人工肝生物反应器的研究现状

体外人工肝支持系统 (简称人工肝 )是国外近年来发展起来为肝衰竭患者提供体外肝功能支持的装置 ,这一技术的出现与发展为肝衰竭的治疗开辟了新途径。在各类人工肝装置中 ,以体外培养肝细胞作为生物成分的新型生物人工肝被认为是最有前途的 ,己在动物实验及临床应用中取得了较好的疗效[1] 。其基本原理是将体外培养增殖的肝细胞 (人肝细胞、哺乳动物肝细胞或肝细胞株 )置于体外循环装置 (生物反应器 )中 ,患者血液 (血浆 )流过生物反应器时 ,通过容器内的纤维素半透膜或直接与肝细胞进行物质交换 ,从而达到人工肝支持的目的。生物反应器是生…     

体外生物人工肝系统对暴发性肝衰竭兔的支持作用

目的探讨培养肝细胞用于生物人工肝及其作为肝移植辅助支持手段的可能性。方法以培养人肝细胞和中空纤维反应器为主要材料构成体外生物人工肝系统,对Ｄ-氨基半乳糖诱导的暴发性肝衰竭（ＦＨＦ）免进行人工肝支持实验。结果尽管两组实验动物的存活时间没有明显差异,但支持治疗组兔的血清转氨酶、总胆红素和肌酐水平均低于对照组,肝组织病理检查见肝细胞坏死程度明显轻于对照组,实验所用肝细胞保持较好的活力和贴壁能力。结论所用体外生物人工肝支持系统已发挥出培养肝细胞的生物作用,能够部分代偿ＦＨＦ兔的肝脏功能。【关键词】##4人工肝;;支持;;暴发性肝衰竭;;兔     

体外生物人工肝对无肝模型犬的支持效果

我们用悬浮高密度大量培养的肝细胞与中空纤维生物反应器及由血液透析仪改装的辅助循环装置共同构成一种体外生物人工肝支持系统（ＥＢＬＳＳ），对无肝模型犬进行人工肝支持实验，以期推动我国生物人工肝的研究，为肝衰竭的治疗开辟新的途径。一、材料与方法１．ＥＢＬＳ...     

人工肝生物成分的研究进展

体外生物人工肝支持系统是用以为肝衰竭患者提供体外肝功能支持的装置。肝细胞是其主要生物成分 ,该系统的支持作用主要来源于肝细胞的生物代谢功能。近几年来 ,国外在肝细胞作为人工肝生物成分的有关研究方面取得较大进展 ,现就这一领域的主要进展作一综述。一、肝细胞来源1.同种肝细胞 :理论上讲 ,人肝细胞最为理想[1] ,但成人肝仅用于肝移植 ,因而成人肝细胞来源困难。有人提出将不适于肝移植的成人肝及肝移植时剩余的肝叶碎片收集起来 ,建立成人肝细胞“库”以资利用[2 ] ,但其来源仍然有限。胎肝细胞特别是较大月龄胎肝分离出的肝细胞 …     

猪肝细胞用于生物人工肝的研究进展

异种动物肝细胞一直是国外生物人工肝研究的主要细胞 ,其中猪肝细胞已成为生物人工肝应用最多的肝细胞。由于猪肝细胞的代谢功能 (细胞色素P4 5 0含量及其代谢能力 )与人工肝细胞最为接近 ,其混合氧化酶的高水平表达正是代偿肝衰竭解毒功能的重要基础〔1〕,故猪肝细胞被公认是目前生物人工肝较好的细胞材料。近年来 ,在大量实验研究的基础上 ,猪肝细胞型生物人工肝已进入Ⅱ /Ⅲ期临床研究阶段〔2〕。一、猪肝细胞用于生物人工肝的优缺点在人肝细胞来源极为困难的情况下 ,猪肝细胞在生物人工肝的实验研究和临床实验中起着重要作用〔3〕,占据…     

肝细胞的低温储存

肝细胞移植和应用体外培养肝细胞生物人工肝支持在大量的动物实验和一些有限的临床实验中获得良好的效果,成为有前途的肝病治疗途径。但基于肝细胞的这些治疗方法在进入临床前仍然有许多问题需要解决。其中之一为肝细胞的低温贮存。若有一实用可靠的低温储存技术,建立一个肝细胞库,危重患者随时都能得到大量高活率、有功能的肝细胞;肝细胞移植和生物人工肝技术就能普遍推广。目前较好的肝细胞低温储存液仍为肝器官保护液ＵＷ液,价值昂贵、较长期储存肝细胞的效果也不理想。我们研制一种建立于肝细胞培养基基础上的新型肝细胞低温保存液…     

猪肝细胞用于生物人工肝的安全性问题

人工肝为肝衰患者过渡到肝移植的桥梁,而生物人工肝更符合生理需要.目前进入临床实验的生物人工肝多以猪肝细胞为材料,本文对猪肝细胞源性生物人工肝脏辅助系统的概念,猪肝细胞应用的潜在危险,猪内源性逆转录病毒的相关问题,以及防止猪病原体传播的方式等进行了综述.     

三明治构型培养肝细胞——一种潜在的生物人工肝单位

目的：探索一种新的生物人工肝单位。方法：双层胶原三明治构型培养肝细胞,并观察其形态分化的特点及蛋白合成功能,并与传统单层胶原培养肝细胞相比较。结果：三明治构型培养的肝细胞48h后形成肝板样结构,伴胆小管网络,肝细胞蛋白分泌功能稳定、持续增高,生存时间达2个月之久;而对照组基本没有形成肝板样结构,蛋白分泌功能差,7d后基本消失,细胞趋向死亡。结论：三明治构型培养的肝细胞在体外重建细胞极性,形态及功能更接近体内肝细胞,是一种潜在的生物人工肝单位。     

肝衰竭动物模型的制备及其现状

生物人工肝是一种新型体外人工肝支持系统,它以培养肝细胞为材料,旨在充分代替肝脏的生物功能,为急性肝功能衰竭(ALF)患者提供可靠的过渡支持治疗[1].各种类型的生物人工肝研究都离不开体外肝支持的动物实验,合适的动物模型是其性能评价和进一步临床应用的重要条件.     

猪肝细胞用于生物人工肝的安全性问题

人工肝为肝衰患者过渡到肝移植的桥梁,而生物人工肝更符合生理需要.目前进入临床实验的生物人工肝多以猪肝细胞为材料,本文对猪肝细胞源性生物人工肝脏辅助系统的概念,猪肝细胞应用的潜在危险,猪内源性逆转录病毒的相关问题,以及防止猪病原体传播的方式等进行了综述.     

肝衰竭动物模型的制备及其现状

生物人工肝是一种新型体外人工肝支持系统，它以培养肝细胞为材料，旨在充分代替肝脏的生物功能，为急性肝功能衰竭(ALF)患者提供可靠的过渡支持治疗。各种类型的生物人工肝研究都离不开体外肝支持的动物实验，合适的动物模型是其性能评价和进一步临床应用的重要条件。     

生物人工肝

生物人工肝李铎孙家邦肝病是常见病、多发病，其中１０％的患者死于急性肝功能衰竭。这些患者若在其肝细胞再生到足以支持肝功能前有暂时的人工肝支持，将得以存活。随着肝脏移植技术的提高，许多肝病患者在行肝移植前等待供体时也需要人工肝支持。另外若有理想的人工肝支...     

生物人工肝的细胞培养及反应器进展

生物人工肝支持系统(BALSS)由肝细胞、专用反应器和体外循环系统三大要素共同构建。其中生物活性部分的体外培养技术与反应器设计的优劣是影响BALSS性能的重要因素。为使培养肝细胞的数量、活性和功能更理想,近年各种培养技术及其相应反应器均从各个方面改进以期实现"拟肝化培养"。现就目前常用于BAL的肝细胞培养方法及其相应反应器的现状及进展进行综述。     

生物人工肝人肝细胞系进展

大多数生物人工肝 (bioartificialliver,BAL)装置以原代猪肝细胞作为生物成分 ,然而 ,由于异种移植相关危险性 ,猪肝细胞终究不是最佳选择。人肝细胞系无论哪方面都具有比动物肝细胞要好的特性 ,所以是应用于BAL的候选细胞。肿瘤来源细胞系C3A和HepG2具有多种肝细胞功能 ,但缺乏一些特异的肝功能 ,如氨解毒和尿素生成等。永生化肝细胞可能提供更好的BAL应用前景。另一有希望的方法是应用胚胎或成人干细胞。啮齿动物干细胞已经可在体外定向分化为肝细胞 ,这些体外诱导方法可能也适用于人干细胞。但是 ,在人肝细胞系和分化的干细胞成功…     

生物人工肝支持系统生物反应器的建立及体外转流试验

目的 探讨由微载体培养的L－02人肝细胞和中空纤维舱构成的生物反应器的生物效能。方法 采用微载体培养高浓度L－02人肝细胞，同时使用中空纤维型生物反应器和血泵等共同构成生物人工肝系统。在体外转流试验中观察循环液中游离胆红素、葡萄糖、白蛋白、谷草转氨酶浓度的变化以及实验对肝细胞的影响等。结果 L－02肝细胞能很好地粘附于cytodex 3微载体上形成微载体诱导的肝细胞聚集体；移入生物反应器内进行体外循环，4h后可见循环液中游离胆红素和葡萄糖浓度显著降低，分别为27.1μmmol/L和1.75mmol/L；白蛋白含量明显增加，为15．21mg/L；肝细胞仍有较高活力达75％。结论 本实验所建立的生物反应器作为生物人工肝系统的核心组件具备一定的生物合成和解毒代谢功能，为进一步建立混合型生物人工肝支持系统奠定了基础。     

人肝细胞的球体培养及其意义

人肝细胞的球体培养及其意义王英杰李梦东王宇明刘国栋丁健普通单层培养的肝细胞贴壁生长后，再次消化损伤大，活力显著下降，难以在肝细胞移植和生物人工肝等研究中广泛应用。作者在体外两步灌流分离肝细胞后，综合应用限制贴壁技术进行了人肝细胞球体悬浮培养的实验研究...     

球体培养人、猪肝细胞：一种理想的体外生物人工肝模式

体外培养的肝细胞有多种临床用途〔１〕。其中将肝细胞置入特殊的生物反应器,构建生物人工肝（ｂｉｏａｒｔｉｆｉｃｉａｌｌｉｖｅｒ,ＢＡＬ）支持系统有重要的临床价值。有研究报道,细胞聚集成多细胞的球体（ｓｐｈｅｒｉｏｄ）更类似于体内条件;并且可在有限的容积内高密度地培养肝细胞〔２〕。因此,我们实验构建人、猪肝细胞球体,并比较肝细胞普通培养与球体培养蛋白分泌功能的变化。１．材料和方法：试剂：Ｄｕｂｅｃｃｏ′ｓ磷酸盐缓冲液;Ｈａｎｋ′ｓ平衡盐;ＩＴＳ（胰岛素,运铁蛋白和硒,ｉｎｓｕｌｉｎ,ｔｒａｎｓｆｅｒ…     

一种新型生物人工肝系统的构建及体外功能评价

目的　构建一种新型生物人工肝 (BAL )系统 ,并评价其体外功能。方法　采用原位胶原酶循环灌注法分离中国实验用小型猪肝细胞。 1× 10 1 0 肝细胞在无血清培养基中经限制贴壁、旋转培养形成肝细胞球体后 ,注入BIOLIVA3A中空纤维管生物反应器的细胞环路 ,构建新型BAL系统。观察循环 6h内细胞环路中肝细胞总数和活率变化 ,并检测循环的细胞悬液和RPMI164 0培养基中ALT ,TBI和ALB的变化及进行利多卡因代谢试验。结果　循环 6h内肝细胞总数和活率无明显变化 ;新型BAL系统具有较强的清 (白 )蛋白合成和利多卡因代谢能力。结论　该新型BAL系统具有一定的肝支持作用 ,可望用于肝衰竭的治疗和为过渡到肝移植创造条件     

人肝细胞的分离、培养和冻存

人肝细胞是生物人工肝的最理想细胞来源，决定其治疗效果。本文就人肝细胞分离、培养及冻存进行综述。     

微载体培养L02人肝细胞应用于生物人工肝的初步研究

Ｌ0 2人肝细胞株组织学来源为人正常肝组织 ,具备一定正常肝细胞的生物功能。我们将高密度微载体培养的Ｌ0 2人肝细胞聚集体加入中空纤维生物反应器 ,构建简易体外生物人工肝装置并进行初步的应用研究。一、材料与方法1.材料 :Ｌ0 2人肝细胞株购于中国科学院上海细胞生物学研究所 ;Ｃｙｔｏｄｅｘ3微载体为Ｐｈａｒｍａｓｉａ公司产品 ;聚羟乙基异丁烯酸 (Ｐｏｌｙ ＨＥＭＡ )及ＤＭＥＭ、ＨａｍｓＦ12培养基均为Ｓｉｇｍａ公司产品。2 .Ｌ0 2人肝细胞的微载体培养 :( 1)取 1.4ｇＣｙｔｏｄｅｘ 3,水化处理[1] ;( 2 ) 12 %Ｐｏｌｙ ＨＥＭＡ…