K-ras基因的临床研究进展

现已发现 ,多种肿瘤有Ras基因的突变 ,包括H Ras、K ras和N Ras基因的突变。Ras基因编码产物为P2 1ras蛋白 ,其本质为膜相关G蛋白 ,具有GTP酶的活性 ,参与信号传导。其中K ras的突变与临床中很多肿瘤的发病有密切关系 ,如胰腺癌、胃癌、小细胞肺癌及胆囊癌等。本文就近年来针对K ras基因的临床研究作一综述。1　K ras基因与胰腺癌胰腺癌是一种高度恶性肿瘤 ,其 5年生存率低于 5 % ,并且近年来患病率有明显上升迹象 ,但其早期诊断十分困难。目前 ,分子生物学研究发现 ,K ras基因是与胰腺癌高度相关的癌基因 ,其第一外显子 12密码子的…     

检测胰液和粪便中K-ras和p53基因突变对胰腺癌早期诊断的价值

目的 通过检测胰液、粪便癌基因K－ras和抑癌基因p53的突变,探索早期诊断胰腺癌的手段。方法 1994年至2000年5月住院和门诊患者共201例,正常对照60例,通过聚合酶链反应－限制片段长度多态性（PCR－RFLP）方法检测胰液、粪便K－ras突变,PCR－SSCP方法检测p53突变。结果 胰腺癌患者胰液K－ras突变率为87．8％（36／41）,胰腺良性病变为23．5％（4／17）。粪便K－ras扩增成功率为90．0％（235／261）。胰腺癌患者粪便K－ras突变率为88．0％（66／75）,胰腺良性病变为51．1％（24／47）,正常人粪便K－ras突变率为19．6％（9／46）。胰腺癌胰液细胞p53突变率47．4％（18／38）,胰腺良性疾病为12．5％（2／16）。胰腺癌粪便p53突变率为37．1％（23／62）,慢性胰腺炎为19．1％（4／21）。结论 胰腺癌患者胰液K－ras突变的敏感性、特异性高,可以作为胰腺癌诊断的辅助手段。粪便K－ras结合p53检测可以提高敏感性,在胰腺癌筛选中有潜在的价值,联合血清CA19－9等肿瘤标记物检测有助于提高胰腺癌早期诊断率。     

43例大肠癌K—ras基因突变与体外化疗敏感性的关系

目的 验证Ｋ－ｒａｓ基因突变与化疗敏感性之间关系。方法 用ＭＴＴ法测定了１７种抗癌药对４３例大肠癌的抑制率，并用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析法检测大肠癌中Ｋ－ｒａｓ基因突变情况，将其分成Ｋ－ｒａｓ突变组与正常组，分别统计１７种抗癌药在两组中抑制率大小，并进行比较。结果 除线裂霉素、平阳霉素、顺铂外，抗部药在正常组中的抑制率大于在突变组中的抑制率，其中更生霉素，甲氨喋呤、长春新碱、鬼臼乙叉     

应用寡核苷酸芯片检测白血病患者P53和K-ras基因点突变

目的 研究白血病病例中P53、K—ras基因点突变情况。方法 采用寡核苷酸芯片技术对临床收集的白血病标本进行P53、K—ras突变热点检测。结果 共检测出P53突变8例、K—RAS突变4例。其中P53突变包括ANLL—M3 2例，M2 3例，ANLL—M5、ALL、CML各1例。K—ras突变包括CML3例，ALL1例。结论 P53、K—ras突变在白血病发生、发展中起到一定作用。应用寡核苷酸芯片进行P53、K—ras点突变检测，优缺点并存，具有一定临床实用价值。     

遗传性非息肉病性大肠癌错配修复基因突变的检测方法

大肠癌在我国乃至全世界是一常见的恶性肿瘤 ,近年随着人们生活条件及饮食结构的改变 ,其发病有明显上升的趋势。我国每年新增病例约 2 5万 ,占恶性肿瘤发病率的第 4位 ,发达地区已上升到第 3位。遗传性非息肉病性大肠癌 (HNPCC)是一种特殊类型的大肠癌 ,它是由于DNA错配修复基因 (MMR)发生胚系突变所致的一种单基因的显性遗传性疾病 ,又称Lynch综合征 ,约占大肠癌总数的 1 5 %～ 1 8%。由于HNPCC家族成员到 65岁时结、直肠癌发病率为 68%～ 75 %,因此发现HNPCC患者及其家系 ,对家系成员进行定期检查 ,早期发现和及时治疗将有效地…     

胃癌组织ras和P53基因突变的检测

（１）目的 研究胃癌组织中Ｐ５３基因和ｒａｓ基因的突变情况,（２）方法 采用ＰＣＲ ＲＦＬＰ技术,分析４１例胃癌标本中Ｐ５３基因和ｒａｓ基因的突变。（３）结果 本组４１例中,１２例（２９．３％）发生Ｐ５３基因突变,１６例（３９．１％）发生ｒａｓ基因突变,１全负时发生Ｐ５３基因和ｒａｓ基因的突变。（４）结论 Ｐ５３和ｒａｓ基因突变与胃癌的发生密切相关,在胃癌的发生中可能起重要作用。     

K-ras基因与大肠癌关系的研究进展

Ras基因的突变在大肠细胞癌变过程中起启动作用并是一个早期事件,突变产生具有致癌活性的p21蛋白,通过Ras信号转导通路,激活下游信号分子,持续刺激细胞生长、发育、增殖,引起细胞恶变。可以检测大肠癌手术标本,血清等K-ras基因的突变。     

痰细胞K—ras基因突变检测对肺癌诊断的意义

引言近年来，分子生物学技术的发展为肺癌的基因诊断提供了可能．我们应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术，对肺癌患者手术标本和痰细胞的Ｋ－ｒａｓ基因突变进行了检测，以探讨其对肺癌临床诊断的应用价值．１方法１．１病例选择选取我校唐都医院住院肺腺癌患者２４（男１５，女９...     

癌性胸腔积液K—ras基因突变检测及临床应用

目的 探讨Ｋ－ｒａｓ基因突变检测用于癌性胸腔积液的诊断价值。方法 采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对５８例生及３０例结核性胸积液进行Ｋ－ｒａｓ基因突变分析。结果：结核性胸液未发现突变，癌性胸液有１７例突变阳性，突变率２９．３％，其中腺癌所致胸腔积液突变率为３４．１％（１４／２１），鳞癌１６．７％（２／１２）。１７例Ｋ－ｒａｓ基因突变阳性的胸液中，１４例肉眼生，明显高于非血性胸液组，Ｐ〈０．０５。１８例未找     

肺癌患者p53、K-ras基因突变与吸烟关系的Meta分析

Ｍｅｔａ分析最早由Ｇｌａｓｓ于 1976年提出 ,首先运用于心理学、教育学 ,随后用于医学健康领域。其主要目的是将以往的研究结果进行更加客观的综合 ,虽不可避免的要受到偏移、混杂因素的影响 ,如发表偏移等 ,但是可以认为能提高统计检验效能 ,解决研究结果间的不一致性 ,使研究结果更全面而可靠[1 ] 。本研究谨对近年来国内外有关吸烟或不吸烟与肺癌中ｐ5 3、Ｋ ｒａｓ基因突变的关系的病例对照结果进行Ｍｅｔａ分析 ,以综合评价吸烟作为肺癌的危险因素对有关基因的影响。1　材料与方法　　通过《中文科技资料目录》、文献追溯和其他方法…     

结直肠癌患者不同组织中K-ras基因研究

目的 研究结直肠癌患者不同组织中K-ras基因的临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR方法检测患者原发灶组织100例、转移淋巴结组织64例、远处转移灶13例、腺瘤组织19例中K-ras基因突变情况。结果 结直肠癌原发灶、转移淋巴结组织、远处转移灶、腺瘤组织的K-ras基因检出率分别为100%、92.2%、92.3%、89.5%;K-ras基因突变率分别为39.0%、30.5%、33.3%、17.6%。主要突变基因第12编码子34位 G>T, G>A, G>C, 35位 G>A, G>T, G>C;第13编码子 37位 G>C, 38位 G>A等8种基因发生突变。结论 结直肠癌原发灶、转移淋巴结组织、远处转移灶的K-ras基因突变率基本一致, 而腺瘤组织K-ras基因突变率明显低于原发灶、转移淋巴结组织、远处转移灶组织。K-ras基因突变在结直肠癌的发生、发展中起重要作用, 这对结直肠癌的防治有重要的指导意义。     

结直肠癌MICA基因的表达与p53、K-ras基因突变的关系研究

目的研究结直肠癌MICA基因的表达与p53、K-ras基因突变之间的联系。方法选取我院从2015年8月~2017年8月132例结直肠癌患者为此次研究对象行回顾性分析,应用半定量PCR-SSCP技术,进行mRNA水平的检测,对结直肠癌组织MICA基因表达量与p53、K-ras进行检测,并分析结直肠癌MICA基因表达与p53、K-ras基因突变之间的相互关联。结果在K-ras基因突变组中的MICA平均表达量显著高于K-ras基因未突变组,差异具有统计学意义(P0.05);在p53基因突变组中的MICA平均表达量显著高于p53基因未突变组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论高表达的MICA基因的发生可能与p53、K-ras基因突变关系密切,MICA基因的表达情况是目前检测结直肠癌的关键,应引起人们的广泛关注。     

结直肠癌k-ras基因与多药耐药相关蛋白相关性研究

目的：探讨结直肠癌（CRC）中K-ras基因突变和多药耐药相关蛋白的表达及两者的关系。方法：利用免疫组织化学、实时荧光定量PCR技术检测K-ras基因及多药耐药相关蛋白在CRC中的表达。结果：结直肠癌中Pgp、Topo-Ⅱ、CerbB-2、GST-π和Ki-67的阳性率分别为15.8％,84.21％,26.13％,71.42％,32.67％。 Pgp、Topo-Ⅱ的表达和K-ras突变率与肿瘤发病的性别、类型、分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移无关（P＞0.05）,CerbB-2、GST-π的阳性率与肿瘤淋巴结转移相关（P＜0.05）,Ki-67的阳性率与肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关（P＜0.05）。 K-ras基因突变率为28.94％,与CerbB-2的表达呈正相关（P＜0.05）。结论：联合检测多药耐药相关蛋白及K-ras突变有助于临床判定CRC对化疗药物的敏感性、制定个性化化疗方案提供依据。     

粪、血APC及K-ras基因突变联合检测在大肠癌筛查中的作用

目的 通过联合检测粪、血浆中APC和K-ras两种基因的突变,探讨其在大肠癌筛查中的作用.方法 收集本院2003年10月～2004年3月行肠镜检查患者的肝素抗凝血5 ml,大便3～5 g.提取粪便及血浆DNA,采用PCR-SSCP法检测APC和K-ras突变.结果 和结论(1)大肠癌和腺瘤患者血浆APC基因突变分别为41.9%和57.7%(P＞0.05),高于正常对照组(P＜0.05).粪便APC基因突变分别为51.6%和42.3%(P＞0.05),高于正常对照组(P＜0.05).两种检测方法具有高度的吻合度(kappa值为0.811,P＜0.001).(2)血浆K-ras基因突变在大肠癌、腺瘤和正常对照分别为48.4%、3.8%和0%,粪便K-ras基因突变在3组中分别为54.8%、7.7%和11.1%,大肠癌组高于腺瘤组和正常组(P＜0.05),腺瘤组和正常组间无差异(P＞0.05).两种方法检测的吻合度一般(kappa值为0.662,P=0.000).(3)联合检测APC及K-ras基因突变可以提高诊断大肠癌的灵敏度.血、粪联合检测检测APC和K-ras基因突变较粪便检测无明显优势.(4)APC基因突变与是否发生肿瘤区域淋巴结转移有关,K-ras基因突变与病变分化程度有关.     

K-ras基因突变在胰腺癌诊断及发病高危因素中的研究现状

胰腺癌早期症状及诊断缺乏特异性,治疗效果不佳.手术切除是现阶段唯一能治愈胰腺癌的手段,但疑诊此病时,多数已处于进展期,肿瘤已转移或超出手术切除范围,所以预防胰腺癌的发生和提高早期诊断率尤为重要.胰腺癌的高危因素包括男性、高龄、长期吸烟、酗酒、饮咖啡、糖尿病、慢性胰腺炎、遗传因素、肥胖、非家族性高血脂、高热量饮食、职业暴露等.多项研究表明胰腺癌的发生与K-ras基因突变密切相关,且在具有高易感性患者中k ras突变率很高.本文就检测K-ras突变对胰腺癌的诊断价值、癌前病变中的K-ras突变情况及高危因素与K-ras突变发生的关系作一综述.     

大肠癌p53基因突变及p16基因缺失检测及临床意义

目的：探讨本地区散发性大肠癌p53、p16蛋白表达、临床病理因素的关系。方法：SSCP－PCR检测p53基因突变、p16基因缺失,免疫组化检测p53,p16蛋白表达,结果p16基因缺失率48％（19／40例）,未见突变,p16蛋白缺失率为55％（22／40）。p53基因突变率30％,p53蛋白阳性表达率为68％（27／40例）。组织学分组Ⅱ,Ⅲ级p16基因缺失率明显高于Ⅰ级（P＜0．01）,临床分期D期p53估变明显高于临床分期B,C期（P＜0．05）,结论p16基因缺失、53基因突变与大肠癌的发生、发展有关。     

结直肠癌 K-ras 基因突变检测及其意义

目的：研究结直肠癌中K-ras基因突变率及突变类型,探讨结直肠癌K-ras基因野生型及突变型与患者临床参数的关系;通过基因测序,指导临床靶向药物用药。方法随机选取哈尔滨医科大学附属第三医院结直肠外科2008年9月至2010年3月收治的100例结直肠癌患者组织标本通过手术室取材、组织标本DNA提取、逆转录PCR、凝胶电泳、胶回收、直接测序等技术筛选K-ras基因突变标本进行统计分析,从中得出突变率及突变类型。结果共筛选出了34例（34％）K-ras基因突变标本,其基因突变均发生在第一外显子的第12及第13密码子。结果表明：第一外显子的第12密码子GGT突变为GAT或GTT;第一外显子第13密码子由GGC突变为GGT。其中并未发现第二外显子第59及第61位发生突变,及第一外显子12位13位同时突变。结论 K-ras基因结直肠癌中约有34％发生突变。在K-ras基因突变类型与患者的病期、病理类型、肿瘤的浸润深度、发病部位等因素无关。     

APC基因启动子甲基化在大肠癌中的研究

目的 研究APC基因在结直肠癌和结直肠腺瘤中的甲基化状态和蛋白表达的变化及意义。方法 采用甲基化特异性PCR（methylation specific PCR，MSP）和免疫组织化学染色检测结直肠癌和结直肠腺瘤中APC基因的甲基化状态和蛋白表达的变化。结果 在结直肠癌和腺瘤发生过程中，APC基因在腺瘤为39．3％（11／28），癌旁为47．4％（18／38），癌组织中甲基化率为57．9％（22／38），其甲基化程度呈增加趋势；APC蛋白表达在腺瘤组织中82．1％，癌旁组织中57．9％，癌组织中为34．2％，随病变发展表达率呈下降趋势，与甲基化率呈明显负相关。结论 APC基因异常甲基化是APC失活的主要机制。与结直肠癌和结直肠腺瘤的发生、发展密切相关，可作为大肠癌早期诊断和治疗的重要参考指标。     

结直肠癌组织中K-ras基因的检测及其意义

目的 观察结直肠癌组织中K-ras基因的表达情况,并分析其与临床病理学的相互关系,为临床筛选出能从生物靶向治疗中获益的人群.方法 对208例结直肠癌组织标本,使用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增目的基因(包含12和13密码子),并对扩增产物进行Sanger法测序,进行K-ras基因的检测,结合相关的临床病理学资料,分析K-ras基因的表达状况同临床病理学的关系.结果 208例结直肠癌组织中K-ras基因12或13密码子突变为91例,突变率为43.8%,突变率在男女性别之间、肿瘤位置、组织分化类型和Duke's分期间差异无统计学意义.结论 对结直肠癌组织K-ras基因的表达状况进行检测有助于临床筛选出针对抗EGFR靶向治疗药物有效的结直肠癌患者.     

非同位素PCR－SSCP分析检测结肠腺瘤与腺癌中K－ras基因改变

运用非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析检测结肠腺瘤与腺癌中Ｋ－ｒａｓ基因的改变，探讨该基因改变与结肠腺瘤不典型增生、结肠腺癌分期及分化程度之间的关系。结果显示，与自身正常及癌旁粘膜比较，２４例结肠腺场中，５例出现单链带的泳动变位，阳性率为２１％；１８例腺瘤中检出２例有单链带泳动变位，均为伴局部场变的腺瘤组织，提示当腺瘤发生ｒａｓ基因改变时，其恶性倾向增大。但结肠癌的分期及分化程度与ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析阳性率无明显相关性。增生性及幼年性息肉均未检出有改变。该法简便快速，不用同位素，可适用于临床标本检测。