柯萨奇B病毒性心肌炎病原学检测及单克隆抗体的应用

应用自备的柯萨奇 B病毒单克隆抗体 ( CVB-Mc Ab) ,建立斑点免疫结合试验( DIBA) ,并与病毒分离及酶联免疫吸附试验 ( ELISA)检测特异性 Ig M法作比较 ,对 2 2例临床诊断为病毒性心肌炎的患儿进行病原学检测。结果 :病毒分离阳性 4例 ( CVB51例 ,CVB63例 )。CVB抗原检测阳性 8例 ( 2例 CVB3 及 CVB5抗原均阳性 ,2例 CVB6抗原阳性 ,但此 4例病毒分离均呈阴性 ;另 4例抗原检测与病毒分离基本一致 ,但有交叉 )。提示 :应用CVB-Mc Ab行病毒抗原检测其灵敏度较病毒分离法高 ( 8/ 4) ,但存在交叉反应     

51例病毒性心肌炎患儿血清柯萨奇 B 组病毒特异性 IgM 检测分析

用间接ＥＬＩＳＡ法检测５１例病毒性心肌炎患儿血清中柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）ＩｇＧ、ＩｇＭ，结果ＣＶＢ－ＩｇＭ≥１∶１００（＋）２１例，占４１．２％。３５例非心肌炎组患儿ＣＶＢ－ＩｇＭ≥１∶１００（＋）２例，占５．７％。经统计学处理，两者有非常显著差异（Ｐ＜０．０１）。说明ＣＶＢ是合肥地区病毒性心肌炎的主要病原；ＣＶＢ－ＩｇＭ检测，方法简便，准确可靠，具有早期诊断价值。ＩｇＭ阳性组病程均在两个月以内，９０．５％有明确的上呼吸道或肠道感染史，ＳＴ－Ｔ改变占２８．６％，与ＩｇＭ阴性组比较差异显著（Ｐ＜０．０５）；ＩｇＭ阳性组心脏扩大、心功能不全均较阴性组多，但经χ２检验没有差异（Ｐ＞０．０５）；ＩｇＭ阳性组与阴性组在心律紊乱、酶学异常上没有差异。     

新生儿柯萨奇B3病毒性心肌炎及其病原学检测

１９９２年北京市某医院发生一次新生儿柯萨奇Ｂ３病毒感染流行，发病３５例，合并病毒性心肌炎８例，２例死亡，尸解病理诊断为急性弥漫性非化脓性心肌炎。为明确病原学诊断，用ＥＬＩＳＡ测患儿血中柯萨奇Ｂ病毒抗体ＩｇＭ；用ＰＣＲ测患儿血及心肌组织中的肠道病毒（包括柯萨奇病毒）ＲＮＡ；用大便及咽拭子分泌物进行病毒分离，证实此次流行的病原为柯萨奇病毒Ｂ３。认为ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ方法快速、敏感、特异强，可推广应用。     

卡托普利治疗实验性小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的疗效研究

在小鼠柯萨奇Ｂ３病毒性心肌炎模型上采用卡托普利治疗其感染时和感染１周后和疗效，并与维生素Ｃ治疗组和生理盐水对照组比较。结果：卡托普利对其感染时的自下而上率高于对照组和维生素，感染１周后用药生存率高于对照组，心肌炎症，坏死，钙化的程度在感染同时或１周后用药均明显低于对照组和维生素组，心脏重量均低于对照组。     

柯萨奇B组病毒感染与病毒性心肌炎关系的研究

用微量中和试验法检测１００例病毒性心肌炎患者，５０例正常人和５０例其他心脏病患者血清ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ病毒（ＣＢＶ）中和抗体。ＣＢＶ中和抗体阳性串分别为５３％、２４％和２０％，前组阳性率显著高于后两组，Ｐ＜０．０１。后两组阳性率之间无显著差异，Ｐ＞０．０５，提示该组病毒性心肌炎病人的病因有半数以上与ＣＢＶ感染有关。     

柯萨奇B3M病毒性心肌炎小鼠细胞免疫状态

作者借助BALB/C小鼠柯萨奇B3m(CoxB3m)病毒性心肌炎模型,用单克隆抗体间接免疫荧光法测定病毒感染后不同天数小鼠脾脏的T细胞亚群;用LDH释放法测定NK细胞活性。结果显示:脾脏的Thy-1(Pan T)、L3T4(TH/I)及Ly-2(TS)细胞在感染后第3天起开始下降,直至第14天,各点所测得的值显著低于正常对照(P<0.05～0.001);T4/T8(L3T4/Ly-2)比值从感染后第3天的2.08±0.97上升到14天时的2.68±0.58;NK细胞活性在感染后呈进行性下降,各点所测得的值均显著低于正常对照(P<0.05～0.001)。这些实验结果提示:细胞免疫异常在本病发病中起一定作用。     

上海15所医院病毒性心肌炎患者中柯萨奇B组病毒感染情况

本文总结1987年1月至1990年6月本市15所医院临床上拟诊“急性病毒性心肌炎”患者柯萨奇B组病毒(CBV)感染情况。在调查的1790例患者中,双份血清CBV中和抗体效价阳性及可疑阳性率分别为36％和8.1％,与前9年的阳性率相似。提示上海市与CBV感染有关的心肌炎存在于各大医院,值得引起重视。     

病毒性心肌炎柯萨奇病毒B特异性IgM的临床观察

用间接酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）测定１３４例病毒性心肌炎患儿的柯萨奇病毒Ｂ（ＣＶＢ）特异性ＩｇＭ。其中阳性５８例总阳性率为４３．３５％以正常血清３０做对照，仅１例为阳性，占３．２％。两者比较，有显著差异性。病程早期（半月内）阳性率较高，病程超过８周者２７便，阳性检出率４０．３％，阳性检出机会仍然较多，提示ＣＶＢ在病毒感染的心肌中是主要的病原。临床检测特异性ＩｇＭ不仅有早期病原学诊断意义，并能观     

槐果碱对感染CVB_3小鼠干扰素和肿瘤坏死因子水平的影响

目的 :研究槐果碱对感染 CVB3小鼠干扰素和肿瘤坏死因子活性的影响。方法 :制备 CVB3病毒性心肌炎小鼠模型 ,用 MTT比色分析法检测小鼠脾细胞 IFN-α与 TNF的诱生量以及血清中 型干扰素 (IFN- )和TNF水平。结果 :槐果碱 5 0 mg· (kg· d) - 1 皮下注射可提高正常小鼠血清 TNF含量。与正常对照组比较 ,病毒对照组 TNF活性明显升高 ,IFN无明显变化。槐果碱 5 0 m g· (kg· d) - 1 和 2 5 mg· (kg· d) - 1 两个剂量灌胃均明显升高 CVB3感染小鼠血清和脾细胞诱生的 IFN-α活性。槐果碱两种途径、四个剂量给药均明显降低感染小鼠血清中TNF活性 ,其中槐果碱 2 5 mg· (kg· d) - 1灌胃和槐果碱 30 m g· (kg· d) - 1皮下注射还明显降低脾细胞中的 TNF诱生量。结论 :槐果碱升高 CVB3感染小鼠的 IFN活性 ,降低 TNF的活性 ,可能是其体内抗 CVB3免疫机制之一     

小鼠急性柯萨奇B_3病毒性心肌炎电生理的表现

用常规细胞内微电极技术及实时微机数据处理系统,对柯萨奇B_3病毒(CB_3V)感染的BALB/c小鼠(早期7d、14d)作心肌电生理参数及动作电位波形研究。发现在病毒感染早期,心肌细胞的静息电位(RP)、动作电位振幅(APA)、超射(Os)、O相最大上升速率(Vmax)均数值除感染7d组Os值无差异,其余均显著低于同期正常对照组:而动作电位时程APD50和APD90均数值除感染14d组APD90无差异外,均显著延长。动作电位异常波形多达十种,占感染组的65％以上。提示CB_3V感染对心肌造成的损害,可产生多种心电活动异常,并成为形成各种形式心律失常的基础。     

用PCR检测心肌疾病患儿心肌组织EV－RNA

目的：研究肠道病毒感染与心肌炎和心肌病的关系。方法：用聚合酶链反应及核酸杂交技术检测心肌疾病病人心肌组织中及血清肠道病毒ＲＮＡ，同时用酶联免疫吸附试验测血清柯萨奇Ｂ病毒特异ＩｇＭ、ＩｇＧ抗体，取非心肌炎者心肌、血清作为对照。结果：有心肌损伤病人可用ＰＣＲ技术证明其心肌或血清中存在病毒ＲＮＡ，而无心肌损伤病人及对照组均阴性。结论：应用ＰＣＲ技术配合免疫学检测对于研究病毒感染与心肌炎和心肌病病因的关系很有帮助。     

槐果碱对感染CVB3小鼠干扰素和肿瘤坏死因子水平的影响

目的研究槐果碱对感染CVB3小鼠干扰素和肿瘤坏死因子活性的影响.方法制备CVB3病毒性心肌炎小鼠模型,用MTT比色分析法检测小鼠脾细胞IFN-α与TNF的诱生量以及血清中Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)和TNF水平.结果槐果碱50 mg·(kg·d)-1皮下注射可提高正常小鼠血清TNF含量.与正常对照组比较,病毒对照组TNF活性明显升高,IFN无明显变化.槐果碱50 mg·(kg·d)-1和25 mg·(kg·d)-1两个剂量灌胃均明显升高CVB3感染小鼠血清和脾细胞诱生的IFN-α活性.槐果碱两种途径、四个剂量给药均明显降低感染小鼠血清中TNF活性,其中槐果碱25 mg·(kg·d)-1灌胃和槐果碱30 mg·(kg·d)-1皮下注射还明显降低脾细胞中的TNF诱生量.结论槐果碱升高CVB3感染小鼠的IFN活性,降低TNF的活性,可能是其体内抗CVB3免疫机制之一.     

西洋参对小鼠病毒性心肌炎的疗效及机制

目的:探讨西洋参(Panax quinquefolium)对BALB/C小鼠Coxsackie B_3病毒性心肌炎的治疗作用。方法:雄性4周龄BALB/C小鼠腹腔接种CVB_3病毒液,建立VMC模型,接种30min后用西洋参煎剂灌胃每日1次,持续最长至4周。观察小鼠存活率、心肌病理改变、心肌内病毒滴度、心肌细胞凋亡坏死率、外周血T细胞亚群及抗心肌抗体的改变。结果:西洋参治疗组比病毒感染组存活率提高,心肌组织病理改变恢复加快,心肌细胞凋亡坏死率减低及外周血T细胞亚群比例改善,自身抗体减少(P<0.05)。结论:西洋参对CVB小鼠有较好的治疗作用。晚期效果好于黄芪。     

柯萨奇病毒B3诱导人心肌纤维细胞因子的产生

目的　探讨柯萨奇病毒与心肌炎的关系。方法　采用ELISA方法检测了感染CVB3心肌纤维细胞培养上清液IL - 6、IL - 8、IL - 1α、IL - 1β和TNF -α的产生。 结果　发现感染CVB32 4h后IL - 6和IL - 8明显升高 (P <0 .0 1) ,96h后IL - 1α有所升高 (P <0 .0 5 ) ,IL - 1β和TNF -α无明显变化。 结论　IL - 6、IL - 8和IL - 1α在CVB3心肌炎中可能有一定作用     

先天性心脏病与柯萨奇病毒B3,B4感染的关系

采用配对病例对照研究，探讨先心病与柯萨奇病毒B3、B4感染的关系，结果显示：病例组与对照组患儿CVB3、CVB4．IgG抗体阳性率分别为59．3％、54．3％和53．6％、45．7％，差异天显著性（P值均＞0．05）；经单因素和多因素回归分析均未发现CVB3、CVB4感染与先心病有病因学联系（P＞0．05）     

肠道病毒RNA RT-PCR检测在病毒性心肌炎诊断中的应用

目的 探讨ＲＴ－ＰＣＲ方法在肠道病毒感染诊断中的应用。方法 根据肠道病毒５’非编码区和ＶＰ２基因区共同序列设计一对引物,建立了检测各型肠道病毒的ＲＴ－ＰＣＲ方法。用该方法扩增已知病毒,并用于临床标本检测。结果 所检测１１种已知病毒中,只对肠道病毒的９个型别扩增,１８６例心肌炎患者血清标本中,５２例（２７．９５％）阳性,１５例脑炎患者脑脊液标本中,４例（２６．６７％）,阳性。结论 该ＲＴ－ＰＣＲ方法