结缔组织生长因子及其在胰腺纤维化中的作用机制

胰腺星状细胞在慢性胰腺炎胰腺纤维化的进程中扮演重要的角色,其中TGF-β1是最重要的刺激该细胞分泌胶原的细胞因子之一.近来更发现结缔组织生长因子(CTGF)是各种纤维化形成过程中重要的有丝分裂原,可促进Fn和Ⅰ、Ⅲ型胶原的形成.在各种病理模型中均可见其协同TGF-β1来促进成纤维细胞增殖和胶原沉着.     

脂质过氧化在胰腺纤维化形成中的作用

目的研究脂质过氧化对胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSC)活化的影响及其在胰腺纤维化形成中的作用。方法实验大鼠每周2次腹腔内注射二乙基二硫代氨基甲酸盐(diethyldithiocarbamate,DDC),共10周建立胰腺纤维化模型。分别于注射后第2,4,6,8,10周处死大鼠,检测胰腺组织中丙二醛(MDA)含量,各时间点胰腺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测α1-型胶原(Colα1)、TGF-β1 mRNA水平。结果注射DDC后,胰腺组织内MDA含量逐步升高,8周时高达(6.21±0.70)nmol/mg prot(P<0.01)。4周时可见明显的细胞外基质沉积和纤维化形成,8周时小叶及小叶内广泛纤维化,大量腺体萎缩,形成瘢疤组织。α-SMA、TGF-β1的阳性表达在2周时已出现,4周时明显增加,且阳性细胞多位于胰腺小叶间及腺泡旁纤维化区域。胰腺组织Colα1 mRNA在造模2周时少量表达,4周表达增加,8周后维持在较高水平;对照组TGF-β1mRNA表达水平较低,TGF-β1 mRNA在造模4周时表达明显增强,与对照组相比有显著性差异(P<0.05),6周后表达增加不明显。结论随着造模时间的延长,胰腺组织MDA含量的增加与胶原纤维形成、TGF-β1表达及活化PSC的增加相一致,提示脂质过氧化产物通过激活PSC及刺激TGF-β1的分泌,增加胰腺组织中胶原的沉积,促进胰腺纤维化的形成。     

脂质过氧化在胰腺纤维化形成中的作用

目的 研究脂质过氧化对胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells, PSC)活化的影响及其在胰腺纤维化形成中的作用.方法 实验大鼠每周2次腹腔内注射二乙基二硫代氨基甲酸盐(diethyldithiocarbamate, DDC),共10周建立胰腺纤维化模型.分别于注射后第2,4,6,8,10周处死大鼠,检测胰腺组织中丙二醛(MDA)含量,各时间点胰腺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测α1-Ⅰ型胶原(ColⅠα1)、TGF-β1 mRNA水平.结果 注射DDC后,胰腺组织内MDA含量逐步升高,8周时高达(6.21 ± 0.70)nmol/mg prot(P ＜ 0.01).4周时可见明显的细胞外基质沉积和纤维化形成,8周时小叶及小叶内广泛纤维化,大量腺体萎缩,形成瘢疤组织.α-SMA、TGF-β1的阳性表达在2周时已出现,4周时明显增加,且阳性细胞多位于胰腺小叶间及腺泡旁纤维化区域.胰腺组织ColⅠα1 mRNA在造模2周时少量表达,4周表达增加,8周后维持在较高水平;对照组TGF-β1 mRNA表达水平较低,TGF-β1 mRNA在造模4周时表达明显增强,与对照组相比有显著性差异(P ＜ 0.05),6周后表达增加不明显.结论 随着造模时间的延长,胰腺组织MDA含量的增加与胶原纤维形成、TGF-β1表达及活化PSC的增加相一致,提示脂质过氧化产物通过激活PSC及刺激TGF-β1的分泌,增加胰腺组织中胶原的沉积,促进胰腺纤维化的形成.     

转化生长因子-β3对肝脏和胰腺纤维化的影响

组织纤维化的基本特征是细胞外基质降解减少、过度沉积,导致组织结构的改建.TGF-β3通过抑制胶原的沉积,促进其降解而具有抗纤维化作用,并被证实在创伤愈合过程中可减轻伤后疤痕的形成.本文着重介绍了TGF-β3在肝脏及胰腺纤维化中的表达及其作用,以进一步了解其对纤维化疾病的影响.     

心房利钠肽和转化生长因子β_1在心房颤动心房纤维化进程中的作用及相互联系

心房利钠肽(ANP)和转化生长因子β_1(TGF-β_1)是心房颤动心房纤维化的重要因素,前者抑制心房纤维化进程,后者促进心房纤维化进程,二者均可以用来预测心房颤动患者复律后的恢复情况。更重要的是,二者对于心房颤动患者心房纤维化进程的相反作用在信号通路方面存在交叉。本文就ANP和TGF-β_1在心房颤动心房纤维化进程中的作用及二者在心房纤维化进程当中的联系进行综述。     

血清转化生长因子-β1在慢性肝病患者肝纤维化形成中的意义

转化生长因子-β(TGF-β)是一组重要的细胞生长因子,其中TGF-β_1被认为是最主要的肝纤维化介质,它能促进各种细胞外基质(ECM)如胶原蛋白、层粘连蛋白和蛋白多糖的表达,并抑制这些蛋白的降解。笔者检测了141例病毒性肝炎患者血清TGF-β_1水平,及血清中HA、LM、G-Ⅳ水平,以探讨血清TGF-β_1含量的检测在肝纤维化中的意义。1 材料和方法1.1 研究对象 141例肝炎患者均为我院2001年以来的住院患者。男101例,女40例,年龄24～65岁,平均39.6岁。     

纤维化胰腺组织中TGF-β1、Smad3、Smad7的表达及意义

目的:检测人纤维化胰腺组织中TGF-β1,Smad3和Smad7蛋白的表达,探讨他们在胰腺组织纤维化发生中的意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测34例纤维化胰腺组织标本中TGF-β1,Smad3和Smad7蛋白的表达,并以同期15例正常胰腺组织作对照.结果:TGF-β1,Smad3在纤维化胰腺组织中的表达(79.4%,64.7%)明显高于正常胰腺组织(6.7%,20.0%)(P<0.01),Smad7在纤维化胰腺组织中的表达(26.5%)则低于正常胰腺组织(73.3%)(P<0.01),纤维化胰腺组织中TGF-β1的表达与Smad3的表达呈正相关(r=0.385,P<0.05)而与Smad7的表达呈负相关(r=-0.519,P<0.01).结论:TGF-β1,smad3和Smad7在胰腺纤维化形成过程中起不同的介导作用,通过靶向性阻断TGF-β1、Smad3信号和(或)加强Smad7信号可能成为治疗胰腺纤维化的新手段.     

纤维化胰腺组织中TGF-β1、Smad3、Smad7的表达及意义

目的检测人纤维化胰腺组织中TGF-β1,Smad3和Smad7蛋白的表达,探讨他们在胰腺组织纤维化发生中的意义.方法采用免疫组织化学SP法检测34例纤维化胰腺组织标本中TGF-β1,Smad3和Smad7蛋白的表达,并以同期15例正常胰腺组织作对照.结果TGF-β1,Smad3在纤维化胰腺组织中的表达(79.4%,64.7%)明显高于正常胰腺组织(6.7%,20.0%)(P＜0.01),Smad7在纤维化胰腺组织中的表达(26.5%)则低于正常胰腺组织(73.3%)(P＜0.01),纤维化胰腺组织中TGF-β1的表达与Smad3的表达呈正相关(r=0.385,(P＜0.05)而与Smad7的表达呈负相关(r=-0.519,P＜0.01).结论TGF-β1,Smad3和Smad7在胰腺纤维化形成过程中起不同的介导作用,通过靶向性阻断TGF-β1、Smad3信号和(或)加强Smad7信号可能成为治疗胰腺纤维化的新手段.     

TGF-β1及其在胰腺纤维化中的作用

慢性胰腺炎(chronic pancreatitis, CP)典型的病理表现为胰腺实质纤维化、腺泡细胞萎缩、胰管狭窄或扩张、胰管结石以及炎症细胞浸润.胰腺纤维化的本质是以胶原为主的细胞外基质(extracellular matrix, ECM)合成增多,而降解相对减少,两者失去动态平衡,致使过多ECM沉积.目前认为,在胆道梗阻、酒精、代谢、遗传等因素作用下,造成胰腺实质损伤坏死伴发炎症反应,继而各种炎症因子释放并激活胰腺星状细胞(pancreatic stellate cell, PSC),使之转化为成肌纤维细胞 (myofibroblast cell),后者增殖并合成大量的ECM,导致胰腺纤维化.这是一个非常复杂的病理过程,受多种细胞因子介导并调节,其中,TGF-β1(transforming growth factor β1, TGF-β1)起到关键性的作用.本文通过总结近年来有关TGF-β1的研究进展,对TGF-β1的结构、来源、生物学效应及对胰腺纤维化的作用作一综述.     

胰腺星状细胞在大鼠胰腺纤维化形成中的作用

目的 动态观察三硝基苯磺酸(TNBS)胰管内注射诱导大鼠胰腺纤维化过程中胰腺星状细胞(PSC)的活化情况，并研究PSC相关介质转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和Ⅰ型胶原蛋白表达，探讨PSC在胰腺纤维化形成过程中的作用。方法 通过胰管内注射含2％TNBS的乙醇磷酸盐缓冲液诱导大鼠胰腺纤维化模型，并分别于术后72h和3、4、5、6、7周处死大鼠，留取胰腺组织。胰腺组织切片经HE染色，光镜下观察病理学变化。分别用免疫组化、RT-PCR、Western blot检测胰腺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1、MMP-2 mRNA和Ⅰ型胶原蛋白表达；电镜观察不同时点胰腺组织超微结构变化。结果 2％TNBS胰管内注射后早期主要以胰腺组织炎症、水肿、坏死为主，3周后则以纤维组织增生、腺泡萎缩、胶原沉积等纤维化表现为主，以第4周为甚。第3周时α-SMA表达量较少，第4周时则显著增多，而后又渐减。第3周时胰腺组织TGF-β1蛋白表达显著增加，4周时达峰值。正常胰腺组织仅有极微量MMP-2 mRNA表达，而制模早期胰腺组织即有MMP-2 mRNA表达显著增加，随时间延长其表达量呈波动性变化，但仍明显高于正常。正常胰腺组织间质有少量I型胶原表达，而在胰腺纤维化区域则可见大量Ⅰ型胶原沉积。结论 PSC可能参与了TNBS诱导的大鼠胰腺纤维化的发生与发展过程；而此作用可能是PSC在促纤维化因子TGF-β1作用下活化，并合成Ⅰ型胶原等细胞外基质、分泌MMP-2等细胞外基质代谢相关酶而实现。     

胰腺纤维化与TGF-β1/Smad信号转导机制的研究进展

流行病学资料表明,慢性胰腺炎(CP)的发病率呈逐年升高趋势,而胰腺纤维化是CP的重要病理特征之一。近年来的研究发现,胰腺星状细胞(PSC)可能是导致胰腺纤维化的主要始动细胞和效应细胞,其静止型可在转化生长因子-β1(TGF-β1)的作用下转变为活化型,导致细胞外基质(ECM)大量生成并最终进展为纤维化。TGF-β1主要将刺激信号经由细胞质中的Smad蛋白来调节PSC的表达,TGF-β1/Smad信号通路在胰腺纤维化过程中可能起着重要作用。此文主要就PSC及信号通路与胰腺纤维化的发生、发展的研究进展作一综述。     

纤维化肝组织转化生长因子β1表达水平与肝纤维化程度的关系

在众多的细胞因子中，转化生长因子β1(TGF-β1)在肝纤维化的形成中起着关键作用。国内外关于TGF-β1的基础研究大多为细胞培养及动物实验；临床研究主要集中在血清的TGF-β1。测定，但肝组织内TGF-β1的分布及其临床意义研究较少。我们以慢性病毒性肝炎患者肝组织TGF-β1为研究对象，观察肝纤维化不同阶段TGF-β1在肝组织内表达情况，进一步比较肝脏TGF—β1与血清TGF-β1及血清纤维化指标Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)反映肝纤维化情况的优劣，深入探讨TGF—β1与肝纤维化发生发展的关系。     

可溶性细胞因子对肝纤维化的调节作用

在慢性肝病的发展过程中,肝纤维化的形成是一个缓慢复杂的过程。不管其原因如何,都是肝脏受到外界刺激引起的免疫反应下,一系列的体液因子、多种细胞和细胞外基质蛋白(ECM)间复杂的相互作用的结果。在纤维化发生发展的过程中,细胞因子的地位和作用是近年来非常活跃的领域。一些与肝纤维化关系密切的细胞因子已被鉴定。1 转化生长因子β_1(Transforming Growth Factorsβ_1,TGF-β_1) TGF一β_1为双硫键联结的二聚体碱性蛋白,分子量为25KD,体内多种细胞如淋巴细胞、血小板、巨噬细胞等都可以合成与分泌TGF-β_1,其中以血小板内含量最多。TGF-β_1具有调节细胞生长和分化的作用,是细胞生长的双向调节剂。它对细胞有抑制或促进作用,取决于特定的细胞。 TGF-β_1在肝纤维化中的作用日益受到重视。Czaja     

转化生长因子β1（TGF—β1）与肝纤维化

本文综述了TGF-β_1的结构、性质、生物学功能及其与肝纤维化之间的关系。它与肝胶原、纤维连结蛋白等细胞外基质蛋白的合成明显相关,是近年来发现的反映肝纤维化的重要指标之一。     

慢性乙型肝炎患者血清中TGF-β_1及TNF-α含量与肝纤维化程度的关系探讨

目的:观察分析慢性乙型肝炎患者血清中TGF-β_1、TNF-α的含量与肝纤维化程度的关系,寻求肝纤维化的诊断指标。并从细胞因子角度探讨肝纤维化的发病机理。方法:采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)和放射免疫分析法(RIA)分别测定30例正常人员、45例慢性乙型肝炎及10例肝硬化患者血清中TGF-β_1和TNF-α的含量。结果:①慢性乙型肝炎轻、中、重度及肝硬化患者血清TGF-β_1、TNF-α水平均不同程度高于对照组(P<0.1或P<0.05),并且随着肝损害程度的加重逐渐升高,与肝损害程度呈正相关关系(P<0.01)。②血清中TGF-β_1、TNF-α水平与肝纤维化程度呈正相关关系(P<0.01)。结论:①血清TGF-β_1、TNF-α水平随着肝纤维化程度加重而升高,与肝纤维化发生发展密切相关。②对血清中TGF-β_1、TNF-α水平同时测定,可作为诊断肝纤维化的血清学指标。③寻找有效的方法拮抗TGF-β_1、TNF-α对抗纤维化治疗具有重要意义。     

转化生长因子β_1对Ⅰ型胶原基因转录的调节

在肝纤维化形成进程中,早期以Ⅲ型胶原增加为主,随着病理的发展,胶原生成主要由Ⅲ型向Ⅰ型转变,这一现象为肝纤维化病理过程中的一个明显特征。研究Ⅰ型胶原生成增加的机制,已是肝纤维化研究的重要一环。转化生长因子β_1(transforming growth factor β_1,TGFβ_1)在肝纤维化发生过程中,对Ⅰ型胶原蛋白的积聚起着关键的作用。因此,了解TGFβ_1对Ⅰ型胶原基因表达的调节,可以更深入地认识肝纤维化的病理生物学机制,有助于对肝纤维化的发生发展进行防治。     

丹参单体IH764-3对胆总管结扎大鼠胶原降解的作用及其机制

目的 研究丹参单体IH764-3抗胆总管结扎大鼠肝纤维化作用,观察其对胶原降解的影响。方法 40只大鼠随机分为对照组、模型组及IH764-3预防组。预防组腹腔注射IH764-3 40mg·kg~(-1)·d~(-1),另两组注射等剂量生理盐水,共14天。应用免疫组织化学方法检测TIMP-1、TGF-β_1。结果 胆总管结扎大鼠14天后有明显肝纤维化形成,IH764-3可使肝组织内羟脯氨酸减少40.6％,同时TIMP-1、TGF-β_1蛋白质表达分别下降36.2％和32.5％。结论 丹参单体IH764-3可以减轻胆总管结扎大鼠肝纤维化程度,其抗肝纤维化作用机制之一是抑制TIMP-1和TGF-β_1蛋白的表达。     

转化生长因子β_1基因沉默脂肪干细胞移植对盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化和心肌细胞的影响研究

目的探讨转化生长因子β_1(TGF-β_1)基因沉默脂肪干细胞(ADSCs)移植对盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化和心肌细胞凋亡的影响。方法本实验于2015年6月—2016年7月在陕西省医学实验动物中心实验室完成。体外培养ADSCs,构建TGF-β_1为靶向基因的mRNA和siRNA表达质粒,病毒转染至ADSCs,取第三代ADSCs进行慢病毒转染,转染时分为空白组、对照组、TGF-β_1-siRNA转染组。采用Western blot法检测基因转染后第3天和第14天不同基因转染组ADSCs TGF-β_1蛋白表达情况。选取80只SPF级雄性Dahl盐敏感大鼠构建盐敏感性高血压大鼠模型,采用随机数字表法分为正盐组、高盐组、ADSCs组及TGF-β_1基因沉默组,每组20只。正盐组给予0.3%氯化钠饮食;高盐组给予8%氯化钠饮食;ADSCs组予8%氯化钠饮食6周后尾静脉移植ADSCs,持续3 d;TGF-β_1基因沉默组大鼠给予8%氯化钠饮食6周后尾静脉移植TGF-β_1基因沉默ADSCs,持续3 d。细胞移植2周后,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测4组大鼠心肌组织TGF-β_1mRNA表达情况,采用Western blot法检测4组大鼠心肌组织TGF-β_1蛋白表达情况,采用超声心动图检测4组大鼠左心室射血分数(LVEF)和缩短分数(FS),并计算左心室质量指数(LVMI),VG染色测算胶原容积积分,HE染色观察心肌细胞形态,荧光显微镜下观察心肌组织中CM-Dil标记的ADSCs分布情况,采用TUNEL法检测4组大鼠心肌细胞凋亡情况。结果 (1)荧光显微镜下显示,CM-Dil标记的ADSCs呈橘红色,标记率为97%。(2)基因转染后第3天和第14天空白组和对照组ADSCs TGF-β_1蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),而TGF-β_1-siRNA转染组ADSCs TGF-β_1蛋白相对表达量低于空白组和对照组(P<0.05)。(3)细胞移植2周后,TGF-β_1基因沉默组大鼠心肌组织TGF-β_1mRNA、蛋白相对表达量低于正盐组、高盐组及ADSCs组,ADSCs组大鼠心肌组织TGF-β_1mRNA、蛋白相对表达量低于正盐组、高盐组,高盐组大鼠心肌组织TGF-β_1mRNA、蛋白相对表达量高于正盐组(P<0.05)。(4)细胞移植2周后,高盐组和ADSCs组大鼠LVEF和FS低于正盐组和TGF-β_1基因沉默组,LVMI高于正盐组和TGF-β_1基因沉默组(P<0.05);ADSCs组和TGF-β_1基因沉默组大鼠LVEF和FS高于高盐组,LVMI低于高盐组(P<0.05);正盐组与TGF-β_1基因沉默组大鼠LVEF、FS及LVMI比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(5)细胞移植2周后,高盐组、ADSCs组和TGF-β_1基因沉默组大鼠胶原容积积分高于正盐组,ADSCs组和TGF-β_1基因沉默组大鼠胶原容积积分低于高盐组,TGF-β_1基因沉默组大鼠胶原容积积分低于ADSCs组(P<0.05)。(6)HE染色结果显示,细胞移植2周后高盐组大鼠心肌出现明显纤维化且巨噬细胞浸润明显增多,ADSCs组大鼠心肌纤维化较轻,TGF-β_1沉默组大鼠心脏纤维化最轻、巨噬细胞浸润最少。(7)荧光显微镜下显示,细胞移植2周后正盐组和高盐组大鼠心肌组织中未发现CM-Dil标记的ADSCs,TGF-β_1基因沉默组大鼠心肌组织中CM-Dil标记的ADSCs多于ADSCs组(P<0.05)。(8)细胞移植2周后,正盐组大鼠心肌细胞凋亡率为0,ADSCs组和TGF-β_1基因沉默组大鼠心肌细胞凋亡率低于高盐组,TGF-β_1基因沉默组大鼠心肌细胞凋亡率低于ADSCs组(P<0.05)。结论TGF-β_1基因沉默ADSCs移植能有效减轻盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化,减少心肌细胞凋亡。     

复方益气活血化瘀中药对大鼠肝纤维化组织中胶原和转化生长因子β1表达的影响

目的应用二甲基亚硝胺（DMN）建立肝纤维化大鼠模型,研究以黄芪、丹参、三七为主的益气活血化瘀复方中药抗肝纤维化的作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药干预组。采用DMN腹腔内注射的方法建立肝纤维化大鼠模型;根据病理学检查评价各组动物肝纤维化程度;应用RT-PCR检测各组肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA水平;应用免疫组化检测各组肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1的表达。结果中药干预组大鼠肝纤维化程度、肝组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA水平,以及肝组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原和TGF-β1的阳性表达均分别较模型组显著减轻与下降。结论益气活血化瘀复方中药能明显减轻肝组织病理改变和肝纤维化程度,抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1表达是其抗肝纤维化的部分机制。     

氧自由基对转化生长因子-β1表达的影响及其在胰腺纤维化中的作用

目的研究氧自由基在慢性胰腺炎发病过程中对转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响及其促胰腺纤维化作用。方法每周2次在大鼠腹腔内注射不同剂量二乙基二硫代氨基甲酸盐(DETC),分别于注射后1.5h,24h,48h,72h,2周,3周,4周,6周将大鼠处死。检测胰腺中超氧歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和丙二醛(MDA)含量以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),结蛋白(Desmin)。胶原Ⅰ,Ⅲ(CoⅠ,Ⅲ).转化生长因子β1(TGF-β1),纤维连接蛋白(FN)的表达。结果注入DETC后,胰腺组织内SOD、GSH-PX活性下降,MDA含量升高,提示氧自由基增多,3周后出现较明显纤维化,6周达高峰,与对照组有显著差异(P<0.001)。2周起胰腺内α-SMA,Desmin,TGF-β1呈阳性表达,提示胰腺星状细胞(PSCs)的激活。CoⅠ,CoⅢ,FN的表达2周时弱,4周时强。RT-PCR半定量测定2周时TGF-β1mRNA、FNmRNA水平高于对照组(P<0.001),4周和6周时达高峰。结论氧自由基可能通过激活PSCs刺激TGF-β1的分泌,后者促使了胰腺纤维化的形成。