B细胞淋巴瘤石蜡包埋组织克隆性重链基因重排检测

目的 探讨克隆性重链基因重排检测在B细胞淋巴瘤(B—NHL)诊断中的价值。方法 用半巢式聚合酶链反应(semi—nested PCR)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及银染技术，检测经形态学及免疫组织化学确诊的23例B—NHL石蜡包埋组织标本的克隆性免疫球蛋白第三互补决定区(IgHCDR3)重排基因，对照组为7例T细胞淋巴瘤(T—NHL)及6例反应性增生或肉芽肿性淋巴结炎。结果 B—NHL IgHCDR3检出的阳性率87．0％(20／23)，假阳性率7．7％(1／13)，假阴性率13．0％(3／23)。结论 检测克隆性IgHCDR3重排为B—NHL的诊断及鉴别诊断提供有效的辅助手段。     

用PCR方法检测B细胞淋巴瘤克隆性IgH基因重排

用ＰＣＲ方法检测克隆性ＩｇＨ基因重排正在成为Ｂ细胞淋巴瘤基因诊断的有效手段。与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析法相比，前者有明显的优点：快速简便，标本用量少并可用于石蜡切片，无放射性危害等。ＰＣＲ所用引物是辨认ＩｇＨ基因可变区（Ｖ）和连接区（Ｊ）中存在的相对保守...     

B细胞淋巴瘤免疫球蛋白重链基因重排的检测

目的 探讨免疫球蛋白重链(IgH)基因重排的检测在B细胞性淋巴瘤(B-NHL)中的诊断价值。方法 用聚合酶链式反应(PCR)方法检测B细胞淋巴瘤30例．淋巴结反应性增生(RH)10例及T细胞淋巴瘤(T-NHL)2例的IgH基因重排。结果 30例B-NHL中，22例(73．3％)出现IgH基因克隆性重排，而RH及T-NHL均未出现IgH基因重排。结论 B细胞淋巴瘤中存在B细胞单克隆增生，支持肿瘤单克隆起源学说；IgH基因克隆性重排检测对鉴别B细胞淋巴瘤和反应性增生以及T细胞和B细胞淋巴瘤有重要意义。     

基因重排检测技术诊断脾脏淋巴瘤

目的:利用B和T淋巴细胞产生的抗原受体分子基因重排检测技术,探讨1例原发性脾脏恶性淋巴瘤(PLS)基因重排检测结果.方法:从组织蜡块中切取组织片5～10张,提取基因组DNA,PCR扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染显示基因重排结果.结果:脾脏淋巴瘤免疫组化证实为B细胞性滤泡性淋巴瘤.从24个不同部位取得的组织经PCR均扩增成功,所有部位组织T细胞受体基因重排阴性,22个部位组织B细胞单克隆性免疫球蛋白基因重排阳性,基因重排阳性率91.7%.结论:应用PCR法检测B淋巴细胞IgH和T淋巴细胞TCR基因重排可作为淋巴细胞来源的良、恶性病变的一种辅助诊断手段,对脾脏淋巴瘤有较高的诊断价值.     

中线T细胞淋巴瘤的TCR—γ基因重排研究

目的 对中线Ｔ细胞淋巴瘤的克隆性进行研究。方法：用一组针对Ｔ细胞受体γ链基因Ｖ区片段的家族特异性引物和ＰＣＲ方法，对１１例（２２个标本）中线Ｔ细胞淋巴瘤病例进行了Ｔ细胞受体γ基因重排的检测，结果：２２个标本中的２１个有Ｔ细胞受体γ链基因的克隆性重排（９４．４５％），在９例原发灶的连续活检和１例原发灶及其转移灶的标本中未发现曾生的克隆家族的改变。结论：中线Ｔ细胞淋巴瘤的病变组织中存在Ｔ细胞的单克隆性     

淋巴瘤T细胞受体δ基因重排的研究

本文应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法对１７例淋巴瘤患者骨髓细胞Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖδ１－Ｊδ１基因重排进行了检测。１１例Ｔ细胞淋巴瘤中５例发生ＴＣＲＶδ１－Ｊδ１基因重排，６例Ｂ细胞淋巴瘤和１０例正常骨髓细胞无ＴＣＲＶδ１－Ｊδ１基因重排。研究表明：ＴＣＲＶδ１－Ｊδ１基因重排显示细胞系列的特异性，是Ｔ细胞恶性肿瘤的克隆标志。     

基因重排检测技术的建立及其在淋巴瘤诊断中的应用

目的:建立基于克隆性分析技术的B和T淋巴细胞产生的抗原受体分子基因重排检测技术,探讨B淋巴细胞免疫球蛋白及T淋巴细胞受体基因重排在恶性淋巴瘤临床诊断中的应用. 方法: 从组织蜡块中切取组织片5～10张,提取基因组DNA,PCR扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染显示基因重排结果. 结果:20例良性淋巴组织反应性增生病例中, 淋巴细胞IgH及TCR基因重排均为阴性;18例T细胞非何杰金氏淋巴瘤中TCRγ基因重排12例, TCRβ基因重排3例,未见有IgH基因重排;32例B细胞性非何杰金氏淋巴瘤标本中有28例IgH基因重排阳性,有2例TCRγ和IgH基因重排均阳性;3例未确诊的疑难病例均为IgH基因重排;IgH及TCR基因重排检出率在淋巴瘤组与良性组之间,差异有显著意义(P<0.05). 结论:应用PCR法检测B淋巴细胞IgH和T淋巴细胞TCR基因重排可作为淋巴细胞来源的良、恶性病变的一种辅助诊断手段,且适用于石蜡标本以进行回顾性研究.     

T细胞淋巴瘤T细胞受体γ链基因重排的检测

目的 探讨T细胞淋巴瘤T细胞受体γ链基因重排的情况。方法 用免疫组化标记筛选30例T细胞淋巴瘤、2例高度可疑为T细胞淋巴瘤和10例淋巴结反应性增生，采用聚合酶链式反应扩增方法检测T细胞受体7链基因重排。结果 30例T细胞淋巴瘤中27例和2例高度可疑为T细胞淋巴瘤均出现T细胞受体γ链基因重排．10例淋巴结反应性增生均无T细胞受体γ链基因重排。结论 T细胞淋巴瘤病变中存在T细胞单克隆增生，支持肿瘤单克隆起源学说；T细胞受体γ链基因重排检测是区分T细胞淋巴瘤和淋巴结反应性增生的有效方法，且对T细胞淋巴瘤疑难病例的诊断有帮助。     

非霍奇金淋巴瘤IgH基因重排分析及其意义

目的 探讨免疫球蛋白重链(IgH)基因重排的检测在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的诊断价值.方法 用半巢式和混合聚合酶链式反应(PCR)方法,联合使用IgH FR3A、FR2A、FR1家族特异性引物Mixtures(VH1、VH2、VH3)检测44例B-NHL患者、1例未分型淋巴瘤、15例T-NHL患者和5例淋巴结反应性增生患者IgH基因克隆性重排情况.结果 ①采用FR3A引物,44例B-NHL有37例出现克隆性IgH基因重排,检测率为84%(37/44);采用FR2A引物,有27例出现克隆性IgH基因重排,检测率为61% (27/44);采用FR1家族特异性引物Mixtures(VH1、VH2、VH3)与J区(JHb、JHc)引物,有34、33例出现克隆性IgH基因重排,检测率为77%、75% (34/44、33/44);结合FR3A、FR2A、FR1家族特异性引物Mixtures(VH1、VH2、VH3),总检测率为95%(42/44).②15例T-NHL有4例出现克隆性IgH基因重排,而5例LRH未出现克隆性IgH基因重排.③1例免疫组化未分型的NHL经PCR检测后明确了分型,为B细胞性淋巴瘤.结论 联合采用多对引物可提高检测阳性率;IgH基因克隆性重排检测对鉴别B细胞淋巴瘤和淋巴结反应性增生以及T细胞淋巴瘤有重要意义.     

应用PCR检测恶性淋巴瘤骨髓浸润及其临床意义

目的：检测恶性淋巴瘤（ＭＬ）的骨髓浸润（ＩＢＭ）并探讨其与临床分期、疗效和预后的关系。方法：以克隆性ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分别作为Ｂ和Ｔ细胞淋巴瘤克隆基因标志，应用ＰＣＲ基因扩增技术检测ＭＬ患者ＩＢＭ。结果：（１）３４份ＭＬ患者骨髓标本ＩＢＭ检出率为７０．６％（２４／３４），明显高于形态学检测方法（３８．６％，Ｐ＜０．０５）。（２）１９例形态学检测正常的非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）骨髓标本，ＩＢＭ阳性率５７．９％（１１／１９），其中８例Ｂ－ＮＨＬ（８／１４）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排；５例同时还检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，２例Ｔ－ＮＨＬ（２／３）检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，无克隆性ＩｇＨ基因重排；２例免疫分型不明确ＮＨＬ患老中１例（１／２）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，无克隆性ＴＣＲ，基因重排。２例霍奇金病（ＨＤ）和１０例非淋巴系肿瘤骨髓ＩＢＭ均阴性。（３）Ⅲ，Ⅳ期ＮＨＬ患者ＩＢＭ检出率显著高于ＩＩ期（ｐ＜０．０１），初诊未治及复发患者也显著高于部分或完全缓解患者（Ｐ＜０．０１）。（４）ＩＢＭ阳性组ＮＨＬ２年死亡率５４．５％（６／１１），明显高于ＩＢＭ阴性（ｐ＜０．０５）。结论：ＰＣＲ方法检测ＩＢＭ有助于估     

非同位素的PCR-RNA转录本分子杂交法检测急淋微小残留病

以T细胞抗原受体γ链重排基因（TCRγ）为标志,运用分别与V区和J区片段的保守序列一致,并带有T_7RNA聚合酶启动子序列的引物,将急性淋巴细胞白血病（ALL）初诊期的骨髓标本进行PCR（聚合酶链反应）.并将其产物转录成为RNA,以该RNA为探针,与ALL缓解期骨髓标本DNA的PCR产物所转录的 RNA杂交,杂交体用RNA酶消化,消化产物行聚丙烯酰酰凝胶电泳（PAGE）,尔后硝酸银染色观察检测结果。实验表明:该方法特异性强.灵敏度可达10~(-5)水平.具有快速、经济、没有同位素污染的优点,便于临床运用。     

NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型、EB病毒感染及TCRγ基因重排的检测

目的检测NK／T细胞淋巴瘤（NK／TCL）的免疫表型、EB病毒感染及TCRγ基因重排，为诊断和鉴别诊断提供依据。方法收集诊断NK／TCL48例患者石蜡包埋标本，用免疫组化S-P法标记LCA、CD79aαCD20、CD56、CD3、CD45R0及EBV抗体研究其免疫表型；EBER探针原位杂交方法检测EB病毒编码的小分子RNA（EBER）；聚合酶链式反应扩增方法检测TCR）,基因重排。结果48例NK／TCL均表达LCA，CD3、CD45RO、CD56和EBV阳性率分别为44％、52％、73％和19％，CD79α和CD20均为阴性；EBER阳性率为81％；TCRγ基因重排阳性率为19％。结论NK／T细胞淋巴瘤免疫表型不一致，并非所有病例CD56阳性，石蜡切片中CD3阳性定位于细胞质；EBER在肿瘤细胞中高表达，提示它们可能为NK细胞来源；TCR7基因重排阳性说明NK／TCL中存在T细胞的单克隆性增生。     

PCR方法检测淋巴系肿瘤的基因标志：附67例分析

应用多聚酶链反应方法检测６７例淋巴系肿瘤的基因标志，以５例正常人和５例急性非淋巴细胞白血病为对照。结果表明ＩｇＨ基因重排只见于Ｂ细胞性肿瘤，具有Ｂ系特异性；ＴＣＲγ重排不仅见于Ｔ细胞，也可见于Ｂ细胞；     

半重叠PCR检测急性淋巴细胞白血病骨髓移植后残留白血病的临床意义

目的：观察急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）骨髓移植（bone marrow transplantation，BMT）后残留白血病情况，评价BMT效果。方法：对16例ALL患者在BMT前后的不同时期，用半重叠多聚酶链反应（polymerasc chain reaction，PCR）方法检测免疫球蛋白重链（immunoglobin heavychain，IgH）和T细胞受体γ链（T-cell reception γ。TCRγ）单克隆性基因重排情况，了解微小残留白血病（minimal residual disease，MRD）阳性率。结果：BMT前MRD阳性率为81．2％，BMT后3个月时MRD阳性率显著降低为37．5％（P〈0．05）。而异基因骨髓移植（allo-BMT）与自体骨髓移植（auto-BMT）之间在3个月时MRD阳性率无显著性差异。结论：半重叠PCR方法检测ALL-MRD敏感性及特异性极高，对auto-BMT前骨髓的净化处理有指导意义；时BMT后（包括auto-BMT和auo-BMT）效果的评价、BMT后疗效的追踪观察以及BMT后化疗方案的制定均具有重要的临床意义，是BMT后长期随访、判断预后、预测复发的理想指标。     

T细胞受体γ基因重排用于蕈样肉芽肿的分子生物学诊断

目的：探讨检测T细胞受体γ(TCR-γ)基因重排的方法用于蕈样肉芽肿(MF)早期辅助诊断。方法：采用“一步法”提取10％福尔马林固定、石蜡包埋组织的DNA作为模板，聚合酶链反应／琼脂糖凝胶电泳方法，检测46例蕈样肉芽肿，19例可疑蕈样肉芽肿，10例湿疹皮炎，5例类银屑病及5例正常皮肤石蜡包埋组织的TCR-γ(V1～V8和V9)基因重排。结果：与非MF病人相比，81％的二期蕈样肉芽肿病人显示TCR-γ基因重排，而非MF病人未见TCR-γ基因重排。结论：“一步法”提取的石蜡包埋组织的DNA作为模板的PCR技术可用于检测MF石蜡包埋组织的。TCR-γ基因重排，且是一种灵敏度和特异性均较高的方法，可用作MF疾病的早期诊断指标。