还原型和氧化型抗坏血酸分光光度测定法

本文介绍一种测定人血浆抗坏血酸浓度的紫外分光光度法并与HPLC方法相比较。分析的基本原理为：抗坏血酸氧化酶催化血浆中的抗坏血酸生成脱氢氧化型抗坏血酸，以甲醇／三氯乙酸预先抽提，并沉淀蛋白质。取上清液于346nm波长比色，与同样处理的标准管比较，求样本中待测物浓度。方法①试剂抗坏血酸酶250u溶于2．5ml甘油和2．5ml100mmol／LKH2PO4中，调pH至6，分装置-80℃备用。1μmol／L～1000μmol／L抗坏血酸标准液，临用前新鲜配制。Chelex树脂溶液，称取10gChelex－100，树脂（200目～400目）加入100ml含KH2PO42mol／L、0．333mo…     

一种新的快速特异的血清铁测定法

国内推荐的亚铁嗪血清铁测定法[1]，血清用量大、费时，而且受铜离子干扰。我们参照有关文献[2，3]，建立一种准确、特异、快速的血清铁测定法。1材料和方法1．1试剂与仪器1．1．1释铁剂：含吐温－200．5ml，硫晚0．5g，抗坏血酸0．1g，共溶于0．1mol／L盐酸溶液并稀释至100ml，4℃存放稳定4～5天。1．1．2显色剂：亚铁嗪5mol／L，于1．5mol／L乙酸钠溶液中。1．1．3铁标准应用液：Fe26．87μmol／L。1．1．4仪器：Beckman700自动生化分析仪或721型分光光度计，微量比色皿（温州东巨试剂厂）。所用试剂为分析纯，试剂配制所用水均为双重…     

稳定单一重氮试剂显色法测定GGT

γ－L-谷氨酰转肽酶（GGT）测定主要有γ-谷氨酰-α-萘胺法与γ－L-谷氨酰对硝基苯胺法两大类。前者应用比较普遍、历史悠久，但是，反应产物α萘胺的显色剂需临用新鲜配制，本文介绍一种改进的稳定单一重氮显色试剂，不必每次配制；简便实用。并调查了参考值及初步临床价值，将GGT列为肝功常规提供条件。1材料和方法1．1试剂1.1.1基质准：取0．15mol／L（1．829／dl）三羟甲基氨基甲烷及0．06mol／L（0．792g／dl）双甘肽溶液90ml。称取γ－L-谷氨酰-α-萘胺（无水，Mr272．3）217mg，加1mol／L盐酸4ml，使溶解后，与Tris-双甘肽溶液…     

利用尿素氮试剂盒测定血氨

波氏法测定血氨时，显色剂中的次氯酸钠在贮存过程中有效氯浓度逐渐降低，每次配制时需重新标定，配制麻烦。配制好的显色剂如放置时间稍长，有效氛浓度也要降低，影响显色，甚至不显色。针对这一问题，我们利用上海生物制品研究所生产的尿素氮试剂盒（闭田一波氏法）中的显色剂1、！作为血氨测定的显色剂，解决了上述问题，使用方便，取得了满意的效果。现介绍如下：1材料与方法1．l试剂无氟蒸馏水，0．15mol／L钨酸溶液，硫酸饮标准液按《规程》配制。显色剂1和显色剂l：上海生物制品研究所尿素锦试剂盒。1．2操作按《规程》操作。2结果…     

速率法测定血浆（尿液）游离血红蛋白

血红蛋白（Hb）中亚铁血红素有类似过氧化物酶的作用，本文用ELISA试验广泛采用的显色剂TMB（3，3，5，5—四甲基联苯胺），建立了测定血浆和尿液中游离Hb的速率法，效果满意．1材料和方法1．1仪器意大利BT－224半自动生化仪。1．2试剂①TMB溶液：TMB用二甲亚飒溶解并配成10mg／ml，以0．1mol／LpH5．4醋酸钠一枸橼酸缓冲液稀释成1mmol／L，4℃避光保存备用。②0．3％H2O2：溶液：3％H2O2lml加于9ml蒸馏水中，4℃稳定6小时。③Hb标准液：Hb质控物用盐水稀释至100mg／L。1．3方法TMB液和0．3％H2O2。液各0．5ml混匀，再加肝素…     

用TBHBA色原测定血浆游离血红蛋白

我们对文献报道的血浆游离血红蛋白（Hb）的酚、4-氨基安替比林（4－AAP）测定法进行了改良，改用一种新色原剂2、4、6、一三溴间羟基苯甲酸（TBH－BA）代替酚，使灵敏度大大提高，此法试剂来源方便，结果准确可靠。材料和方法一、试剂1．包原缓冲液称取TBHBA2·0g、个AAP0·3g、加人0·lmol／L的磷酸盐缓冲液（PH7．4）至1000ml置棕色瓶中保存。2．Hb标准液取血红蛋白液，用氰化高铁血红蛋白法准确测定其浓度，稀释成10g／L浓度为贮存液。取贮存液0．lml用生理盐水稀释至10ml，为Hbldomg／L标准应用液。二、方法：按表1操作。裹1…     

用铁氰化钾消除胆红素对HDL-c酶法测定的干扰

胆红素对应用Trinder反应的高密度脂蛋白胆固醇（HDL－c）酶法测定有显著的干扰，我们从文献（蒋兴良．国外医学临床生物化学与检验学分册，1994，15（1）：40〕中得到启示，设计了一种用铁氰化钾氧化胆红素消除干扰的简单有效的方法．1材料与方法1．1试剂①HDL－c酶法测定试剂盒（东瓯试剂）。②40mmol／L铁氰化钾溶液。③1．29mmol／L胆固醇标准液。④0．3mol／L抗坏血酸。1．2方法待测黄泣血清0．3ml，加40mmol／L铁氰化钾15叫混匀，室温sndn后加沉淀剂0·3ml混匀，15min后离心，分别取上清波0．Zml于测定Uf和佯品空白Ua管中，U。…     

溴酚蓝-乙醇法测定脑脊液总蛋白

我们参考了有关资料设计了一种溴酚益－乙酸法测定脑脊液总蛋白的方法，效果满意，现报道如下。1材料和方法1．1材料①721型分光光度计．②磷酸氢二钠－枸橼酸缓冲液：0．1mmol／L枸椽酸被1000ml加入0．2mol／LNa1HPO4液20ml，调整pH2.1。③1mmol／LBPB液：取澳酚蓝0．6g9溶解于10ml0．1mmol／LNa0H液中，然后再加蒸馏水至1000ml。④100g／LBroj35液。⑤显色剂：分别取试剂②、③、④为200、200、30ml再加入无水乙醇200ml，然后加蒸馏水至l000ml．③0．sg／L蛋白标准波：取白蛋白、球蛋白标准液或已知浓度质技血清用生理盐水稀择而成…     

十二烷基硫酸钠在肌酐显色剂中用量的探讨

肌酐直接显色法，在多数实验室中均采用4％十二烷基硫酸钠与破性缓冲液（0．4mol／L氢氧化钠、0．05mol／L硼砂）及12.5g／L苦味酸液2：2：1比例混合而成，我们发现用电％浓度十二烷基硫酸钠配制成的肌历显色剂，放置时间越长试剂颜色越深，由金黄色逐渐变为桔黄色，空白管吸光度随之升高．室温低于15C时还会产生大量十二烷基硫酸钠沉淀物沉淀在瓶底．我室所采用1％十二烷基硫酸钠液配制肌日显色剂，同样达到稳定蛋白质的作用，而且消除了上述不足因素，还节省了大量试剂，同时我们用两种试剂，对40份标本进行检测，经成组t检验，t—1．02…     

肾病的淀粉酶肌酐清除比值(摘要)

淀粉酶肌酐清除比值（ACCR）应用于急性胰腺炎曾有少量文章，但是在肾病应用上未见报道．1方法1．1淀粉酶（Ams）测定加4．938μmol／ml的Merck淀粉基质液1ml，尿（血清）20μl，37℃水浴12min，加0．715mmol／L应用碘液7．OInl。空白管最后加标本，金同．以水调本，在660urn读取吸光度．U川l一（Aa－AU）X1000／AB．1．2WN（Cre）测定取血浆0．5ml，加单一鹤酸试剂4．5ml混匀，10min后，离心沉淀取上情3ml（或0．2ml／dl的尿3ml），加0．04mol／L苦味酸和0．75mol／L氢氧化销各0．75ml，混匀，10min后500nm读取吸光度，尿肌醉展X5…     

乙酸浓度对大便隐血结果的影响

参照《全国临床检验操作规程》，大便隐血试剂配制：1试剂Ⅰ0．15L／L邻甲苯胶（0－Toludne）：将邻甲苯胺15ml，加到适量的冰乙酸中，用冰乙酸稀释到100ml。Ⅱ3％过氧化氢液。分别采用冰乙酸（99．7％）、50％乙酸、25％乙酸，三种浓度进行试剂1（0.15L／L刘甲苯胺）配制，然后进行三种试剂对照实验，常规操作，得出下列结果：乙酸浓度假阳性假阴性冰乙酸12％050％乙酸2％025％乙酸0175％2讨论试剂！中乙酸浓度过高，方法过于敏感，造成假阳性率偏高（12％），乙酸浓度过低．敏感度较差，假阴性偏高（17．5％）。故，0．15L／L邻甲苯胶…     

思南县0～10岁儿童5种金属元素参考范围的调查

目的了解思南地区0～10岁儿童末梢全血中铜（Cu）、锌（Zn）、钙（Ca）、镁（Mg）、铁（Fe）5种金属元素的含量，确定其临床参考范围，为临床提供理论依据。方法采用原子吸收光谱法，采集儿童末梢血40μL加入专用稀释液中进行稀释，测定其中的Cu、Zn、Ca、Mg、Fe含量。结果检测0～10岁儿童964例，按照不同年龄特征将其分为5个组，以^-x1.96s作为参考范围，其结果分别是〈28d：Cu（13．80±7．94）μmol／L，Zn（73．72±38．59）μmol／L，Ca（1．32±0．63）mmol／L，Mg（1．56±0．59）mmol／L，Fe（10．48±5．15）mmol／L；～1岁：Cu（17．48±9．35）μmol／L，Zn（99±44．98）μmol／L，Ca（1．84±0．45）mmol／L，Mg（1．55±0．41）mmol／L，Fe（7．19±2．49）mmol／L；～3岁：Cu（17．43±8．64）μmol／L，Zn（100±41．24）μmol／L，Ca（1．78±0．51）mmol／L，Mg（1．59±0．43）mmol／L，Fe（7．67±2．19）mmol／L；～6岁：Cu（18．15±7．51）μmol／L，Zn（112．20±43．53）μmol／L，Ca（1．85±0．53）mmol／L，Mg（1．65±0．43）mmol／L，Fe（8．15±2．12）mmol／L；～10岁：Cu（15．60±5．70）μmol／L，Zn（120．67±45．92）μmol／L，Ca（1．73±0．49）mmol／L，Mg（1．60±0．39）mmol／L，Fe（8．17±1．98）mmol／L。各年龄组及各组男女之间检测结果经统计分析处理，P〉0．05，差异无统计学意义。结论以上调查结果作为临床参考范围，结果准确可靠，污染少，稳定性好，适宜0～10岁儿童。原子吸收光谱法简便快捷，标本易采集，用血量少，具有临床推广使用价值。该参考值范围仅供思南地区0～10岁儿童参考。     

用加标法标定EDTANa_2液的浓度

用新配制的EDTANa2液滴定血清钙时，必须用钙标准液标定EDTANa2液的浓度．而用新配制的EDTANa2获直接清定钙标准液时，终点颜色不易事提。笔者在工作实践中采用加标标定的方法，较好地解决了这一问题．方法是：①先用新配制的EDTANa2液滴定正常人血清（即取0．1ml正常人血清，加0．5ml，0．1mol／LNaOH液，再加0．05ml钙红指示剂，用新配制的EDTANa2液满定至出现浅蓝色时为终点，可反复清定数次，取均值，得新配制的EDTANa2液的消耗量（ml）A．②再取正常人血清0．lin加钙标准液0．lml，加0．lmol／LNa0H和0．sml，加钙红指…     

脑脊液蛋白定量α,α′-联吡啶测定法

脑脊液（CSF）蛋白定量常用浊度法，仅缩脲试剂比色法［1］和考马斯蓝（CBG）染料结合法［2］等。我们参考有关文献［3，4］用α，α′-联吡啶作CSF蛋白定量测定，方法简便，精密度高，重复性好。1材料和方法1．1原理在酸性溶液中，蛋白质还原Fe为Fe，后者与α，α′-联吡啶结合生成红色复合物，颜色深浅与蛋白含量成正比．1．2试剂1．2．1pH4．00．25mol／L醋酸盐缓冲液。1．224．0g／LFeCl3溶液。1．2．3显色剂α，α′-联吡啶200mg，溶于5ml无水乙醇，加醋酸盐缓冲液至200ml，置棕色瓶，冰箱保存，可长期使用。1．2．4蛋白标准液…     

间苯二酚法快速测定血清唾液酸

血清唾液酸的测定方法主要有硫代巴比妥酸法[1]和间苯二酚法[2，3]。一般都需预处理标本，操作比较复杂。为此，我们研究了间本二酚法，经过改进，使其简化，既能快速测定，又保证结果可靠。现报告如下：1材料和方法1．1原理唾液酸在强酸环境中，三氯化铁参与下，经加热与间苯二酚反应形成紫红色络合物，在一定范围内，呈色强度与唾液酸含量成正比。1．2试剂1．210．06mol／L三氯化铁液：称三氯化铁0．762克，加水溶解并补至100ml，备用。1．2．2显色剂：间苯二酚0．75克加蒸馏水少许溶解，加浓盐酸300ml，加0．06mol／L三氯化铁液7．0ml，…     

介绍一种厌氧菌的简易快速培养

国内目前厌氧菌的培养多采用焦性没食子酸培养法，此法虽较简便，但阳性率放低，且易受污染，使用厌氧培养箱（罐）价格昂贵，难以推广。近来我们参考有关资料，制备了一种厌氧菌的简易快速培养基，临床应用效果较佳，现将配法介绍如下：①常规配制厌氧菌液体培养基，其中加入硫乙醇酸钠，使其最终浓度为1g／L，加入500ml输液瓶内，橡皮塞塞好，铝盖压口，高压灭菌后备用。②常规配制厌氧菌基础培养基，溶化后加入硫乙醇酸钠，使其最终浓度为1．5g／L，同时加入美蓝（每100ml培养基内加0.2g／L美蓝水溶液1ml）。若用刃天青（resazrin）则…     

氯丙嗪单独及与顺铂联合对人宫颈癌Hela细胞生长影响的研究

目的：探讨氯丙嗪及其与抗癌药物顺铂联合应用对人宫颈癌Hela细胞体外生长的抑制作用，以期为药物治疗宫颈癌寻找更加完善的途径。方法：选取人宫颈癌Hela细胞为研究对象。实验分三组，即氯丙嗪、顺铂、氯丙嗪与顺铂联合组。分别处理Hela细胞48小时。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测氯丙嗪和顺铂及两者联合应用对Hela细胞的生长抑制作用。结果：分别用氯丙嗪、顺铂及联合用药处理细胞48h后，氯丙嗪在浓度为10^-7mol／L、10^-6mol／L、10^-5mol／L、10^-4mol／L时对Hela细胞的抑制率分别为22．74％、41．69％、51．39％、67．45％，与对照组（加入等量培养液）比较，差异有非常显著性（P〈0．01）；顺铂在浓度为0．2μmol／L、0．5μmol／L、1．0μmol／L和2．0μmol／L时对Hela细胞的抑制率为43．88％、48．59％、61．49％和71．52％；两者合用可大大提高对Hela细胞的抑制作用，抑制率分别为49．70％、63．52％、70．42％、76．15％，与单纯应用氯丙嗪或顺铂比较差异有非常显著性（P〈0．01）。结论：氯丙嗪能抑制Hela细胞的生长，且氯丙嗪对顺铂有协同作用，从而丰富了临床上宫颈癌治疗。     

同型半胱氨酸致脑微血管内皮细胞损伤及丙丁酚拮抗作用的浓度依赖性

目的：观察同型半胱氨酸对大鼠脑微血管内皮细胞的损伤及抗氧化药物丙丁酚的拮抗作用，并观察这种拮抗作用是否有浓度依赖性。 方法：实验于2004-04／10在广西壮族自治区人民医院实验中心完成。取Wistar大鼠2只，用酶溶液消化大鼠脑皮质组织制成细胞悬液再进行培养传代。①经过鉴定的大鼠脑微血管内皮细胞分为损伤组和正常对照组，正常对照组加入无血清1640培养液；损伤组分别加入用无血清的培养液配制的浓度为0．1，0．5，1．0，1．5，2．0mmol／L的同型半胱氨酸，两个组孵育2，4，6，8，10h后计算血管内皮细胞损伤的指标乳酸脱氢酶释放率。②另将细胞分为3组，正常对照组换用无血清1640培养液孵育8h；损伤组加入1．0mmol几同型半胱氨酸孵育8h：干预组分别加入终浓度为10，20，30，40，50μmol／L的丙丁酚各孵育30min后再加入1．0mmol／L同型半胱氨酸孵育8h，然后计算乳酸脱氢酶释放率。⑧将细胞分为3组：正常对照组RPMI-1640培养基常规培养；损伤组：RPMI-1640培养基＋同型半胱氨酸1．0mmol／L进行培养；干预组：RPMI．1640培养基＋丙丁酚50μmol／L30min后再加入同型半胱氨酸1．0mmol／L进行培养。一共观察7d，并画出细胞生长曲线。 结果：①同型半胱氨酸在浓度1．0mmol／L孵育时间8h时乳酸脱氢酶释放率最高，显著高于对照组[（49．06&;#177;1．07）％，（19．6&;#177;2．04）％，P〈0．011。②丙丁酚在10，20，30，40，50μmol／L时乳酸脱氢酶释放率为（45．57&;#177;1.31）%，（41．17&;#177;1．25）％，（37．9&;#177;0．69）％，（32．57&;#177;9．47）％，（26.26&;#177;2.34）%，与损伤组相比差异显著[（49．03&;#177;1．12）％，P〈0．05]，且丙丁酚浓度越高，乳酸脱氢酶释放率越低。③细胞存活数：损伤组低于干预组和对照组（P〈0．01），后两组间无差异（P〉0．05）。 结论：同型半胱氨酸对大鼠脑微血管内皮细胞有毒性损伤作用，丙丁酚10～50μmol／L呈剂量依赖性拮抗作用同型半胱氨酸所致大鼠脑微血管内皮细胞损伤。     

自动电子计时粘度计冲洗液的配制

自动电子计时粘度计，由于反复测试，血液里的有机物残渣及无机质的沉积，难免堵塞毛细管道，从而影响了测试速度，在日常工作中，笔者配制了一种冲洗液，优于10g／dl海欧溶液，而且操作方便，不需将毛细管卸下，测试速度较原来得到了提高，现就试剂的配制介绍如下：1试剂①0．lmol／L盐酸；②12g／dl胃蛋白酶液配制：称取胃蛋白酶12克加于蒸馏水至0．1升溶解后，三层纱布过滤备用；③Zml川1吐温80；①冲洗液的配制比例；取以上试剂（1）（2）（3）按6：1：3比例混合即可应用。2使用方法取配制的冲洗液，用吸管吸取适量，加入毛细管道，反…     

黄芪注射液治疗慢性肾功能不全患者血浆内皮素变化及其意义

内皮素（ET）是目前已知的最强血管收缩剂[1]，并能促进血管平滑肌增殖，对动、静脉均有很大致李作用[2]。能直接收缩肾血管，使肾血流量减少，参与肾脏病发生和发展[3]。本文应用黄芪注射液治疗慢性肾功能不全患者，观察治疗前后ET变化，旨在寻找ET桔抗剂，另辟治疗肾病新途径。1对象与方法1．1观察对象：18例本院住院病人，男12例，女6例，年龄11～86岁，平均年龄42．1岁。尿素氮（BUN）8.16～15mmol／L6例，＞15mmol／L6例。肌酐（Cr）177～354μmol／L7例，＞354μmol／L5例。病因为慢性肾炎，糖尿病肾病，高血压Ⅲ期。1．2治疗方…