乳腺癌血管内皮生长因子表达与血管生成及预后相关研究

研究表明,血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎ－ｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）在肿瘤的间质形成和新生血管形成中起关键作用。本研究采用免疫组织化学染色方法,检测４７例原发性乳腺癌中ＶＥＧＦ表达与微血管密度（ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌ ｄｅｎｓｉｔｙ, ＭＶＤ）,探讨乳腺癌ＶＥＧＦ表达强度与肿瘤血管生成、预后的相关性。１材料与方法１．１临床资料 收集我院乳腺癌患者的临床资料及病理标本。随机选出４７例。年龄３８～６６岁（平均５２岁）。术前均未接受任何治疗。切除标本以１０％甲醛固定…     

双调蛋白反义重组腺病毒治疗乳腺癌的实验研究

目的:在人乳腺癌模型上探讨双调蛋白(AR)反义重组腺病毒的治疗作用.方法:人AR的cDNA被反向亚克隆入E1/E3缺失的5型腺病毒载体中而得到AdA4,AR反义mRNA的表达由CMV启动子控制.进而研究其对恶性转化人乳腺上皮细胞株NS2T2A1体外、体内增殖的作用.结果:乳腺癌NS2T2A1细胞被AR反义重组腺病毒感染后,AR蛋白质的表达被强烈地抑制.以MOI为200和400pfu/细胞的AdA4感染4天后,细胞体外增殖分别被显著地抑制至空病毒对照组的69.3%和49.8%(P＜0.02,P＜0.005).3次肿瘤内注射109pfu AdA4病毒,至第35天肿瘤体积只为对照组的40.6%(P＜0.005).结论:在此乳腺癌模型上,AR反义重组腺病毒可有效地用于针对AR的反义治疗策略,抑制肿瘤细胞的体外增殖及体内肿瘤生长.     

VEGF反义RNA 抑制裸鼠体内食管癌细胞生长的实验研究

 目的 探讨VEGF反义RNA对食管癌细胞在裸鼠体内生长的影响。方法 观察转染VEGF反义RNA的食管癌细胞TE-1在裸鼠体内成瘤性；应用免疫组化法、RT—PCR法检测移植瘤组织中VEGF蛋白及mRNA表达和MVD；用流式细胞仪和透射电镜检测细胞凋亡情况。结果 转染VEGF反义RNA的TE-1细胞在裸鼠体内肿瘤形成的潜伏期明显延长，所形成肿瘤的重量和体积小于对照组及空载体组。肿瘤组织中VEGF蛋白和mRNA的表达降低，MVD降低；肿瘤细胞发生明显的凋亡形态学改变；G0／G1期细胞明显增多，S期细胞明显减少，细胞增殖能力降低。结论 VEGF反义RNA能抑制裸鼠体内TE-1细胞的生长，减少肿瘤内血管的生成，增加细胞凋亡；为食管癌的基因治疗提供了一定的实验依据。     

槲皮素对实验性乳腺癌中血管生成抑制作用的研究

目的：探讨槲皮素对实验性乳腺癌中的肿瘤血管生成抑制作用。方法：本实验建立了DMBA诱导的乳腺癌动物模型。79只雌性SD大鼠随机分为四组：A组（DMBA）,B组（DMBA TMA）,C组（DMBA 槲皮素）,D组（空白对照）。喂养持续28周后,进行光镜观察、MVD计数,抗bFGF、VEGF及H-ras的免疫组化分析。结果：1）A组大鼠乳腺肿瘤发生率及癌灶平均直径（75.2%、2.37cm）明显高于B组（40.9%、1.82cm),C组（45.5%、1.71cm)及D组（0%、0cm),其差异均有显著意义（P＜0.05),B组和C组差异显著意义（P＞0.05);2）MVD、VEGF、bFGF及H-ras免疫组化分析显示：A组与B组和C组差异有显著意义（P＜0.05),B组和C组无显著性差异（P＞0.05)。结论：槲皮素有降低DMBA诱导的SD大鼠乳腺癌发生率及抑制其生长的作用,其机制可能与以下因素有关：1）抑制ras基因活性,从而抑制肿瘤细胞的增殖及血管生成;2）抑制VEGF,bFGF等血管生长因子的活性,肿瘤血管生成过程受阻,致乳腺癌组织内MVD降低。     

乳腺癌血管内皮生长因子的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在乳腺癌中的表达及其与血管生成，肿瘤转移等参数之间的关系。方法对101例浸润性乳腺癌组织的VEGF表达进行了免疫组化检测。结果正常乳腺组织及良性病变组织均无VEGF表达。乳腺癌VEGF表达与组织分化（P＜0．05），淋巴结转移（P＜0．005），远处转移（P＜0．005）及早期死亡（P＜0．005）密切相关，与乳腺癌组织微血管密度（MVD）亦呈显著相关性（P＜0．05）；与患者年龄，肿瘤大小无关（P＞0．05）。结论VEGF是促进乳腺癌血管生成的主要因素。VEGF阳性的乳腺癌组织分化差，易发生转移，预后不良。     

Avastin对胃癌裸鼠原位移植模型血管生成的影响

背景与目的:血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和肿瘤的生长和转移密切相关,本实验通过VEGF单克隆抗体Avastin联合或不联合氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),对人类胃癌裸鼠原位种植模型的肿瘤生长和转移进行干预治疗,从而探讨Avastin对胃癌生长、转移和血管生成的抑制作用。方法:应用原位移植方法建立裸鼠胃癌转移模型,术后10天将裸鼠随机分为4组:对照组、5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组。经过6周的治疗,对裸鼠原位肿瘤的瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度、凋亡指数以及肝脏转移灶进行检测和分析。结果:和对照组相比,5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组原位移植肿瘤重量明显降低,抑瘤率分别为37.52%,58.76%和98.51%。微血管密度Avastin单药组和联合用药组均比对照组明显减少(8.40±1.26和7.20±1.23vs15.30±1.06),而5-FU组与对照组之间没有显著的差别;Avastin单药组和联合用药组的凋亡指数比对照组明显升高[(11.50±1.58)%和(13.60±1.35)%vs(4.70±1.70)%]。联合应用Avastin和5-FU对肝脏转移灶具有明显的抑制作用,而其他3组的抑制肝转移效果没有明显的差别。结论:抗VEGF抗体Avastin通过抑制肿瘤新生血管的生成而诱导胃癌细胞凋亡,进而显著抑制裸鼠原位肿瘤的生长。联合应用Avastin和5-FU不仅对原位肿瘤的生长抑制最为明显,而且对肝脏转移有显著的抑制作用。因此,联合应用Avastin和传统的细胞毒化疗药物对胃癌的治疗效果更显著。     

VEGF-C反义寡核苷酸抑制人胃癌裸鼠移植瘤淋巴管生成的实验研究

目的:探讨VEGF-C反义寡核苷酸(VEGF-C-ASODN)对人胃癌裸鼠移植瘤淋巴管生成的影响。方法:构建人胃癌裸鼠移植瘤模型,反义组在接种部位皮下注射VEGF-C-ASODN,正义组和对照组分别注射VEGF-C正义寡核苷酸和生理盐水,观察移植瘤生长变化。半定量RT-PCR检测移植瘤VEGF-CmRNA表达,酶组织化学方法(5'-Nase-ALPase)染色行淋巴管计数。结果:反义组移植瘤生长缓慢,体积和重量分别为(387.57±166.29)mm³、(1.4±0.7)g,较正义组和对照组显著下降(P<0.01)。反义组VEGF-CmRNA表达的相对系数为(0.35±0.12),淋巴管计数为(14.37±4.21),较正义组和对照组均显著降低(P<0.01)。结论:VEGF-C-ASODN可抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长及淋巴管的生成。     

乳腺癌组织中P27蛋白和血管内皮生长因子的表达及意义

目的探讨乳腺癌组织中P27蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)的表达意义,及其与乳腺癌病理类型的相关性。方法分析2010年5月至2013年9月接受手术治疗的60例乳腺癌患者(乳腺癌组织)的临床资料和病理标本,另选取30例正常乳腺组织标本作为对照(正常乳腺组织)。比较乳腺癌组织和正常乳腺组织中P27蛋白和VEGF的阳性表达率,以及P27蛋白和VEGF表达水平与病理类型的相关性。结果乳腺癌组织中VEGF的阳性表达率高于正常乳腺组织(P<0.01),而P27蛋白的阳性表达率明显低于正常乳腺组织(P<0.01)。不同病理类型标本中P27蛋白(P=0.76)和VEGF的阳性表达率差异无统计学意义(均P>0.05)。结论乳腺癌组织中VEGF水平显著高于正常乳腺组织,P27蛋白表达水平显著下降,且P27蛋白和VEGF的表达与乳腺癌病理分型无关。     

血管内皮生长因子及其受体双靶向阻断对膀胱癌细胞生长及血管生成的抑制作用

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(KDR)双靶向阻断对人膀胱癌T24细胞和裸鼠膀胱癌移植瘤生长的抑制作用.方法 构建VEGF siRNA和可溶性KDR(sKDR)表达质粒的共转染细胞系,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪测定T24细胞的增殖和凋亡,采用免疫组化法检测裸鼠移植瘤组织中VEGF的表达、瘤间质微血管密度(MVD)和细胞DNA拓扑异构酶(Topo)Ⅱα的表达,采用原位末端标记(TUNEL)法检测裸鼠移植瘤中肿瘤细胞的凋亡.结果 MTT法检测结果显示,VEGF siRNA、sKDR和联合应用组细胞的生存率分别为56.3%±8.3%、42.6%±13.8%和32.5%±4.3%,均明显低于阴性对照组(97.3%±11.6%,P＜0.0001).流式细胞仪分析显示,VEGF siRNA、sKDR和联合应用组在G.期前均出现亚二倍体凋亡峰,凋亡率分别为5.1%±0.9%、4.2%±0.5%和8.8%±0.7%,均高于阴性对照组(0.9%±0.4%,P＜0.05),而且联合应用组的凋亡率还明显高于VEGF siRNA和sKDR组(P＜0.01).体内实验结果显示,VEGF siRNA、sKDR和联合应用组的肿瘤生长均受到不同程度的抑制,联合应用组从16 d开始肿瘤体积即明显小于阴性对照组(P＜0.05),28 d起肿瘤生长几乎处于停滞状态.免疫组化分析显示,联合应用组肿瘤组织中VEGF的表达水平为54.37±5.28,显著低于阴性对照组(141.66±8.59,P＜0.0001);瘤间质MVD仅为8.22±3.79,明显低于阴性对照组(61.76±5.28,P＜0.0001)和sKDR组(19.46±4.16,P=0.0089);瘤细胞增殖指数为1.5%±0.7%,显著低于阴性对照组(11.8%±5.2%,P＜0.0001);而凋亡率达到67.2%±8.5%,明显高于阴性对照组(8.7%±2.7%,P＜0.0001)、VEGF siRNA组(54.3%±4.8%,P=0.0492)和sKDR组(52.3%±6.4%,P=0.0293).结论 VEGF siRNA与sKDR单独应用均可不同程度地抑制肿瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡,但二者联合应用时靶向双位点的治疗效果更为显著.     

重组人血管内皮抑制素治疗人乳腺癌裸鼠模型的实验研究

目的 探讨重组人血管内皮抑制素注射液(恩度,YH-16)对人乳腺癌细胞株MCF-7裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 建立人乳腺癌裸鼠模型,随机分成4组,每组10只,接种人乳腺癌细胞悬液,瘤体达1.0 cm3时,于种植部位皮下注射药物:阴性对照组生理盐水0.2 mg/kg体重,阳性对照组顺铂(DDP)1 ms/ks体重,YH-16组YH-16 20 ms/kg体重,DDP联合YH-16组为DDP1 mg/kg体重和YH-16 20 ms/ks体重,隔日一次,20 d后颈椎脱位处死裸鼠,检测裸鼠体重、肿瘤体积、抑瘤率、血管内皮生长因子(VEGF)、癌细胞凋亡率、肺转移率.结果 DDP联合YH-16组、阳性对照组、YH-16单药组、阴性对照组肿瘤体积分别为(0.686±0.229)、(1.258±0.101)、(1.888±0.215)、(3.366±0.284)cm3;抑瘤率分别为92.1%、57.3%、36.5%、0;肺转移率分别为0、10%、20%、90%;癌细胞凋亡率分别为31.6%±2.7%、28.1%±2.7%、19.4%±2.9%、15.7%±3.2%;RT-PCR检测VEGF表达,吸光度(A)比值均数分别为0.530±0.164、0.759±0.210、1.063±0.295、1.268±0.145,Western blot检测结果为0.260±0.0820、0.348±0.085、0.461±0.099、0.556±0.113,以上各组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 YH-16对人乳腺癌裸鼠肿瘤生长及远处转移均有抑制作用,不良反应小;YH-16联合DDP有协同增效作用.     

端粒酶RNA的反义寡核苷酸抑制裸鼠移植瘤生长的研究

背景与目的许多研究已证明:端粒酶的激活在肺癌的发生、发展中具有重要作用,因而成为肺癌基因治疗的重要靶点之一。本研究旨在探讨针对人端粒酶RNA成分的反义寡核苷酸对裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法应用人肺腺癌细胞株A549细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型,18只荷瘤裸鼠随机分为反义寡核苷酸组(Antisense Oligodeoxynucleotide Group,Group ASODN)、正义寡核苷酸组(Sense Oligodeoxynucleotide Group,Group SODN)和生理盐水对照组(Normal Saline Group,Group NS),每组6只,瘤体内分别注射反义寡核苷酸/阳离子脂质体复合物、正义寡核苷酸/阳离子脂质体复合物和生理盐水,均为每日1次,共14次,观察移植瘤的生长情况。结果反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组的体积抑瘤率分别是43.94%、6.91%,统计学检验有非常显著性差异(t=6.17,P<0.001)。治疗过程中裸鼠对药物耐受良好,无恶心、呕吐等消化道症状,未见皮下出血,治疗结束时各组裸鼠的体重较治疗开始时略有增加。结论瘤体内注射脂质体包封的端粒酶RNA的反义寡核苷酸能够明显抑制裸鼠体内移植瘤的生长。     

Bcl-xl反义寡核苷酸对裸鼠人鼻咽癌移植瘤抑制作用的研究

目的　探讨bcl xl反义寡核苷酸 (ASODN)对裸鼠人鼻咽癌移植瘤生长和基因表达的抑制作用。方法　建立裸鼠人鼻咽癌模型 ,接种肿瘤细胞后 2 4h之内将bcl xlASODN、序列对照寡核苷酸 (ODN)皮下注射进行治疗 ,观察肿瘤大小变化和组织形态学改变 ,并检测药物治疗后肿瘤细胞中bcl xlmRNA和蛋白表达情况。结果　Bcl xlASODN治疗组裸鼠鼻咽癌的生长受到明显抑制 ,抑瘤率为 41.7% ,其对应的bcl xlmRNA和蛋白水平明显降低 ,与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,而序列对照ODN治疗组抑瘤率仅为 19.0 % ,差异无显著性 ,对基因的表达亦无明显影响。结论　Bcl xlASODN对裸鼠鼻咽癌移植瘤的生长具有一定的抑制作用 ,为鼻咽癌的治疗提供新的方法。     

Angiogenesis inhibitorO-(chloroacetyl-carbamoyl) fumagillol (TNP-470) inhibits tumor angiogenesis,growth and spontaneous metastasis of MKL- 4 human breast cancer cells in female athymic nude mice

Accumulated knowledge regarding the important roles played by angiogenesis in solid tumor growth and metastasis has prompted the development of angiogenesis inhibitors for clinical use in cancer therapy. Among these inhibitors,O-(chloroacetyl-carbamoyl)fumagillol (TNP-470) has been reported to have both antitumor and antimetastatic activities in rodent and human tumor models. We recently established a new metastasis model of MKL-4 human breast cancer cells in female nude mice. This cell line is a co-transfectant of the MCF-7 cell line with genes of a potent angiogenic factor, fibroblast growth factor 4, and a genetic marker, bacteriallacZ. In this paper, we describe the inhibitory effects of TNP-470 on tumor angiogenesis, growth and metastasis in this MKL-4 metastasis model. Subcutaneous injection of 10 or 50 mg/kg of TNP-470 every other day for two weeks obviously inhibited the tumor growth and metastasis of MKL-4 cells in female nude mice. The treatment of TNP-470 at both doses significantly reduced the tumor volumes, respectively, to 28% and 14% of that in the control group (P<0.05 in each comparison). The positive rate of metastasis into the axillary lymph nodes was 100% in the control group, whereas it was only 3396 in both of the treatment groups. Distant metastasis into the inguinal lymph nodes, lungs, kidneys and liver also tended to decrease in both of the treatment groups. Immunohisto-chemical analysis using anti-factor VIII antibody revealed that the number of microvessels in both of the treatment groups was significantly less than that in the control group (P<0.01 in each comparison). To the best of our knowledge, this is the first report describing simultaneous demonstration of the antiangiogenic, antitumor and antimetastatic effects of TNP-470 on human breast cancer cells in nude mice. This work was supported in part by a grant from the Ministry of Education, Science and Culture of Japan and by a Research Project Grant (No. 5-3O4) from Kawasaki Medical School     

c-jun基因沉默对放射抗拒鼻咽癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响

目的 探讨c-jun基因沉默对人鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法 用携带shRAN慢病毒载体感染CNE-2R细胞以沉默c-jun基因,构建c-jun-shRNA-CNE-2R细胞组（c-jun-shRNA组）以及阴性对照NC-shRNA-CNE-2R细胞组（NC组）,以CNE-2R细胞为空白对照组,采用Western blot 检测3组细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白的表达水平。构建裸鼠模型,观察3组细胞裸鼠皮下种植瘤生长曲线及体积;采用免疫组化法检测移植瘤组织中VEGF、CD34的表达,并检测组织内微血管密度（microvessel density,MVD）。结果 Western blot 结果显示,c-jun-shRNA组细胞VEGF蛋白表达较NC组及空白对照组明显下调（P<0.05）。裸鼠模型实验中,c-jun-shRNA组移植瘤体积为（720.85±72.10） mm³,质量为（0.42±0.04）g,MVD为11.69±3.30;NC组移植瘤体积为（1 196.81±90.69） mm³,质量为（0.80±0.08）g,MVD为32.56±7.33;空白对照组移植瘤体积为（1 203.76±100.42） mm³,质量为（0.83±0.05）g,MVD为35.45±4.87;c-jun-shRNA组种植瘤体积、质量、MVD较NC组和空白对照组低（P<0.05）。免疫组化检测结果显示,移植瘤组织中VEGF蛋白表达c-jun-shRNA组呈弱阳性,NC组及空白对照组组均呈强阳性。结论 c- jun基因沉默可抑制放射抗拒性鼻咽癌移植瘤生长及血管生成。     

VEGF receptor antisense therapy inhibits angiogenesis and peritoneal dissemination of human gastric cancer in nude mice

The efficacy of a phosphorothioate antisense oligonucleotide (ASO) for KDR/Flk-1 (KDR/Flk-1-ASO), an endothelial cell-specific vascular endothelial growth factor (VEGF) receptor, was investigated on the peritoneal dissemination and angiogenesis of a human gastric cancer cell line in nude mice. Green fluorescent protein (GFP)-transduced NUGC-4 (NUGC-4-GFP) human gastric cancer cells were implanted into the peritoneal cavity of nude mice. KDR/Flk-1-ASO, -SO, or phosphate-buffered saline was administrated from days 7 to 14, 200 microg/mouse, once a day. The mice were sacrificed on day 28. Disseminated peritoneal tumor nodules expressing GFP were visualized by fluorescence microscopy. KDR/Flk-1-ASO significantly decreased the extent of peritoneal dissemination of the tumors. The number of cells undergoing apoptosis was significantly increased in the KDR/Flk-1-ASO-treated tumors. Microvessel density was significantly reduced in the KDR/Flk-1-ASO-treated tumor nodules. The KDR/Flk-1 antisense strategy, therefore, decreases tumor dissemination apparently by inhibiting angiogenesis.     

VEGF-A/VEGF-C反义脱氧寡核苷酸对乳腺癌生长及其脉管生成的影响

背景与目的:肿瘤脉管生成与肿瘤的生长和转移密切相关,血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)可能是最强的促血管生成因子,而VEGF-C是VEGF家族中最强的促淋巴管生成因子,在肿瘤血管生成中与VEGF-A具有协同促进效应.本研究旨在探讨VEGF-A/VEGF-C反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleoude,ASODN)对乳腺癌生长及其脉管生成的影响.方法:将VEGF-A/VEGF-C ASODN注入人乳腺癌裸鼠原位移植癌模型中,观察肿瘤生长;运用RT-PCR法检测肿瘤组织VEGF-A/VEGF-C mRNA表达,免疫组织化学法检测其蛋白表达情况;5'-Nase-ALPase双重酶组织化学染色标记肿瘤微血管和微淋巴管,并计算肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)和微淋巴管密度(lymphatic microvessel density,LMVD).结果:反义组成瘤时间较对照组长[(13.00±2.83)天vs.(7.67±1.63)天,P＜0.05],移植瘤生长速度较对照组缓慢,肿瘤重量明显低于对照组[(0.45±0.14)g vs.(0.92±0.37)g,P＜0.05],抑瘤率达51.09%;反义组VEGF-A和VEGF-C mRNA及蛋白表达较对照组明显减弱(P＜0.05),且MVD(21.83±2.86 vs.41.33±4.03)及LMVD(18.67±4.67 vs.31.83±2.33)显著低于对照组(P＜0.05).结论:VEGF-A/VEGF-C ASODN通过抑制VEGF-A及VEGF-C表达抑制乳腺癌脉管生成,进而抑制肿瘤生长.     

Endostatin对结肠癌生长和转移抑制作用的实验研究

背景与目的:结肠癌的生长、转移是血管生成依赖性的,血管生成抑制剂有望通过抑制肿瘤血管生成,诱导结肠癌细胞凋亡,有效地抑制结直肠癌的生长和转移。肿瘤的抗血管生成治疗对选择手术时机和方式、制定综合治疗方案,提高结肠癌患者5年生存率都具有重要意义。本实验研究血管生成抑制因子Endostatin对结肠癌生长和转移的抑制作用,并探讨其对结肠癌细胞凋亡的影响。方法:采用人结肠腺癌细胞株SW1116完整组织块裸鼠原位种植,建立类似于临床的结肠癌转移裸鼠模型。种植后第1周开始皮下注射Endostatin,每天一次,剂量为0mg/kg(对照组)、5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg(治疗组),共用6周。种植后第7周处死动物,测量原位肿瘤瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度(intratumoralmicrovesseldensity,MVD)、肿瘤细胞凋亡指数(apoptoticindex,AI),观察肿瘤细胞腹膜、肝、其他脏器转移及腹水情况。结果:Endostatin剂量为0mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg时,原位肿瘤瘤重分别为(1.31±0.36)g、(0.42±0.17)g、(0.21±0.09)g、(0.13±0.05)g;抑瘤率分别为0%、67.9%、84.0%、90.1%;MVD分别为(12.8±4.1)、(5.9±2.5)、(2.2±1.4)、(0.74±O.3);AI分别为(3.87±2.61)%、(6.89±5.18)%、(13.24±4.76)%、(20.97±9.04)%;腹膜转移率分别为9     

乳腺癌腋窝淋巴结转移血管生成的免疫组化研究

目的　研究乳腺癌腋窝淋巴结转移的血管生成情况。方法　采用内皮细胞ⅧFRAg 免疫组化染色技术,对37 例乳腺癌根治术或改良根治术切除的乳腺癌组织和121 枚腋窝转移淋巴结进行免疫组化染色。在100 倍视野下通过显微电视系统计数微血管密度( MVD) ,并用显微测量器测量转移灶的直径。结果　在121 个淋巴结中找到13 处微转移灶,其平均直径为(210 ±37) μm ,无血管生成。腋窝淋巴结转移瘤的MVD 为89-3 ±18-4 ,与乳腺癌组织MVD(93-8 ±21-8) 差异无显著性,且微血管分布不均,周围高于中央。结论　淋巴结微转移灶无血管生成,转移瘤有血管生成。为抑制微转移灶发展成转移瘤,以及抑制转移瘤的生长,抑制血管生成可能是控制淋巴结转移的有效措施。     

辛伐他汀在裸鼠模型中对乳腺癌骨转移的影响

目的 观察辛伐他汀在裸鼠模型中对乳腺癌骨转移的作用.方法采用完全随机分组方法 将60只裸鼠分为3组,每组20只,裸鼠左心腔注射乳腺癌骨转移细胞株(MDA-MB-231),7d后,分别皮下注射辛伐他汀、生理盐水及无任何处理(2次/周,19 d).应用图像分析软件评估骨转移瘤的面积.随后处死裸鼠,用放射免疫法检测骨转移癌髓腔内甲状旁腺素相关蛋白(PTHrP)浓度;应用骨密度检测软件进行组织形态学分析,计数骨转移灶每毫米癌组织与临近骨小梁之间破骨细胞的数量.计量资料比较采用方差分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 与生理盐水组和无处理组相比,注射辛伐他汀的裸鼠骨转移癌面积明显减小(0.51±0.18 mm2 vs 2.13±1.24 mm2 vs 2.29±1.22 mm2;F=15.600,P=0.002; F=15.673,P=0.001),骨转移癌周围髓腔内PTHrP浓度明显降低(0.98±0.20 pmol/L vs 2.11±0.31 pmol/L vs 1.99±0.29 pmol/L;F=61.469,P＜0.001;F=58.274,P＜0.001),并且其转移灶破骨细胞的数量明显减少(4.00±1.73个/mm vs 11.40 ±4.93个/mm vs 10.91±3.87个/mm;F=17.820,P=0.001,F=17.184,P=0.002).结论 辛伐他汀能够降低乳腺癌细胞PTHrP的分泌,从而抑制乳腺癌细胞在骨内生长及其对骨质的破坏.