促肾上腺皮质激素释放因子对镉的淋巴细胞免疫毒性的体内外双向调节作用

目的 探讨体内外镉的免疫功能抑制过程中促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）的修饰调节使用。方法 用垂体前叶细胞培养法测定中枢下丘脑和外周血浆CRF水平,用[^3H-TdR]掺入法分别检测体内、体外染毒的鼠脾T、B淋巴细胞增殖转化功能。结果 （1）整体实验动物各镉剂量组中枢下丘脑组织CRF水平均升高,有丝分裂原诱导脾T、B淋巴细胞增殖转化的刺激指数均低于对照组,差异有显著性（P＜0．05）;下丘脑CRF水平与T、B淋巴细胞增殖指数之间呈负相关关系（r＝－0．6750、－0．7560,P＜0．05）;外周血浆CRF水平各组间差异无显著性（P＜＞0．05。（2）体外染毒时,镉明显抑制大鼠脾淋巴细胞的增殖转化;1．0-100．0nmol/LCRF明显增强T、B淋巴细胞增殖转化能力;当以1．0nmol/LCRF与5－20μmol/L氯化镉联合作用对各实验组两种免疫组织[^3H-TdR]掺入率依然高于对照组,差异均有显著性（P＜0．05）。体内染镉时存在中枢组织CRF介导的免疫功能抑制性调节作用,但体外CRF却能增强免疫细胞活性并阻断镉对鼠脾淋巴细胞的直接免疫功能抑制。CRF对镉的淋巴细胞免疫毒性具有双向调节作用。     

CRF阻断镉对大鼠脾淋巴细胞免疫毒性的体外实验研究

目的：探讨体外镉的免疫功能抑制过程中促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）的修饰调节作用。方法：离体培养大鼠脾淋巴细胞,用^3H-TdR掺入法测定分别在给氯化镉、CRF及两者联合作用条件下的T、B淋巴细胞的增殖转化功能。结果：镉抑制大鼠脾淋巴细胞的增殖转化,各染镉实验组T、B淋巴细胞增殖指数低于对照组（P＜0．05）;且有随剂量升高而而降低的趋势;1．0－100．0nmol/L CRF标准浓度组T、B淋巴细胞增殖指数明显高于对照组（P＜0．05）;当以1．0nmol/L CRF与5－20 μmol/L氯化镉联合作用时两种免疫细胞的增殖功能依然明显受到刺激,各实验组^3H-TdR掺入率高于对照组（P＜0．05）。结论：体外CRF能增强免疫细胞增殖活性并可阻断镉对T、B淋巴细胞的增殖抑制毒性。     

镉致淋巴细胞DNA损伤及其免疫毒性的研究

目的　探讨镉 (Cd)致淋巴细胞DNA损伤及其镉免疫毒性机制中的地位和作用。方法　运用单细胞凝胶电泳法、MTT法和荧光抗体标记法分别检测各染镉剂量组的DNA损伤、T淋巴细胞增殖转化功能和T淋巴细胞亚群情况。结果　各染镉组的DNA损伤与对照组有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;T淋巴细胞增殖功能与对照比较有降低 (P <0 0 5 ) ,并均随镉剂量的升高有逐步加重的趋势 ;DNA损伤与T淋巴细胞增殖转化功能有显著的相关关系 (Pearson相关分析 ,r =0 .80 78,P <0 .0 1)。结论　镉的免疫毒性机制中镉致淋巴细胞DNA损伤可能是重要的机制之一。     

外源性镉金属硫蛋白对小鼠脾淋巴细胞功能影响的研究

目的 分析外源性镉金属硫蛋白（CdMT）的免疫毒性。方法 采用分离纯化经诱导合成的CdMT作为受试物与CdCI2比较,经口给予BALB／C小鼠不同剂量染毒2周和4周,检测脾T淋巴细胞增殖和T细胞亚群评价细胞免疫功能。结果 与阴性对照和脱金属硫蛋白（Apo-MT)组相比,CdMT组和CdCI2组表现为T细胞增殖功能降低;L3T4^ 亚群减少、Lyt2^ 亚群升高、L3T4^ /Lyt2^ 比值降低;且在CdMT组的改变明显低于相同含量的CdCI2组。结论 外源性CdMT经口作用可体内脾淋巴细胞免疫抑制作用,并与染毒剂量和时间有关,但CdMT经口免疫毒性低于CdCI2;结果可为评价环境镉暴露的生物学作用提供依据。     

维生素C对锌中毒小鼠免疫功能的影响

[目的]了解维生素C对锌中毒小鼠免疫因子及T淋巴细胞增殖功能的影响。[方法]以不同浓度维生素C作用于锌中毒模型小鼠后,计算脏器指数,MTT比色法测定T淋巴细胞增殖功能,ELISA法测定白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。[结果]锌中毒对照组TNF-α、IL-2浓度及T淋巴细胞增殖活性明显低于空白对照组(P﹤0.05);中、高剂量维生素C锌中毒组(150mg/kg/day、300mg/kg/day)TNF-α浓度和T淋巴细胞增殖活性高于锌中毒对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01);高剂量维生素C锌中毒组(300mg/kg/day)IL-2浓度高于锌中毒对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。[结论]维生素C可提高锌中毒小鼠外周血TNF-a、IL-2水平及促进T淋巴细胞增殖功能,对锌中毒小鼠免疫功能的损伤有一定的治疗作用。     

牛磺酸对锌中毒小鼠免疫功能影响

目的了解牛磺酸对锌中毒小鼠免疫因子及T淋巴细胞增殖功能影响。方法以不同浓度牛磺酸作用于锌中毒模型小鼠后,计算脏器指数,噻唑蓝(MTT)比色法测定T淋巴细胞增殖功能,酶联免疫吸附(ELISA)法测定白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。结果锌中毒模型组TNF-α、IL-2浓度分别为(9.02±1.34)、(1.411±0.082)pg/mL,T淋巴细胞增殖活性为(0.056 1±0.006),明显低于空白对照组(P<0.05),低剂量(200mg/kg)牛磺酸组TNF-α、IL-2分别为(15.92±2.32)、(1.928±0.103)pg/mL,T淋巴细胞增殖活性为(0.120 1±0.012),明显高于锌中毒模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论牛磺酸可提高锌中毒小鼠外周血TNF-α、IL-2水平及促进T淋巴细胞增殖,对锌中毒小鼠免疫功能损伤有一定保护作用。     

纳豆菌糖肽对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用

目的探讨纳豆菌糖肽(Bacillus natto glycopeptide,BNGP)对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用。方法KM小鼠80只随机分成BNGP低、中、高(6.25、12.5、25 mg/ml)剂量、空白、模型、5组。试验组连续灌胃BNGP 30 d,空白组与模型组以等量生理盐水代替,除空白对照组外,其余各级于24,25,26 d按80 mg/(kg·bw)腹腔注射环磷酰胺(CTX)。灌胃结束后,测定小鼠脾脏、胸腺指数,血清溶血素水平,脾细胞转化能力,细胞因子分泌以及体外脾细胞增殖作用的测定,研究BNGP对免疫低下小鼠体外免疫活性的影响。结果 BNGP中、高剂量组小鼠脾脏指数、HC50均显著高于模型组(P<0.05,P<0.01),高剂量组胸腺指数显著高于模型组(P<0.05);低、中、高剂量组ConA诱导的脾细胞增殖活性均显著高于模型组(P<0.05,P<0.01);中、高剂量组IL-2水平、高剂量组IFN-γ水平显著高于模型组(均P<0.05),而IL-10水平显著低于模型组(P<0.05,P<0.01);100²00μg/ml BNGP-1-b和12.5200μg/ml BNGP-1-b和12.5²00μg/ml BNGP-2-a可显著增强体外脾淋巴细胞增殖活性(P<0.05,P<0.01),50μg/ml BNGP-1-b和50200μg/ml BNGP-2-a可显著增强体外脾淋巴细胞增殖活性(P<0.05,P<0.01),50μg/ml BNGP-1-b和50²00μg/ml BNGP-2-a对ConA诱导的体外脾淋巴细胞增殖活性也具有显著增强作用(P<0.05,P<0.01)。结论 BNGP具有增强免疫功能低下小鼠体液和细胞免疫的作用。     

氨基葡萄糖对小鼠免疫功能的影响

目的:研究氨基葡萄糖(GlcNH2)对小鼠免疫功能的影响。方法:用体外实验方法测定GlcNH2对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响;进一步研究GlcNH2在体内促进免疫功能的作用,给小鼠灌服GlcNH2后,对其免疫功能指标进行测定,主要包括单核巨噬细胞吞噬功能,绵羊红细胞所致小鼠迟发型超敏反应,小鼠抗体生成能力(以半数溶血值表示),以及小鼠免疫器官指数(脾脏和胸腺)。结果:GlcNH2在体外能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,体内研究结果表明GlcNH2能够提高单核巨噬细胞的吞噬功能,增强迟发性超敏反应,提高小鼠抗体生成能力,并增加脾脏和胸腺指数。结论:GlcNH2对特异性细胞免疫功能和体液免疫功能以及非特异性免疫功能均有明显的促进作用,能够增强小鼠免疫功能。     

血府逐瘀汤对荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的：观察血府逐瘀汤对荷瘤小鼠免疫功能的影响，探讨血府逐瘀汤的抗肿瘤效果及其抗肿瘤的免疫学机制。方法：小鼠造模后给予不同药物治疗，10d后观察药物对瘤重和脾细胞功能的影响。结果：血府逐瘀汤能够显著抑制瘤重，活化T淋巴细胞增殖能力，提高荷瘤小鼠脾脏L3T4^ 细胞数量，升高L3T4^ ／Lyt-2^ 细胞比值，促进IL-2的分泌，但对Lyt-2^ 细胞数量影响不大。结论：血府逐瘀汤能够完全逆转肿瘤抗原和环磷酰胺引起的免疫抑制，其抑瘤作用与增强机体细胞免疫功能有关。     

褐藻多糖对小鼠淋巴细胞功能和细胞因子产生的影响

目的 :　研究褐藻多糖 ( BSP)对正常和免疫低下小鼠淋巴细胞功能及几种细胞因子产生的影响。方法 :　用环磷酰胺造成免疫功能低下小鼠模型 ,通过腹腔注射观察 BSP对正常和免疫低下小鼠淋巴细胞增殖反应、T细胞亚群及白介素 - 2 ( IL- 2 )产生的影响 ,并在体外观察 BSP对小鼠腹腔巨噬细胞分泌白介素 - 1 ( IL- 1 )和肿瘤坏死因子 ( TNF)的影响。结果 :　 ( 1 ) BSP1 0 0 mg/( kg·d)× 1 0 d能够明显提高正常和免疫低下小鼠脾脏 T、B细胞的增殖能力 ,显著促进脾细胞产生 IL- 2 ;使免疫低下小鼠胸腺、脾脏的 L3 T+ 4细胞数显著升高 ,L3 T+ 4/Lyt- 2 + 细胞比值增加。( 2 ) BSP在体外还能促进正常小鼠腹腔巨噬细胞产生 IL - 1和 TNF。结论 :　 BSP对正常和免疫低下小鼠的免疫功能具有促进作用。     

Cyclic AMP and GMP levels in thymocytes and splenic T and B lymphocytes in protein deprived rats.

Cyclic nucleotide levels were determined in thymocytes and in splenic T and B lymphocytes separated by nylon wool filtration. In control rats, thymocytes contained less cAMP and cGMP than splenic T cells. The level of cGMP was lower, and consequently cAMP:cGMP ratio was higher in splenic B than in T cells. Protein deprivation increased the nucleotide ratios in both T and B splenic lymphocytes; this effects was due to a decrease in the cGMP levels in the case of the T cells and to an increase in the cAMP levels in the B cells. These data could be related to the reduced mitotic activity of the splenic lymphocytes. However, the nylon-nonadherent thmyocytes of protein deprived rats paradoxically displayed increased cGMP contents without changes in the cAMP levels, despite the drop in their proliferative potential. The impairment of cyclic nucleotide metabolism may intervene in the immunological disturbances due to protein malnutrition.     

5km急性低压缺氧及不缺氧对免疫系统的影响

目的：探讨急性低压缺氧及急性低压不缺氧对免疫系统的影响并分析其主要因素。方法：小白鼠分为３组,急性低压缺氧５ｋｍ３０ｍｉｎ,急性低压不缺氧５ｋｍ ３０ｍｉｎ及地面对照组。实验组在５ｋｍ分别低压缺氧３０ｍｉｎ,低压不缺氧３０ｍｉｎ后,下降至地面,处死。应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测淋巴细胞增殖水平,小鼠胸腺细胞增殖法测定ＩＬ－１,ＩＬ－２活性,小鼠骨髓细胞增殖法检测ＩＬ－３活性。     

氯化镉诱发人支气管上皮细胞系恶性转化

目的研究氯化镉诱发SV40 LargeT抗原永生化的人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化作用。方法体外用不同浓度氯化镉多次处理16HBE细胞,软琼脂集落形成和裸鼠成瘤试验鉴定转化细胞的恶性度。结果细胞培养至35代,发现氯化镉可诱导16HBE恶性转化。转化细胞排列紊乱、重叠生长,在软琼脂中的集落形成率显著高于对照组(P<0.01),并呈时间—剂量依赖关系;转化细胞在裸鼠体内成瘤,组织学证实为低分化鳞状细胞癌。结论氯化镉有较强的诱导16HBE恶性转化能力;该转化模型为镉致癌机制的分子水平提供了理想的研究系统。     

膳食脂肪酸构成对小鼠淋巴细胞功能和脂质过氧化的影响

目的:探讨膳食多不饱和脂肪酸n-6/n-3比值对小鼠T淋巴细胞功能和脂质过氧化的影响。方法:96只BALb/c小鼠随机分为8组:饱和脂肪酸:单不饱和脂肪酸:多不饱和脂肪酸(S∶M∶P)为1:1.5:3.7和1:1.5:1,n-6/n-3比值分别为1、7.5、15、30,各4组。基础饲料采用AIN-93G配方,各组饲料的脂肪酸构成以食用油脂调配。饲养12w。测定小鼠T淋巴细胞功能,IL-2和血清丙二醛(MDA)水平。结果:S:M:P为1:1.5∶3.7,n-6/n-3为1时,小鼠T淋巴细胞增殖活性、IL-2水平均显著降低(P<0.05),且两者显著正相关(r=0.438,P<0.05),n-6/n-3为1、30时,血清MDA水平明显高于n-6/n-3为7.5和15组(P<0.05);S:M:P为1:1.5:1,n-6/n-3为1时,小鼠T淋巴细胞增殖活性、CD4+/CD8+T细胞比例、IL-2水平明显降低(P<0.05),n-6/n-3为1、30时,血清MDA水平明显高于n-6/n-3为7.5组(P<0.05)。结论:S:M:P为1:1.5:3.7和1:1.5:1,n-6/n-3为1时,T淋巴细胞功能受到抑制,其作用机制可能与IL-2有关;DHA对CD4+/CD8+T细胞比例的抑制作用可能大于ALA;结合脂质过氧化程度来考虑,膳食n-6/n-3为7.5～15范围内较为理想。     

镉的免疫毒性与促肾上腺皮质激素释放因子的关系

对ＣｄＣｌ２和ＣｄＣｌ２＋α－ｈＣＲＦ（α螺旋促肾上腺皮质激素释放因子）分另染毒的ＳＤ大鼠,用「＾３ＨＴｄＲ」掺入法测定大鼠脾Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖转化功能,垂体前叶细胞培养法测定中枢下丘脑和外周血浆中的ＣＲＦ含量。结果表明单独染镉组有丝分裂原诱导的鼠脾Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖转化均受到显示抑制,具有剂量－效应关系（Ｐ〈０．０５）;动物下丘脑ＣＲＦ含量着染镉剂量升高（Ｐ〈０．０５）;外周血浆ＣＲＦ含量各组间     

Ag85B蛋白诱导小鼠脾淋巴细胞表达IL-2、IFN-γ及促进细胞增殖的实验研究

目的探讨结核分枝杆菌Ag85B蛋白在体外诱导BALB/c小鼠脾淋巴细胞表达IL-2和IFN-γ的能力及对细胞增殖的影响,以了解Ag85B基因表达在特异性细胞免疫应答中的作用。方法体外分离培养BALB/c小鼠脾淋巴细胞,除去蛋白中的内毒素,采用BCA法对Ag85B蛋白进行定量,10μg/ml浓度的蛋白与小鼠脾淋巴细胞共同孵育24、72 h,RT-PCR方法检测细胞培养液上清中IL-2和IFN-γ的表达;用不同浓度的Ag85B蛋白刺激小鼠脾淋巴细胞24、48、72 h,MTT法检测其对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响。结果小鼠脾淋巴细胞在体外分离培养成功;经RT-PCR检测,Ag85B蛋白能诱导小鼠脾淋巴细胞表达IL-2和IFN-γ,对照组表达呈阴性;MTT法检测到Ag85B蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖具有促进作用,在一定范围内呈时间和剂量依赖性,在同对照组的增殖比较中,除0.5μg/ml组在24、48 h差异无统计学意义外,其他浓度组在各个时间点差异均有统计学意义(P0.05)。结论结核分枝杆菌Ag85B蛋白能诱导小鼠脾细胞产生IL-2和IFN-γ因子,能在体外促进小鼠脾淋巴细胞增殖,诱导了特异性的T细胞免疫应答。     

褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞Th1/Th2细胞因子谱影响的体内外研究

目的研究褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞Th1/Th2细胞因子谱的影响。方法体内实验:分别设阴性对照组和两个褐藻胶组(0.50g/kgbw和1.50g/kgbw),每组各5只C57BL/6小鼠,分别经口给予纯净水和褐藻胶,30天后分离脾淋巴细胞,培养48h后取上清采用流式微球分析术(CBA)方法分析白细胞介素(IL-2、IL-4、IL-5)、肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。体外实验:分离C57BL/6种小鼠脾淋巴细胞,与褐藻胶(25mg/ml和50mg/ml)培养48h后取上清采用CBA方法分析IL-2、IL-4、IL-5、TNF和IFN-γ水平。结果体内实验:0.5g/kgbw和1.5g/kgbw褐藻胶组IFN-γ表达水平明显高于阴性对照组(P<0.01),而IL-2和IL-4表达水平下降(P<0.01,P<0.05)。体外实验:25mg/ml和50mg/ml褐藻胶组TNF、IL-2和IL-4表达均明显高于阴性对照组(P<0.05,P<0.01),50mg/ml褐藻胶组IL-5表达水平明显高于阴性对照组(P<0.01)。结论无论是在体内还是体外实验条件下,褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞分泌的Th1/Th2细胞因子谱均有影响。     

维生素A与铁缺乏对小鼠免疫功能的影响

目的 :　通过建立动物模型 ,观察维生素 A( VA)与铁 ( Fe)缺乏对小鼠免疫功能的影响 ,为在人群中科学而合理地实施 VA与铁的联合干预提供理论依据。方法 :　人工制备缺 VA( - VA)、缺 Fe( - Fe)和缺 VA、Fe( - VA- Fe)三种饲料 ,相对等饲喂养小鼠 5 w,眼窝静脉采血测定全血铁、血红蛋白、血清 VA、血清溶血素及 T淋巴细胞 α-醋酸萘酯酶 ( ANAE)阳性率 ,无菌摘取免疫器官制备脾细胞悬液进行细胞培养 ,测定脾脏抗体生成细胞 ( PFC)数并用颜色反应 ( MTT)法检测 T淋巴细胞增殖功能。结果 :　摄入 - VA- Fe饲料组小鼠血清 VA与全血铁分别为 ( 0 .85±0 .0 1 )μ mol/L和 ( 6.0 6± 1 .43) mmol/L,显著低于对照组和其它实验组 ;特异性细胞免疫指标MTT值与α- ANAE阳性率分别为 ( 0 .36± 0 .0 3) %和 ( 4 0 .37± 8.2 2 ) % ,均显著低于对照组和低VA组 ;体液免疫指标 PFC亦以 - VA- Fe组最低 ,为 1 877.5 0± 2 73.37( /5× 1 0 6脾细胞 )。结论 :　 VA与 Fe同时缺乏对小鼠细胞免疫和体液免疫功能均有不同程度损伤 ,这种损伤较单独缺乏时广泛而严重。     

高分压氧处理对体外培养大鼠脾淋巴细胞增殖及杀伤能力的影响

目的观察大鼠体外脾淋巴细胞经不同压力—时程的高分压氧处理后淋巴细胞增殖及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤能力的变化。方法分离成年大鼠脾淋巴细胞,置于高压细胞培养舱内,以不同压力—时程的高分压氧(含CO25 kPa)处理,W ST-8比色法测定经刀豆球蛋白(ConA)刺激后淋巴细胞的增殖率和对肿瘤细胞株P815的杀伤能力。以常压空气(含5%CO2)处理作为对照组。结果一定压力—时程的高分压氧处理对体外培养的大鼠脾淋巴细胞增殖及杀伤能力具有促进作用,但随暴露剂量的增加则逐渐表现为抑制效应。结论高分压氧对离体大鼠脾淋巴细胞增殖及杀伤能力存在一个从适度暴露促进功能发挥至过量暴露抑制功能发挥的过程。