三七总皂甙对平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因表达的作用及三七总皂甙对其影响.方法:采用流式细胞技术测定了在血管紧张素Ⅱ不同浓度和不同作用时间下血管平滑肌细胞凋亡率及凋亡调控基因Fas、Bcl-2表达的变化和三七总皂甙对其影响.结果:血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞凋亡和凋亡调控基因表达有较明显的诱导作用;三七总皂甙可抑制AngⅡ作用,对细胞凋亡有一定的影响,同时可影响凋亡调控基因的表达.结论:血管紧张素Ⅱ具有一定促进血管平滑肌细胞凋亡作用和调节凋亡调控基因表达的作用,尤其在大剂量作用较明显;三七总皂甙可明显抑制AngⅡ对血管平滑肌细胞的作用.     

白毛藤诱导人结肠癌SW1116细胞凋亡作用及其机制研究

目的:研究白毛藤诱导人结肠癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:荧光显微镜观察不同浓度白毛藤诱导SW1116细胞凋亡的作用,RT-PCR检测Bcl-2、Fas基因表达量的变化。结果:白毛藤具有诱导SW1116细胞凋亡的作用,并且上调Fas基因、降低Bcl-2基因的表达。结论:白毛藤促进SW1116细胞凋亡,其机制可能与激活Fas基因、抑制Bcl-2基因表达有关。     

参附汤血中移行成分对血管紧张素Ⅱ致肥大心肌细胞凋亡及自噬的影响

目的:以参附注射液为阳性对照,研究参附汤血中移行成分对血管紧张素Ⅱ所致心肌细胞凋亡及自噬的影响。方法:原代培养乳鼠心肌细胞,随机分为空白组、血管紧张素Ⅱ组、参附注射液组和参附汤血中移行成分组(移行成分组)。运用MTT比色法和CCK-8试剂盒分别测定心肌细胞存活率,采用实时定量PCR检测凋亡相关基因Caspase-3和自噬相关基因Beclin1、Atg5 mRNA水平在不同组中的表达。:结果与正常组比较,参附注射液组(100μl/孔)和移行成分组(相当于原药材3g/kg)细胞存活率无明显变化(P0.05);与血管紧张素Ⅱ组比较,参附注射液组和移行成分组明显能够提高血管紧张素Ⅱ致肥大细胞的存活率;在凋亡及自噬相关基因Caspase-3、Beclin1、Atg5 mRNA的表达上,与血管紧张素Ⅱ组比较(2.18±0.11,2.69±0.12,2.07±0.11),参附注射液组(1.15±0.08,1.79±0.15,1.48±0.18)和移行成分组(1.24±0.13,1.68±0.13,1.67±0.12)均能够显著降低肥大心肌相关基因的表达。结论:参附汤血中移行成分对血管紧张素Ⅱ所致肥大心肌细胞的凋亡及自噬均有保护作用。     

当归补血汤对大鼠动脉内皮细胞凋亡的干预作用

目的:研究当归补血汤对动脉血管内皮细胞凋亡的影响,探讨其可能作用机制.方法:当归补血汤提取液作用于血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠动脉内皮细胞(RAOEC)凋亡模型(细胞密度l×105/mL)24 h,检测RAOEC凋亡率和半胱氨酸蛋白酶-8(caspase-8),Bcl-2相关x蛋白(Bax),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)mRNA的表达.结果:浓度为500 mg·L-1的当归补血汤作用于AngⅡ诱导的RAOEC凋亡细胞后,凋亡率为(8.69±0.69)％,与对照组(14.45±1.87)％相比,凋亡率明显下降,且差异有统计学意义(P＜0.05);当归补血汤组RAOECs的caspase-8,Bax mRNA水平,Bax mRNA/Bcl-2 mRNA分别为0.603±0.081,0.629±0.079,0.566 ±0.113,均明显低于对照组(1.083 ±0.115,1.024±0.072,1.018±0.111),且差异具有统计学意义(均为P＜0.05).结论:当归补血汤具有抗动脉血管内皮细胞凋亡的作用;当归补血汤可能通过下调caspase-8和Bax基因表达分别从死亡受体通路和线粒体通路抑制RAOEC凋亡.     

搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞LOX-1mRNA及ET-1 mRNA表达的影响

目的观察搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ致体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）氧化低密度脂蛋白1（LOX－1）mRNA及内皮素－1 ET－1）mRNA表达的影响。方法制备兔活心汤舍药血清。采用酶消化法培养HUVECs2～3代用于实验,采用RT-PCR法测定内皮细胞LOX－1 mRNA及ET－1 mRNA。随机分为正常对照组、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组、低浓度中药血清＋AngⅡ组、中浓度中药血清＋AngⅡ组、高浓度中药血清＋AngⅡCR。结果活心汤可抑制AngⅡ导致的内皮细胞损伤,减少LOX—1 mRNA及ET-1 mRNA的表达。结论活心汤可抑制AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮细胞功能。     

LPS诱导HUVEC凋亡的分子机制

目的：从脂多糖（LPS）所致血管内皮细胞（VEC）凋亡的角度进行了实验研究，为进一步探讨血瘀证实质及分子机制。方法：以1μg／mLLPS作用于人脐静脉内皮细胞（HUVEC）24h，通过流式细胞仪检测凋亡相关基因Bcl-2与黏附分子ICAM-1的表达，通过激光共聚焦显微镜测定钙离子的动态变化，并测定培养液中生物活性物质NO、ET、SOD和MDA的变化。结果：①LPS作用HUVEC后，LPS可导致HUVEC表达的Bcl-2基因下调，ICAM—1的表达增高，胞内钙离子浓度升高，同时LPS刺激后培养液中SOD降低，MDA升高，ET-1和NO几乎同时增加。结论：1μg／mL LPS可用于建立HUVEC凋亡模型，其机理与调节凋亡相关基因、黏附分子表达及钙离子浓度有关，同时可刺激HUVEC生物活性物质的分泌。     

血管紧张素Ⅱ对肾小球血管内皮细胞损伤机制的研究

整理和分析血管紧张素Ⅱ对肾小球血管内皮细胞损伤机制的相关文献。以血管紧张素Ⅱ,肾小球血管内皮细胞、内皮细胞损伤等为主题词检索近10年来国内外有关肾小球内皮细胞损伤机制的研究文献,并进行分析。结果发现血管紧张素Ⅱ通过激活炎症反应、氧化应激、诱导细胞凋亡、损伤肾小球血管内皮结构、内分泌功能以及改变肾脏血流动力等途径损伤肾小球血管内皮细胞。本研究对于进一步明确血管紧张素Ⅱ损伤肾小球血管内皮细胞的机制,寻找有效的防治方法具有重要意义。     

搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞LOX-1 mRNA表达的影响

目的:观察搜风祛痰中药对血管紧张素II致体外培养人脐静脉内皮细胞LOX-1 mRNA表达的影响。方法:制备兔活心汤含药血清。采用酶消化法培养HUVECs 2-3代用于实验,采用RT-PCR法测定内皮细胞LOX-1 mRNA,随机分成5组:正常对照组,AngⅡ组,低浓度药物血清+AngⅡ组中浓度药物血清+AngⅡ组高浓度药物血清+AngⅡ组。结果:活心汤可抑制AngⅡ所致的内皮细胞损伤,减少LOX-1 mRNA的表达。结论:活心汤可抑制AngⅡ所致的HUVECs损伤,可以保护血管内皮功能。     

搜风祛痰法中药对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞NF-κB mRNA及ET-1 mRNA表达的影响

目的观察搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ致体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）核转录因子（NF-κB）mRNA及内皮素-1（ET-1）mRNA表达的影响。方法制备兔活心汤含药血清。采用酶消化法培养HUVECs2-3代用于实验,采用RT-PCR法测定内皮细胞NF-κB mRNA及ET-1 mRNA,随机分为5组：正常对照组,血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组,低浓度中药血清＋AngⅡ组,中浓度中药血清＋AngⅡ组,高浓度中药血清＋AngⅡ组。结果活心汤可抑制AngⅡ导致的内皮细胞损伤,减少NF-κB mRNA及ET-1 mRNA的表达。结论活心汤可抑制AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮细胞功能。     

丹参酮ⅡA对猪主动脉内皮细胞受血管紧张素Ⅱ作用时产生NO及eNOS基因表达的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA对血管内皮细胞的保护作用。方法 采用硝酸还原酶法、逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）和免疫组织化学法,分别检测不同作用时间（1h、6h、24h）的血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）以及在AngⅡ作用的不同时间点（0h点为A组、6h点为B组）加入丹参酮ⅡA对培养的猪主动脉内皮细胞产生NO及其内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的蛋白和mRNA表达。结果 （1）随着AngⅡ作用时间的延长,血管内皮细胞NO的产生及eNOS的表达呈显著下降（P〈0．01）,表现出时间依赖性的负性作用。（2）丹参酮ⅡA可抑制AngⅡ对内皮细胞分泌NO及eNOS基因表达的负性作用（P〈0．01）。（3）在丹参酮ⅡA作用1h、6h,A组的抑制效应明显强于B组（P〈0．05）;随着作用时间延长至24h,两组比较差异无显著性。结论 丹参酮ⅡA可抑制AngⅡ对血管内皮细胞分泌NO以及细胞eNOS基因表达的负性作用;     

诱导细胞凋亡及抗凋亡的药物研究进展

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)又称程序性死亡 (ＰＣＤ) ,是一种生理的“细胞自杀”过程。ＰＣＤ与坏死性死亡不同 ,其主要靶目标是细胞核。ＰＣＤ可形成“死亡小体”(ａｐｏｐｔｉｘｂｏｄｙ) ,在琼脂糖凝胶电泳下可呈现典型的ＤＮＡ“梯状结构”(ｌａｄｄｅｒｐａｔｔｅｒｎ)。研究ＰＣＤ不仅可以揭示“死”的秘密 ,而且也是理解“生”的需要。如果该“亡”的细胞不能凋亡 ,而该“生”的细胞过早凋亡 ,都将影响机体正常“生”的需要。下面就将近年来人们在诱导凋亡及抗凋亡药物方面的研究进展作一概述。1　诱导细胞凋亡药物及其相关因素…     

细胞凋亡的研究现状

细胞凋亡是与机体组织自身稳定机制有关的主动性死亡，参与机体的许多生理、病理过程；其产生机制仍未完全阐明。研究表明与Ca^2 、PKC等因素有关，并受BCL－2等基因调节有关。新近的资料显示：细胞凋亡在中医药的研究中也具有重要意义，可能为中药作用机制的研究提供了新的思路。     

细胞凋亡机制概述

细胞凋亡是一种重要的生物学过程,是在基因调控下所发生的一系列细胞主动死亡过程。就近几年细胞凋亡信号传递机制、酶学机制以及基因调控机制的研究作一概述。     

细胞凋亡机制概述

细胞凋亡是一种重要的生物学过程,是在基因调控下所发生的一系列细胞主动死亡过程。就近几年细胞凋亡信号传递机制、酶学机制以及基因调控机制的研究作一概述。     

胃康舒宁促胃癌细胞凋亡机制与线粒体凋亡途径

目的: 以线粒体凋亡通路为中心在分子水平上探讨胃康舒宁诱导人胃癌细胞株SGC-7901细胞凋亡的作用机制。 方法: 将胃癌SGC-7901细胞分别培养于200,400,800 mg·L^-1胃康舒宁培养药液中48,72 h 后,收集细胞并采用流式细胞术检测胃康舒宁对胃癌细胞线粒体膜电位的影响;利用ELISA方法检测用药后胃癌细胞细胞色素C(Cyt c)的变化情况;制作胃癌细胞爬片后,给予不同浓度水平的胃康舒宁处理胃癌SGC-7901细胞不同时间后采用免疫细胞化学方法检测胃癌细胞中B细胞性淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)和Bcl-2基因相关蛋白X(Bax)蛋白的表达情况。 结果: 胃康舒宁可以使胃癌细胞线粒体膜电位下降(P<0.05),促进细胞色素C释放(P<0.05);胃康舒宁各浓度组均能显著增强胃癌细胞株SGC-7901内Bax蛋白的表达(P<0.05),而显著抑制Bcl-2蛋白的表达(P<0.05),且有一定的浓度依赖性。 结论: 胃康舒宁在体外诱导胃癌细胞凋亡的机制可能与线粒体凋亡通路有关。     

肝星状细胞(HSC)凋亡机制研究进展

肝星状细胞是一种肝脏非实质性细胞,它的活化、增殖与凋亡在肝纤维化过程中起着核心作用。HSC的凋亡是减少活化的HSC的主要途径,其凋亡机制非常复杂,主要与一些细胞因子、相关基因和蛋白、粘附分子等有关。     

细胞凋亡与心力衰竭研究现状

从细胞凋亡与HF、HF细胞凋亡发生机制,研究细胞凋亡的防治-HF治疗的新靶点、细胞凋亡与中医药等,综述了细胞凋亡与心力衰竭研究现状。     

姜黄素诱导Lovo细胞凋亡

目的旨在探讨姜黄素体外抗人结肠癌Ｌｏｖｏ细胞生长的作用。方法采用口丫啶橙荧光染色、透射电镜观察、流式细胞仪测定及ＤＮＡ凝胶电泳等技术研究姜黄素诱导肿瘤细胞凋亡的作用。结果经姜黄素２０μＭ处理２４ｈ肿瘤细胞即可发生凋亡,凋亡率达３２．６％。ＤＮＡ凝胶电泳产生特征性ＤＮＡ梯形带。口丫啶橙荧光染色和透射电镜观察证实肿瘤细胞形态呈凋亡特征性改变。结论姜黄素可诱导肿瘤细胞凋亡,这种作用可能是姜黄素抗癌作用机制的一个重要方面     

六神丸诱导白血病细胞凋亡及调控凋亡相关基因的实验研究

目的 :从细胞凋亡角度研究六神丸及蟾酥、雄黄治疗白血病的机制。方法 :MTT法观察六神丸对HL 6 0白血病细胞的生长抑制、用荧光、瑞士 吉姆萨染色法观察细胞凋亡的形态学变化 ,RT PCR方法检测相关基因Bcl 2、C myc、BaxmRNA表达。结果 :六神丸及蟾酥水溶液有明显促进白血病细胞HL 6 0凋亡的作用 ,而含同样剂量雄黄的水溶液未见明显促凋亡作用 ,珍珠、牛黄、麝香、冰片混合物的水溶液也无明显促凋亡作用。六神丸能下调凋亡相关基因Bcl 2、C myc、mRNA表达水平 ,上调BaxmRNA表达水平。结论 :六神丸可诱导白血病细胞凋亡 ,是治疗白血病的有效复方     

芍药苷对人肝癌细胞HepG-2凋亡及其调控基因的影响

目的：研究芍药苷诱导人肝癌细胞株HepG-2细胞凋亡的作用及机制。方法：采用人肝癌细胞株HepG-2细胞药理学方法,观察芍药苷对HepG-2细胞凋亡及凋亡相关调控基因Bax、Bcl-2及抑癌基因P53表达的影响。结果：芍药苷2mg/mL对HepG-2细胞增殖均有显著抑制作用（31.45%）,其细胞凋亡率（21.67%）显著高于无药对照组（3.06%）。芍药苷上调凋亡调控基因Bax、P53的表达,与无药对照组比较,差异显著,且呈剂量依赖关系,P〈0.05。结论：芍药苷能在一定程度上抑制HepG-2细胞的增殖和诱导其凋亡,其作用机理之一可能是上调促凋亡基因Bax和P53的表达。