延迟复苏对烫伤大鼠小肠上皮细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的：探讨延迟复苏对烫伤大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡百分率（ap%）及凋亡相关基因表达的影响。方法：Wistar大鼠30只，随机分为立即复苏组（ER）和延迟复苏组（DR）；30％体表面积Ⅲ度烫伤，采用DNA片段百分率测定、电泳和RT-PCR 观察伤后小肠粘膜上皮细胞ap%和ICE、bcl-2基因表达。结果：大鼠烫伤后小肠上皮ap%显著高于伤前（P＜0.01）；DR组肠上皮ap%显著高于ER组（P＜0.05-0.01）。DNA电泳可见明确梯形条带。烫伤后肠上此ICE基因表达明显增强，DR组ICE基因表达显著高于ER组（P＜0.01）。Bcl-2基因伤前在肠粘膜不表达，伤后极弱表达，两组比较无显著性差异。结论：烫伤延迟得苏后小肠上皮凋亡显著增加；促凋亡基因ICE和抑凋亡基因bcl-2的表达失衡可能是其凋亡剧增的重要原因之一。     

烫伤延迟复苏后细胞凋亡对肠粘膜通透性的影响

目的：探讨烫伤延迟复苏后肠粘膜细胞凋亡对其通透性的影响。方法：150只Wistar大鼠分为立即复苏(ER)、延迟复苏(DR)，N—乙酰半胱氨酸(NAC)和别嘌呤醇(Allo)治疗组及正常对照。采用DNA片段百分率(ap％)、电泳、TUNEL法观察回肠粘膜凋亡情况；并测定门静脉D—乳酸、内毒素以观察肠粘膜通透性改变。结果：伤后DR组ap％均显著高于ER组。NAC组ap％显著低于DR组。电泳、TUNEL法均观察到肠粘膜凋亡发生；ap％与D—乳酸、内毒素变化呈显著正相关。结论：烫伤延迟复苏后肠粘膜发生病理性凋亡，与其通透性变化密切相关；NAC可显著减轻延迟复苏所致肠粘膜细胞凋亡。     

高海拔地区大鼠严重烧伤延迟复苏后肝脏HSP70的表达及其意义

目的：探讨高海拔地区大鼠严重烧伤延迟复苏后肝脏HSP70表达的意义及与肝损伤的关系。方法：雄性Wistar大鼠240只,分别在海拔1 517 m和3 848 m分为即时复苏组（IFR,n=60）、延迟复苏组（DFR,n=50）和假伤组（SG,n=10）,建立30%体表面积Ⅲ度烫伤模型,分别于伤后1、6、12、24、72和168 h取材。采用组织病理学、组织芯片技术、原位末端标记（TUNEL）法、免疫组织化学染色与图像分析技术,观察肝组织病理学改变与细胞凋亡及HSP70蛋白的表达。结果：两个海拔高度HSP70表达强度,实验组均高于假伤组,高海拔组表达强度均高于低海拔组的强度,各海拔高度DFR组高于IFR组（P〈0.05）;肝细胞凋亡率DFR组高于IFR组,且高海拔组高于低海拔组（P〈0.05）。结论：HSP70可能参与肝缺血缺氧等应激损伤过程,HSP70在一定程度上反映机体应激水平和损伤程度,其表达可能与肝细胞自我保护机制启动有关。     

大鼠严重脑损伤后细胞凋亡状态及相关基因Bcl-2、Bax的表达

从分子水平对脑损伤后可能存在的基因和蛋白表达异常进行研究，有助于进一步阐明脑损伤的机制，从而指导临床治疗。笔者对50只大鼠严重脑损伤后脑组织中的细胞凋亡状态及相关基因Bcl-2、Bax的表达进行了研究。现报告如下。     

高原地区大鼠严重烫伤延迟复苏血浆降钙素基因相关肽的变化

目的:探讨高原地区不同海拔高度大鼠严重烧伤后延迟复苏血浆降钙素基因相关肽(CGRP)的变化特点。方法:240只雄性Wistar大鼠建立严重烧伤模型(TBSA30%,Ⅲ度),随机分为延迟复苏组(DFR)、即时复苏组(IFR)和正常对照组(C),分别于伤后1、6、12、24、72h、7d取材。应用放射免疫法检测血浆中CGRP的含量。结果:在3800m海拔高度,IFR组血浆CGRP于伤后12h达最低点,DFR组于伤后6h达最低点;1500m海拔高度,IFR组与DFR组均于伤后12h达最低点,CGRP血浆含量明显高于3800m海拔高度者。两个海拔高度间,DFR组在伤后6h即出现显著差异(P<0.01),并一直延续至伤后24h,IFR组无显著性差异(P>0.05)。结论:高原地区大鼠严重烫伤后同一海拔高度,延迟复苏组血浆CGRP的含量低于即时复苏组;海拔越高,血浆CGRP的含量越低,延迟复苏后CGRP下降的越早。提示消耗的心肌保护物质越多,缺血缺氧越严重。     

不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织损伤的特点

目的：探讨不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织损伤的特点。方法：将240只雄性Wistax大鼠建立高原（海拔3800m）与兰州地区（海拔1517m）严重烧伤动物模型（TBSA30％，Ⅲ度），并随机分为延迟、即时复苏组和正常对照组。采用干湿比重法测定脑组织含水量并应用HE染色与透射电镜技术观察大鼠脑组织结构的变化。结果：高原严重烧伤后早期脑水含量呈显著升高趋势，伤后24h达峰值。大鼠脑组织超微结构变化显示：延迟复苏组脑损伤后24h达高峰，7d尚未恢复。结论：高原严重烧伤延迟复苏脑组织损伤改变明显加重。     

Bcl-2基因家族与细胞凋亡

目前已知在多细胞生物体中细胞有两种不同的死亡形式:坏死(Necrosis)和凋亡(Apoptosis).细胞凋亡是指细胞在一定生理或病理条件下,由基因调控的主动而有序的自我消亡过程,在形态学、生化和分子水平上与细胞坏死有明显区别.     

股骨颈骨折后股骨头内骨细胞凋亡与Bcl-2蛋白表达的关系及意义

目的　研究股骨颈骨折后股骨头内骨细胞凋亡及Bcl- 2蛋白的表达的关系。　方法　采用光镜观察 (HE)和免疫组织化学 (PV - 90 0 0法 )及原位末端标记法对 6 0例 (分为早、中、晚期组 )股骨颈骨折患者的股骨头标本进行组织学观察、Bcl - 2蛋白及细胞凋亡检测。　结果　6 0例标本中均可见到不同程度的空骨陷窝化 ,并可见骨细胞凋亡。中期组Bcl- 2表达较早晚期组强 ,晚期组细胞凋亡较中期组显著 ,差异均有显著性意义 (P <0 .0 5 )。　结论　Bcl- 2表达可使骨细胞的存活时间延长 ,保持骨细胞的稳定性。在股骨颈骨折后的 10～ 2 0d内 ,可有Bcl- 2蛋白的高表达抑制骨细胞的凋亡。若在此阶段采取恰当的临床治疗 ,则有可能对股骨颈骨折的愈合起到有效作用。     

不同海拔高度大鼠严重烫伤延迟复苏心肌组织ET-1和HSP70的变化

目的：探讨高原地区不同海拔高度（3840m，1517m）大鼠严重烫伤后延迟复苏心肌组织内皮素-1（ET-1）与热休克蛋白70（HSP70）的变化规律。方法：雄性Wistar大鼠240只随机分为延迟复苏组（DFR，n=100）、即时复苏组（IFR，n=120）和对照组（CG，n=20），建立总体表面积30％的Ⅲ度烫伤模型，分别于伤后1、6、12、24、72和168h取材。应用免疫组化方法检测心肌组织ET-1和HSP70的含量。结果：ET-1在心肌细胞浆及血管内皮组织表达高于对照组，随海拔梯度上升ET-1表达增高，海拔高组高于海拔低组，DFR组高于IFR组（P〈0．01）；HSP70表达在海拔低者差异早于海拔高者（P〈0．01）。结论：高原地区大鼠严重烫伤后随海拔升高，心肌保护物质消耗增多，ET-1／HSP70调节变化更加显著。     

移植胰腺冷缺血后细胞凋亡与Bcl-2Bax表达的研究

目的：探讨胰腺移植后供胰冷缺血损伤后细胞凋亡与Bcl-2、Bax表达的关系。方法：建立小型猪胰腺移植冷缺血再灌注模型，根据供胰冷缺血时间（CIT）分为：CIT 0h组、CIT 3h组、CIT 6h组、CIT 9h组。切除受体猪胰腺制作成糖尿病模型，胰腺移植完成30min后观察胰腺病理变化及TUNEL法检测胰腺细胞凋亡、免疫组织化学法进行Bcl-2、Bax测定。结果：CIT 3h、CIT 6h、CIT 9h组供胰细胞凋亡指数（AI）明显高于冷缺血时间0h组，随着冷缺血时间的延长Bcl-2表达及Bcl-2／Bax比率逐渐下降，Bax表达则逐渐增强。结论：冷缺血时间越长，胰腺细胞凋亡程度越重，细胞凋亡不仅与Bcl-2、Bax自身表达水平有关，也与Bcl-2／Bax比率失衡有关。     

不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织中神经肽-Y的变化

目的:探讨不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织神经肽-Y(Neuropeptide-Y,NPY)变化及意义。方法:将240只雄性Wistar大鼠建立高原与兰州地区严重烧伤模型(TBSA30%,Ⅲ度),随机分为延迟复苏组和即时复苏组及正常对照组,应用免疫组织化学SABC法检测大鼠脑组织中NPY的表达。结果:NPY阳性表达主要分布在神经元细胞的胞浆中。高原地区各组间在伤后1~72 h差异显著(P<0.01)。高原地区各组与兰州地区相比较,NPY表达均减少。结论:NPY表达减少与高原严重烧伤延迟复苏脑损伤的发生有关。     

高原地区大鼠烫伤延迟复苏后Peyer氏结中Bax表达及其意义

目的：探讨不同海拔高度大鼠烫伤延迟复苏后回肠Peyer氏结淋巴细胞凋亡和Bax基因表达的意义。方法：Wistar大鼠132只,分别在海拔1517m和3848m随机分为延迟复苏组（DFR）、即时复苏组（IFR）和假伤组（SG）,建立TBSA 30％Ⅲ度烫伤模型,分别于伤后6、12、24、48和72h取材。采用TUNEL、免疫组化与图象分析技术,观察Peyer氏结中淋巴细胞凋亡率及Bax表达。结果：淋巴细胞凋亡率在各海拔高度DFR组和IFR组均高于SG组,随海拔高度上升凋亡率有所上升;DFR组凋亡率高于同海拔IFR组,海拔3848m各实验组分别高于海拔1517m（P〈0．05）;Bax表达强度变化平行于淋巴细胞凋亡率变化,但在伤后6h和72h海拔3848m各实验组分别高于海拔1517m（P〈0．05）。结论：高原地区烫伤延迟复苏后Bax表达增高可能是Peyer氏结T淋巴细胞凋亡增加的重要原因之一。     

小鼠严重烫伤延迟复苏后肺组织中白介素-21变化的临床意义

目的探讨C57BL/6小鼠严重烫伤延迟复苏后肺组织中白介素21(IL-21)的变化及其意义。方法雄性C57BL/6小鼠100只,随机分为延迟复苏组(DFR组,n=40)、即时复苏组(IFR组,n=50)和正常对照组(CG组,n=10),建立体表面积25%的Ⅲ度烫伤模型,分别于致伤后1、6、24、72 h和168 h取材。采用组织病理学、免疫组织化学染色、图像分析技术,观察不同实验组小鼠肺脏组织的病理学变化与IL-21的表达。结果 IL-21的阳性表达位于肺泡上皮细胞的胞核与胞质,延迟复苏组与即时复苏组IL-21的表达分别明显高于正常对照组,且延迟复苏组小鼠肺组织IL-21的表达高于即时复苏组小鼠肺组织IL-21的表达(P<0.05)。结论 IL-21表达强度的变化与严重烫伤延迟复苏小鼠肺组织损伤有关。     

延迟快速复苏对犬烧伤后早期肾功能的影响

目的 探讨烧伤后延迟复苏情况下,快速补液对伤后早期肾脏功能的影响。方法 利用犬 ４０％ ＴＢＳＡⅢ度烫伤模型,２４只犬被随枘发为烧伤对照组,延迟快速补液组和延迟均匀补液组进行补液,观察伤前,伤后２,６,８,１２,２４,３６和４８ｈ血浆尿素氮,肌酐,内皮素和血管紧张素Ⅱ等指标的变化。结果 烧伤后各组血浆Ｂｕｎ,Ｃｒ,ＥＴ和ＡＴⅡ逐渐升高,至伤后２－６ｈ即显著高于伤前并继续升高,但补液两组上升幅度明显     

川芎嗪在严重烧伤大鼠延迟复苏中的作用及调控

目的：探讨川芎嗪在烧伤休克延迟复苏大鼠中的抗渗作用及对肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）的调控。方法：选用SD大鼠制备烧伤和烧伤休克延迟复苏模型，随机分为假烫组、烫伤组及治疗组，伤后24h检测肺脏、肝脏及肠的含水量及血管通透性，血浆中TNF—α、IL-1β及IL-6的浓度。结果：与烫伤组相比，治疗组大鼠的肺脏、肝脏及小肠的含水量及血管通透性均显著降低，血浆中TNF-α、IL—1β及IL-6的浓度显著降低。结论：大鼠严重烧伤后，早期使用川芎嗪，能下调TNF-α、IL-1β及IL-6在血浆中的总体水平，控制烧伤后过度全身炎症反应，有助于减轻脏器水肿，减轻烧伤早期脏器损害。     

烫伤延迟复苏后小肠PPL凋亡率及凋亡相关基因表达的变化

目的 :探讨烫伤延迟复苏对小肠Peyer氏结节淋巴细胞 (PPL)凋亡率 (ap % )及凋亡相关基因表达的影响。方法 :Wistar大鼠 30只 ,分为立即复苏 (ER)和延迟复苏 (DR)。 30 % Щ度烫伤模型 ,采用DNA片段百分率、DNA电泳及RT -PCR观察伤后PPLap %变化及ICE、bcl- 2及TNFα、IL - 2mRNA表达变化。结果 :烫伤后 6h ,PPLap %显著上升 (P <0 .0 1 ) ,DR组显著高于ER组 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 )。电泳可见明确梯形条带 ;ICE伤后 6h、1 2h ,DR组显著高于ER组。Bcl- 2伤前强表达 ,伤后 6hDR组显著低于ER组 ;两组伤后 1 2hTNFα表达均显著高于伤前。两组IL - 2伤前呈强表达 ,伤后 6h表达减弱 ;DR组显著低于ER组 (P <0 .0 1 )。结论 :烫伤延迟复苏后促凋亡和抑凋亡基因表达失衡 ,可能是PPL凋亡剧增的重要原因