的改变,进而探讨糖尿病胃轻瘫发生的相关机制。方法SD大鼠30只,随机分为正常对照组（n=10）和糖尿病组（n=20）。用链脲佐菌素建立大鼠糖尿病胃轻瘫模型,3个月后用放射性核素（^99Tc）灌胃测定大鼠胃液体排空率,取正常对照组及模型组大鼠胃窦标本,应用免疫组化染色法检测c—kit阳性Cajal间质细胞和P物质在大鼠胃窦的变化,应用彩色病理图像分析软件进行分析,并行统计学比较。结果与正常大鼠相比,糖尿病大鼠胃排空明显延迟（P〈0．01）,胃窦c—kit阳性Cajal间质细胞减少（P〈0．01）,P物质表达减少（P〈0．01）。结论糖尿病胃轻瘫与Cajal间质细胞和P物质的变化有一定的相关性。     

Involvement of interstitial cells of Cajal in experimental severe acute pancreatitis in rats

AIM:To observe the changes in interstitial cells of Cajal(ICC) in rats with experimental severe acute pancreatitis(SAP).METHODS:A total of twenty-four SD rats were randomly divided into two groups(n = 12),namely the sham(S) group and the SAP group;the SAP rat model was established by retrograde injection of 5% sodium taurocholate(1.0 mL/kg) into the pancreatic duct.Twenty-four hours later intestinal motility was assessed by testing small intestinal propulsion rate,and then the rats were sacrificed.The pancreas and jejunum were resected and underwent routine pathologic examination.Immunohistochemical staining was used to detect c-kit-positive cells in the jejunum.Expression of c-kit mRNA was detected by real-time polymerase chain reaction,and the expression of c-kit protein was evaluated by Western blotting.Ultrastructure of ICC was evaluated by transmission electron microscopy.RESULTS:There was bleeding,necrosis and a largeamount of inflammatory cell infiltration in pancreatic tissue in the SAP group,while in jejunal tissue we observed a markedly denuded mucosal layer,loss of villous tissue and a slightly dilated muscular layer.The small intestinal propulsion rate was 68.66% ± 2.66% in the S group and 41.55% ± 3.85% in the SAP group.Compared with the S group,the rate of the SAP group decreased sharply.The density of c-kit-positive cells in the SAP group was significantly lower than in the S group;the respective mean densities were 88.47 ± 10.49 in the S group and 56.11 ± 7.09 in the SAP group.The levels of c-kit protein and mRNA were 0.36 ± 0.04 and 1.29 ± 0.91 in the SAP group,respectively,which were significantly lower than those in the S group(0.53 ± 0.06,0.64 ± 0.33,respectively).In the SAP group,ICC profiles showed the same change tendency,such as vacuolation of mitochondria,irregular vacuoles and loosened desmosome-like junctions.CONCLUSION:Decreased c-kit-positive cells and ultrastructural changes in ICC resulting from blockade of the c-kit signaling pathway are involved in the intestinal dysmotil     

消化道Cajal间质细胞及其受体的研究进展

Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal，ICCs）是胃肠起搏细胞，主要参与胃肠基本电节律（BER）调控和神经递质信号转导，近年来进行的一系列研究表明这种细胞在胃肠电及动力发生和运动障碍机制中有重要作用，同时关于消化道ICCs受体的研究也越来越被人们所关注。因此了解Cajal间质细胞及其受体的特点、功能具有重要意义，现主要对消化道ICCs及其受体的研究现状做一综述。