胃泌素受体拮抗剂对胃癌细胞株生长的抑制作用

研究胃泌素受体拮抗剂丙谷胺（ＰＧＬ）对体外培养的人胃癌细胞株ＭＫＮ４５的作用。发现ＰＧＬ能完全抑制癌细胞的生长，其所需的ＰＧＬ量是恒定的，探讨作用机制是符合受体学说的。流式细胞分析仪（ＦＣＭ）检测显示癌细胞经ＰＧＬ作用后，其ＤＮＡ含量明显减少，处在Ｇ０／Ｇ１期细胞明显增多，而Ｓ期和Ｇ２＋Ｍ期细胞却明显减少，对对照组相比，差异显著。     

大蒜素对人胃腺癌BGC-823细胞影响的研究

目的探讨大蒜素诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的作用及机制.方法传代培养人胃腺癌BGC-823细胞,使细胞浓度为5×105个/ml.分别加入10-5g/L(大蒜素1)和10-3g/L(大蒜素2)的大蒜素,另设对照组,培养时间分别为6 h、24 h、48h、72h.结果与对照组相比①大蒜素可明显提高胃癌细胞凋亡率、降低PI值(P＜0.01或P＜0.05),且表现出明显的细胞凋亡的形态学变化.②大蒜素可明显降低胃癌细胞CEA、GST-π的水平(P＜0.01或P＜0.05).③大蒜素可明显提高胃癌细胞的cAMP水平(P＜0.01),降低PKC水平(P＜0.01或P＜0.05).④大蒜素能够显著增加胃癌细胞fas基因及bax基因蛋白的表达(P＜0.05或P＜0.01);降低bcl-2基因蛋白的表达(P＜0.01).结论大蒜素可通过对第二信号系统cAMP、PKC的影响,增强细胞凋亡始动基因fas、凋亡促进基因bax的表达,抑制凋亡抑制基因bcl-2的表达,增加细胞凋亡率,并使胃癌细胞调亡,并抑制其增殖活性;并可导致胃癌细胞CEA、GST-π的合成减少,从而降低其水平.本研究为临床应用的中药大蒜素治疗胃癌提供了实验依据.     

胃泌素受体拮抗剂抑制胃癌细胞生长的可行性研究

目的　探讨应用胃泌素受体拮抗剂治疗胃癌的可行性。方法　在体外条件下观察胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺对胃癌细胞株ＭＫＮ４５ 的细胞活力、细胞内ｃＡＭＰ浓度及细胞凋亡的影响;在体内条件下观察胃泌素受体拮抗剂丙谷胺对胃癌细胞株ＭＫＮ４５ 移植瘤的面积、重量及胃癌细胞ＤＮＡ 的影响。结果　在体外条件下,胃泌素能促进胃癌细胞株ＭＫＮ４５ 的增殖,细胞内ｃＡＭＰ浓度增高,细胞凋亡百分率降低,而丙谷胺能完全阻断胃泌素的作用。在体内条件下,丙谷胺能抑制胃癌细胞株ＭＫＮ４５ 移植瘤的生长,肿瘤面积、重量及胃癌细胞ＤＩ、ＤＮＡ 含量、ＳＰＦ均低于对照组。结论　胃泌素受体拮抗剂能够抑制胃泌素受体阳性的胃癌细胞生长,有望为胃癌的治疗提供一种新手段。     

胃泌素及其受体拮抗剂对胃癌细胞PCNA、p53基因表达的影响

为探讨胃泌素促肿瘤细胞增殖作用的机制,我们观察了胃泌素及其受体拮抗剂对MKN45胃癌细胞PCNA、p5 3基因表达的影响。一、材料与方法1.主要试剂:MKN45胃癌细胞株(上海市消化疾病研究所提供) ,5肽胃泌素(上海丽珠东风生物技术公司产品) ,丙谷胺(江苏金坛制药厂赠) ,PCNA、p5 3单抗及ABC免疫组织化学试剂盒购自华美生物工程公司(Sigma产品)。2 .细胞培养:MKN45胃癌细胞株培养于含10 %小牛血清的RPMI 164 0培养液中,置3 7℃二氧化碳培养箱,隔天换液,3d传代。3 .试剂配制及实验分组:用体积分数为0 .0 5小牛血清的164 0培养液将胃泌素…     

胃泌素受体拮抗剂对大肠癌肝转移的疗效观察

目的　观察胃泌素拮抗剂对大肠癌肝转移患者的治疗效果。方法　对照组 3 8例常规化疗 ;治疗组 46例除常规化疗外同时服用胃泌素受体拮抗剂丙谷胺 12 0 0mg/d。两组患者每月定期随访 1次。 结果　对照组患者 1年内肝脏转移癌最大径增加 8.1± 2 .2cm ,死亡率为 5 5 .3 % ( 2 1/3 8) ;治疗组患者肝脏转移癌 1年内最大径增加 3 .5± 1.2cm ,死亡率为 2 1.7% ( 10 /46) ,均明显低于对照组 (P <0 .0 1)。结论　用胃泌素受体拮抗剂对大肠癌肝转移患者进行治疗 ,可以延缓肿瘤生长 ,延长患者生存时间 ,降低患者死亡率。     

胃泌素及其受体拮抗剂对人大肠癌细胞株SW480作用的研究

用ＭＴＴ比色分析法和流式细胞术在体外研究了５肽胃泌素（ｐｅｎｔａｇａｓｔｒｉｎ，ＰＧ）及胃泌素受体拮抗剂丙谷胺（ｐｒｏｇｌｕｍｉｄｅ，ＰＧＬ）对人大肠癌细胞株ＳＷ４８０的作用。结果显示：ＰＧ能促进ＳＷ４８０细胞生长；ＰＧＬ单用时对ＳＷ４８０细胞没有影响，当ＰＧ与ＰＧＬ合用时，ＰＧＬ呈剂量依赖地拮抗ＰＧ的作用，ＰＧＬ在３２μｇ／ｍｌ以上时，拮抗作用趋于恒定。提示胃泌素的作用是通过其受体发挥的。ＰＧ促进ＳＷ４８０细胞合成ＤＮＡ、蛋白质，促进ＳＷ４８０细胞从Ｇ０／Ｇ１期过度到Ｓ期和Ｇ２Ｍ期；ＰＧＬ完全拮抗这种作用，提示胃泌素的作用在受体后是通过影响细胞周期实现的     

胃泌素受体拮抗剂抑制胃癌细胞生长的可行性研究

目的 探讨应用胃泌素受体拮抗剂治疗胃癌的可行性。方法 在体外条件下观察胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺对胃癌细胞株MKN45的细胞活力、细胞内cAMP浓度及细胞凋亡的影响；在体内条件下观察胃泌素受体拮抗剂丙谷胺对胃癌细胞株MKN45移植瘤的面积、重量及胃癌细胞DNA的影响。结果 在体外条件下，胃泌素能促进胃癌细胞株MKN45的增殖．细胞内cAMP浓度增高，细胞凋亡百分率降低，而丙谷胺能完全阻断胃泌素的作用。在体内条件下．丙谷胺能抑制胃癌细胞株MKN45移植瘤的生长，肿瘤面积、重量及胃癌细胞DNA、DNA含量、SPF均低于对照组。结论 胃泌素受体拮抗剂能够抑制胃泌素受体阳性的胃癌细胞生长．有望为胃癌的治疗提供一种新手段。     

重组人生长激素在体外对人胃癌细胞株BGC823作用的研究

目的　研究重组人生长激素 (rhGH)对人胃癌细胞生长的影响。方法　利用体外细胞培养测定不同浓度的rhGH对人胃癌细胞株BGC82 3的生长曲线、细胞抑制率和细胞倍增时间的影响。结果　rhGH在体外无明显促进BGC82 3细胞分裂增殖 ,rhGH组与对照组、rhGH +L OHP组与L OHP组比较差异均无显著意义 (P >0 0 5 ) ,且生长曲线没有升高 ;rhGH +L OHP组与对照组比较细胞抑制率为 6 3 2 %和 5 0 8% (P <0 0 1) ,细胞倍增时间为 82 5h和 39 6h(P <0 0 1) ;或rhGH+L OHP组与对应的rhGH组配对比较 ,细胞抑制率为 6 3 2 %和 1 7% (P <0 0 1) ,细胞倍增时间为82 5h和 37 2h(P <0 0 1)。结论　rhGH在体外无明显促进胃癌细胞的分裂增殖 ,与抗肿瘤药合用可提高抗肿瘤药的疗效。     

胃泌素受体拮抗剂丙谷胺对人大肠癌SW480细胞株作用及机理

目的，探讨胃泌素受体拮抗剂丙谷胺(PGL)对人大肠癌SW480细胞株活细胞散、DNA和蛋白质合成及细胞增殖周期的影响，为大肠癌病人应用丙谷胺治疗提供实验依据．方法：用MTT比色分析法测活细胞散，流式细胞术测DNA、蛋白质和细胞增殖周期。结果，PGL组括细胞散、DNA和蛋白质合成、细胞周期分布和增殖指数(PI)与对照组比无显著性(P均>0.05)。PG(5肽胃泌素)组活性细胞数明显高于对照组(P<0.01)，POL PG组活细胞散、DNA和蛋白质台成、S、G1M期细胞数及PI均明显低于PG组(P均<0．01)，G0/G1期细胞散明显高于PG组(P<0.01)，而与对照组比均无显著性(P均>0．05)。结论。PG对大肠癌SW480细胞株生长无明显影响，但可抑制胃泌素对大肠癌细胞的促增殖作用，其作用机理为抑制胃泌素对癌细胞的DNA和蛋白质的合成，从而抑制癌细胞从G0/G1期过渡S、G1M期。     

AT-Ⅱ 受体及其拮抗剂对人肾功能的保护作用

近年来，血管紧张素（ＡＴ－Ⅱ）受体及拮抗剂在肾脏中的作用逐渐受到人们的重视，本文就ＡＴ－Ⅱ受体及拮抗剂的作用，作用调节及对人肾功能方面的保护作用作一综述。     

穿心莲内酯体外对人胃腺癌BGC823细胞增殖凋亡的影响

目的探讨穿心莲内酯（andrographolide,AD）对人胃癌细胞株BGC-823细胞增殖、细胞周期以及细胞凋亡的影响。方法分别采用MTT法、流式细胞术和流式细胞仪AnnexinV／PI双染色法检测AD对BGC-823细胞体外增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响：应用光镜和透射电镜观察不同浓度的AD作用后BGC．823细胞形态学改变。结果各浓度组AD均对人低分化胃癌细胞株BGC-823的增殖有抑制作用。并具有时间和浓度依赖关系（均P〈0．05）。浓度7．5μg／ml以下的AD抑制效果较弱,而15．0-60．0μg／ml抑制效果显著提高（P〈0．05）,60．0μg／ml以上抑制率增高不显著（P〉0．05）。24、48和72h的IC50分别为（35．3±4．3）、（25．5±3．5）和（18．2±2．7）μg／ml。BGC-823细胞经AD作用后,G0／G1期细胞的比例增加,S期和G2/M期细胞的比例下降,细胞被阻滞在G0／G1期,呈浓度依赖关系。AD浓度为7．5、10．0和15．0μg／ml组作用24h后,早期凋亡率分别为（19．3±4．7）％、（29．4±4．1）％和（52．7±6．7）％,晚期凋亡率为（10．8±1．8）％、（10．9±4．7）％和（14．7±4．8）％,均显著高于阴性对照组的早期凋亡率[（3．4±1．0）％]和晚期凋亡率[（4．1±0．7）％],差异有统计学意义（均P〈0．05）,并呈浓度依赖关系。结论AD能抑制BGC-823细胞增殖、阻滞其细胞周期在G0／G1期和诱导其细胞凋亡．是潜在的胃癌抗肿瘤中药制剂成分。     

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对肝星状细胞收缩的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对体外培养的肝星状细胞收缩的影响。方法采用HSC-T6肝星状细胞系作为活化的肝星状细胞的研究模型。将培养的肝星状细胞随机分为对照组、血管紧张素Ⅱ(1×10-9～1×10-5)mol／L组、受体拮抗剂组和血管紧张素Ⅱ+受体拮抗剂组,继续培养48 h后,比较胶原晶格收缩面积的变化,并绘制收缩的量效关系曲线和时效关系曲线。结果血管紧张素Ⅱ各浓度组,胶原晶格的收缩面积比较对照组均明显增加(P<0．05)。随着血管紧张素Ⅱ浓度的升高,胶原晶格的收缩面积逐渐增大,量效曲线呈近似直线的正相关关系;而且随着血管紧张素Ⅱ作用时间的延长,胶原晶格的收缩面积逐渐增大,在48 h之内呈时间依赖性。血管紧张素Ⅱ作用48 h后,胶原晶格面积为(379．337±37．755)mm2,同时加入受体拮抗剂,面积为(540．803±70．018)mm2,胶原晶格的收缩程度比较血管紧张素Ⅱ组明显减轻(P<0．05)。结论血管紧张素Ⅱ能够剂量依赖性和时间依赖性地促进肝星状细胞的收缩,而血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂能够抑制血管紧张素Ⅱ引起的肝星状细胞的收缩。     

纳米磁流体-单纯疱疹病毒胸苷激酶重组质粒的构建及其对胃癌细胞增殖的影响

目的 研究hTERT启动子调控下单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)重组质粒的构建、在人胃癌细胞BGC823中的表达及对胃癌细胞BGC823增殖的影响.方法 构建重组质粒pGL3 -hTERT-tk和相应的荧光报告质粒pGL3-hTERT-tk-Luc+;经纳米磁流体PEG-PEI/Fe3O4转染胃癌细胞BGC823,荧光显微镜观察细胞形态变化和转染效率,免疫组织化学(免疫组化)方法检测目的基因在胃癌细胞BGC823中的表达,MTT法检测胃癌细胞BGC823的增殖能力,以上实验均以正常肝细胞LO2为对照.结果 重组质粒pGL3-hTERT-tk构建成功,其长度为1100 bp.荧光素酶标记的阳性、阴性对照及治疗报告质粒pGL3-hTERT-TK- Luc+均能有效转染高表达端粒酶活性的胃癌细胞BGC823,转染效率为(28.1±2.3)％.免疫组化结果显示,重组质粒组胃癌细胞BGC823的细胞质中可见大量HSV -tk基因编码的表达.MTT检测结果示,转染pGL3-hTERT-tk质粒4d后,BGC823细胞增殖受抑制,其A570值为0.254±0.011,低于L02细胞的0.322±0.013;亦低于pGL3-basic-tk转染的BGC823细胞(0.357±0.014)(均P＜0.05).结论 纳米磁流体能将重组质粒pGL3-hTERT-tk转染BGC823细胞并获得表达,PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-tk可显著抑制BGC823细胞增殖,有望成为胃癌基因治疗的新型生物制剂之一.     

纳米磁流体-单纯疱疹病毒胸苷激酶重组质粒的构建及其对胃癌细胞增殖的影响

目的研究hTERT启动子调控下单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-tk）重组质粒的构建、在人胃癌细胞BGC823中的表达及对胃癌细胞BGC823增殖的影响。方法构建重组质粒pGL3-hTERT-tk和相应的荧光报告质粒pGL3-hTERT-tk-Luc＋：经纳米磁流体PEG-PEI／Fe304转染胃癌细胞BGC823．荧光显微镜观察细胞形态变化和转染效率．免疫组织化学（免疫组化）方法检测目的基因在胃癌细胞BGC823中的表达．M1Tr法检测胃癌细胞BGC823的增殖能力．以上实验均以正常肝细胞L02为对照。结果重组质粒pGL3-hTERT-tk构建成功,其长度为1100bp。荧光素酶标记的阳性、阴性对照及治疗报告质粒pGL3-hTERT-TK-Luc＋均能有效转染高表达端粒酶活性的胃癌细胞BGC823,转染效率为（28．1±2．3）％。免疫组化结果显示,重组质粒组胃癌细胞BGC823的细胞质中可见大量HSV-tk基因编码的表达。MqT检测结果示．转染pGL3．hTERT-tk质粒4d后．BGC823细胞增殖受抑制．其A,,值为0．254±0．011,低于L02细胞的0．322±0．013;亦低于pGL3-basic-tk转染的BGC823细胞（0．357±0．014）（均P〈0．05）。结论纳米磁流体能将重组质粒pGL3-hTERT．tk转染BGC823细胞并获得表达,PEG-PEI／Fe3O4纳米磁流体-tk可显著抑制BGC823细胞增殖。有望成为胃癌基因治疗的新型生物制剂之一。     

与侵袭性相关胶质瘤细胞骨架构筑特点

目的 探讨与侵袭性相关胶质瘤细胞骨架构筑特点.方法 流式细胞术(FCM)检测细胞内F-肌动蛋白(F-actin)荧光强度;原子力显微术(AFM)表征整体骨架及骨架成分三维形貌,胶质瘤细胞微管直径、长度为(27.69±3.42)、(439.96±43.20)am,胶质细胞微管直径、长度为(24.70±2.25)、(136.76±13.78)nm.比较胶质瘤细胞与胶质细胞骨架形态结构差异,探讨与侵袭性相关胶质瘤细胞骨架构筑特点.结果 胶质瘤细胞整体骨架呈网架结构,边界不齐,呈"树根样";微丝密集;中间丝呈"鱼网状",无极性多点联系;微管较大较长,紧密结合成束,束间联系密切.胶质细胞整体骨架边界整齐;微丝稀疏;中间丝密集交织;微管联系疏松.胶质瘤细胞内F-actin荧光强度(202.54±11.06)明显强于胶质细胞内F-actin荧光强度(62.64±10.23),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 整体骨架边界不齐,呈"树根样",微丝密集,中间丝高度网络结构,微管又大又长,紧密结合成束,束间联系密切,以及高F-actin含量均与胶质瘤侵袭性相关.     

胃癌及邻近黏膜表达胃泌素受体的差异及其意义

目的 揭示胃泌素受体（gastrin receptor,GR)在胃癌自分泌生长中的作用。方法 应用受的放射配基结合分析法,测定34例胃癌及其邻近黏膜的GR含量和新和力（Kd),比较胃癌及基邻近黏膜表达GR的差异。结果 34例胃癌组织中,GR阳性16例。胃体癌表达高亲和力GR的阳性率为77．8％（7／9）,胃底贲门癌为50．0％（3／6）,而胃窦癌为21．1％（4／19）。晚期胃癌（Ⅲ、Ⅳ期）表达高样和力GR的阳性率为52．2％（13／24）,早、中期癌（Ⅰ、Ⅱ）为10．0％（1／10）。34例黏膜组织中,GR阳性16例。有30例胃癌及其邻的黏膜组织表达GR基本一致。胃癌表达含量GR的平均含量较邻近黏膜高。结论 胃癌较周围黏膜易于表达高含量GR,其表达与肿瘤的部位和分期相关。     

胃泌素受体在胃癌组织中表达的特征及其预后价值

目的探讨胃泌素受体（ｇａｓｔｒｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＧＲ）在胃癌自分泌生长中的作用及其与胃癌预后的关系。方法应用胃泌素受体的放射配基结合分析法,测定３４例胃癌组织胃泌素受体的含量及其亲和力。结果３４例胃癌中,胃癌组织胃泌素受体阳性１６例,其中低亲和力胃泌素受体２例;高亲和力胃泌素受体１４例,高含量胃泌素受体９例,低含量胃泌素受体５例。２４例Ⅲ、Ⅳ期胃癌中,胃癌组织胃泌素受体阳性１５例;１０例Ⅰ、Ⅱ期胃癌中,胃癌组织胃泌素受体阳性仅１例。胃癌组织胃泌素受体的表达与胃癌临床病理分型无关。胃泌素受体阳性的胃癌细胞Ｓ期细胞比例及超５倍体细胞比例均高于胃泌素受体阴性者。对３１例胃癌患者随访３１～６９个月,胃泌素受体阴性或低亲和力胃泌素受体的胃癌患者,其预后较高亲和力胃泌素受体者好。结论胃泌素受体易于在晚期胃癌中表达,其对评估胃癌患者的预后有一定参考价值。     

血小板活化因子及受体拮抗剂对肝星状细胞增殖的影响

目的 观察血小板活化因子(PAF)及受体拮抗剂对体外培养的肝星状细胞(HSC)增殖的影响.方法 采用LX-2肝星状细胞系作为活化的HSC的研究模型.采用噻唑蓝比色法检测HSC的增殖.流式细胞PI染色及BrdU掺入法检测HSC的细胞周期.结果 PAF(1×10~(-8)～1×10~(-3)mol/L)各浓度组OD_(492)显著高于对照组(P<0.05);PAF(1×10~(-6))加PAF受体拮抗剂(1×10~(-7)～1×10~(-4)mol/L)组OD_(492)明显少于PAF(1×10~(-6)mol/L)组(P<0.05).PAF组HSC的S%和Prl明显增高.结论 PAF能够剂量依赖性地促进HSC增殖,而PAF受体拮抗剂能够抑制其作用.     

全反式视黄酸对胃癌细胞BGC-823和MKN-45肝转移模型的作用

目的 研究全反视黄酸（ＡＴＲＡ）对胃癌细胞实验性肝转移能力的影响。方法 将胃癌细胞ＢＧＣ－８２３和ＭＫＮ－４５注射于裸小鼠脾包膜下,隔日结裸小鼠灌服ＡＴＲＡ。术后６周处死裸小鼠,解剖脾脏及肝脏肿瘤并用免疫组织化学方法测定其肿瘤血管密度;以放射免疫法测定血清癌胚抗原（ＣＥＡ）。结果 ＡＴＲＡ抑制胃癌细胞脾包膜下移植瘤的生长及其肝转移,抑制率分别为５０．０％（ＢＧＣ－８２３）和３３．３％（ＭＫＮ－４５     

表皮生长因子对肾小球上皮细胞骨架的影响

目的观察阿霉素作用下体外培养的大鼠肾小球上皮细胞(GEC)通透性和细胞骨架变化并研究表皮生长因子(EGF)对它们的作用及可能途径。方法在阿霉素作用GEC24h之前给予和不给予外源性EGF，利用Milllcell—PCF Inserts检测牛血清白蛋白(BSA)滤过量，同时评价GEC细胞活力。细胞免疫荧光法和激光共聚焦显微镜观察和测定细胞骨架分子F-肌动蛋白(actin)、α-辅肌动蛋白(actinin)的表达。结果阿霉素刺激GEC24h后，BSA滤过量明显增加，而F—actin重排率增加，排列紊乱，部分解聚，胞浆内应力纤维明显减少；α-actinin趋向核周聚集。阿霉素诱导前先给予EGF，则BSA滤过量明显减少，细胞骨架恢复正常组装状态,α—actinin在胞浆内均匀分布。但在EGF之前给予EGF受体(EGFR)抑制剂AG1478或磷脂酶C(PLC)1抑制剂U73122，则EGF对阿霉素诱导下GEC的改善效应减弱，而在无EGF的阿霉素诱导之前应用AG1478或U73122，均未产生改变。结论阿霉素诱导了GEC细胞骨架的重排和破坏．致使上皮通透性增高，而EGF可能通过EGF—EGFR—PLCγ这条信号转导途径阻止了阿霉素对GEC细胞骨架的影响，保护了GEC上皮屏障。