Periostin对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：研究小鼠重组Periostin对牙周膜细胞（PDL细胞）增殖及碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法：采用MTT比色试验及酶动力学方法。测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果：Periostin仅在浓度为40μg/ml时,可显著促进PLD细胞的增殖（P＜0．01）,其余浓度则无作用,而其浓度在10μg/ml-80μg/ml范围中时,均可显著提高PDL细胞ALP活性水平（P＜0．05）。结论：小鼠重组Periostin对PDL细胞的增殖及ALP活性均有促进作用,但其在这两方面的作用存在着异,对此还需深入研究。     

Periostin对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 :研究小鼠重组Periostin对牙周膜细胞 (PDL细胞 )增殖及碱性磷酸酶 (ALP)活性的影响。方法 :采用MTT比色试验及酶动力学方法 ,测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果 :Periostin仅在浓度为 40 μg/ml时 ,可显著促进PDL细胞的增殖 (P <0 .0 1) ,其余浓度则无作用 ,而其浓度在 10 μg/ml～ 80 μg/ml范围中时 ,均可显著提高PDL细胞ALP活性水平 (P <0 .0 5 )。结论 :小鼠重组Periostin对PDL细胞的增殖及ALP活性均有促进作用 ,但其在这两方面的作用存在差异 ,对此还需深入研究     

牙周优势菌内毒素对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：研究牙周优势菌牙龈卟啉菌、中间普氏菌、具核梭杆菌的内毒素对人牙周膜细胞（PDL细胞）增殖和碱性磷酸酶活性（ALP）的影响。方法：采用MTT比色试验及酶动力学方法，测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果：内毒素在10μg/mL、100μg/mL高浓度时，可显著抑制PDL细胞增殖，而在0.01μg/mL、0.1μg/mL低浓度时，则促进PDL细胞增殖；在10μg/mL、100μg/mL可呈浓度依赖性方式抑制PDL细胞ALP活性。结论：内毒素对牙周膜细胞的抑制作用主要和其浓度有关，不同来源内毒素差异并不显著；内毒素可能通过影响PDL细胞功能而影响牙周组织的代谢和修复过程。     

Emdogain和辛伐他汀联合应用对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的观察Emdogain、辛伐他汀联合应用对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法取培养至第五代的人牙周膜细胞,分别用含50μg/mL Emdogain、含0.125μmol/L辛伐他汀、同时含50μg/mL Emdogain和0.125μmol/L辛伐他汀以及不含上述药物的4组无血清DMEM培养液培养,3 d后酶标仪检测各组细胞的碱性磷酸酶活性。结果仅含Emdogain、仅含辛伐他汀以及不含上述药物的培养液培养的人牙周膜细胞碱性磷酸酶光密度值分别为0.193±0.002、0.197±0.003及0.166±0.002。同时含Emdogain和辛伐他汀的培养液培养的细胞碱性磷酸酶光密度值为0.325±0.002,与其他3组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Emdogain和辛伐他汀联合应用对牙周膜细胞碱性磷酸酶活性有促进作用,提示可能有利于牙周组织的再生。     

釉基质蛋白对牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：探讨釉基质蛋白对于牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法：采用细胞培养技术,噻唑盐比色测定（MTT）法和酶动力学方法,观察釉基质蛋白对牙周膜细胞的作用。结果：釉基质蛋白组的牙周膜细胞,其增殖活性显著提高,以50mg/L浓度为最佳;其ALP活性也较对照组明显增加,以200mg/L浓度的效果最佳。具有一个合适的剂量范围。结论：釉基质蛋白可促进人牙周膜细胞的增殖和ALP活性。     

纤维蛋白粘合胶对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：探讨纤维蛋白粘合胶（FG）对牙周膜细胞（PDLCs）增殖和碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法：应用细胞培养技术,噻唑盐比色测定法（MTT法）和酶动力学方法,观察FG对PDLCs的增殖作用和时间效应以及ALP活性的作用。结果：FG组的PDLCs增值和ALP活性较对照组均有显著升高,且在作用的第1天就显著促进了细胞的增殖。结论：FG可促进PDLCs的增殖和ALP活性。     

胰岛素对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和总蛋白含量的影响

目的：探讨胰岛素作用下，牙周膜（ＰＤＬ）细胞碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性和总蛋白含量的变化。方法：细胞生物学法、酶动力学法和考马斯亮蓝法。结果：胰岛素浓度超过１０－４Ｕ／ｍｌ时，明显增加ＰＤＬ细胞的ＡＬＰ活性和总蛋白含量（Ｐ＜０．０１）。其中，在１０－４～１０－１Ｕ／ｍｌ之间，效应随浓度增加而增加，超过１０－１Ｕ／ｍｌ效应趋于稳定，此时效应最大，ＡＬＰ活性和总蛋白含量分别比对照组增加１．４倍和１．２倍。结论：胰岛素明显促进ＰＤＬ细胞分化及蛋白合成功能。胰岛素作为骨代谢的重要调节因子，可能对牙周组织的再生修复有调节作用。     

乏氧对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性表达的影响

目的: 探讨不同氧张力对牙周膜细胞的增殖碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase activity,ALP)影响.方法:采用组织块法体外培养人牙周膜细胞,取第5代培养细胞分别在210 mL/L(对照组)和10mL/LO2浓度(乏氧组)下培养1～3 d,复氧组在相同的乏氧环境下培养1 d和2 d后分别移到常氧条件下继续培养1～2 d后检测牙周膜细胞增殖能力与分泌碱性磷酸酶情况.结果:所有组别的细胞增殖率随培养时间呈依赖性的增高.乏氧组乏氧第2,3 d与对照组有统计学差异.所有组别细胞的ALP活性随时间而降低,但乏氧第1,2,3天和复氧1 d与对照组相比明显降低,差别具有统计学意义.结论:乏氧对牙周膜细胞的生物学有较大的影响,提示临床牙周炎及正畸所导致的缺氧环境对牙周膜细胞活性与功能有一定的影响.     

内皮素受体对牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素含量影响

目的:研究内皮素受体(endothelin receptor)对牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨钙素(osteocalcin,OCN)含量的影响.方法:体外培养牙周膜细胞,加入100nM的ET-1,以未作任何处理的牙周膜细胞为空白对照,加入内皮素受体ETA拮抗剂BQ123(l00nM)和ETB拮抗剂BQ788(100nM)作阴性对照,刺激48h后观察ET-1对牙周膜细胞ALP活性和OCN含量的影响.结果:与对照组相比,ET-1对牙周膜细胞ALP活性(2.247±0.721)和OCN(1.462±0.412)含量具有显著抑制作用.ETA拮抗剂BQ123和ETB拮抗剂BQ788阻断了ET-1的抑制作用.结论:内皮素-1通过内皮素受体抑制牙周膜细胞的ALP活性和OCN含量.     

骨形成蛋白对牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：了解骨形成蛋白（ＢＭＰ）剂量变化对人牙周膜细胞（ＰＤＬＣ）增殖和碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性的影响。方法：应用细胞培养技术、噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）和酶动力学方法。结果：ＢＭＰ作用后的实验组ＰＤＬＣ的增殖和ＡＬＰａｓｅ活性较对照组均有明显的升高；且有一个合适的剂量范围。ＰＤＬＣ的增殖和ＡＬＰａｓｅ活性受ＢＭＰ浓度梯度影响的变化幅度并不完全一致，表现在所需ＢＭＰ用量不同。结论：可以认为ＢＭＰ能够促进人ＰＤＬＣ的增殖和ＡＬＰａｓｅ活性功能，但各自的影响机制可能还有所差异。     

骨碎补柚皮苷对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶活性影响的实验研究

目的研究骨碎补柚皮苷对人牙周膜细胞（hPDLC）增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法采用酶消化结合组织块法,体外培养人牙周膜细胞;运用MTT法测定不同质量浓度骨碎补柚皮苷在不同时间对hPDLC增殖的影响;采用IFCC推荐法测定不同质量浓度骨碎补柚皮苷作用后hPDLC的ALP活性,采用考马氏亮兰法,测定样本中蛋白量,从而测定每毫克冻融蛋白中所含的ALP比活性。结果10、1、0.1 mg·L-1这3种质量浓度的骨碎补柚皮苷对hPDLC的增殖有促进作用;100、10、1、0.1 mg·L-1的骨碎补柚皮苷均可促进hPDLC的ALP活性,其中以1 mg·L-1组的促进作用最强。结论骨碎补柚皮苷对hPDLC具有促进增殖、促进碱性磷酸酶活性的作用。     

Cell-bound and extracellular matrix-associated alkaline phosphatase activity in rat periodontal ligament

In previous studies it was noted that alkaline phosphatase (ALP) activity in periodontal ligament does not only seem to be related to cells but may also be associated with the extracellular matrix. In an attempt to clarify this we studied the distribution of the enzyme at the electron microscopic level. In addition, ALPactivity was assessed biochemically following extraction of the ligament with (i) agents dissolving the membrane or splitting the phosphatidylinositol anchor (Triton X-100 or phosphatidylinositol-phospholipase C, respectively), and (ii) a matrix-degrading enzyme cocktail (collagenase, hyaluronidase and elastase). Histochemical observations revealed (a) a heterogeneous distribution of ALP-activity, with highest activity adjacent to the alveolar bone and (b) two pools of activity; one bound to cells and one associated with the collagenous extracelluJar matrix. In line with this were the biochemical data indicating that approximately 10% of the enzyme activity was firmly bound to the extracellular matrix and 90% to plasma membranes. Isoelectric focusing did not reveal differences between the two fractions, both samples yielding a single broad band corresponding with an isoelectric point of about 4.4.     

成骨细胞对人牙周膜成纤维细胞生物学特性的影响

[摘要] 目的 观察成骨细胞(osteoblast cells,OBs)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast cells,HPLFs)生物学特性的影响,为进一步探讨正畸牙齿移动的生物学机制奠定基础。方法 建立人OBs与HPLFs共培养系统,通过细胞计数及生化检测法观察成骨细胞对人牙周膜成纤维细胞增殖和分化的影响。结果 3 d和5 d时,共培养组HPLFs细胞计数分别为3.5×10~4个/ml及7.5×10~4个/ml,均明显低于对照组HPLFs细胞计数,且差异有统计学意义(P<0.05)。HPLFs碱性磷酸酶(ALP)活性比较中,transwell共培养组HPLFs ALP活性高于对照组。在3 d时,差异有统计学意义(P<0.05),5 d及7 d时差异也有统计学意义(P<0.01)。结论 人OBs可能抑制HPLFs的增殖,促进HPLFs ALP活性。     

甲壳胺对老年人牙周膜细胞分化功能的影响

目的：探讨甲壳胺（Chi）对老年人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌的影响。方法：将不同浓度的Chi（0．05g／L，0．1g／L，0．2g／L）分别与体外培养的老年人牙周膜细胞一同培养后，采用酶动力学方法和放射免疫法检测老年人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌水平，并与青年人牙周膜细胞进行比较。结果：①在老年组，Chi（0．05g／L）组细胞裂解液中和Chi（0．1g／L）及Chi（0．2g／L）组细胞培养液中碱性磷酸酶活性明显高于对照组（P〈0．05，P〈0．01）。老年组和青年组差值比较，甲壳胺各组无论是细胞裂解液还是培养液中碱性磷酸酶活性青年组均明显高于老年组（P〈0．05，P〈0．01）。②在老年组，只有21d时的Chi（0．1g／L）组、Chi（0．2g／L）组骨钙素分泌高于对照组（P〈0．05）。在青年组，7d时Chi（0．05g／L）和Chi（0．1g／L）组、14d时Chi（0．1g／L）组及21d时Chi（0．1g／L）组骨钙素分泌均明显强于对照组（P〈0．05，P〈0．01）。老年组和青年组差值比较，7d和21d时Chi（0．05g／L）、（0．1g／L）组骨钙素分泌青年组明显高于老年组。结论：一定浓度的甲壳胺不论对青年人还是老年人的牙周膜细胞向成骨样细胞转化和成骨能力均有明显的增强作用，对青年人牙周膜细胞的作用程度强于老年人。