应用聚合酶链式反应探讨肠道病毒感染与克山病及扩张型心肌病发病的关系

用聚合酶链式反应对云南楚雄地区克山病及扩张型心肌病心内膜心肌活检标本各６例和＂正常人＂心肌标本１６例进行肠道病毒ＲＮＡ的检测。发现１２例患者心肌组织中肠道病毒ＲＮＡ阳性率达５８．３３％，而＂正常人＂中均为阴性。证实患者心肌组织中存在肠道病毒持续感染，且肠道病毒感染与患者心功能及心肌病理损害密切相关，提示肠道病毒感染在楚雄地区克山病及扩张型心肌病发病中起重要作用。     

肠道病毒感染与扩张型心肌病发病关系的探讨

为了探讨肠道病毒感染与扩张型心肌病发病的关系，应用聚合酶链反应等方法对２１例患者心肌及血标本进行肠道病毒检测，结果显示９例患者心肌组织中有肠道病毒ＲＮＡ存在，阳性率为４２．９％；１７例外周血标本中，亦有６例阳性；而１７例患者血清中，仅４例有柯萨奇Ｂ组病毒中和抗体存在，表明部分扩张型心肌病患者中确有肠道病毒感染或持续感染，支持肠道病毒感染和（或）持续感染参与部分扩张型心肌病发生及发展过程。     

应用原位杂交法对比研究慢型克山病、扩张型心肌病与肠道病毒的关系

本文用生物素标记的柯萨奇B_3病毒(CVB_3)的cDNA探针,通过原位杂交技术检测50例组织学诊断为慢型克山病、14例扩张型心肌病的心肌石蜡包埋切片,并以15例正常心肌标本作阴性对照。结果50例慢型克山病有34例出现阳性结果。14例扩张型心肌病有7例出现阳性结果。15例正常对照心肌标本杂交均为阴性,从而确定慢型克山病的心肌组织中、扩张型心肌病的心肌组织中有肠道病毒核酸存在,表明肠道病毒感染与慢型克山病、扩张型心肌病的发病高度相关。经统计学处理二者之间无明显差异。     

应用原位杂交法对比研究慢型克山病,扩张型心肌病与肠道病？…

本文用生物素标记的柯萨克Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）的ＣＤＮＡ探针，通过原位杂交技术检测５０例组织学诊断为慢型克山病、１例扩张型心肌病的心肌石蜡包埋切片，并以１５例正常心肌标本作阴性对照。结果５０例慢型克山病有３４例出现阳性结果。１４例扩张型心 ７７例出现阳性结果。１５例正常对照组心肌标本杂交均为阴性，从而确定慢型克山病的心肌组织中、扩张型心肌病的心肌组织中有肠道病毒核酸存在，表明肠道病毒感染与慢型克山病     

克山病患者心肌肠道病毒VP1结构蛋白检测

目的 探讨肠道病毒感染与克山病发病的关系。方法 应用抗柯萨奇B5病毒(Coxsackie B5 virus，CVB5)VP1蛋白单克隆抗体，采用免疫组化方法，检测黑龙江、山东、云南省克山病病区急型、亚急型、慢型、潜在型克山病死亡病例心肌标本83例，风心病10例，冠心病10例，心肌炎21例，扩张型心肌病29例，非病区非正常死亡的正常人10例，病区发病季节非克山病死亡病例13例。结果 克山病83例心肌标本中有74例VP1结构蛋白阳性，阳性率89．2％；风心病、冠心病、非正常死亡健康人VP1阳性检出率均为10％；心肌炎、扩张型心肌病VP1阳性检出率分别为66．7％和70％；病区发病季节非克山病死亡病人VP1阳性检出率为38．5％。结论 来自3省份的各型克山病死亡病例心肌标本中均能检出肠道病毒VP1结构蛋白，克山病的发生与肠道病毒感染高度相关。     

RNA－RNA原位杂交检测心肌中的肠道病毒RNA

报道将ｐＣＶＢ３－Ｒ１进行体外转录合成柯萨奇Ｂ３病毒负股ＲＮＡ，以同位素３５Ｓ标记作为阳性探针，将ｐＳＰＴ１８的体外转录产物以同位素３５Ｓ标记作为阴性探针，分别对多种经石蜡包埋的心肌切片进行原位杂交，检测肠道病毒ＲＮＡ。阳性探针检测结果显示：急性小鼠柯萨奇Ｂ３病毒性心肌炎心肌均有阳性信号出现；３例急性心肌炎和２例扩张型心肌病心肌各有１例阳性发现；６例风心病病人心脏瓣膜未见阳性信号；正常人和小鼠心肌未见阳性信号。阴性探针检测未发现任何阳性信号。可见此方法特异性高，可对肠道病毒ＲＮＡ进行特异检测。本结果也提示在我国急性心肌炎和扩张型心肌病病人心肌中存在肠道病毒的持续感染。     

克山病患者心肌中肠道病毒VP1抗原的检测

目的为进一步探讨肠道病毒感染与克山病的发病关系.方法应用抗柯萨奇B5病毒的VP1壳蛋白的单克隆抗体,采用免疫组化方法,对黑龙江、山东、云南3省区急型、亚急型、慢性、潜在型克山病患者尸检心肌共83例,风心病10例,冠心病10例,心肌炎21例,扩张型心肌病29例,非病区非正常死亡的正常人10例,病区发病季节非克山病死亡病人13例的尸检心肌进行了检测.结果克山病尸检心肌83例中有74例阳性,阳性率89.2%;风心病、冠心病、非正常死亡健康人的阳性检出率分别为10%,心肌炎,扩张型心肌病的阳性检出率分别为66.7%和70%;病区发病季节非克山病死亡病人心肌阳性检出率为38.5%.结论 3省区各型克山病心肌中均能检出肠道病毒VP1结构蛋白,支持克山病的发生与肠道病毒感染高度相关.     

克山病病区12例急性心肌炎临床病理分析

目的 探讨云南省克山病病区急性致死性心肌炎暴发流行及其猝死的原因。方法 对１２例在季节性群体发病中收集到的死亡病例,作临床病理资料总结分析。结果 此类心肌炎暴发浒具有一定的发病特点,心肌病变主要表现为间质性炎症反应,在９例心肌组织中,有８例肠道病毒ＲＮＡ阳性。结论 肠道病毒感染可能是云南克山病病区急性心肌炎暴发流行的主要病因。     

一例胎儿克山病心肌检出肠道病毒RNA及凋亡细胞的探讨

一例胎儿克山病心肌检出肠道病毒ＲＮＡ及凋亡细胞的探讨周令望钟学宽牛美娟于祖熙既往研究报道母亲因患克山病可在其胎儿心肌上检出病变程度和性质相对应的病理改变，称其为胎儿克山病［１］。为探讨胎儿克山病与肠道病毒感染的关系，我们应用柯萨奇Ｂ３病毒的ｃＤＮＡ探...     

用原位核酸杂交法探讨柯萨奇B组病毒与黑龙江慢型克山病的关系

克山病是原因未明的地方性心肌病，慢型克山病有关病毒病因的研究未见有关报道，作者用生物素标记的柯萨奇Ｂ３病毒的ｃＤＮＡ探针与黑龙江病区慢型克山病尸检心肌组织及非正常死亡成人心肌组织和非病区７￣８个月引产胎儿心肌组织进行了原位杂交，以检测柯萨奇Ｂ组病毒ＲＮＡ。结果１３例慢型克山病中有９例呈现阳性杂交信号，阳性率达６９．２％，两对照组均为阴性。表明黑龙江慢型克山病心肌组织中有柯萨奇Ｂ组病毒ＲＮＡ的存在，     

云南楚雄地区“扩张型心肌病”与慢型克山病关系的探讨

本文从流行病及病理学等方面对楚雄地区“扩张型心肌病”与慢型克山病关系进行了分析。     

用原位核酸杂交技术探讨肠道病毒与急型克山病的关系

目的 探讨肠道病毒(柯萨奇病毒)与吉林省急型克山病的关系。方法 用柯萨奇病毒B3、B4、B5、A9共同序列作寡核苷酸探针对吉林省急型克山病尸捡心肌组织12例及病区与非病区尸捡正常心肌组织各7例进行原位核酸杂交。结果 吉林省急型克山病12例中有11例出现阳性杂交信号，即有肠道病毒RNA存在，阳性率为91．66％，对照组均为阴性。结论 吉林省急型克山病病人心肌组织中有肠道病毒感染，提示急型克山病的发病可能与肠道病毒感染有关。     

四川省克山病病区非病区扩张型心肌病初步调查

四川省克山病病区非病区扩张型心肌病初步调查胡其家，杨小静，喻昭蓉扩张型心肌病（以下简称扩心病）和克山病均属原因不明心肌病，在临床上二者很难鉴别。进人７０年代末，南北方克山病病区克山病发病率逐年大幅度下降。据云甫报道１９８６～１９９０年楚雄克山病重、中...     

用原位核酸杂交法探讨柯萨奇病毒与克山病的关系

为进一步探讨柯萨奇病毒与克山病的关系，采用柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）制备的ｃＤＮＡ探针与黑龙江、山东、云南三省病区克山病尸检心肌组织及胎儿克山病心肌组织的石蜡切片进行了原位核酸杂交，并用脑外伤、ＣＯ中毒等意外死亡健康成人及冠心病、风心病尸检心肌组织和病区、非病区７～８个月引产胎儿心肌组织的石蜡包埋切片作为对照。结果急型克山病８／１３、慢型克山病３４／５０、亚急型克山病２２／２９呈现阳性杂交信号，提示有柯萨奇病毒ＲＮＡ的存在，冠心病２／１５、风心病１／１５、显著低于克山病，而健康成人对照组均为阴性，胎儿克山病一例呈阳性反应，病区引产胎儿心肌组织１０例中有２例也检出柯萨奇病毒ＲＮＡ，而非病区胎心则为阴性。结果提示在一些克山病的发生和发展过程与柯萨奇Ｂ组病毒的感染高度相关。     

克山病与病毒感染关系的实验研究

目的为了探讨克山病与肠道病毒特别与柯萨奇病毒(CVB)的关系.方法①选择用CVB3病毒的cDNA探针,应用原位核酸杂交的方法,检测克山病尸检心肌组织;②采用CVB5病毒VP1壳蛋白的单克隆抗体应用免疫组化法检测克山病尸检心肌组织;③用不同配方的低硒合成饲料喂养小鼠,分别感染CVB2、CVB4m'、CVB3m以及先后感染CVB4和CVB3m的病毒.结果①原位杂交法急型克山病、亚急型克山病、慢型克山病的阳性率分别为61.5%、75.8%和68%;②免疫组化法克山病阳性率分别为89.2%,两种方法阳性检出率均显著高于健康人,高于心肌炎及扩张型心肌病,但无差异;③光镜下低硒病毒组心肌病变位于心肌实质、乳头肌等.为多发性灶状坏死伴少量炎性细胞浸润,补硒组心肌病变为间质炎性细胞浸润,病变程度及检出率、低硒病毒组均重/高于补硒病毒组.结论以上实验结果均支持克山病的发生与肠道病毒,特别CVB病毒的感染高度相关.     

RNA—RNA原位杂交检测心肌中的肠道病毒RNA

报道将ｐＣＶＢ３－Ｒ１进行体外转录合成柯萨奇Ｂ３病毒负股ＲＮＡ，以同位素＾３５Ｓ标记作为阳性探针，将ｐＳＰＴ１８的体外转录产物以同位素＾３５Ｓ标记作为阴性探针，分别对多种经石蜡包埋的心肌切片进行原位杂交，检测肠道病毒ＲＮＡ。阳性探针检测结果显示：急性小鼠柯萨奇Ｂ３病毒性心肌炎心肌均有阳性信号出现；３例急性心肌炎和２例扩张型心肌病心肌各有１例阳性发现；６例风心病病人心脏瓣膜未见阳性信号；正常人和小鼠     

克山病、心肌病、心肌炎细胞免疫水平测定

用E玫瑰花总花(Et)和活性玫瑰花(Ea)两项试验检测慢型、潜在型克山病、扩张型心肌病、肥厚型心肌病、病毒性心肌炎患者共115例和34例正常人的细胞免疫水平。方差分析显示:心脏病人、正常人Et、Ea水平有非常显著性差异(P<0。01)。证实克山病等4种心脏病细胞免疫功能均有损害,且损害程度各不相同。克山病在4种心脏病中,细胞免疫功能受损最为严重。此结果提示:可将细胞免疫水平测定作为诊断克山病及与扩张型心肌病鉴别诊断参考指标之一。     

扩张型心肌病心肌组织中肠道病毒感染与趋化因子mRNA表达的关系

目的 探讨病毒感染与趋化因子表达的改变在扩张型心肌病发病中的作用。方法 利用RT-PCR方法检测12例原位异体心脏移植的扩张型心肌病受体心肌组织以及5例正常对照心肌组织中Evs-RNA的存在以及趋化因子RANTES、MCP-1、FKN及其受体US28的表达水平。结果 在病理学证实的12例扩张型心肌病心肌组织中有7例Evs-RNA阳性。25％(3／12)心肌组织中MCP-1mRNA的表达明显增高，经DNA同源序列分析，与人JE MCP-1同源性为97％。而正常对照心肌组织中病毒基因及趋化因子检测均阴性。结论 肠道病毒感染可能会改变趋化因子的表达水平，而趋化因子的异常表达在扩张型心肌病发生发展中可能起重要作用。     

原位逆转录PCR法检测心肌组织中的柯萨奇B3病毒RNA

目的　探讨柯萨奇B3病毒感染与心肌炎及扩张型心肌病的病原学关系。方法　应用生物素标记的核苷酸直接掺入法 ,建立了原位逆转录PCR反应技术 ,检测心肌炎、扩张型心肌病患者的心肌活检标本及正常心肌的尸检标本中的柯萨奇B3病毒。结果　 16例病理学及临床诊断为心肌炎患者的心肌组织中 ,7例检测到柯萨奇B3病毒RNA ;14例病理学及临床诊断为扩张型心肌病的患者心肌组织中 ,5例检测到柯萨奇B3病毒RNA ;16例正常心肌标本中检测结果均为阴性。结论　部分心肌炎及扩张型心肌病患者心肌组织中存在柯萨奇B3病毒RNA ,提示柯萨奇B3病毒感染与部分心肌炎及扩张型心肌病的发病有关。     

楚雄地区扩张型心肌病与克山病关系临床病理讨论会(辑要)

1992年4月22日,卫生部地方病专家咨询委员会主任委员于维汉教授趁昆明全国克山病监测会议的机会,在楚雄州克山病防治研究所,邀请有关流行病、临床、病理等学科的专家、教授以及科研防治人员,召开了楚雄地区“扩张型心肌病”与克山病关系“临床病理”讨论会,现将讨论会记录摘要整理于下: