广西2009～2012年集中式中央空调冷却塔水嗜肺军团菌调查

目的 了解广西公共场所集中式中央空调冷却塔水嗜肺军团菌污染状况,为科学防制提供依据.方法 采集2009～2012年广西14个地级市公共场所301份集中式中央空调冷却塔水进行嗜肺军团菌培养及鉴定.结果 共检出嗜肺军团菌95株,阳性率31.56％(95/301),LP1型占54.74％ (52/95),LP2-15型占45.26％(43/95).中央空调系统使用单位(酒店、宾馆、超市和医院)该菌阳性率40.29％ (83/206).45株嗜肺军团菌1型经脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,获得了41种基因型别,带型比较分散,未发现绝对优势带型.结论 广西公共场所水体嗜肺军团菌污染普遍存在且较严重,对人群健康构成潜在威胁,需要引起重视,以防军团菌病的暴发流行.     

深圳市嗜肺军团菌血清Ⅰ型菌株PFGE分型指纹图谱研究

目的研究深圳市公共场所中央空调冷却塔水中分离的嗜肺军团菌血清Ⅰ型（LpⅠ）的基因特征。方法应用脉冲场凝胶电泳（Pulsed-Field Gel Electrophoresis，PFGE）技术对30株LpⅠ型军团菌进行电泳，并经Bionumerics软件进行聚类分析。结果30株菌可分为28种PFGE型。不同地区间分离出部分菌株，经PFGE分型，相似性系数为100％，表明深圳市公共场所中央空调冷却塔水间可能存在交叉污染；同一地区，菌株间相似性系数存在差异，没有优势菌株；同一采样地点，存在两种以上PFGE型别。结论深圳市公共场所冷却塔水中分离的LpⅠ型菌株基因宅多样性．     

公共场所中央空调冷却塔水中分离出嗜肺军团菌的调查

目的调查宁夏公共场所中央空调冷却塔水中嗜肺军团菌污染状况。方法采集宁夏21家宾馆、饭店的中央空调冷却塔水21份,用GVPC、BCYE-α等培养基进行嗜肺军团菌的分离,用诊断血清进行分型,并以PCR法加以确证。结果21份冷却水中有7份分离到嗜肺军团菌,检出率为33.33%,菌型分布为：LP1 5株、LP9一株、LP10一株,上述菌株PCR检测mip基因结果均为阳性。结论宁夏公共场所中央空调冷却塔水中存在着嗜肺军团菌,污染较为严重,都有可能对人群造成危害,必须引起重视。     

江门市公共场所淋浴水中嗜肺军团菌污染分子溯源研究

目的 通过分析江门市公共场所淋浴水中分离的嗜肺军团菌的基因特征,初步建立嗜肺军团菌分子分型数据库,为卫生行政部门实施监督提供科学依据。方法 对分离出来的嗜肺军团菌进行血清分型,并使用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型,经BioNumerics软件进行聚类分析,按照相似系数>85%的不同菌株归为同一聚类,获得克隆系。结果 66株嗜肺军团菌有6种血清群,其中Ⅰ型有37株占56.06%,为优势菌型。嗜肺军团菌有38种PFGE型别,带型的相似系数为18.20%～100.00%,菌株之间PFGE带型差异较大。相同的PFGE带型≥3条有6种型别,分别为P8、P9、P11、P21、P25和P26,无优势带型。最大的克隆系是3和4。结论 从公共场所淋浴水分离的嗜肺军团菌呈基因多样性,也具有一定的遗传稳定性。     

广东省中山市2018—2019年沙门菌血清型分布、耐药性及分子分型

目的 了解中山市沙门菌的血清型分布、分子分型特征以及对抗生素的耐药情况。方法 对2018—2019年中山市哨点医院以及食物中毒事件采集检出的沙门菌进行血清型分型,采用微量肉汤稀释法（MIC）对15种药物进行药物敏感试验,应用脉冲场凝胶电泳法（pulse-field gel electrophoresis, PFGE）对3种优势血清型沙门菌进行分子分型。结果 509株沙门菌共鉴定出44种血清型,优势血清型为鼠伤寒沙门菌单相变种（173/509,34.0%）、鼠伤寒沙门菌（107/509,21.0%）、肠炎沙门菌（93/509,18.3%）和斯坦利沙门菌（21/509,4.1%）。179株沙门菌中耐药菌株占93.9%（168/179）,多重耐药菌株占85.5%（153/179）。共产生82种耐药谱,最常见的耐药谱为AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-Sul和AMP-TET-CHL-SXT-Sul。暂未检出对亚胺培南耐药的菌株,对其余14种试验药物均存在耐药现象,其中对氨苄西林、四环素、磺胺异噁唑、氯霉素、复方新诺明耐药率均超过60%。耐受10种及以上抗生素的菌株有22株,占12.3%（22/179）。42株鼠伤寒沙门菌单相变种分出40个PFGE带型,各型别相似度为52.2%~100.0%;32株鼠伤寒沙门菌分出24个PFGE带型,各型别相似度为48.9%~100.0%;21株肠炎沙门菌分出9个PFGE带型,各型别相似度为55.5%~100.0%。结论 中山市沙门菌血清型主要为鼠伤寒沙门菌单相变种、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌,多重耐药现象严重,PFGE分子分型结果呈多样性。     

深圳市外环境水源军团菌污染调查

目的了解深圳市外环境中不同水体军团菌污染和血清型别分布状况。方法利用传统的检验方法与实时荧光PCR技术相结合,对深圳市环境中243份水源进行军团菌的检测,用传统细菌分离培养法分离鉴定,用实时荧光PCR法加以验证。结果共检测环境水源243份,52份水样检出军团菌阳性,其中49份水样为嗜肺军团菌,3份水样为非嗜肺军团菌,军团菌和嗜肺军团菌总检出率分别为21.4%（52/243）和20.2%（49/243）;空调系统嗜肺军团菌检出率为25%（29/116）,宾馆淋浴热水嗜肺军团菌检出率为23.3%（20/86）,二次供水、游泳池水、景观水池水均未检出军团菌。血清型以LP1和LP6为优势菌型,占检出菌的65.3%（32/49）和22.5%（11/49）,LP3、LP5、LP6、LP7、LP10均检出1株。结论深圳市环境水源中军团菌污染主要分布于空调冷却塔水和宾馆淋浴热水中,嗜肺军团菌血清型以LP1、LP6为主,相关部门需引起足够重视,防止军团菌病发生。     

集中空调系统水中嗜肺军团菌脉冲场凝胶电泳指纹图谱分析

目的研究某市2014年公共场所集中空调系统水中嗜肺军团菌的分子指纹图谱,初步建立某市嗜肺军团菌的脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型数据库。方法对某市2014年公共场所集中空调系统水分离的34株嗜肺军团菌,采用PFGE技术进行电泳,并经Bio Numerics 6.6软件进行聚类分析。结果34株嗜肺军团菌的PFGE图谱共分为24种PFGE带型,不同地区嗜肺军团菌存在同样的酶切图谱,同一采样场所不同冷却塔检出菌株的PFGE带型相同,聚类分析结果显示菌株间相似性系数为23.80%~100.00%。结论某市2014年公共场所集中空调系统水嗜肺军团菌菌株基因型散在分布,呈多态性和复杂性,同时具有克隆化特征。     

深圳市中央空调冷却塔水军团菌AFLP分型研究

目的 了解深圳市中央空调冷却塔水中军团菌的多态性，分析优势种群和菌型分布，为建立军团菌分子型别库提供资料。方法 运用The European Working Group for Legionella Infections（E．W．G．L．I）组织制定的扩增片断长度多态性分型（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）方法，对深圳市中央空调冷却塔水中军团菌进行分子分型。结果 按照血清分型方法，将冷却塔水中军团菌分为Lp1、Lp2-14以及非嗜肺型，运用AFLP技术对50株军团菌菌株分型，结果将22株Lpl血清型分为7种AFLP型，分别记为AFLP1—7，以AFLP2型与AFLP5型为主要型别；20株Lp2-14血清型分为7种AFLP型，分别记为AFLPⅠ—AFLPⅦ，以AFLPⅠ、Ⅱ为主要型别；9株非嗜肺军团菌血清型分为5种AFLP图谱。结论 AFLP分型技术能初步分析深圳市军团菌优势种群，为对军团菌监测及致病性军团菌型别的分析提供基本资料。     

江苏省张家港市2017年人源沙门菌血清型特征及分子分型

目的 分析2017年张家港检出的92株人源沙门菌的血清学特征,用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术对优势血清群进行分子分型研究,为该地区沙门菌菌型库积累数据。方法 收集和提取2017年张家港地区人源沙门菌患者血清学特征,对优势群B群沙门菌进行PFGE分子分型检测,利用PulseNet China网络获得相关性指纹图谱并进行聚类分析。结果 92株沙门菌分离株分布7个血清群和16个血清型,以B群为主（33.70％）,30株B群沙门菌PFGE指纹图谱可分为26个基因型（相似值100% 为同一PFGE 型别）,19个克隆系（相似度在0.85~1.00的为同一PFGE的克隆系）。其中9株德尔卑沙门菌可分为5个克隆系7个基因型,7个基因型相似度60.92％~100％;7株阿贡那沙门菌PFGE指纹图谱5个克隆系6个基因型,6个基因型相似度0~100%;6株鼠伤寒沙门菌可分为3个克隆系5个基因型,5个基因型相似度48.51％~100％。结论 张家港市人源沙门菌血清型多样化分布,B群沙门菌为优势血清群。沙门菌PFGE带型较多,基因多态性较高,同一血清型可获得不同PFGE指纹图谱。其中德尔卑沙门菌亲缘关系近,鼠伤寒部分菌株存在较近的亲缘关系,阿贡那沙门菌各克隆系存在明显差异,亲缘关系较远。     

广东省中山市2017年沙门菌耐药菌谱及分子分型分析

目的 了解中山市2017年沙门菌的耐药特征及分子分型,为临床合理用药和食源性疾病的溯源提供科学依据。方法 对中山市2017年食源性疾病监测（3个哨点医院）的沙门菌分离株采用微量肉汤稀释法进行14种抗生素药敏试验,运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术对肠炎沙门菌进行分子分型。 结果 中山市2017年食源性疾病监测检出的285株沙门菌对14种抗生素敏感性试验结果显示,237株（占83.16％）沙门菌对13种抗生素呈现不同程度的耐药性,未发现对亚胺培南（IPM）耐药菌株。耐药抗生素最多的种类达到11种,耐药率较高（40 %以上）的抗生素为氨苄西林（AMP）、四环素（TET）、氨苄西林/舒巴坦（SAM）、氯霉素（CHL）;共有87类耐药谱型,其中多重耐药谱型75类（86.21%）,多重耐药菌株数为176株（61.75%）。25株肠炎沙门菌的PFGE分为5种带型,相似度为63.9%~100.0%。结论 中山市2017年食源性疾病监测显示沙门菌耐药状况较为严重,呈多重性和多态性,应采取综合措施控制耐药性;肠炎沙门菌PFGE的相似度较高,存在优势带型。     

沙门菌携带者分离株血清学及PFGE分型研究

目的建立在健康携带者分离的沙门菌的血清型及PFGE分子型别图谱库,探讨其多态相关性关系。方法将预防性健康体检分离获得的21株沙门菌鉴定培养,进行血清分型;将确定后的菌株用限制性内切酶Xba I消化酶切其基因组DNA,在脉冲场凝胶电泳仪进行DNA电泳,所得的分子型别图谱用Bionumerics5.1软件建立图谱数据库,并进行聚类分析。结果21株沙门菌分属于O：4（B）、O：9（D1）和O：3,10（E1）3个菌群,8种血清型;以德尔卑沙门菌为主,共7株占所有分离株的占33.3%,其次为阿贡纳沙门菌19.1%（4/21）,鼠伤寒沙门菌14.3%（3/21）。经比对分析,18株沙门菌分为15个PFGE型别,菌株间的相似值在53.9%～100%之间,同一血清型别的沙门菌可对应多个PFGE型别。结论沙门菌的PFGE型别呈现多样性,脉冲场凝胶电泳对从业人员体检沙门菌有较高的分型能力,可为沙门菌的日常监测和相关疫情的处理提供重要的技术支撑。     

An Investigation on the Molecular Characteristics and Intracellular Growth Ability among Environmental and Clinical Isolates of Legionella pneumophila in Sichuan Province,China

Objective To investigate the molecular characteristics and intracellular growth ability of Legionella pneumophila(L. pneumophila) strains from 1989 to 2016 in Sichuan Province, China. Methods Seventy-nine isolates of L. pneumophila were collected from environmental and clinical sources, including cooling towers, hot springs, bath water, fountains, and patients, and identified with 16 S rRNA gene analysis and serum agglutination assay. The isolates were then typed by Sequence-Based Typing(SBT), and Genotyping of forty-two LP1 strains were analyzed by means of multiple-locus VNTR analysis with 8 loci(MLVA-8). All strains were further analyzed for two virulence genes: Legionella vir homologue(lvh) and repeats in structural toxin(rtx A). The intracellular growth ability of 33 selected isolates was determined by examining their interaction with J774 cells. Results All isolates were identified to L. pneumophila including 11 serogroups, among which the main serogroup were LP1, accounting for 54.43%. Thirty-three different sequence types(STs) from five main clonal groups and five singletons were identified, along with 8 different MLVA patterns. Both the lvh and rtx A loci were found in all 79 strains. Thirty isolates showed high intracellular growth ability in J774 cells. Conclusion L. pneumophila is a potential threat to public health, and effective control and prevention strategies are urgently needed.     

街道饮食及服务行业从业人员携带沙门菌的病原学特征研究

目的分析龙岗街道饮食及服务行业从业人员健康体检分离的沙门菌的耐药性及分子分型。方法对分离到的11株沙门菌进行血清学分型鉴定,并采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和改良K．B法分别进行分子分型和药敏试验。结果11株沙门菌鉴定出B群5株,E1群6株。对四环素的耐药率最高（63．64％）,其次为氨苄西林（54．55％）、链霉素（54．55％）,5株菌有多重耐药的现象（45．5％）。PFGE分子分型菌株之间的相似度在51．8％。96％之间．同一血清型的沙门菌相互间的相似度均低于85％。结论从业人员携带的沙门菌耐药比较严重,PFGE分型、血清型与耐药谱无直接关联。     

儿童与成人呼吸道病原体九联检结果对比分析

目的了解呼吸道感染儿童与成人非细菌性感染病原体情况,为临床合理选用抗微生物治疗药物提供依据。方法采集静脉血4.0 ml,离心分离血清,采用间接免疫荧光法（IFA）检查嗜肺军团菌血清1型（LP）;肺炎支原体（MP）、Q热立克次体（CB）;肺炎衣原体（CP）;腺病毒（ADV）;呼吸道合胞病毒（RSV）;甲型流感病毒（Influenza A virus）;乙型流感病毒（Influenza B virus）;副流感病毒1、2、3型（HPIVs1、2、3）病原体Ig M抗体,分析该院2013年1~12月1 650例儿童患者与2 656例成人患者呼吸道感染病原体Ig M抗体检出情况。结果 1 650例儿童患者Ig M抗体阳性775份,其Ig M抗体阳性检出率为46.97%,2 656例成人患者Ig M抗体阳性835份,其Ig M抗体阳性检出率为31.44%;儿童患者同时检出两种Ig M抗体296份,三种54份,两种及以上病原体抗体检出率45.16%。成人患者同时检出两种Ig M抗体162份,三种16份,两种及以上病原体抗体检出率21.32%,儿童与成人均未检出三种以上Ig M抗体;儿童乙型流感病毒Ig M抗体占第一位,成人肺炎支原体Ig M抗体占第一位,嗜肺军团菌血清1型、腺病毒、甲型流感病毒Ig M抗体以成人为主,儿童检出率低。结论呼吸道病原体九联检结果儿童与成人有差异,临床应根据检测结果合理选用抗微生物治疗药物。