SAW对S180小鼠的体内免疫疗效及其机制的研究

以小鼠可移植性实体型Ｓ１８０为模型，ＣＰ为阳性对照，通过１２５Ｉ－ｕｄＲ标记肿瘤细胞ＤＮＡ释放试验，观察了ＳＡＷ直接体内注射对该带瘤小鼠的免疫疗效、腹腔巨噬细胞细胞毒和脾脏ＮＫ细胞细胞毒活性的影响。结果表明ＳＡＷ能明显增强带瘤小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒和ＮＫ细胞细胞毒活性，这与ＳＡＷ的抗肿瘤效应呈一致关系。结果提示ＳＡＷ体内注射的抗肿瘤机制与其增强巨噬细胞细胞毒和ＮＫ细胞细胞毒活性有关。     

雷公藤内酯醇对人宫颈癌细胞的凋亡诱导效应

目的:探讨腺病毒介导AFP基因修饰的DC(AFP-DC)瘤苗经不同途径免疫后机体抗肿瘤免疫应答反应.方法:采用皮下注射、静脉注射和瘤体注射三种途径回输AFP-DC瘤苗,比较观察AFP-DC瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用,应用4h51cr释放杀伤实验、T细胞与NK体内剔除实验等方法,观察AFP-DC瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用及保护性免疫反应.结果:皮下注射AFP-DC瘤苗治疗效果在抑制肿瘤生长、延长小鼠存活期方面都明显优于瘤体内注射或尾静脉注射(P＜0.05),AFP-DC瘤苗体内能更有效地诱导特异CTL细胞毒活性,能使免疫动物产生一定的免疫保护作用,抵抗肿瘤细胞的再攻击.在AFP-DC瘤苗诱导抗肿瘤免疫排斥反应过程中,必需有CD4 T和CD8 T细胞的参与;而在其效应阶段,则依赖于CD8 T细胞的参与,CD4 T细胞为非必需;在免疫诱导及效应阶段剔除NK细胞对抗肿瘤免疫应答无明显影响.结论:皮下注射AFP-DC瘤苗能有效诱导机体产生抗肿瘤免疫反应,为DC介导的肝癌免疫治疗开辟了新的途径.     

瘤内/瘤周注射巨噬细胞集落刺激因子或(和)干扰素γ基因转染的巨噬细胞对肿瘤的治疗作用

目的观察巨噬细胞集落刺激因子（ＭＣＳＦ）和干扰素γ（ＩＦＮγ）基因单独或联合转染的巨噬细胞（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，Ｍ）对局部黑色素瘤的治疗效果及相关免疫机理。方法荷瘤小鼠经基因转染的巨噬细胞治疗后，观察其长期存活期并检测其体内抗肿瘤免疫功能。用４小时５１Ｃｒ释放法检测荷瘤小鼠脾细胞自然杀伤细胞（ＮＫ）、细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）活性，间接ＭＴＴ法检测荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的杀伤活性，常规方法检测脾细胞诱导上清中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、白细胞介素２（ＩＬ２）、γ干扰素（ＩＦＮγ）活性，局部肿瘤经治疗后行常规病理分析。结果经ＩＦＮγ基因及联合基因转染的巨噬细胞治疗后的荷瘤小鼠有２５％能长期存活，体外诱导的ＣＴＬ和小鼠腹腔巨噬细胞杀伤活性显著增强，脾细胞经诱导产生的细胞因子有不同程度的增加，与对照组相比差别显著。常规病理显示，ＭＣＳＦ和ＩＦＮγ联合基因转染的巨噬细胞治疗的小鼠肿瘤局部有大量的淋巴细胞浸润。结论ＭＣＳＦ和ＩＦＮγ基因转染的巨噬细胞瘤内瘤周注射对肿瘤有较好的治疗效果，其机制除了与巨噬细胞在局部直接接触杀伤瘤细胞有关外，宿主抗肿瘤免疫功能的增强亦起了重要的作用     

北豆根提取物PE2成分的体内抗肿瘤作用及其免疫学调节机制研究

背景与目的探讨中药北豆根提取物的体内抗肿瘤作用和免疫学调节作用机制。材料与方法采用水提取、醇提取及水回流等方法对北豆根进行成分分离。采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethy-2-thiazoly)-2,5-diphenyl-2-tetrazoliumbromide,MTT]显色法分析北豆根提取物对肿瘤细胞和淋巴细胞增殖反应的作用。采用中性红法检测了北豆根提取物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。采用皮下接种肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型,采用北豆根提取物灌胃,观察北豆根提取物对小鼠的体内抗肿瘤作用和免疫调节作用。结果北豆根乙醇提取物(RME)比水提取物(RMW)具有更强的抑瘤活性,醇提取物中的PE2成分可能是北豆根的主要抗肿瘤活性部分。经北豆根提取物PE2灌胃后的荷瘤小鼠,与对照组荷瘤小鼠相比其胸腺指数、脾指数明显增加;腹腔巨噬细胞吞噬功能和细胞因子分泌功能增强;NK细胞活性增加;一般情况较对照组小鼠好;肿瘤生长缓慢而局限;生存期明显延长。结论PE2是北豆根抗肿瘤作用的主要有效部分,PE2体内也具有抗肿瘤作用,能通过增强荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬功能,增强NK细胞和小鼠脾细胞的活性,而发挥抗肿瘤作用。     

鼠白细胞介素-12质粒联合小剂量环磷酰胺对荷瘤小鼠NK及巨噬细胞功能的影响

目的探讨联合应用鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒(pCmIL-12)和小剂量环磷酰胺(CTX)治疗小鼠黑色素瘤的效果以及对NK和巨噬细胞功能的影响.方法荷瘤小鼠经肌注pCmIL-12和皮下注射CTX后,观察肿瘤大小,测定小鼠NK细胞杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及NO释放量.结果肿瘤重量、NK和巨噬细胞杀伤活性及NO释放量的结果提示pCmIL-12与CTX合用具有交互(协同)作用.结论联合应用pCmIL-12质粒和小剂量环磷酰胺有较明显的抑瘤作用,并可增强荷瘤小鼠NK及巨噬细胞的功能.     

灵芝多糖对小鼠肿瘤的抑制作用及免疫指标的观察

目的:观察灵芝多糖的抑瘤作用及对小鼠免疫系统的影响。方法:MTT法测定灵芝多糖的细胞毒作用。小鼠荷瘤建立动物模型,观察灵芝多糖对荷瘤小鼠的存活期、抑瘤率和免疫系统的影响。结果:灵芝多糖对肿瘤细胞无直接杀伤作用(P<0.005),体内可延长荷瘤小鼠的存活期;治疗组小鼠的NK细胞活性、淋巴细胞转化率、血清中TNF蛳α均有显著提高。结论:灵芝多糖抗肿瘤作用是通过机体的免疫系统介导的。     

β-胡萝卜素增强小鼠对同基因肿瘤的免疫应答

给接种 B_(16)黑色素瘤的 C57BL/6小鼠行β-胡萝卜素灌胃,每日10mg/kg。20天后,取小鼠脾细胞和B_1~6黑色素瘤细胞混合注入健康 C57BL/6小鼠皮下,观察肿瘤生长情况并检测脾细胞增殖活性和腹腔巨噬细胞的细胞毒活性。实验组和对照组小鼠肿瘤大小无显著性差异,但实验组肺部瘤转移灶数明显低于对照组;实验组脾细胞增殖活性和巨噬细胞细胞毒活性明显高于对照组。提示β-胡萝卜素可增强小鼠的抗肿瘤免疫功能。     

rIL-6抗癌机理初探(Ⅱ)-rIL-6对小鼠脾脏NK细胞和CTL细胞体内外调节效应

为了探讨rIL-6对NK和CTL细胞的调节效应．我们进行了rIL-6对小鼠脾脏NK细胞和CTL细胞功能影响的体内外实验研究，实验采用C57BL/6荷瘤或正常小鼠，给予rIL-6或生理盐水，连续10天，第15天取小鼠脾脏进行NK细胞或CTL细胞的活性测定。结果表明：(1)rIL-6在体外对NK细胞在小剂量时有促进作用，在大剂量时有抑制作用；对CTL细胞则表现出随IL-6剂量的增加，促进作用明显增强；(2)rIL-6对正常鼠体内NK细胞杀伤活性有促进怍用；(3)对荷瘤鼠体内NK细胞和CTL细胞杀伤活性均有明显的促进作用；(4)rIL-6对荷瘤所致NK功能下降具有预防作用。提示rIL-6对小鼠NK细胞和CTL细胞杀伤活性的促进效应可能是rIL-6发挥抗癌作用的一个途径。     

中药复方的抑瘤和免疫调节作用的初步研究

本文观察了由姜黄、淫羊藿等八味组成的中药复方对小鼠移植瘤S_180的抗肿瘤作用。以水煎液灌胃.连续10天,其抑瘤率为68.35%(P<0.001)这种抑瘤作用可被台盼蓝所所消除,注射台盼蓝的瘤重明显大于对照组,进一步测定其NK细胞和LAK细胞活性.该药能明显提高NK细胞和LAK细胞活性,分别为40.72%、45.5%。本文提示:该复方能有效地抑制S_180的生长.可通过巨噬细胞系统激活。提高NK细胞和LAK细胞活性而起作用。     

黄芪,女贞子水煎剂对小鼠巨噬细胞细胞毒功能的影响

以小鼠腹腔巨噬细胞介导的肿瘤细胞溶解作用(MTC)和抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(AD-CC)为指标,观察扶正中药黄芪、女贞子水煎剂对小鼠巨噬细胞细胞毒活性的影响。结果表明,黄芪、女贞子水煎剂对受环磷酰胺作用的免疫功能抑制小鼠细胞毒活性有增强作用。     

Nesosteine对宿主自然防御功能的影响(摘要)

Nesosteine(CO1177, Neso)系一新合成具有免疫调节作用的化合物。本文研究了Neso对巨噬细胞和天然杀伤细胞(NK)细胞毒作用的影响。实验动物用C_3H/HeN小鼠和Fisher大鼠。方法为体内给药体外用同位素释放法测定腹腔肺的巨噬细胞和脾,肺的NK对靶细胞的杀伤作用。巨噬细胞     

白术多糖通过激活免疫细胞抑制小鼠结肠癌HT-29 细胞原位移植瘤的生长

目的: 探究白术多糖(polysaccharide of atractylodes macrocephala, PAM)对小鼠结肠癌细胞移植瘤生长的抑制作用及其机制。方法：将荧光酶标记的1×107个结肠癌细胞（HT-29）注射到小鼠结肠浆膜层,建立结肠癌细胞原位移植瘤模型小鼠。待瘤体积达到约230 mm3时,小鼠采用连续10 d 灌胃给药30 mg/kg PAM（PAM组）或生理盐水（对照组）;通过肿瘤活体成像技术检测PAM对小鼠体内结肠癌细胞生长的影响,通过流式细胞术检测PAM对瘤体组织中粒细胞、树突状细胞以及巨噬细胞的MHCII以及IL-12 的表达、淋巴细胞的激活以及CD4+和CD8+细胞分泌IFN-γ 功能的影响。结果：PAM可显著抑制结肠癌原位移植瘤模型小鼠体内结肠癌细胞生长（P<0.01）。PAM可通过增加MHCII 和IL-12 在树突状细胞和巨噬细胞中的表达水平（均P<0.01）,PAM可显著增加瘤体组织中CD8+细胞、NK细胞、CD44+/NK细胞和CD44+/CD4+细胞比例以及提升单位组织体积中CD8+细胞和NK细胞细胞数量（均P<0.01）,PAM可显著增加CD4+及CD8+细胞分泌IFN-γ 的能力（均P<0.01）。结论：PAM可通过激活结肠癌模型小鼠原位移植瘤组织中免疫细胞来抑制肿瘤生长。     

肺癌和食管癌外周血NK与ADCC活性的变化

自然杀伤细胞(NK细胞)在没有抗原的刺激下,无需抗体和补体的参与,能在很短的时间内,直接杀伤瘤细胞。而抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)必须在特异的抗体参与下,效应细胞才能对靶细胞起细胞毒作用,杀伤靶细胞。 NK和ADCC活性是重要的细胞免疫反应之一。对病毒感染、肿瘤、移植器官的排异反应和自身免疫性疾病的研究、诊治有着     

联合过继免疫细胞输注小鼠后DC、NK分布的研究

目的：观察自然杀伤（NK）细胞／树突状细胞（DC）联合过继免疫治疗小鼠皮下黑色素瘤时效应细胞在荷瘤小鼠体内的分布。方法：建立C57BL/6小鼠皮下黑色素瘤模型。体外培养增殖小鼠NK细胞、DC并标记，以不同比例混合两种细胞，分别以静脉注射和瘤内注射的方式回输荷瘤小鼠体内．于注射后不同时间点取肿瘤、肝、脾、肺组织进行切片，观察各组织中效应细胞的数量及分布。结果：静脉注射组NK细胞、DC主要分布在肿瘤微循环及实质组织中，各时间点NK细胞、DC的浸润数量有显著差异（P〈0．01），注射后4h浸润的效应细胞最多．12h最少，在脾脏中见少量NK细胞的分布，在肝脏及肺组织中偶见。瘤内注射组NK细胞、DC主要分布在肿瘤实质组织中，各观察时间点NK细胞、DC的浸润数量有显著差异（P〈0，01）．注射后1h浸润的效应细胞最多，12h最少，在肝、脾、肺组织中未见NK细胞、DC分布。两种注射方式下按不同比例混合进行NK细胞、DC的过继治疗，各组间差异具有显著性（P〈0.01），混合注射组效应细胞在肿瘤组织内的浸润多于单独注射组。结论：NK细胞、DC免疫过继后能够“靶向性”聚集在肿瘤周围及肿瘤内部，对肿瘤具有治疗作用．NK细胞、DC联合过继免疫治疗效果优于单独注射，提示NK细胞、DC联合输注可能成为肿瘤生物治疗的新模式。     

肿瘤生长时巨噬细胞反应的体液调理

过去人们曾强调巨噬细胞在宿主体内有抗癌作用,事实证明它确对肿瘤的生长有监护机制。动物实验发现在瘤细胞接种之前先刺激巨噬细胞系统能增强宿主的抗瘤能力,如降低巨噬细胞的功能,则宿主对瘤易感。Halpern 等(1963)曾观察小鼠感染卡介苗后,可增强抗肉瘤 J 的能力,这与巨噬细胞系统活性的增强有关,卡介苗刺激巨噬细胞系统,使其在宿主体内发挥抗癌作用。同样,Walmark 等(1974)发现短小棒状杆菌的抑瘤生长也需有活性巨     

体内IL—2基因转染小鼠腹腔巨噬细胞的抗肿瘤作用

目的：研究ＩＬ２基因体内转染小鼠腹腔巨噬细胞，探讨基因的表达，抗肿瘤作用及其机理。方法：采用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法，将ｐＲＥＰ８ＩＬ２真核表达质粒直接注射至小鼠腹腔，转染腹腔巨噬细胞。结果：ＩＬ２基因可成功地转染腹腔巨噬细胞（ＭФ），并表达基因产物，能有效地抑制肿瘤的生长，转基因ＭФ及其表达产物可使脾ＮＫ活性和内源性ＬＡＫ活性增强，能增加腹腔ＭФ细胞毒活性并使ＭФ分泌ＴＮＦ、ＩＬ１和ＮＯ的水平增加。结论：本实验能有效地激活机体的非特异性免疫功能，从而发挥抗肿瘤效应。     

未活化巨噬细胞对杂交瘤/瘤细胞作用的研究

 用正常Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞培养上清液（MφSN）培养杂交瘤细胞，瘤细胞，正常细胞，用台盼兰染色法。（³H）-TdR掺入法，ELISA法观察Mφ-SN中能够刺激杂交瘤/瘤细胞生长的活性物质，对该物质的生物活性进行探讨。结果表明：Mφ-SN中含有刺激杂交瘤/瘤细胞生长的活性物质，该物质不能使ConA激活的T细胞增殖，也不能刺激C₃H，/HeJ小鼠胸腺细胞增殖，其生物活性不同于白细胞介素-1（IL-1），IL6。     

腹腔内注射IL-2重组腺病毒、IL-3重组腺病毒增强化疗药物抗白血病作用的研究

对实验性白血病小鼠模型大剂量化疗后,直接腹腔注射IL-2重组腺病毒(Ad-IL-2)和/或IL-3重组腺病毒(Ad-IL-3),发现腹腔注射对照腺病毒载体小鼠虽经大剂量化疗,仍有大量白血病细胞浸润至骨髓、血管、肝脏及脾脏。而腹腔注射Ad-IL-2或Ad-IL-3组小鼠肿瘤生长缓慢,注射Ad-IL-2组小鼠脾NK、CTL活性显著提高,注射Ad-IL-3组小鼠腹腔巨噬细胞数量及杀伤活性明显提高,联合应用Ad-IL-2,Ad-IL-3组小鼠抗白血病作用最为明显,骨髓中虽然仍见白血病细胞,但可见较多正常造血细胞,且肝、脾中未见白血病细胞浸润。表明腹腔内注射Ad-IL-2和Ad-IL-3可显著增强大剂量化疗对白血病的治疗效果。     

IL—2和（或）IL—3基因治疗对大剂量化疗后小鼠免疫功能恢复的影响

目的探讨ＩＬ－２、ＩＬ－３对化疗后小鼠免疫功能恢复的影响。方法正常小鼠腹腔注射大剂量环磷酰胺２４小时后,直接腹腔注射ＩＬ－２重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－２）和（或）ＩＬ－３重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－３）,观察小鼠腹腔巨噬细胞数量、杀伤活性、Ｉａ抗原表达、脾细胞增殖及ＮＫ细胞杀伤活性。结果腹腔注射Ａｄ－ＩＬ－３组小鼠,腹腔巨噬细胞数量明显增加,杀伤活性及Ｉａ抗原表达显著增强。腹腔注射Ａｄ－ＩＬ－２组小鼠,脾细胞增殖能力显著升高,ＮＫ细胞杀伤活性增强,但对小鼠腹腔巨噬细胞无激活作用。联合应用Ａｄ－ＩＬ－２及Ａｄ－ＩＬ－３组小鼠,腹腔巨噬细胞、脾细胞、ＮＫ细胞均被激活。结论腹腔直接注射Ａｄ－ＩＬ－２和Ａｄ－ＩＬ－３可促进化疗后小鼠免疫功能的恢复。     

聚肌胞（PolyI：C）抗肿瘤作用和免疫调节作用

本文观察了国产聚肌胞(polyI:C)在小鼠体内抗瘤作用和免疫调节功能。结果表明,5mg/kg polyI:C对小鼠肉瘤180,Lewis肺癌和小鼠肝癌抑瘤率分别为37.3％、61.6％和44.2％。在免疫调节作用中,polyI:C在体内外均增加NK,Mφ和抗体依赖的Mφ活性。注射polyI:C后的小鼠血清较正常小鼠血清在体外对P_(388)细胞有较强的抑制DNA合成作用。polyI:C本身无明显细胞毒作用(100μg/ml抑制P_(388)细胞~3HTdR掺入率为16.5％)。实验提示polyI:C通过免疫调节发挥抗肿瘤作用。