肝细胞癌变时神经节苷腺对转铁蛋白受体介导的内吞作用的…

目的：研究肝细胞癌变时神经节苷脂ＧＭ３和ＧＤ３的变化对转铁蛋白受体介导的内吞作用的影响及其在促进肝癌生长中所起的作用。方法：采用放射性核素标记配体受体结合法，及洗脱法测定转铁蛋白与其受体的结合以及转铁蛋白受体介导的内吞作用；用ＭＴＴ比色法测定细胞生长情况。结果：（１）ＧＭ３抑制肝癌细胞的生长，ＧＤ３则促进肝癌细胞的生长；（２）这种影响与转铁蛋白对细胞的作用直接相关；（３）此相关作用不是通过影响转铁     

外源性神经节苷脂对人肝癌培养细胞生长,蛋白分泌及合成的影响

１０ｍｇ／Ｌ双唾液酸神经节苷脂（ＧＤ３）可促进人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞生长，增加细胞ＤＮＡ合成，静止期细胞数减少而合成期和分裂期细胞增多。单唾液酸神经节苷脂（ＧＭ３）对白蛋白的分泌和合成均发生抑制，而ＧＤ３对白蛋白的分泌也发生抑制，但细胞内白蛋白的含量上升。ＧＭ３，ＧＤ３对甲胎蛋白的合成影响不大，ＧＤ３可降低甲胎蛋白的分泌，而ＧＭ３对甲胎蛋白的分泌影响不大。结果提示ＧＤ３有促进细胞生长作用，Ｇ     

外源性神经节苷脂对人肝癌培养细胞生长、蛋白分泌及合成的影响

１０ｍｇ／Ｌ双唾液酸神经节苷脂（ＧＤ３）可促进人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞生长，增加细胞ＤＮＡ合成，静止期细胞数减少而合成期和分裂期细胞增多。单唾液酸神经节苷脂（ＧＭ３）对白蛋白的分泌和合成均发生抑制，而ＧＤ３对白蛋白的分泌也发生抑制，但细胞内白蛋白的含量上升。ＧＭ３、ＧＤ３对甲胎蛋白的合成影响不大，ＧＤ３可降低甲胎蛋白的分泌，而ＧＭ３对甲胎蛋白的分泌影响不大。结果提示ＧＤ３有促进细胞生长作用，ＧＭ３、ＧＤ３比对不同蛋白质的分泌和合成有选择性作用。     

神经节苷脂GM_3诱导HL-60细胞分化后中性糖脂的变化

为了研究神经节苷脂ＧＭ３（Ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅ，ＧＭ３）对人早幼粒白血病细胞系ＨＬ６０细胞诱导分化后中性糖脂的影响，将神经节苷脂ＧＭ３加到ＨＬ６０细胞的ＤＭＥ／Ｆ１２培养液中，观察其对ＨＬ６０细胞的诱导分化作用及分化后细胞中性糖脂的变化。结果：细胞吞噬功能显著增强，非特异性酯酶活性升高，细胞形态也呈现与这种分化相一致的改变。神经节苷脂ＧＭ３诱导ＨＬ６０细胞分化后细胞中性糖脂各组分的百分含量发生了显著改变，ＣＤＨ、ＣＭＨ及ＣＱＨ显著增多，与分化前相比Ｐ＜００５；ＣＸＨ显著降低，与分化前相比Ｐ＜００５。结果提示：神经节苷脂ＧＭ３诱导ＨＬ６０细胞分化时改变了细胞中性糖脂的代谢     

神经节苷脂GM_1和GM_3对受体介导的转铁蛋白内吞过程的影响

我们从正常人脑及肝脏中分离得到纯化的神经节苷脂GM_1[Gal-GalNAc-(NeuNAc)Gal-Glc-Cer]和GM_3[NeuNAc-Gal-Glc-Cer],发现外源性GM_1或GM_3的加入能不同程度地抑制SMMC-7721人肝癌细胞的生长,但仅GM_3能抑制转铁蛋白(Tf)促进的细胞生长。进一步的研究发现,GM_3并不影响Tf与细胞膜表面受体的结合,而是抑制了受体介导的Tf内吞过程,内吞囊泡的形成及融合均受到影响。结果提示:GM_3在膜中的嵌入,可能使受体的构象发生变化或影响了膜的流动性,从而抑制Tf的内吞过程。     

神经节苷脂GM3诱导HL—60细胞分化后中性糖脂的变化

为了研究神经节苷脂ＧＭ３对人早幼粒白血病细胞系ＨＬ－６０细胞诱导分化后中性糖酯的影响，将神经节苷脂ＧＭ３加到ＨＬ－６０细胞的ＤＭＥ／Ｆ１２培养液中，观察其对ＨＬ－６０细胞的诱导分化作用及化后细胞中性糖脂的变化。     

神经节苷脂GM1的含量测定

神经节苷脂（ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅ，Ｇｌｓ）是一类结构复杂的酸性鞘糖脂。中枢神经细胞特别是脑细胞中含量丰富。对神经细胞的发育、再生和修补起重要作用。其主要成分是ＧＭ１、ＧＤ１ａ、ＧＤ１ｂ、ＧＴ１ｂ。其中ＧＭ１和ＧＴ１ｂ对神经突起生长的促进作用最大，Ｇ...     

外源性神经节苷脂GM3对人肝癌细胞生长的抑制作用

为了解神经节苷脂（ＧＭ３）是通过何种途径来调节细胞生长的，运用ＲＮＡ和蛋白质含量的测定及免疫组化法，结果发现：ＧＭ３（１０ｍｇ／Ｌ）可明显抑制人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１细胞增殖，抑制率达天２８．８１％，同时能降低细胞内平均ＲＮＡ和蛋白质含量，以ＧＭ３处理细胞３ｄ时最为明显，ＧＭ３能使ｃ－ｆｏｓ蛋白量在短时间内剧增，ＧＭ３处理３０ｍｉｎ时增加了２．８５倍；而ｃ－ｍｙｃ蛋白量在短时间明显减少ＧＭ３     

铜锌超氧化物歧化酶基因对HepG2肝癌细胞增殖的抑制作用

目的：探讨超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）对肝癌细胞增殖的抑制作用。方法：利用逆转录病毒载体介导的基因转移技术，将人铜锌ＳＯＤ基因导入人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２细胞内，获得高表达。检测其对ＨｅｐＧ２细胞生物学特性的影响。结果：与对照相比ＳＯＤ基因转染后的肝癌细胞生长受到抑制，细胞体积变大，分裂象减少，Ｓ期细胞比率减少，软琼脂集落形成率低，裸鼠成瘤瘤体小。结论：铜锌ＳＯＤ基因具有抑制ＨｅｐＧ２肝癌细胞增殖的作用。     

神经节苷脂GM1对神经生长因子诱导PC12细胞分化的影响

目的 研究神经节苷脂GM1是否介导神经生长因子（NGF）诱导的PC12细胞的分化。方法 采用MTT法、葡萄神经酰胺合成抑制剂（D－PDMP）分析神经节苷脂GM1对NGF诱导的PC12细胞分化的影响。结果 神经节苷脂GM1对PC12细胞的生长无明显的影响，而能够促进NGF对PC12细胞的生长抑制作用；NGF能诱导PC12细胞分化，但NGF无法诱导神经节苷脂缺乏型PC12细胞的分化；在神经节苷脂缺乏型PC12细胞中添加神经节苷脂GM1后，细胞恢复对NGF的反应性。结论 神经节苷脂GM1在NGF诱导的PC12细胞分化过程中发挥重要作用。     

肝癌细胞膜上转铁蛋白受体和去唾液酸糖蛋白受体数量的变化

采用体外反博（ECP）治疗10例阿尔茨海默型老年痴呆（SDAT）患者，从临床症状、仪器检查及血和脑脊侵液（CSF）中生物活性物质的改变等评价了ECP对SDAT的治疗作用。主要结果：体外反对8周后，SDAT患者的脑SPECT显像显示普遍性脑供血增加；血液超氧化物歧化酶（SOD）活力和强啡肽A1－13含量明显升高；CSF中生长抑素含量、SOD活力等明显增加；而脯氨酸和蛋氨酸浓度均明显下降。上述结果表明，体外反搏对SDAT确有积极的治疗作用．     

肝癌细胞膜上转铁蛋白受体和去唾液酸糖蛋白受体数量的变化

研究肝癌细胞膜摄取转铁蛋白受体的变化。采用免疫组化及配体受体结合法分别测定正常肝脏，肝 癌组织及癌旁肝组织转铁蛋白受体及去唾液酸糖蛋白受体的含量。该变化有利于肝癌细胞对转铁蛋白的有效摄取，也增加了肝癌细胞对高度唾液酸化的转铁蛋白的相对特异性摄取。     

毛细管电泳技术分离哺乳动物脑组织中神经节苷脂

利用毛细管电泳（ｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＣＥ）分离猪脑、鼠脑组织中主要几种神经节苷脂ＧＭ_１、ＧＤ_（１ａ）、ＧＤ_（１ｂ）、ＧＴ_（１ｂ），在缓冲液中加入α－环状糊精（α－ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ，α－ＣＤ）来提高分离的选择性和效率，并对缓冲液的ｐＨ值、α－ＣＤ浓度和电压等变化因素进行研究。结果表明在含１５．０ｍｍｏｌ／Ｌα－环状糊精的２．５ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸级冲液（ｐＨ８．６）中，电压为２５ｋＶ时能很好的分离生物样品。从猪脑提取物中分离出ＧＭ_３、ＧＭ_１、ＧＤ_（１ａ）、ＧＤ_（１ｂ）、ＧＴ_（１ｂ）和含唾液酸的其他糖脂类物质，鼠脑中分离出ＧＭ_１、ＧＤ_（１ａ）和ＧＴ_（１ｂ），说明毛细管电泳可用于分离神经节苷脂，具有快速、简便、节约等特点。     

肝癌大鼠各组织中的鞘糖脂图谱

作者应用微量法(Ladish法)对正常及肝癌大鼠肝、心、肺、肾、脾等组织的鞘糖脂图谱及脂结合唾液酸含量进行比较分析。肝癌大鼠上述各组织中,脂结合唾液酸含量大幅升高,单唾液神经节苷脂减少(GM_8减少,GM_2与GM_1稍有增多),而多唾液酸神经节苷脂(GD_8,GD_(1a))相对增多;中性鞘糖脂也有明显变化。研究结果表明,大鼠肝细胞癌变伴有肝外其他组织中鞘糖脂代谢的改变。     

阿拉瑞林对GnRH受体阳性肝癌细胞Fas/FasL基因表达的影响

目的　探讨Fas Fasl系统在LHRH类似物抑制肝癌细胞增殖过程中的作用。方法　用免疫组织化学方法检测SMMC772 1肝癌细胞中GnRH受体的表达 ;用半定量RT PCR方法 (QRT PCR)观察LHRH类似物对SMMC772 1肝癌细胞中Fas FasL系统mRNA表达的变化。结果　SMMC772 1肝癌细胞呈GnRH及其受体免疫反应阳性。PCR反应产物均与预期长度相符合。Fas FasL mRNA水平随LHRH类似物浓度增加而增大 ,经方差分析各组间有显著性差异 (Fas ,F =16.5 18FasL ,F =111.5 83 ,P <0 .0 1)。结论　SMMC772 1肝癌细胞具有自分泌GnRH的功能 ;Fas FasL系统可能参与了LHRH类似物对肝癌细胞增殖的抑制作用     

膜联蛋白A7与IGFBP2结合抑制肝癌细胞增殖

目的 分析膜联蛋白A7(ANXA7)与肝癌发生的相关性及筛选、鉴定ANXA7的相互作用分子,探讨ANXA7在肝癌发生中的机制.方法 通过实时定量PCR法检测48对肝癌与癌旁组织以及多种肝和肝癌细胞株中ANXA7表达量的差异,并通过肝癌细胞ANXA7过表达及特异性干扰抑制分析其对肝癌细胞增殖的影响.采用免疫共沉淀法筛选与ANXA7发生结合的蛋白,并以点突变法分析蛋白质相互作用的关键位点;用蛋白免疫印迹法分析了ANXA7对肝癌相关的重要信号通路中ERK1/2磷酸化水平的影响.结果 ANXA7在肝癌组织与肝癌细胞中均呈下调表达.胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP2)能与ANXA7蛋白发生特异性结合,且IGFBP2上的RGD序列是两者结合的关键位点.肝癌细胞中ANXA7表达上调能抑制肿瘤细胞增殖(P＜0.05),并能使IGFBP2介导的ERK1/2的磷酸化水平降低.下调ANXA7的表达可促进肝癌细胞增殖(P＜0.01),磷酸化ERK1/2的水平升高.结论 ANXA7可能作为一种抑癌基因,通过介导IGFBP2对ERK1/2磷酸化水平的影响参与对肝癌增殖的调控.     

各种分化诱导剂对人白血病HL-60细胞中神经节苷脂合成及唾液酸转移酶的影响

作者采用[~(14)C]-半乳糖研究佛波酯(TPA)、二甲基亚砜(DMSO)、GM3(NeuAe-Gal-Gle-cer)等诱导HL-60细胞分化过程中神经节苷酯(Sg)合成及CMP-Neu Ac:LacCer唾液酸转移酶(ST1)活性的变化。TPA、GM3促进HL-60细胞合成[~(14)C]-Gg,也促进GM3的合成。DMSO抑制HL-60细胞合成[~(14)C]-Gg,但促进GM3的合成。各种制剂处理EL-60细胞后,均能使ST1活性升高,但GM3使ST1活性增加不明显,可能是终产物对ST1的反馈抑制。结果提示Gg(GM3)的生物合成和ST1的活性变化与HL-60细胞的分化增殖有关。