颅神经嵴细胞及内胚层在鳃弓发育中作用的研究进展

颅神经嵴细胞在脊椎动物颌面部发育中起着主导作用。其衍生物包括牙齿及牙周组织、骨及衍生物、鳃弓神经节等。近来大量研究发现,颅神经嵴细胞在鳃弓模式形成中并非起决定性作用,而鳃弓的发育是颅神经嵴和内胚层交互作用的结果,内胚层在其中起着关键作用。为此,可以认为对颅神经嵴在鳃弓发育中的作用有了新的认识。     

颅神经嵴干细胞的发育生物学特征

颅神经嵴干细胞可特征性地分化成颌面部硬组织，形成上下颌骨及牙体（釉质除外）外周组织。颅神经嵴干细胞发生于早期胚胎神经板，具有多能分化，广泛迁移，模式预成，可塑性等生物学特性，在内外多因素调控下发生不同的分化。     

颅神经嵴细胞的迁移及特性

颅神经嵴细胞(CNCC)是动物胚胎发育过程中出现的一个暂时性、可迁移、多潜能细胞群,它对颅颌面发育具有十分重要的意义.起源于背侧神经管的CNCC,在多种因素的调控下,于胚胎内经过长距离的、精确的迁移.最终到达其目标区域,并进一步衍生为骨、软骨、神经、结缔组织等多种组织,构成了颅颌面大部分重要的软硬组织结构.因此,CNC...     

颅神经嵴细胞迁移的调控

<正>颅神经嵴细胞(cranial neural crest cells,CNCC)起源于背侧神经管,是一个对颅颌面部各种软硬组织的衍生都具有十分重要作用的细胞群。其产生后便向腹侧迁移,并向多种方向进行分化,如骨细胞、神经元细胞、神经胶质细胞、色素细胞、肌细胞等等[1],而这些细胞则进一步组织构建成颅颌面大部分的软硬结缔组织,因此,颅神经嵴细胞对于颅颌面发育具有十分重要的意义。颅神经嵴细胞迁移的启动、迁移     

颅神经嵴干细胞的发育生物学特征

颅神经嵴干细胞可特征性地分化成颌面部硬组织,形成上下颌骨及牙体(釉质除外)牙周组织。颅神经嵴干细胞发生于早期胚胎神经板,具有多能分化、广泛迁移、模式预成、可塑性等生物学特性,在内外多因素调控下发生不同的分化。     

小鼠颅神经嵴细胞的培养和特征

目的：在体外原代培养Balb/c小鼠胚胎的颅神经嵴细胞。为颅面部各种组织细胞的发育研究提供细胞来源。方法：采用胰酶消化法分离小鼠胚胎第8.5天的颅神经管，从小鼠颅神经管中游离出来的细胞即为颅神经嵴细胞，用免疫组织化学方法鉴定细胞的来源，并测定细胞的生长曲线。结果：成功地培养出小鼠的颅神经嵴细胞，其形态类似成纤维样细胞，免疫组化检测结果表明，神经特异性烯醇化酶（NSE）抗体染色结果阳性。细胞的群体倍增时间为43.65h。结论：原代培养的小鼠颅神经嵴细胞生长稳定，来源明确，是颅面部各种细胞的发育和分化研究中一种有用的工具。     

鸟苷酸交换因子Trio通过调控神经嵴细胞迁徙影响颅颌面发育

目的:研究鸟苷酸交换因子Trio在胚胎发育过程中对神经嵴细胞的影响.方法:将trio反义寡核苷酸通过显微注射入斑马鱼胚胎内,抑制其trio功能;在斑马鱼胚胎发育96 h时使用体式显微镜观察神经嵴细胞衍生物下颌骨的发育情况,120 h时通过阿尔辛蓝染色观察颅颌面部软骨的发育状况.利用转基因斑马鱼(sox10:EGFP)特...     

颅神经嵴细胞向成骨细胞表型分化的诱导实验

目的：观察颅神经嵴细胞（CNCC）在体外是否可以向成骨细胞表型进行诱导分化。方法：用标准的无血清培养液和含10^-8mol/L地塞米松、50mg/L左旋抗坏血酸和10mmol/L β－磷酸甘油钠的矿化诱导培养液对CNCC进行培养。15d后取两组细胞用于实验，观察两组间细胞形态，群体倍增时间、活力细胞数、碱性磷酸酶的活性和OC的含量等方面的变化。结果：诱导后的CNCC形态由成纤维样转变为多角形，细胞群体倍增时间延长，细胞活力数减少，碱性磷酸酶的活性和OC的含量升高。结论：CNCC在特定的矿化诱导培养液中，可以向成骨细胞表型分化。     

神经嵴细胞与颅颌面骨骼的发生

脊椎动物颅颌面骨骼的发育涉及一系列复杂的细胞和分子生物学机制,神经嵴细胞的迁移、位置确定及其相关分子信号调控是整个进程的中心,也是形成颅面部间充质的主要来源。该文对颅颌面骨骼发生中颅神经嵴细胞的生物学特性作一综述。     

诱导颅神经嵴细胞向第一鳃弓外胚间充质细胞分化的实验研究

目的 研究体外成纤维细胞生长因子8(FGF-8)对颅神经嵴细胞向第一鳃弓表型分化的影响，并确立其时相效应，为进一步探讨颅神经嵴细胞的牙颌向分化诱导提供实验依据。方法 组织块法无血清条件培养颅神经嵴细胞，通过同源盒基因Hoxa2原位杂交及波形蛋白免疫细胞化学染色，观察不同剂量FGF-8对颅神经嵴细胞迁出前、后及其向第一鳃弓外胚间充质细胞表型分化的影响。结果 迁出前颅神经嵴细胞在100μg／LFGF-8作用下，呈现Hoxa2阴性表达、波形蛋白阳性表达，迁出后颅神经嵴细胞诱导组及对照组Hoxa2、波形蛋白表达均为阳性。结论 FGF-8可诱导颅神经嵴细胞向第一鳃弓外胚间充质细胞表型分化，具有早期诱导时相性特征。     

颅神经嵴干细胞的体外培养及其多向分化潜能研究

目的　分离培养颅神经嵴干细胞,探讨其体外生物学特征,为进一步研究其牙、颌向分化提供细胞来源。方法　取小鼠胚胎颅段神经管,组织块法无血清条件培养获颅神经嵴干细胞,形态学、BurdU掺入及免疫细胞化学法鉴定其生物学性状。结果　原代培养的颅神经嵴干细胞为梭形成纤维样细胞,表现为克隆样生长、自我更新能力和多向分化能力等干细胞性状,且特异性标记物HNK-1呈阳性表达。结论　本研究成功地获取保持有多潜能干细胞性状的颅神经嵴细胞,为深入研究其牙、颌向分化奠定基础。     

rhBMP-2诱导颅神经嵴细胞向神经元分化的体外研究

目的；观察重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）对颅神经嵴细胞的诱导发化作用。方法：分别用不含rhBMP-2的无血清培养液和含有不同浓度rhBMP-2的培养液对颅神经嵴细胞进行培养。10d后，观察两组细胞的形态学差别，用胶质纤维酸性蛋白（GFAP），神经纤维细丝蛋白（NF），颅神经嵴细胞的特异性抗体P75等抗体进行免疫组化染色，鉴定细胞的分化状态，并计算NF阳性细胞数的百分比及进行统计分析。结果：在含有rhBMP-2的培养液中，颅神经嵴细胞的形态由成纤维细胞样向神经元样的表型进行转变，可见较长的细胞突起出现。NF染色结果阳性，而GFAP，P75染色结果阴性。50ng/mL组中，NF的阳性细胞数比其它浓度组明显增多，并有显著性差异（P＜0．05）。结论：rhBMP-2可以诱导颅神经嵴细胞向神经元进行分化，50ng/mL是其中最有效的诱导浓度。     

牙本质非胶原蛋白诱导颅神经嵴干细胞向成牙本质细胞表型分化

目的探讨颅神经嵴干细胞(CNCSC)用于牙再生研究的可行性,观察牙本质基质非胶原蛋白(DMNCP)对CNCSC的成牙本质样细胞表型分化的影响。方法小鼠神经管组织块无血清条件培养法获取颅神经嵴干细胞,以DMNCP体外诱导CNCSC的分化,形态学、免疫细胞化学、茜素红特染等方法,分别从Ⅰ型胶原表达、牙本质涎磷蛋白(DSPP)表达、碱性磷酸酶(ALP)活性及钙结节形成情况,鉴定CNCSC的成牙本质样细胞表型。结果诱导后的CNCSC呈现I型胶原、DSPP阳性表达,ALP活性增高,钙结节形成,具有成牙本质细胞表型特征。结论DMNCP具有诱导CNCSC向成牙本质细胞表型分化的作用,利用CNCSC开展牙再生研究是可行的。     

体外培养的神经嵴细胞的定向诱导分化

神经嵴细胞是发育中具有多向分化潜能的干细胞,可向神经元、神经胶质细胞、软骨细胞、平滑肌细胞和黑色素细胞等多方向分化。其分化受到多种因子和化学物质的影响,包括转录因子、生长因子、钙离子浓度和细胞外基质等。     

神经嵴细胞的特性和培养

在胚胎的发育中，神经嵴细胞是一组特殊的细胞群，可以分化为神经元、神经胶质细胞及多种非神经细胞，是机体内最具多能性的结构之一。在口腔颌面部的发育中，大部分组织如牙乳头、牙囊、牙周膜、骨组织、肌肉中所包含的细胞几乎无一例外地均来源于神经嵴细胞。因此，神经嵴细胞，尤其是     

血清对神经嵴细胞向神经胶质细胞分化诱导的体外研究

目的：探讨神经嵴细胞在含血清培养基中向神经细胞的自发分化过程，方法：取妊娠第8．5天的BALB／c胎鼠的神经嵴细胞，分别在无血清和含血清培养基中培养，免疫组化和透射电镜鉴定和观察神经嵴细胞的分化情况.结果：在无血清的培养基中，NSE染色结果阳性，透射电镜下未见神经内分泌颗粒，神经嵴细胞保持其原有的特性，在有血清的培养基中，神经嵴细胞自发分化，胶质纤维酸性蛋白（GFAP），神经特性烯醇化酶（NSE）和S－100染色阳性，透射电镜下可见大量的神经内分泌颗粒。结论：血清可使神经嵴细胞自发的向神经胶质细胞分化。     

视黄酸信号通路调控咽弓神经嵴影响斑马鱼牙齿发育的研究

目的研究视黄酸（RA）信号通路在斑马鱼颅神经嵴迁移至咽弓神经嵴对牙齿发育的影响。方法将野生型斑马鱼胚胎与转基因斑马鱼胚胎各分为3组,分别采用1×10^-7~6×10^-7 mol·L^-1梯度浓度的RA（RA处理组）、1×10^-7 mol·L^-1的4-二乙氨基苯甲醛（DEAB）（DEAB处理组）、与RA处理组相应浓度的二甲基亚砜（DMSO对照组）处理24 hpf胚胎9 h。制备dlx2a、barx1、dlx2b基因的反义探针,运用整胚原位杂交技术检测野生型斑马鱼48~72 hpf胚胎的dlx2a、dlx2b、barx1基因表达,荧光显微镜观察转基因斑马鱼4 dpf胚胎。结果获得3个基因的反义mRNA探针。与DMSO对照组相比,1×10^-7 mol·L^-1RA处理组barx1、dlx2a在咽弓神经嵴的表达明显增强,并有由咽弓神经嵴向后段咽弓牙齿萌出位点迁移的趋势,绿色荧光向周边咽弓扩散;4×10^-7 mol·L^-1 RA处理组胚胎致畸率和死亡率极高,3×10^-7 mol·L^-1 RA处理组1/3胚胎发育迟缓。DEAB处理组神经嵴发育不良,barx1、dlx2a表达降低,dlx2b在牙齿位点的表达有所延迟。结论 RA能够通过调控咽弓神经嵴发育过程,进而调控牙齿发育前体细胞,最终达到调控牙齿发育的过程。     

重组人骨形成蛋白2诱导颅神经嵴细胞向肾上腺能神经元分化的研究

目的：研究重组人骨形成蛋白2(rhBMP2)诱导小鼠颅神经嵴细胞(CNCC)分化后所产生的神经元类型是否为肾上腺能神经元。方法：用50ng／ml rhBMP2诱导CNCC分化为神经元。提取诱导前后细胞内的总RNA,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测细胞中酪氨酸羟化酶(TH)和γ-氨基丁酸受体(GABAAR)亚单位的表达情况。结果：诱导前的CNCC中，TH和GABAAR亚单位均无mRNA水平的表达，诱导后二者均有表达，但表达的量均低于脑组织中的表达。结论：rhBMP2诱导CNCC后所分化的神经元为肾上腺能神经元，但在功能上可能弱于正常的肾上腺能神经元。     

BMP在神经发育中的作用

骨形成蛋白 ,又称骨形态发生蛋白 (ｂｏｎｅｍｏｒ ｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＭＰ) ,是一类能在骨骼外异位诱导软骨和骨形成的酸性多肽。 80年代初期被发现并提纯以来引起了人们广泛的兴趣和重视。随着对ＢＭＰ研究的不断深入 ,逐渐认识到它是一种具有多种功能的细胞因子家族 ,在中胚层诱导、肢体发育、牙齿发育、造血细胞形成和其它生长因子基因的调节等方面发挥着重要作用。本文对近年来ＢＭＰ在神经发育中的研究作一综述。1　ＢＭＰ及其受体的分子生物学ＢＭＰ是一类有 2 0余个成员的蛋白家族 ,它们的存在范围极其广泛 ,且…     

初级纤毛与牙颅颌面发育的相关性研究进展

初级纤毛是一种突出于细胞表面能接收和传导多种细胞信号的细胞器.近一个世纪以来,初级纤毛被视为一个孤立细胞器以及退化结构.然而,目前研究发现初级纤毛可能是一个基本的细胞感受器,能够从微环境中检测和传导机械和化学信息,且与口腔健康息息相关,因其结构或功能异常所导致的口腔疾病也引起了人们的重视.本文结合初级纤毛与牙颅颌面部发育的相关性研究进展作一综述.