miRNA-15b和成纤维细胞生长因子2(FGF2)在增生型糖尿病视网膜病变患者玻璃体及视网膜增生膜组织中的表达

目的　探讨增生型糖尿病视网膜病变（PDR）患者玻璃体、视网膜增生膜组织中miRNA-15b（miR-15b）和成纤维细胞生长因子2（FGF2）的表达情况,并进行相关性研究,初步探讨PDR发生原因。方法　选取2016年9月至2019年10月期间在重庆市开州区人民医院眼科住院的PDR患者80例（80眼）作为PDR组,收集其玻璃体及视网膜增生膜组织;选取同期因眼外伤在本院眼科行眼球摘除术的2型糖尿病患者21例（21眼）作为对照组,收集其玻璃体及视网膜组织;通过实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法检测玻璃体及视网膜组织/视网膜增生膜组织中miR-15b水平,分别通过酶联免疫吸附法（ELISA）、Western blot法检测玻璃体、视网膜组织/视网膜增生膜组织中FGF2蛋白水平表达;通过Pearson相关性分析法分析对照组玻璃体及视网膜组织以及PDR组患者玻璃体及视网膜增生膜组织中miR-15b与FGF2水平相关性;通过二元Logistic回归分析影响糖尿病患者发生PDR的危险因素。结果　PDR组糖尿病病程显著长于对照组（P<0.001）。PDR组玻璃体及视网膜增生膜组织中miR-15b相对表达量分别为0.52±0.07和0.76±0.12,均显著低于对照组（1.03±0.19和1.14±0.19）,差异均有统计学意义（均为P<0.001）;PDR组玻璃体及视网膜增生膜组织中FGF2蛋白表达水平分别为（17.65±4.23）ng·L^-1和0.92±0.23,均显著高于对照组［（12.13±3.05）ng·L^-1和0.61±0.15,均为P<0.001）］。对照组玻璃体、视网膜组织中miR-15b与FGF2蛋白表达水平均无相关性（均为P>0.05）;PDR组玻璃体、视网膜增生膜组织中miR-15b与FGF2蛋白表达水平均呈显著负相关（r=-0.708、-0.705,均为P<0.05）;二元Logistic回归分析结果显示,糖尿病病程长及玻璃体、视网膜增生膜组织中miR-15b水平低、FGF2蛋白表达水平高是影响糖尿病患者发生PDR的危险因素（均为P<0.01）。结论　玻璃体及视网膜增生膜组织中miR-15b与FGF2蛋白表达水平与PDR的发生密切相关。     

增生性玻璃体视网膜病变增生膜内炎性细胞因子mRNA表达

目的 检测炎前因子mRNA在增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy, PVR)中的表达情况，证实其在PVR发病中的作用。 方法 收集14例不同分级的PVR患者玻璃体切割术中所取出的增生膜，石蜡包埋切片，用生物素标记的寡核苷酸探针进行原位杂交，检测IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达，两例角膜移植后的供体眼作为正常对照。 结果 共有5例样本有阳性表达。3例增生膜中IL-1βmRNA表达，3例表达了IL-6 mRNA，1例表达了IL-8 mRNA，3例表达TNF-αmRNA。其中1例既表达了IL-1β又表达了IL-6 mRNA，1例IL-1β、IL-8和TNF-αmRNA三者均表达，2例有IL-6和TNF-αmRNA两者表达。正常视网膜未检测到炎前因子mRNA的表达。 结论 IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α参予了PVR增生膜的形成过程。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 286-288)     

p21WAF1/CIP1在兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变发生和发展中的抑制作用

背景 p21是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂,能阻止细胞从G1期进入S期,抑制细胞增生,研究认为内源性p21表达的动态变化可能与细胞增生性病变有关.外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是眼部增生性反应相关性疾病,了解PVR过程中p21表达的动态变化可能为PVR的靶向治疗提供依据.目的 检测p21WAFl/CIP1在兔外伤性PVR中的动态变化,探讨其在外伤性PVR发病机制中的作用.方法 选取青紫蓝兔54只,采用随机数字表法将实验兔随机分为正常对照组(6只)和造模后7、14、21和28 d组(每组12只),每只兔任意选取一眼作为实验眼.各模型组兔眼玻璃体腔注射人富含血小板血浆(PRP)0.4 ml,同时于鼻上方角巩膜缘后5 mm处行巩膜外冷冻约5 s,以建立外伤性PVR模型.各组兔眼行眼部B型超声检查以评估建模情况.分别于造模后7、14、21和28 d以过量麻醉法处死实验兔并制备实验眼视网膜组织切片,采用苏木精-伊红染色法检测兔眼视网膜的形态表现,分别采用免疫组织化学染色、Western blot及逆转录PCR(RT-PCR)法检测兔视网膜中p21WAFl/CIP1蛋白及其mRNA的相对表达. 结果 正常对照组兔眼眼前后节均正常,模型组兔造模后1～7 d兔眼玻璃体中增生条索逐渐变粗,可见视网膜皱褶,造模后14d兔眼出现牵引性视网膜脱离,造模后28 d兔眼漏斗状视网膜脱离.视网膜病理组织学检查显示,造模后7d兔眼视网膜表面有增生膜和炎性细胞聚集,造模后28 d可见视网膜呈花瓣形固定皱褶,视网膜结构紊乱.免疫组织化学染色显示,p21WAF1/CIP1蛋白在正常对照组兔眼视网膜神经节细胞层及内核层的细胞核内呈强阳性表达,造模后7、14、21和28 d表达强度减弱,以造模后14d表达量最低.Western blot结果显示,正常对照组和造模后7、14、21和28 d组兔眼视网膜中p21WAF1/CIP1蛋白相对表达量分别为0.74±0.08、0.60±0.05、0.56±0.03、0.74±0.02和0.65±0.04,组间总体比较差异有统计学意义(F=20.55,P=0.00),造模后7d和14d的表达量均明显低于正常对照组和造模后21 d和28 d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).RT-PCR结果显示,正常对照组和造模后7、14、21和28 d组兔眼视网膜中p21WAF/CIP1 mRNA的相对表达量分别为0.65±0.09、0.57±0.05、0.45±0.04、0.46±0.02和0.47±0.04,总体比较差异有统计学意义(F=18.06,P=0.00),造模后14、21和28 d P21WAF1/C1P1 mRNA的相对表达量均明显低于正常对照组和造模后7d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 p21WAF1/CIP1在外伤性PVR兔眼视网膜中的动态表达变化与PVR的病程发展过程相吻合,p21可能参与外伤性PVR发生和发展的病理过程,p21WAF1/C1P1表达量的下降与细胞增生的动态变化过程一致,可能促进了PVR的进展.     

mTOR-siRNA转染人晶状体上皮细胞对PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白p70S6K及4EBP1表达的影响

目的　研究mTOR-siRNA转染人晶状体上皮细胞系B3(human lens epithelial line B3,HLEB3)后,对PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白p70S6K及4EBP1表达的影响,并与雷帕霉素的作用作对比。方法　HLEB3分为mTOR-siRNA组（培养基加入Lipo2000和mTOR-siRNA）、control-siRNA组（培养基加入Lipo2000和control-siRNA）、Lipo2000组（培养基加入Lipo2000）、雷帕霉素组（培养基加入雷帕霉素）和空白对照组,于转染24 h、48 h、72 h后观察各组细胞的形态和密度;Western blot法检测各时间点各组细胞p70S6K及4EBP1蛋白的表达情况。结果　mTOR-siRNA组随着转染时间延长,HLEB3细胞分布稀疏、形态不规则,部分细胞贴壁不良。转染24 h、48 h、72 h时,mTOR-siRNA组细胞密度均较其他四组低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。转染24 h后,各组细胞4EBP1蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）,但与空白对照组相比,mTOR-siRNA组及雷帕霉素组p70S6K蛋白表达均下降（均为P<0.05）;转染48 h、72 h后,与空白对照组相比,mTOR-siRNA组及雷帕霉素组4EBP1及P70S6K蛋白表达均下降（均为P<0.05）,而control-siRNA组、Lipo2000组4EBP1、P70S6K蛋白表达与空白对照组相比差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　mTOR-siRNA及雷帕霉素均可影响HLEB3的增殖及生长活性,并抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白p70S6K和4EBP1的表达,且mTOR-siRNA的早期作用较雷帕霉素强。     

增生性视网膜前膜中Caspase-3及Bax的表达

目的 观察凋亡及凋亡调控基因Caspase-3／Bax在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)中视网膜前膜(epiretinal membrane)的表达及与凋亡的相关性。方法20例增生性玻璃体视网膜病变的视网膜前膜标本，分别进行Caspase-3和Bax免疫组织化学染色，观察表达情况及染色强度。结果Caspase-3及Bax在视网膜前膜中有较好的表达。正常视网膜组织中未见Caspase-3及Bax的表达。结论在视网膜前膜中存在细胞凋亡，Caspase-3及Bax的表达表示视网膜前膜的细胞凋亡的程度。     

骨膜蛋白在玻璃体视网膜疾病发病中的作用

骨膜蛋白是一种分泌型的细胞外基质蛋白，表达于多种组织器官，通过与整合素αvβ1、αvβ3和αvβ5结合调节细胞运动，因而在组织发育和重塑过程中发挥重要作用。骨膜蛋白不仅可以诱导血管新生，还可以促进其他细胞外基质成分如胶原、纤维连接蛋白的沉积，参与多种生理和病理性的纤维化过程。增生性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性等玻璃体视网膜疾病的特征就是玻璃体或视网膜的内外表面形成纤维膜及新生血管，骨膜蛋白与玻璃体视网膜疾病中纤维膜的形成及新生血管形成存在一定的关系。（国际眼科纵览， 2018,  42:   149-153）     

人视网膜下膜中ICAM-1及MMP-2的免疫组织化学研究

目的观察增生性玻璃体视网膜病变的视网膜下膜中粘附分子（intercellular adhesion molecules-1，ICAM-1）及基质金属蛋白酶（matrix metculoproteinase-2，MMP-2）的表达。方法用免疫组织化学法对15例复杂视网膜脱离行玻璃体切割术时剥离的视网膜下膜进行观察。结果ICAM-1和MMP-2分别在10例和8例视网膜下膜中表达，二者同时在7例视网膜下膜中表达。结论视网膜下膜中有ICAM-1和MMP-2的表达，提示二者在增生性玻璃体视网膜病变的发生发展中有一定作用。     

增生性玻璃体视网膜病变模型眼内定向 转染报告基因的研究

目的观察目的基因在玻璃体增生膜的表达情况,以探讨基因治疗增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR) 的可行性。方法用β-半乳糖苷酶基因作为报告基因,以逆转录病毒载体携带,直接注入PVR模型眼玻璃体腔中,观察其在PVR 眼各组织表达情况。结果 基因转染后可见玻璃体增生膜组织有转染基因表达,表达主要位于增生膜的表面,而视网膜组织及其它眼组织未见表达。结论逆转录病毒载体用于PVR的基因治疗有靶向性作用,表明PVR基因治疗具有可行性。(中华眼底病杂志,2001,17:224-226)     

血管内皮生长因子在增生性玻璃体视网膜病变中的作用

增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy,PVR）发病机制尚未完全明确。大量研究证实血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在 PVR 视网膜前增生膜组织及玻璃体中表达增高;在动物模型中,抗 VEGF 治疗可有效防止 PVR 的发生发展。VEGF 促进 PVR发展的机制可能在于 VEGF 竞争性地抑制血小板源性生长因子（platelet-derived growth factor,PDGF）结合血小板源性生长因子受体α（platelet-derived growth factor receptor α,PDGFR-α）,从而促进非血小板源性生长因子（non-PDGFs）活化 PDGFR-α,激活 PI3K／Akt 信号通路,减少 p53基因的表达。（国际眼科纵览,2016,40：192-196）     

PI3K/AKT/mTOR signaling pathway inhibitors in proliferation of retinal pigment epithelial cells

AIM: To determine whether the PI3K/AKT/mTOR pathway is activated in proliferative vitreoretinopathy (PVR) in homo-sapiens. METHODS: The retina of controls and patients with PVR were collected and their levels of PI3K, phospho-AKT, phospho-mTOR, phospho-p70S6k and phospho-4EBP-1 were determined by Western blot. The cultured human retinal pigment epithelial cell line D407 was treated with a specific mTOR inhibitor, rapamycin (RAPA) or a PI3K inhibitor, LY294002, of various concentrations and durations. Cell morphology was observed by phase contrast microscopy and the proliferation and apoptosis of treated cells were determined by MTT assay and flow cytometry. RESULTS: Levels of PI3K, phospho-AKT, phospho-mTOR, phospho-P70S6K and phospho-4EBP1 was increased in the retina in PVR (P<0.05). In D407 cells, both RAPA and LY294002 significantly inhibited cell proliferation and cell cycle progression, and promoted apoptosis (P <0.05); morphologically, the cells became smaller. Both RAPA and LY294002 reduced levels of phospho-AKT, phospho-mTOR, phospho-p70S6k and phospho-4EBP1 expression (P <0.05). RAPA, but not LY294002, had no significant effect on PI3K expression. CONCLUSION: PI3K/AKT/mTOR signaling pathway is highly activated in the retinal pigment epithelial cells of PVR. The inhibitors of PI3K/AKT/mTOR signaling pathway, RAPA and LY294002, could inhibited the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway by reducing the levels of phosphorylation of mTOR pathway components.     

精子蛋白32/OY-TES-1在视网膜母细胞瘤中的表达

　　目的　观察精子蛋白（SP）32/OY-TES-1在视网膜母细胞瘤(RB)组织中的表达。方法　病理科收检并经病理学检查确诊的30例RB患儿的石蜡标本纳入研究。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测15例RB组织、12例非肿瘤病变视网膜组织及22例眼部正常组织中SP32/OY-TES-1 mRNA的表达;免疫组织化学技术对30例RB组织和24例正常视网膜组织中SP32/OY-TES-1蛋白的表达进行检测,对比分析SP32/OY-TES-1 mRNA和蛋白表达与RB患儿年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分化程度和临床分期的相互关系。结果　RB组织、非肿瘤病变视网膜组织、眼部正常组织SP32/OY-TES-1 mRNA的表达率分别为86.7%、16.7%和36.4%。不同性别（χ²=0.744）、年龄≤2岁和＞2岁（χ²=1.178）、临床分期（χ²=1.188）、肿瘤大小（χ²=0.216）、肿瘤分型（χ²=1.885）之间SP32/OY-TES-1基因阳性表达率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。SP32/OY-TES-1蛋白在RB中的表达率为73.3%,在正常视网膜组织中则不表达。不同性别（χ²=1.000）、年龄≤2岁和＞2岁（χχ²=0.403）、不同肿瘤大小（χ²=2.274）、不同肿瘤分型（χ²=0.138）之间SP32/OY-TES-1蛋白阳性表达率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;不同临床分期（χ²=6.193）、视神经是否浸润（χ²=4.535）之间SP32/OY-TES-1蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　SP32/OY-TES-1高表达于RB组织中;SP32/OY-TES-1蛋白在RB组织中的表达率与视神经浸润和临床分期存在密切的关系。      

PI3K/Akt and mTOR/p70S6K pathways mediate neuroprotectin D1-induced retinal pigment epithelial cell survival during oxidative stress-induced apoptosis

The initiation and progression of several forms of retinal degenerations involve excessive, repetitive, and/or sustained oxidative stress that, in turn, mediate photoreceptor cell damage and death. Since phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt and mTOR/p70S6-kinase pathways are part of survival signaling in cells confronted with oxidative stress, we asked whether or not docosahexaenoic acid-derived neuroprotectin D1 (NPD1) mediates survival upon single-dose and/or repetitive oxidative stress through this pathway. For this purpose, we used human retinal pigment epithelial (ARPE-19) cells challenged by exposure to hydrogen peroxide (H₂O₂) plus tumor necrosis factor alpha (TNF-α). We found that in single-dose oxidative stress-induced apoptosis, phosphorylation of Akt, mTOR, and p70S6K was both time- and dose- dependent. Inhibition of PI3K or mTOR/p70S6K by wortmannin and rapamycin, respectively, increased apoptosis and inhibited phosphorylation of Akt and p70S6K induced by single-dose oxidative stress. While two exposures of a low dose, non-damaging oxidation induced apoptosis and upregulation of Akt, mTOR, and p70S6K, longer treatment of the cells with three exposures of low dose to low-dose stress showed no changes in the levels of Akt, mTOR, or p70S6K, and resulted in enhanced apoptosis compared to higher doses. Removing the oxidative stress-inducing agents following the single-dose or short term repetitive oxidative stress at the peak of Akt, mTOR, and p70S6K phosphorylation (i.e., 30 min after induction) led to recovery, with no apoptosis after 16 h of incubation. Cells that were induced with three low doses of stress did not show recovery when oxidative stress was removed 30 min after the last exposure. NPD1 protected the RPE cells against both single-dose and repetitive oxidative stress-induced apoptosis and promoted higher levels of phosphorylated Akt, mTOR, and p70S6K. Together, our results show that a) repetitive oxidative stress is dose dependent and may not be recovered by removing the oxidative stress-inducing agents, b) PI3K/Akt and mTOR/p70S6K pathways play a major role in the protection against oxidative stress-induced apoptosis in ARPE-19 cells, and c) NPD1 exerts protection under these conditions by inducing PI3K/Akt and mTOR/p70S6K pathways.     

姜黄素对碱烧伤诱导的兔眼角膜新生血管抑制作用的实验研究

目的探讨姜黄素对碱烧伤诱导的大耳兔眼角膜新生血管(CNV)的影响及其机制。 方法采用碱烧伤法制备CNV模型。模型制作成功后,采用数字表法将健康的成年雄性日本大耳兔48只随机平均分为4组,对照组给予二甲基亚砜,实验1组给予40 μmol/L姜黄素,实验2组给予80 μmol/L姜黄素,实验3组给予160 μmol/L姜黄素。右眼分别滴眼相应药物,所有滴眼药物用量均为20 μl,4次/d,连续用药14 d。用裂隙灯显微镜观察CNV的生长情况。采用酶联免疫吸附试验检测大耳兔眼碱烧伤2 d、4 d、7 d及14 d后的房水中血管内皮生长因子(VEGF)、4E结合蛋白(4EBP1)因子的蛋白含量;采用逆转录-聚合酶链反应检测眼角膜组织中4EBP1、S6蛋白激酶(P70S6K)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的信使核糖核酸(mRNA)的相对表达量。组间比较采用两因素重复测量方差分析,当差异有统计学意义时,进一步采用SNK法两两比较。计算Spearman相关系数判断4EBP1与VEGF蛋白之间的相关性。 结果大耳兔眼角膜碱烧伤后4 d时,各实验组与对照组的平均CNV面积无统计学差异(F＝0.592,P>0.05);眼角膜碱烧伤后7 d、14 d时,则各实验组与对照组平均CNV面积差异有统计学意义(F＝27.5,28.64;P<0.05)。大耳兔眼角膜碱烧伤后2 d时,各实验组房水中的4EBP1、VEGF蛋白含量与对照组的差异无统计学意义(F＝2.46,3.62;P>0.05)。大耳兔眼角膜碱烧伤后4 d、7 d、14 d时,各实验组房水中的4EBP1、VEGF蛋白含量与对照组相比,差异具有统计学意义(F＝10.73,49.15,62.37,17.55,106.61,202.13;P<0.05),且4EBP1与VEGF的蛋白表达呈线性正相关(r＝0.969,0.803,0.67,0.972;P<0.05)。大耳兔眼角膜碱烧伤后7 d时,实验1组的角膜组织中mTOR、4EBP1及P70S6K的mRNA相对表达量为(0.73±0.26)、(0.58±0.19)和(0.52±0.29);实验2组的相对表达量分别为(0.48±0.13)、(0.39±0.21)和(0.41±0.18);实验3组的相对表达量分别为(0.36±0.09)、(0.22±0.09)和(0.18±0.07)。大耳兔眼角膜碱烧伤后14 d时,各实验组mTOR、4EBP1和P70S6K的mRNA表达量较眼角膜碱烧伤后7 d时的mRNA表达量降低;且随着姜黄素浓度的增高,mTOR、4EBP1和P70S6K在mRNA水平的相对表达量依次降低。 结论姜黄素可通过抑制mTOR信号传导通路降低VEGF蛋白的表达,从而抑制眼角膜碱烧伤后新生血管的生长。     

Heat shock cognate-70 gene expression declines during normal aging of the primate retina

PURPOSE: Despite documented age-related changes in retinal function and histology, little is known about the pattern of gene expression during normal aging of the vertebrate retina. This study was undertaken to definitively characterize gene expression in the primate retina during aging. METHODS: Human retina cDNA library clones were arrayed at high density on nylon membranes and screened with mixed cDNA probes generated from young (4-year-old) and old (80-year-old) human retinae. Clones showing a more than twofold difference in intensity were rescreened by dot blot analysis with the same probes and with mixed cDNA probes generated from young (2-3 years) and old (27-35 years) rhesus monkeys. One clone identified by its differential (age-putative) signal, and age-related differential expression was used for analysis of Northern blot analysis of total retinal RNA from human donors (35 weeks to 94 years of age) and two rhesus monkeys (2 and 27 years of age). The identified clone was sequenced and compared with entries in the GenBank/EMBL databases. Western blot analysis was performed on protein isolated from the retina of human donors aged 4 to 64 years and rhesus monkeys aged 18 months and 35 years. RESULTS: Approximately 1.6% of the 55,368 retina-expressed sequences examined show age-related changes between tissues from young and old donors. The mRNA level one clone, identical with heat shock cognate (HSC)70, was altered during normal retinal aging in primates. Regression analysis of Northern blot analysis signals from 23 human donors suggested that there may be a two- to threefold decrease in HSC70 mRNA levels in the human retina by the eighth decade of life. Western blot analysis also showed lower levels of the 70-kDa HSC protein in older tissues of both primates. CONCLUSIONS: HSC70 mRNA levels apparently decline during normal aging of the primate retina. Because the heat shock 70 protein family may play important roles in ocular development and protection from various biologic and environmental stresses, decreased HSC70 levels in the retina during aging may contribute to the apparent increased susceptibility of the retina to age-acquired retinal disease.     

雷帕霉素对豚鼠形觉剥夺性近视的干预作用及相关机制研究

目的　探讨球结膜下注射雷帕霉素对豚鼠形觉剥夺性近视（FDM）的干预作用及相关机制。方法　选取2～3周龄豚鼠80只（80眼）,雌雄不限,随机分为4组:空白对照组、FDM组、雷帕霉素组、FDM+雷帕霉素组;空白对照组不做任何处理;FDM组单纯缝合豚鼠右眼眼睑;雷帕霉素组于实验第1天、第7天豚鼠右眼球结膜下注射雷帕霉素50 μg;FDM+雷帕霉素组于实验第1天、第7天豚鼠右眼球结膜下注射雷帕霉素50 μg后再缝合右眼眼睑。记录各组豚鼠实验前及实验第7天、第14天的眼轴长度、屈光度;并取各组豚鼠视网膜行过碘酸-雪夫染色（PAS染色）及透射电镜检查,观察各组豚鼠视网膜形态变化;取各组豚鼠巩膜行RT-PCR检测巩膜组织中mTOR、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及转化生长因子β1（TGF-β1）的mRNA表达;利用Western blot 检测各组豚鼠巩膜组织中AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR的蛋白表达。结果　FDM组与空白对照组相比,实验第7天、第14天豚鼠的右眼眼轴长度、屈光度增加,形成了相对近视;FDM组巩膜中MMP-2、α-SMA 的mRNA相对表达量与空白对照组相比均增加,TGF-β1 mRNA相对表达量减少,差异均具有统计学意义（均为P<0.05）;与空白对照组相比,FDM组豚鼠巩膜中mTOR mRNA和AKT、P-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白的相对表达量变化不大,差异均无统计学意义（均为P>0.05）,但视网膜变薄,各层结构排列紊乱、疏松。雷帕霉素组与空白对照组相比,实验第7天、第14天豚鼠右眼眼轴长度、屈光度差异均无统计学意义（均为P>0.05）,且视网膜形态无明显变化。FDM+雷帕霉素组与FDM组相比,实验第7天豚鼠右眼眼轴长度、屈光度差异均无统计学意义（均为P>0.05）,实验第14天右眼眼轴长度和屈光度均减小,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,TGF-β1 mRNA的相对表达量增多,MMP-2、α-SMA、mTOR 的mRNA和AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR的蛋白相对表达量均减少,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　雷帕霉素球结膜下注射可延缓豚鼠FDM的形成,可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路、调节巩膜中的MMP-2、TGF-β1、α-SMA的表达而发挥作用的,且对正常豚鼠视网膜结构没有影响。