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1.
目的:研究过氧化氢(H2O2)对培养乳鼠心肌细胞的损伤作用以及小檗碱对其的影响。方法:用H2O2处理心肌细胞,以建立心肌细胞的H2O2损伤模型。用比色法测定乳酸脱氢酶活性;戊巴比妥酸法测定细胞内脂技过氧化物(MDA)的含量;MTT法测定细胞活力。结果:H2O2以呈浓度依赖(50—2500μM)和时间依赖(2—12h)的方式致心肌细胞的损伤作用,且浓度为2500μM的H2O2处理心肌细胞12h接近其损伤作用的最高峰。小檗碱(Ber)可不同程度地减轻H2O2介导的心肌细胞损伤,能降低细胞损伤指数,减少细胞内MDA的生成和提高细胞活力(P〈0.01),这种细胞保护作用呈浓度依赖性(10—100μM)的。结论:心肌细胞H2O2损伤模型可作为一些与氧自由基密切相关的心血管疾病(尤其是心肌缺血/再灌注损伤)的病理模型:Ber对H2O2致心肌细胞损伤有保护作用,其机理可能与其减少膜脂质过氧化物生成有关。 相似文献
2.
目的:探讨甲基莲心碱(neferine)对氧化损伤的大鼠乳鼠心肌细胞的保护作用。方法:分离培养SD乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞过氧化损伤模型,将细胞分为7组,即空白对照组(control)、溶剂对照组(DMSO)、氧化损伤组(H2O2)、氧化损伤加入槲皮素对照组(quercetin+H2O2)、氧化损伤加入莲心碱低、中、高浓度组(甲基莲心碱+H2O2、甲基莲心碱-M+H2O2、甲基莲心碱-H+H2O2)。将300μmol/LH2O2作用于加入槲皮素及不同浓度甲基莲心碱预培2 h的心肌细胞,继续培养24h,以细胞毒四唑盐(MTT)比色试验,乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、丙二醛(MDA)、流式细胞凋亡率、Caspase酶活性为检测指标。结果:甲基莲心碱呈剂量依赖性降低H2O2对心肌细胞活力的影响,降低MDA、LDH量,增加细胞GSH-px活性,并显著抑制Caspase-3和9活性,减少细胞凋亡数量,各指标差异具有统计学意义(P0.01)。结论:甲基莲心碱可保护和修复过氧化氢诱导的心肌细胞的损伤,其作用可能是通过抗氧化、增加细胞GSH-px活性,进而抑制Caspase-3和9活性,减少细胞凋亡。 相似文献
3.
目的研究熊果酸(Ursoic acid,UA)对过氧化氢(H2O2)诱导的H9C2 大鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护
作用及对细胞自噬的调节作用。方法以200 μmol·L-1 H2O2 诱导24 h 建立H9C2 心肌细胞氧化应激损伤模
型。将H9C2 细胞随机分为6 组:正常组、溶剂组、模型组及熊果酸高、中、低剂量(10、5、2.5 μmol·L-1)
组。采用CCK-8 法检测细胞存活率;EdU 法检测细胞增殖能力;TBA 法检测丙二醛(MDA)脂质氧化水平;
WST-8 法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western Blot 法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ比值及p62 的表达水
平。结果与正常组比较,模型组细胞的存活率及EdU 阳性细胞(红色荧光)百分比均明显降低(P<0.05);细
胞内MDA 脂质氧化水平明显升高(P<0.05),SOD 活性明显降低(P<0.05);LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达比值明显上调
(P<0.05),p62 蛋白表达明显下调(P<0.05)。与模型组比较,熊果酸高、中、低剂量均能明显提高H9C2 的
细胞存活率及EdU 阳性细胞百分比(P<0.05);降低MDA 水平(P<0.05),提高SOD 活性(P<0.05);上调
LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达比值(P<0.05),下调p62 蛋白表达水平(P<0.05)。结论熊果酸对H2O2 诱导的H9C2 大
鼠心肌细胞氧化应激损伤具有明显保护作用,可能与其促进细胞自噬有关。 相似文献
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目的:探讨山楂中有机酸对H_2O_2诱导H9C2心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法:将对数期生长的H9C2心肌细胞随机分为6组:空白对照组、模型组、NAC阳性对照组和山楂有机酸(浓度分别为6.25、25、100μg/m L)组。心肌细胞在100μg/m L H_2O_2作用2 h后,采用MTT法检测细胞增殖,利用试剂盒测定细胞外液LDH漏出量和GSH-Px活性及细胞内SOD、MDA水平。对心肌细胞进行HE染色,用光学显微镜观察细胞形态变化。结果:与模型组比较,山楂有机酸可促进H9C2心肌细胞增殖,使LDH漏出量和MDA含量显著降低,SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05~P<0.001),并能明显抑制H_2O_2引起的心肌细胞形态改变。结论:山楂有机酸对H_2O_2诱导的H9C2心肌细胞损伤具有保护作用,作用机制可能和有效地改善细胞内抗氧化酶的活性,抑制氧化应激损伤有关。 相似文献
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目的:基于细胞水平研究小檗碱(berberine,Ber)对阿霉素(doxorubicin,DOX)所致心肌损伤的保护作用并探讨其抗氧化机制。方法:大鼠心肌细胞H9c2给药组分为:空白组,2μmol·L~(-1)DOX组,0.1μmol·L~(-1)Ber组,1μmol·L~(-1)Ber组,10μmol·L~(-1)Ber组,2μmol·L~(-1)DOX+0.1μmol·L~(-1)Ber组,2μmol·L~(-1)DOX+1μmol·L~(-1)Ber组,2μmol·L~(-1)DOX+10μmol·L~(-1)Ber组。各组给药不同时间后测定细胞体积及蛋白含量,RT-PCR法测定细胞心钠素(ANP),脑钠素(BNP)表达水平。以半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性为指标评价心肌细胞凋亡水平。DCFH荧光探针法测定细胞ROS水平,同时测定细胞内丙二醛(MDA)生成量,评价心肌细胞氧化损伤水平。结果:与空白组比较,各给药组心肌细胞体积增大,细胞内蛋白含量增加,ANP,BNP的mRNA水平上调,细胞内Caspase-3活性增强,导致细胞凋亡,降低细胞内ROS水平,均具有明显的统计学差异(P0.01)。结论:小檗碱通过抗氧化作用降低阿霉素诱导的心肌细胞损伤。小檗碱与阿霉素合用后,浓度依赖的抑制阿霉素诱导的心肌肥大,并有效降低细胞内ROS水平,清除脂质过氧化物,逆转阿霉素诱导的心肌细胞凋亡。 相似文献
9.
目的:观察冠心平对过氧化氢(H2O2)所致乳鼠培养心肌细胞损伤的保护作用。方法:原代培养的新生SD乳大鼠,随机分为正常组、模型组、维拉帕米组、和冠心平3个剂量组。用比色法观察乳鼠心肌细胞培养液的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并用光镜观察心肌细胞形态学改变。结果:损伤组乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK-MB、CK和MDA含量非常显著增高,SOD活性非常显著降低(与对照组相比,P〈0.01),心肌细胞损伤严重;冠心平保护组与H2O2损伤组相比,LDH、CK-MB、CK和MDA明显降低,SOD活性显著升高(P〈0.01,P〈0.05),心肌细胞形态学变化减轻。结论:冠心平对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化损伤有关。 相似文献
10.
盐酸小檗碱精制工艺研究 总被引:1,自引:0,他引:1
盐酸小檗碱是从中药黄连、黄柏或三颗针中提取的单体生物碱小檗碱的盐酸盐,为黄色小针状结晶,加热至220℃左右分解,生成红棕色的小檗红碱,继续加热至285℃左右完全熔融.在冷水中溶解度小,较易溶于沸水,几不溶于乙醇[1]. 相似文献
11.
盐酸小檗碱诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的:探讨小檗碱诱导人胃癌细胞株MGC-803的细胞凋亡。方法:用4μg/ml盐酸小檗碱在体外作用于人胃癌MGC-803细胞48小时后进行吖橙染色、荧光照相,同时用原位末端标记,检测给药48小时后MGC-803细胞的凋亡情况。结果:荧光照相发现MGC-803细胞呈典型的凋亡细胞形态,细胞核和细胞质内可见致密浓染的黄绿色染色,甚至可见黄绿色碎片;而原位末端标记法(in situ end-labelling ,ISEL)检测结果显示盐酸小檗碱组细胞凋亡指数显高于空白对照组(P<0.05)。结论:盐酸小檗碱诱导了人胃癌MGC-803细胞的凋亡。 相似文献
12.
目的:观察红花水提物对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞H2O2损伤的保护作用及电子自旋共振(ESR)波谱的影响。方法:建立心肌细胞H2O2损伤模型,实验分5组,空白对照组,模型对照组:H2O2(1 mmol.L-1)孵育1 h;红花水提物500,100,20 mg.L-1剂量组:分别给予不同浓度的红花水提物,预处理24 h,然后换为H2O2(1 mmol.L-1)孵育1 h。实验结束后分别收集细胞上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)和黄嘌呤氧化酶(XOD)活性,用自旋捕集技术结合电子自旋共振波谱技术(Electron Spin Res-onance,简称ESR)检测各组细胞悬液中氧自由基信号的强弱。结果:红花水提物各剂量组能够明显提高H2O2损伤后的心肌细胞的搏动频率,使细胞存活率提高,减少心肌细胞LDH的释放,降低培养液中MDA和XOD的含量,同时提高SOD,NO和GSH-Px的活性,使细胞悬液中的ESR氧自由基信号明显减弱。结论:红花水提物对体外培养乳鼠心肌细胞具有保护作用,其机制与其减少活性氧产生、增强氧自由基的清除、增强内源性抗氧化酶的活性有关。 相似文献
13.
《中药药理与临床》2016,(1):90-95
目的:研究地黄多糖(rehmannia polysaccharide)对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究。方法:无菌环境下分离并培养SD大鼠乳鼠心肌细胞72h后随机分为:空白对照组、H_2O_2干预组、地黄多糖(10、20和40μg/ml)+H_2O_2干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/ml)+H_2O_2干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。各组细胞经药物干预6h后,通过光学纤维镜观察细胞形态并采用MTT法检测细胞存活率;检测培养液中心肌酶:谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;测定细胞中抗氧化酶:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫(ELISA)法测定培养液中炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)含量水平;通过Flow Cytometry检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过RT-PCR检测细胞中AKT mRNA、bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果:较H_2O_2干预组,地黄多糖(20、40μg/ml)+H_2O_2干预组乳鼠心肌细胞形态明显好转,细胞存活率显著升高,培养液中AST、CPK、LDH活性显著降低,细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,培养液中TNF-α、IL-1、IL-6含量显著降低,细胞凋亡状况明显改善、凋亡率显著降低,bcl-2 mRNA表达显著上调且Bax mRNA表达显著下调、bcl-2/Bax表达比值显著升高,其中地黄多糖40μg/ml+H_2O_2干预组AKT mRNA表达显著上调。结论:地黄多糖能够有效改善H_2O_2诱导损伤的乳鼠心肌细胞生存状态、提高细胞存活率、降低细胞凋亡率,提示地黄多糖对H_2O_2诱导损伤的乳鼠心肌细胞具有保护作用;其作用机制可能与地黄多糖能够有效改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤,调节凋亡相关基因表达,抑制炎症反应相关。 相似文献
14.
目的:研究盐酸石蒜碱(lycorine hydrochloride)对脂肪酸诱导H9c2细胞炎性损伤的保护作用及机制。方法:脂肪酸(100μmol/L)诱导H9c2细胞炎性损伤,采用CCK-8法筛选盐酸石蒜碱最佳给药浓度;蛋白免疫印迹法检测TLR4、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达;荧光显微镜及流式细胞术检测H9c2细胞内活性氧(ROS)产生水平。结果:CCK-8筛选出盐酸石蒜碱的最佳给药浓度为5、10μmol/L。与正常对照组比较,模型组TLR4蛋白表达及p-PI3K/PI3K、ROS水平显著升高,p-Akt/Akt显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,盐酸石蒜碱组TLR4蛋白表达及p-PI3K/PI3K、p-mTOR/mTOR、ROS水平显著降低,p-Akt/Akt水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:盐酸石蒜碱对脂肪酸诱导H9c2细胞炎性损伤具有保护作用,其机制可能与抑制TLR4、p-PI3K、p-mTOR蛋白表达,促进Akt蛋白磷酸化,抑制炎性损伤H9c2细胞内ROS的产生有关。 相似文献
15.
目的:探讨甲基莲心碱(neferine)对氧化损伤的大鼠乳鼠心肌细胞的保护作用。方法:分离培养sD乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞过氧化损伤模型,将细胞分为7组,即空白对照组(contr01)、溶剂对照组(DMSO)、氧化损伤组(H202)、氧化损伤加入槲皮素对照组(quercetin+H202)、氧化损伤加入莲心碱低、中、高浓度组(甲基莲心碱+H202、甲基莲心碱一M+H202、甲基莲心碱一H+H202)。将3001xmol/LH202作用于加入槲皮素及不同浓度甲基莲心碱预培2h的心肌细胞,继续培养24h,以细胞毒四唑盐(MTr)比色试验,乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—px)、丙二醛(MDA)、流式细胞凋亡率、Caspase酶活性为检测指标。结果:甲基莲心碱呈剂量依赖性降低H202对心肌细胞活力的影响,降低MDA、LDH量,增加细胞GSH—px活性,并显著抑制Caspase一3和9活性,减少细胞凋亡数量,各指标差异具有统计学意义(P〈0.01)。结论:甲基莲心碱可保护和修复过氧化氢诱导的心肌细胞的损伤,其作用可能是通过抗氧化、增加细胞GSH—px活性,进而抑制Caspase一3和9活性,减少细胞凋亡。 相似文献
16.
银杏叶总提取物对H2O2诱发的心肌细胞损伤的保护作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究银杏叶总提取物(GBE)对H2O2诱发的心肌细胞损伤的保护作用。方法采用胰酶消化法获取大鼠乳鼠心肌细胞,用H2O2损伤心肌细胞,制备心肌缺血再灌注损伤实验模型,实验组加入GBE使其终质量浓度分别为50、100、150 mg/L,阳性对照组加入异博定,用紫外分光光度法、硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法分别测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性;测定线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素C氧化酶(CCO)比活力;透射电镜观察细胞的超微结构。结果与对照组相比模型组LDH活性和MDA水平均明显升高(P<0.05、0.001),SOD则明显降低(P<0.01),而GBE各组能减少LDH和MDA的产生呈剂量依赖关系;SDH和CCO比活力在H2O2组明显下降(P<0.001),GBE组改变不明显;150 mg/L GBE对细胞线粒体有明显的保护作用。结论银杏叶提取物对H2O2诱发的心肌细胞损伤有显著的保护作用,其机制可能与维持细胞中线粒体的能量代谢有关。 相似文献
17.
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目的 观察联合应用盐酸小檗碱(黄连素,berberin hydroehloride,Ber)对心脏移植受者环孢素A(cyclosporine A,CsA)血浓度的影响.方法 观察22例服用CsA心脏移植受者联合服用Ber后CsA全血浓度,肝、肾功能和血脂变化.结果 合用Ber后CsA全血稳态C0和C2浓度与合用前比较明显增加(P<0.01),平均浓度分别增加26%和18%;21例服用CsA剂量减少25~100 mg/d,Ber与CsA合用对受者的肝、肾功能及血脂无明显影响(P>0.05).结论 合用Ber能升高心脏移植受者CsA血浓度,减少CsA服用剂量,节省费用,且无明显不良反应. 相似文献
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盐酸小檗碱对大鼠肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用 总被引:2,自引:2,他引:0
目的:观察盐酸小檗碱(berberine,BBR)对缺血再灌注大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)活性的影响。方法:应用化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)在NRK-52E细胞建立化学性缺氧再给氧损伤模型,模拟在体的缺血再灌注模型。以不同浓度(1×10-6,1×10-5,1×10-4 mol.L-1)的BBR处理NRK-52E细胞。应用四甲基偶氮唑法(MTT)检测BBR对各组细胞活性的影响;检测各组细胞上清液中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;Hoechst33258染色观察各组凋亡细胞的形态学变化;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果:MTT结果显示1×10-4 mol.L-1 BBR对细胞毒性作用明显,而1×10-6,1×10-5 mol.L-1BBR明显提高缺氧再给氧组细胞存活率,尤以1×10-5 mol.L-1为高;Hoechst33258显示正常组基本无凋亡细胞,模型组出现核大深染的凋亡细胞,而BBR(1×10-5 mol.L-1)预处理组凋亡细胞明显减少;与正常对照组相比,缺氧再给氧组细胞上清液中MDA含量明显升高(P<0.05),SOD活力显著降低(P<0.05)。而用BBR预处理后缺氧再给氧组的MDA显著低于用药前(P<0.05),SOD则高于缺氧再给氧组(P<0.05),上述作用在BBR浓度为1×10-6~1×10-5 mol.L-1呈浓度依赖性。流式细胞仪结果显示1×10-5,1×10-6 mol.L-1 BBR预处理后缺氧再给氧各组细胞凋亡率分别为11.1%,32.2%与用药前56.2%相比较有显著性差异(P<0.05)。结论:BBR对缺血再灌注的肾小管上皮细胞具有保护作用,尤以1×10-5 mol.L-1作用最为明显。 相似文献
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目的:研究不同浓度盐酸小檗碱对人宫颈癌Hela细胞转移侵袭的影响,探讨其抗癌机制。方法:将不同浓度的盐酸小檗碱作用于人宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法检测细胞体外增殖的抑制作用;应用Transwell小室进行人工重组基底膜侵袭和运动实验,观察盐酸小檗碱对Hela细胞侵袭和转移的影响;采用免疫组化SABC法检测Hela细胞中MMP-9、NF-κBp65的表达。结果:MTT比色法表明,盐酸小檗碱能抑制宫颈癌Hela细胞的体外增殖(P0.05),并具有剂量、时间依赖性(P0.05),同时细胞侵袭和迁移能力明显降低;免疫组化SABC法结果显示,盐酸小檗碱能引起细胞内MMP-9、NF-κBp65表达下调,与对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。结论:盐酸小檗碱对宫颈癌Hela细胞体外增殖具有明显的抑制作用;盐酸小檗碱能够减弱人宫颈癌细胞Hela的侵袭和转移,其作用机制可能与降低MMP-9、NF-κBp65的表达有关。 相似文献