杜仲醇提取物通过RhoA/ROCK信号通路调控大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化作用研究

目的:分析杜仲醇提取物通过RhoA/ROCK信号通路调控骨质疏松症大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化中的影响。方法:选取实验用纯系大鼠50只,随机数字表法分成5组:正常组(10只)、模型组(10只)、杜仲低剂量组(10只)、杜仲中剂量组(10只)与杜仲高剂量组(10只),模型组与杜仲低、中、高剂量组制备OP大鼠模型,杜仲低、中、高剂量组大鼠分别使用50、100、200 mg/kg杜仲醇提取物灌胃,正常组、模型组大鼠5 mL/kg生理盐水灌胃,末次给药后断颈处死大鼠,经过BMSCs培养并察看大鼠细胞成长及矿化状况,RT-PCR检测大鼠软骨细胞内ROCK1、RhoA表达状况及BMSCs成骨诱导后骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)mRNA表达。结果:模型组、杜仲低剂量组大鼠细胞矿化率较正常组显著降低,杜仲中、高剂量组大鼠细胞矿化率较模型组、杜仲低剂量组显著升高,差异均有统计学意义(P0.05);模型组、杜仲低剂量组大鼠ROCK1、RhoA mRNA表达量较正常组显著降低,杜仲中剂量组、杜仲高剂量组大鼠ROCK1、RhoA mRNA表达量较模型组显著升高,差异均有统计学意义(P0.05);模型组、杜仲低剂量组OPN、Runx2及OCN mRNA表达量较正常组显著降低,杜仲中、高剂量组OPN、Run×2及OCN mRNA表达量较模型组、杜仲低剂量组显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:杜仲醇提取物可提升BMSCs内RhoA/ROCK信号路径ROCK1、RhoA mRNA表达量,促进成骨分化和BMSCs增殖,但其具体机制仍需行更深入研究。     

阿托伐他汀对急性心肌梗死大鼠心肌血管新生及eNOS及RhoA表达的影响

目的观察不同剂量阿托伐他汀对急性心肌梗死大鼠心肌血管新生及心肌eNOS及RhoA表达的影响。方法雄性急性心肌梗死大鼠60只,随机分为对照组(0．9％NaCl溶液)、小剂量阿托伐他汀组(3 mg·kg-1·d-1)、中剂量阿托伐他汀组(12 mg·kg-1·d-1)及大剂量阿托伐他汀组(50 mg·kg-1·d-1),连续灌胃2周。2周后处死动物,α-SMA及vWF免疫组化染色检测心肌血管密度;逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测eNOS及RhoA mRNA的表达。结果大剂量组α-SMA染色阳性血管计数较对照组明显减少(P<0．01):中剂量组vWF染色阳性微血管计数较对照组明显增加(P<0．01)。中剂量组eNOS mRNA表达较对照组明显增加(P<0．05)。大剂量组RhoA mRNA表达较对照组明显减少(P<0．05)。结论阿托伐他汀对大鼠急性心肌梗死后心肌血管新生的作用与剂量有关。eNOS、RhoA可能参与阿托伐他汀对急性梗死心肌血管新生作用过程。     

天麻素对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清内皮素-1水平的影响

目的探讨天麻素对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清中内皮素-1(ET-1)水平的影响。方法 Wistar大鼠50只随机分为5组:假手术组、模型组、天麻素低剂量组、天麻素中剂量组、天麻素高剂量组,每组10只。假手术组大鼠开胸不结扎冠状动脉前降支;模型组大鼠开胸结扎前降支;天麻素低、中、高剂量组大鼠开胸结扎冠状动脉前降支,术前给予相应剂量的天麻素,经舌下静脉给药。放射免疫法测量ET-1血清学水平;反转录-聚合酶链反应、蛋白质免疫印迹法检测各组大鼠心肌组织中ET-1的表达情况。结果与假手术组比较,模型组及天麻素低、中、高剂量组大鼠血清ET-1水平、心肌组织ET-1 mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05);天麻素低、中、高剂量组大鼠血清ET-1水平、心肌组织ET-1 mRNA及蛋白水平均较模型组显著降低(P<0.05),且天麻素剂量越高其水平降低越明显(P<0.05)。结论天麻素进行干预后可有效降低心肌缺血再灌注损伤后内皮素-1表达。     

红景天苷对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠RhoA/Rho激酶信号通路的影响

目的:探讨红景天苷对肺动脉高压大鼠的肺组织病理与RhoA/Rho激酶信号通路的影响。方法:将30只6~8周龄雄性SD大鼠随机分为五组:正常对照组、模型对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组;除正常对照组注射对照溶剂外,其余组皮下注射60 mg/kg野百合碱,2~28d后,对低、中、高浓度组分别注射50、100、200mg/(kg·d)红景天苷,对照组注射生理盐水;实验结束,分别检测各组右心室收缩压(RVSP)及右心室肥厚指数;HE染色检测大鼠肺组织病理变化,RT-PCR检测肺组织ROCK1、RhoA mRNA表达水平,Western blot检测肺组织RhoA、ROCK1、p-MYPT1蛋白表达及磷酸化水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组RVSP及右心室肥厚指数显著上升,肺组织RhoA、ROCK1mRNA显著上调,ROCK1、RhoA、p-MYPT1蛋白表达及磷酸化水平显著上调;不同浓度红景天苷干预后,各组RVSP及右心室肥厚指数出现变化,高浓度组显著下调;肺组织RhoA、ROCK1mRNA逐渐下调,RhoA、ROCK1、p-MYPT1蛋白表达及磷酸化水平逐渐下调,呈浓度依赖,中、高浓度组变化显著。结论:一定剂量红景天苷能够缓解野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压,可能与其对RhoA/Rho激酶信号通路抑制有关。     

辛伐他汀抑制心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大与RhoA激酶关系

目的:观察辛伐他汀对心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大的抑制作用,探讨小G蛋白RhoA激酶(RhoA kinase,ROCK)在辛伐他汀调控心肌细胞肥大中的信号转导作用.方法:雄性Wistar大鼠,分为4组,每组8只.结扎冠状动脉左前降支,建立心肌梗死模型.假手术组(SHAM组)和梗死组(MI组)予生理盐水1 ml/d灌胃.辛伐他汀组(SIM组)予辛伐他汀40mg/(kg·d)灌胃.Fasudil组(F组)予特异性ROCK抑制剂Fasudil 7.5 ms/ks,bid腹腔注射.术后28 d,测定大鼠左室重量指数,心肌细胞横断面积,RT-PCR检测ROCK mRNA表达,免疫组化和Western-Blot检测ROCK活性标志物-磷酸化ERM(Phospho-ERM)蛋白表达水平.结果:术后28 d,MI组大鼠心肌左室重量指数,心肌细胞表面积,ROCK mRNA表达水平以及Phospho-ERM蛋白表达水平较SHAM组明显增高,SIM组和F组前述各项检测指标均较MI组显著降低.结论:辛伐他汀能抑制心梗后心肌细胞肥大,其作用机制可能与他汀抑制ROCK途径有关.     

缺血心肌β受体脱敏现象及机制探讨

【目的】观察心肌缺血状态下 β1肾上腺素能受体 (β1 AR)脱敏现象 ,探讨其脱敏的机制。【方法】用大剂量垂体后叶素 (Pit)造成大鼠心肌缺血 ,采用放射配基受体结合分析测定心肌细胞膜 β1 AR密度 ,放免测定大鼠外周血及心肌组织中cAMP水平 ,定量RT PCR方法测定β1 AR及β1 AR激酶 (βARK 1)mRNA的表达。【结果】心肌缺血时 β1 AR密度上调 ,但亲和力下降 ,血浆及心肌cAMP水平低于正常组 (P <0 0 1或P <0 0 5 ) ,βARK 1mRNA表达明显增加 (P <0 0 1)。【结论】心肌缺血时β AR数目和功能存在分离现象 ,这种现象是β AR脱敏而引起的 ,其脱敏的机制与 β ARK1mRNA表达增加有关。     

壮通饮对大鼠心肌缺血血瘀证内皮素1表达的影响

目的 观察壮通饮对心肌缺血血瘀证大鼠血清及心肌组织内皮素1（endothelin-1，ET-1）表达的影响，探讨壮通饮对冠心病心肌缺血的保护作用机制。方法 采用左冠状动脉结扎法制作大鼠心肌缺血血瘀证模型，并随机分为空白、假手术组、模型组、壮通饮低（6.8g/kg）、中（13.6g/kg）、高（27.2g/kg）剂量组、阳性对照组7个组，灌胃给药治疗4周后，分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）和WB（Western blotting）法检测大鼠血清及心肌组织ET-1的表达。结果 血清ELISA结果显示，与空白组、假手术组相比，模型组ET-1的表达明显升高（P<0.05），药物干预后，各组均可使ET-1降低，但中剂量组降低ET-1效果最明显（P<0.05）。WB检测结果显示，模型组ET-1的平均灰度值明显高于空白组、假手术组，药物干预后，各组均可使ET-1平均灰度值降低，但中剂量组降低效果最明显。结论 壮通饮能减少心肌缺血血瘀证大鼠ET-1的表达，缓解血管收缩，对大鼠心肌缺血有一定的保护作用。     

肾炎消白颗粒对肾小球肾炎蛋白尿大鼠Nephrin mRNA动态表达的影响

【目的】观察肾炎消白颗粒对肾小球肾炎蛋白尿模型大鼠肾脏组织中Nephrin mRNA动态表达的影响,探讨其作用机理。【方法】将100只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、洛汀新组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组20只。采用一次性尾静脉注射阿霉素复制肾小球肾炎蛋白尿大鼠模型。洛汀新组大鼠给予洛汀新(剂量为0.90 mg·kg-1·d-1)灌胃,中药高、低剂量组给予肾炎消白颗粒(剂量分别为3.60、1.80 g·kg-1·d-1)灌胃,每天1次,1周连续给药6次,共给药7周。每周测量1次大鼠体质量,于第3、5、7周分别采用苏木素—伊红(HE)染色法观察各组大鼠肾组织病理学改变,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)法检测各组大鼠肾组织Nephrin mRNA表达。【结果】(1)体质量:与空白组比较,模型组大鼠体质量出现明显的异常增加,尤以造模3周后更明显(P0.05);与模型组比较,洛汀新组大鼠各时间点体质量的异常增加均得到有效控制(P0.05),中药高剂量组在造模3周后也得到有效控制(P0.05),且造模3周后中药高剂量组的控制效果优于洛汀新组(P0.05)。(2)尿白蛋白/尿肌酐比值:与空白组比较,模型组大鼠各时间点尿白蛋白/尿肌酐比值显著升高(P0.01);与模型组比较,洛汀新组大鼠各时间点尿白蛋白/尿肌酐比值显著降低,中药高剂量组大鼠在第3、4、5、6、7周尿白蛋白/尿肌酐比值显著降低(P0.05);与洛汀新组比较,中药高剂量组大鼠在第5、6、7周尿白蛋白/尿肌酐比值降低(P0.05)。(3)Nephrin mRNA:与空白组比较,模型组大鼠第3周肾组织Nephrin mRNA表达显著升高,于第5、7周显著降低(P0.05);与模型组比较,中药高剂量组大鼠各时间点肾组织Nephrin mRNA表达显著升高(P0.05);与同组第3周比较,中药高、低剂量组大鼠第5、7周肾组织Nephrin mRNA表达显著降低(P0.05)。【结论】肾炎消白颗粒可通过上调肾小球肾炎蛋白尿模型大鼠肾组织中Nephrin mRNA表达,修复损伤的足细胞,高剂量治疗效果更明显。     

基于RhoA/ROCK通路研究天麻素对高血压病左心室肥厚大鼠心室重构的影响

目的 观察天麻素对高血压病左心室肥厚大鼠心室重构的影响,从Ras同族体基因家族成员A（Ras homolog gene family member A,RhoA）/Rho激酶（Rho-associated kinase,ROCK）通路探究其作用机制。方法 将100只SD雄性大鼠随机分为假手术组,模型组,天麻素低剂量（16 mg/kg）、中剂量（24 mg/kg）、高剂量（32 mg/kg）组和依那普利组（1.5 mg/kg）,每组15只。采用腹主动脉缩窄法复制左心室肥厚模型。采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）和白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）水平,计算左心室肥厚指数（left ventricular hypertrophy index,LVHI）;苏木精-伊红染色和Masson染色观察心肌的组织形态学变化;qRT-PCR和Western blot法检测心肌组织RhoA、ROCK mRNA及蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠尾动脉收缩压、LVHI及血清AngⅡ、IL-6水平显著升高（P＜0.05）,心肌组织纤维化程度升高,RhoA、ROCK mRNA及蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。与模型组比较,天麻素低、中、高剂量组和依那普利组尾动脉收缩压、LVHI及血清AngⅡ、IL-6水平均显著下降（P＜0.05）,心肌纤维程度降低,RhoA、ROCK mRNA及蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）。依那普利组大鼠心肌组织RhoA、ROCK mRNA及蛋白表达水平最低,天麻素的作用具有剂量依赖性。结论 天麻素能有效降低高血压病大鼠尾动脉血压、LVHI和血清AngⅡ、IL-6水平,改善其心室重构,其机制与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。     

基于Rho/ROCK信号通路的麦粒灸对自发性高血压大鼠主动脉血管内皮功能保护作用机制探讨

目的 观察麦粒灸对自发性高血压大鼠(SHR)降压作用及主动脉血管内皮功能的保护并探讨其可能的机制`。方法 将SHRs随机分为模型组和麦粒灸组,WKY大鼠设为空白组。模型组、空白组不施灸,麦粒灸组实行麦粒灸治疗。观测各组大鼠血压、血清一氧化氮（NO）含量、主动脉形态学改变。采用Western blot法和qPCR法测定各组大鼠主动脉组织中RhoA、ROCK1和RhoA、ROCK1 mRNA表达水平。结果 与模型组相比,麦粒灸组血压下降,主动脉内膜增生不明显,仅部分内膜脱落,血清NO含量明显上升,主动脉RhoA、ROCK1和RhoA、ROCK1 mRNA含量显著下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 麦粒灸能有效降低SHR血压,保护主动脉血管内皮功能,其机制可能与抑制Rho/ROCK信号通路表达相关。      

针刺对抑郁症大鼠海马CREB mRNA、BDNF mRNA表达的影响

【目的】探讨针刺对抑郁症大鼠海马cAMP反应结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的影响。【方法】选用SD成年大鼠32只随机分为空白组、模型组、针刺组和西药组(盐酸氟西汀,剂量为1.8 mg·kg-1·d-1),每组8只。空白组进行正常饲养,不给予其他处理;模型组大鼠采用长期不可预见性温和刺激法复制抑郁症模型;针刺组大鼠造模后针刺合谷穴和太冲穴,并加电针,每日1次,每次15 min,左右两侧穴位交替进行,持续21 d。西药组大鼠造模后以氟西汀灌胃,每日1次,持续3周。应激后22 d以颈椎脱臼法处死大鼠,取大鼠海马组织存储于-70℃备用,采用实时荧光定量PCR方法检测海马CREB mRNA、BDNF mRNA的表达。【结果】抑郁症模型组大鼠海马中的CREB mRNA、BDNF mRNA表达较空白组显著下降(P0.01);西药组和针刺组大鼠海马CREB mRNA表达较模型组显著升高(P0.05);西药组和针刺组大鼠海马BDNF mRNA表达与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05)。【结论】针刺能改善抑郁症大鼠海马CREB mRNA表达,这可能是针刺抗抑郁作用的机理之一。     

RhoA-MMP-2信号通路在缺血预处理保护糖尿病大鼠心肌缺血再灌注中的作用

目的 探讨糖尿病心肌缺血再灌注损伤的发生机理,观察RhoA-MMP-2信号转导通路在缺血预处理保护糖尿病大鼠心肌缺血再灌注中的作用.方法 SD大鼠40只,分为非糖尿病心肌缺血再灌注(CIR)组、非糖尿病心肌缺血预处理(CIP)组、糖尿病心肌缺血再灌注(DIR)组和糖尿病心肌缺血预处理(DIP)组.免疫组织化学法检测心肌MMP-2蛋白的表达,Western blot法测定心肌RhoA和ROCK蛋白的表达,检测血清和心肌组织中NO、NOS、SOD和MDA的水平,进行心肌梗死范围的测定.结果 与DIR组相比,DIP组血清和心肌中的MDA含量明显降低,血清和心肌中的SOD活性明显升高.与DIR组相比,DIP组血清和心肌中的NO含量明显降低,血清和心肌中的NOS活性明显降低.与DIR组相比,DIP组心肌中的MMP-2蛋白表达明显降低.CIP组的心肌梗死面积较CIR组降低;DIP组的心肌梗死面积较DIR组降低;与CIP组比较,DIP组的心肌梗死面积显著增加.DIP组中RhoA蛋白的表达明显低于DIR组.DIP组中ROCK蛋白的表达明显低于DIR组.结论 缺血预处理可减轻糖尿病大鼠的心肌缺血再灌注损伤,可能与减轻脂质过氧化和自由基损伤、下调MMP-2、RhoA和ROCK蛋白的表达以及降低心肌梗死的范围等有关.     

健脾消积法对非酒精性脂肪性肝病模型大鼠的抗氧化作用

【目的】探讨健脾消积法对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠的抗氧化机制。【方法】将46只大鼠随机分为正常组(N=10)、模型组(N=8)、阳性对照组(N=9)、中药低剂量组(N=9)、中药高剂量组(N=10)等5组。给予大鼠喂饲高脂饲料诱导NAFLD大鼠模型。自造模第1天起,正常组、模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,阳性对照组给予复方蛋氨酸胆碱溶液(剂量为0.38 g·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,中药低、高剂量组给予加减丹溪枳术丸溶液(剂量分别为18、36 g·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,共给药10周。采用常规油红O法观察肝组织形态学改变,采用实时荧光定量PCR检测肝组织核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-glutamylcysteine synthethase,γ-GCS)mRNA表达,采用硫代巴比妥酸法检测肝组织丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)含量。【结果】与模型组比较,中药高剂量组大鼠肝脏脂肪变性减轻,Nrf2 mRNA、γ-GCS mRNA表达水平及SOD含量显著升高,MDA含量显著降低(均P0.05或P0.01)。【结论】健脾消积法可有效干预NAFLD大鼠,其机制可能与增强Nrf2、γ-GCS表达,减轻氧化应激有关。     

藏红花素对自发性高血压大鼠血管内皮功能障碍及动脉粥样硬化的作用及其ROCK/JNK信号通路机制

目的 探讨藏红花素（CR）对自发性高血压（SH）大鼠血管内皮功能障碍（ED）和动脉粥样硬化（As）的影响,阐明其可能的作用机制。 方法 选取10只Wistar Kyoto大鼠作为正常组,40只SH大鼠随机分为模型组和低（25 mg·kg^－1·d^－1）、中（50 mg·kg^－1·d^－1）及高剂量（100 mg·kg^－1·d^－1）CR组,每组10只,正常组和模型组大鼠腹腔注射等量生理盐水。检测各组大鼠血压和血脂水平、动脉粥样硬化指数（AI）及24 h尿样8-异构前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）肾脏排泄量,HE染色观察各组大鼠主动脉组织形态表现,ELISA法检测各组大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、内皮素1（ET-1）及血栓素B2（TXB2）水平,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组大鼠主动脉组织中RhoA/Rho相关激酶1（ROCK1）、ROCK2和C-Jun氨基酸末端激酶（JNK）mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠主动脉组织中ROCK1、ROCK2、JNK和磷酸化JNK（p-JNK）蛋白表达水平。 结果 与正常组比较,模型组大鼠收缩压与舒张压,24 h尿8-iso-PGF2α肾脏排泄量,血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）水平,AI,MDA、ET-1及TXB2水平、主动脉组织中ROCK1、ROCK2和JNK mRNA表达水平及ROCK1、ROCK2、JNK和p-JNK蛋白表达水平升高（P<0.05）,血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、GSH-Px和NO水平降低（P<0.05）。模型组大鼠主动脉血管壁粗糙、增厚及大量泡沫细胞和坏死物质分布。与模型组比较,低、中和高剂量CR组大鼠收缩压与舒张压,24 h尿8-iso-PGF2α肾脏排泄量,血清TC、TG和LDL-c水平,AI,MDA、ET-1和TXB2水平,主动脉组织中ROCK1、ROCK2和JNK mRNA表达水平以及ROCK1、ROCK2、JNK和p-JNK蛋白表达水平降低（P<0.05）,血清GSH-Px 活性和HDL-c及NO水平升高（P<0.05）。低剂量CR组大鼠主动脉血管壁粗糙、增厚及泡沫细胞与动脉粥样坏死物质分布可见不同程度减少。与低剂量CR组比较,中剂量CR组大鼠收缩压和舒张压,24 h尿8-iso-PGF2α肾脏排泄量,血清TC、TG和LDL-c水平,AI,MDA、ET-1及TXB2水平,主动脉组织中ROCK1、ROCK2及JNK mRNA表达水平及ROCK1、ROCK2、JNK和p-JNK蛋白表达水平降低（P<0.05）,血清GSH-Px活性和HDL-c及NO水平升高（P<0.05）。中剂量CR组大鼠主动脉血管壁粗糙、增厚及泡沫细胞与动脉粥样坏死物质分布有所减少;与中剂量CR组比较,高剂量CR组大鼠收缩压和舒张压,24 h尿8-iso-PGF2α肾脏排泄量,血清TC、TG和LDL-c水平,AI,MDA、ET-1及TXB2水平,主动脉组织中ROCK1、ROCK2及JNK mRNA表达水平及ROCK1、ROCK2、JNK和p-JNK蛋白表达水平降低（P<0.05）,血清GSH-Px活性和HDL-c及NO水平升高（P<0.05）。高剂量CR组大鼠主动脉血管壁动脉粥样病理形态明显改善。 结论 CR可改善SH大鼠ED及As,其作用机制可能与抑制ROCK/JNK信号通路激活有关。     

姜黄素对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠内皮素-1水平的影响

目的探讨姜黄素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法将60只成年健康Wistar大鼠采用随机数字表法分成6组,即假手术组、缺血30 min组、再灌注1、2 h组、姜黄素+再灌注1、2 h组,每组10只。应用放射免疫方法检测血清内皮素-1(ET-1)水平;反转录-聚合酶链反应及蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织ET-1 mRNA及蛋白表达水平。结果与假手术组比较,缺血30 min组、再灌注1、2 h组、姜黄素+再灌注1、2 h组大鼠血清ET-1和心肌组织ET-1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与缺血30 min组比较,再灌注1、2 h组、姜黄素+再灌注1、2 h组大鼠血清ET-1和心肌组织ET-1 mRNA及蛋白表达水平显著升高,且再灌注2 h组显著高于再灌注1 h组(P<0.05);姜黄素+再灌注1、2 h组较再灌注2 h组大鼠血清ET-1和心肌组织ET-1 mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。结论 ET-1在急性心肌缺血再灌注损伤缺血和再灌注阶段表达上调,姜黄素预处理可下调其表达。     

卡维地洛对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌重塑中Rho/Rock信号通路的影响

目的研究卡维地洛对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌重塑中的作用及对Rho/Rock信号通路的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分成3组:空白对照组(对照组)、ISO模型组(模型组)、卡维地洛(Carvedilol Car)组(治疗组),每组8只。模型组和治疗组皮下多点注射ISO[5 mg/(kg·d)×10 d]建立大鼠心肌纤维化模型,其中治疗组给予Car[10 mg/(kg·d)]灌胃,模型组及对照组每日给予相同体积的生理盐水灌胃。6周后取左室心肌组织进行MASSON染色、免疫组织化学染色,分别检测胶原容积分数(CVF)、心肌组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达量;RT-PCR法检测心肌组织RhoA和Rho激酶(Rock)mRNA的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠CVF增加,TGF-β1表达增高(P<0.01),左室组织RhoA和Rho激酶mRNA表达上调(P<0.01);与模型组比较,治疗组CVF表达下降(P<0.01),TGF-β1、RhoA和Rho激酶mRNA表达减少(P<0.01),但均仍高于对照组(P<0.01)。结论 ISO诱导心肌纤维化伴有Rho/Rock信号通路激活,卡维地洛能抑制Rho/Rock信号转导通路的活性、抑制TGF-β1表达,减轻心肌纤维化。     

祛痰化瘀方对脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征模型大鼠糖代谢、卵巢形态及体质量指数的影响

目的:观察祛痰化瘀方对脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)诱导的多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)模型大鼠血糖曲线下面积(area under curve,AUC)、卵巢形态及体质量指数(body mass index,BMI)的影响。方法:SD雌性大鼠随机分为空白组、模型对照组、祛痰化瘀方高剂量组、祛痰化瘀方低剂量组、二甲双胍组。自22日龄起,模型组、祛痰化瘀方高剂量组、祛痰化瘀方低剂量组及二甲双胍组连续20 d颈背部皮下注射DHEA建立PCOS模型,空白组大鼠每天皮下注射油剂。相应药物连续灌胃28 d后,各组大鼠进行口服葡萄糖耐量实验计算葡萄糖AUC,ELISA法检测血清胰岛素(insulin,INS)浓度,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察卵巢形态,并计算BMI。结果:造模后,模型组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)为(5.89±0.28)mol·mL~(-1),与空白组FBG(5.23±0.37)mol·mL~(-1)比较,差异有统计学意义(P0.01)。模型组空腹INS水平为(14.44±3.56)U·mL~(-1),空白组INS为(8.30±3.14)U·mL~(-1),两组比较,差异具有统计学意义(P0.01)。模型组大鼠血糖AUC为(28.52±3.87)mol·(mL·min)~(-1),空白组为(25.27±2.81)mol·(mL·min)~(-1),两组比较,差异具有统计学意义(P0.01)。模型组BMI高于空白组,但差异无统计学意义(P0.05)。模型组卵巢大体观察:表面苍白、体积增大;镜下观察:黄体数目减少,呈多囊样改变。二甲双胍和祛痰化瘀方两个剂量组可不同程度的改变PCOS模型大鼠上述病理改变,祛痰化瘀方高剂量组效果较好。结论:祛痰化瘀方能降低PCOS模型大鼠空腹血糖水平、血糖AUC水平及胰岛素水平,改善卵巢形态,但对BMI影响不大。     

当归芍药散含药血清抑制内皮素-1介导的肝星状细胞收缩的机制研究

目的 探讨当归芍药散（Danggui Shaoyao San,DSS）含药血清对内皮素-1（endothelin,ET-1）介导的肝星状细胞内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS）和RhoA/ROCKⅡ蛋白表达的影响。方法 将实验动物分为空白组和给药组,分别提取血清,－20 ℃冻存备用。细胞实验分为6组：空白组,模型组,DSS含药血清高、中、低剂量组,Y-27632抑制剂组。肝星状细胞培养24 h后,采用Western blot法检测细胞内RhoA、ROCK Ⅱ、eNOS蛋白的表达水平。结果 与空白组比较,模型组RhoA、ROCK Ⅱ蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）,细胞内eNOS蛋白表达水平明显下降（P<0.05）;与模型组比较,DSS含药血清各剂量组RhoA、ROCKⅡ蛋白表达水平减少（P<0.05）,DSS含药血清高、中剂量组细胞内eNOS蛋白表达水平增多（P<0.05）。结论 DSS可通过抑制肝星状细胞RhoA、ROCK蛋白的表达,上调eNOS蛋白的表达,抑制ET-1诱导的肝星状细胞收缩。     

四逆汤对阿霉素诱导的慢性心力衰竭大鼠内质网应激的影响

【目的】探讨四逆汤对阿霉素诱导的慢性心力衰竭(CHF)大鼠内质网应激的影响。【方法】从90只大鼠中随机选取15只作为正常组,其余大鼠腹腔注射阿霉素构建CHF模型,同时,正常组给予腹腔注射生理盐水。造模结束后,正常组大鼠全部存活,造模大鼠存活60只。再将60只CHF大鼠随机分为5组,即模型组,四逆汤低、中、高剂量组,曲美他嗪组,每组12只。四逆汤低、中、高剂量组分别给予1.4、4.2、12.6(生药)g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,曲美他嗪组给予曲美他嗪10 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,正常组和模型组给予相同体积的生理盐水灌胃。连续给药4周。采用小动物超声测量左心室舒张末期直径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS)变化;采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血浆脑钠肽(BNP)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测心肌组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)和活化转录因子4(ATF4)mRNA表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠LVEDD显著增大,LVEF、LVFS均显著降低,血浆BNP和AngⅡ含量升高,心肌组织GRP78、PERK及ATF4 m RNA表达量升高(P 0.01);与模型组比较,四逆汤低、中、高剂量组及曲美他嗪组LVEDD降低,LVEF、LVFS均显著增加,血浆BNP和AngⅡ含量减少,心肌组织GRP78、PERK及ATF4 m RNA表达量降低,且呈剂量依赖性,其中,四逆汤高剂量组及曲美他嗪组差异均有统计学意义(P 0.05或P 0.01)。【结论】四逆汤可改善慢性心力衰竭大鼠模型心脏功能,其机制可能与抑制PERK/ATF4信号通路从而减轻内质网应激有关。     

健心平律丸抗心律失常的机理研究

【目的】探讨健心平律丸抗心律失常的机理。【方法】SD大鼠90只,随机分成3组,即模型对照组,健心平律丸高、低剂量组;后两组分别按1．6、0．8g／kg剂量灌胃给药,模型组给予等容积生理盐水,连续7d后,3组动物均复制阻断左冠状动脉致大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,采用心电图Ⅱ导联记录、连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)免疫组化染色方法,观察健心平律丸对心肌缺血再灌注大鼠的心律失常发生率、病死率和心肌组织Cx43表达的影响。【结果】健心平律丸可减少缺血再灌注大鼠心律失常的发生率及病死率,增强心肌组织Cx43的表达。【结论】健心平律丸直接拮抗心肌损伤令Cx43表达增强的作用,可能是其抗心律失常的机理之一。