铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性分析及机制探讨

目的:研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性及其机制。方法:取痰液中培养分离的铜绿假单胞菌55株,经K-B法检测耐药性。采用外膜蛋白图谱,对其外膜蛋白OprD2进行SDS-PAGE分析,双纸片增效法检测金属β-内酰胺酶。结果:根据耐药性分为铜绿假单胞菌亚胺培南菌耐药36株和敏感19株。铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株不同程度OprD2减少,耐药组OprD2相对含量明显低于敏感组(P<0.01);产金属β-内酰胺酶6株,检出率10.9%。结论:OprD2的减少和产金属β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

铜绿假单胞菌耐亚胺培南机制研究

目的研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制。方法取临床分离的铜绿假单胞菌35株(对亚胺培南耐药21株,对亚胺培南敏感14株)。采用外膜蛋白图谱,对其外膜蛋白OprD2进行SDS PAGE分析。同时进行超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶检测。结果铜绿假单胞菌耐药组OprD2相对含量明显低于敏感组(P＜0.01),且检出产ESBLs 9株,AmpC酶5株,同时产AmpC酶和ESBLs共2株。结论OprD2减少及产生ESBLs和AmpC酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及其耐药表型与外膜蛋白OprD2的关系

目的 了解铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，Pa）临床分离株对几种常用抗铜绿假单胞菌药物的敏感性；探索铜绿假单胞菌临床分离株对亚胺培南和美罗培南耐药性差异与其膜孔蛋白0prD2变化的关系。方法琼脂对倍稀释法测定142株Pa对亚胺培南、美罗培南等8种常用抗假单胞菌药物的最低抑菌浓度，从中筛出32株对亚胺培南和美罗培南不同耐药表型的Pa，提取外膜蛋白并采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）法分离，检测OprD2相对含量。结果耐药率最高的是亚胺培南（54．23％），其次是环丙沙星（45．07％）、美罗培南（28，87％）、氨曲南（19．72％）、阿米卡星（17.61％）、哌拉西林／三唑巴坦（14．08％）和头孢他啶（11．97％），头孢哌酮／舒巴坦耐药率最低（9．86％）。呈现多重耐药的菌株占38．73％（55／142），交叉耐药率高达40．84％（58／142）。在对亚胺培南耐药的菌株中，合并有其他肛内酰胺类抗生素耐药的菌株达到62．34％（48／77）。32株Pa外膜蛋白电泳结果显示OprD2相对含量在耐药组为0～3．5％（其中有一株为8.70％），敏感组为6．20％～10.20％。在碳青霉烯类耐药组与敏感组之间统计分析P〈0．05，耐碳青霉烯类组低于敏感组，但是在亚胺培南耐药、美罗培南敏感组与亚胺培南、美罗培南均耐药组之间差异无统计学意义。结论铜绿假单胞菌耐药菌株常见，且常呈多重耐药和交叉耐药。亚胺培南耐药率高于美罗培南。膜孔蛋白OprD2减少或缺失是我院Pa对亚胺培南耐药的主要原因之一。但在美罗培南耐药中所起的作用，有待进一步研究。     

铜绿假单胞菌耐亚胺培南相关基因OprD2研究

目的研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制。 方法取临床分离的铜绿假单胞菌18株，经K-B法检测耐药性，根据耐药性分为耐亚胺培南菌组12株和敏感菌组6株。另设1标准菌株ATCC27853。采用PCR法检测各菌株的OprD2基因，探讨OprD2基因突变与细菌对亚胺培南耐药之间的关系。结果12株耐药菌经OprD2基因扩增，8株阴性，4株阳性；6株敏感菌株及标准菌株扩增全部为阳性。统计学检验结果表明，对亚胺培南耐药菌组和敏感菌组OprD2基因阳性率的差异有极显著性（P＜0.01），且在耐药菌中发现了新的OprD2基因突变方式。 结论OprD2突变是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的重要机制，突变的方式有缺失突变与插入失活。     

小儿铜绿假单胞菌感染对亚胺培南耐药性分析及机制探讨

目的 探讨患儿铜绿假单胞菌感染对亚胺培南的耐药性及可能的作用机制.方法 取临床分离的铜绿假单胞菌亚胺培南耐药11株.采用改良三维试验方法 检测ESBLs和AmpC酶.采用外膜蛋白图谱,紫外吸收法测定OprD2含量.采用Etest试验观察氰氯苯腙对亚胺培南最低抑菌浓度(MIC)的影响,以研究细胞内主动外排泵出机制.结果 11株铜绿假单胞菌耐药株中检出单产ESBLs 4株,单产AmpC酶3株,其中同时产AmpC酶和ESBLs共1株.耐药株OprD2相对含量明显低于敏感组(P＜0.01).有27.3%菌株存在主动外排泵出机制.结论 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的产生、OprD2的减少及存在主动外排泵出机制是我院住院患儿铜绿假单胞菌对亚胺培南抗生素耐药的主要原因.     

铜绿假单胞菌对碳青酶烯类抗菌药物的耐药性分析

目的通过分析铜绿假单胞菌感染患者的临床资料及细菌培养结果等,分析铜绿假单胞菌对碳青酶烯类抗菌药物的耐药性。方法选择160例铜绿假单胞菌感染患者为研究对象,首先对对菌株进行耐药性实验检查。抗菌药卡包括美洛培南（MEM）、亚胺培南（IMI）、头孢他啶（CAZ）、庆大霉素（GEN）、阿米卡星（AK）、环丙沙星（CIP）、氨曲南（ATM）、左氧氟沙星（LEV）、美洛西林（MEZ）、氯霉素（CMP）、哌拉西彬他唑巴坦（TZP）和头孢哌酮／舒巴坦（SCF）。以亚胺培南（IMI）和头孢他啶（CAZ）为底物,对金属β-内酰胺酶表型进行筛选。结果铜绿假单胞菌对CMP耐药率最高,为93．75％。对MEM耐药率最低,为18．13％。铜绿假单胞菌对美洛培南敏感率为81．88％,显著高于亚胺培南的敏感率61．88％,差异有统计学意义（X2=4．34、4．34,均P〈0．05）。美洛培南敏感铜绿假单胞杆菌MIC值≤1μg／mL菌株比例为76．9％,显著高于亚胺培南,MIC值2～4μg／mL菌株比例为23．1％,显著低于亚胺培南,差异具有统计学意义（X。=5．43、5．43,均P〈0．05）。32株铜绿假单胞杆菌金属β-内酰胺酶阳性率为19．4％。以CAZ为底物阳性11例,以IMI为底物阳性21例。结论铜绿假单胞杆菌对多种抗生素耐药,而对美洛培南敏感性较高,耐药菌株金属β-内酰胺酶表达率高。     

下呼吸道标本铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性及机制探讨

目的探讨下呼吸道标本铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性及机制探讨。方法选择下呼吸道标本中培养分离的铜绿假单胞菌75株,从金属β-内酰胺酶,超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头胞菌素酶（AmpC酶）的产生状况方面来检测其耐药机制。结果 41株对亚胺培南耐药,34株对亚胺培南敏感。耐亚胺培南铜绿假单胞菌中检出产金属β-内酰胺酯酶6株（14.6%）;检出产ESBLs10株（24.4%）,产AmpC酶6株（14.6%）,其中同时产AmpC酶和ESBLs共3株（7.3%）。结论产生金属β-内酰胺酶、ESBLs和AmpC酶是下呼吸道感染患者铜绿假单胞菌对亚胺培能抗生素耐药的主要原因。     

ICU耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性及危险因素分析

目的探讨重症监护病房(ICU)耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPA)耐药性以及感染的危险因素。方法对ICU临床分离的铜绿假单胞菌标本,采用标准纸片扩散法进行药敏试验。用PCR法检测外膜孔蛋白OprD2基因、金属β-内酰胺酶(MBL)IMP、VIM、GIM和SPM耐药基因和Ⅰ类整合子,并回顾性分析引起IRPA感染的危险因素。结果共检出60株铜绿假单胞菌,其中对亚胺培南敏感20株,耐亚胺培南40株,其中OprD2基因缺失36株,是耐亚胺培南的主要原因。产MBL 4株,Ⅰ类整合子阳性36株。单因素分析发现患者住院时间>2周、气管插管(或切开)、机械通气以及2周内接受过碳青酶烯类抗生素治疗与IRPA感染有关。结论 ICU IRPA的耐药率维持较高水平,OprD2基因缺失及其产MBL是细菌对亚胺培南抗菌药物耐药的重要机制,对IRPA感染应以预防为主,建立耐药监控体系,控制耐药的发展。     

下呼吸道感染铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性及机制探讨

目的探讨下呼吸道感染铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性及机制。方法取下呼吸道标本临床分离的铜绿假单胞菌80株,经纸片扩散法（K-B法）检测耐药性。采用双纸片增效法检测金属β-内酰胺酶,采用标准纸片扩散法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,采用酶提取物三维试验法检测头胞菌素酶（AmpC酶）,采用氰氯苯腙对主动外排泵出表型特征的影响检测细胞内主动外排泵出机制。结果80株临床分离菌株中48株对亚胺培南耐药,32株对亚胺培南敏感。48株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中检出产β-金属酶6株,检出率12.5%;检出产ESBLs11株,AmpC酶8株,其中同时产AmpC酶和ESBLs共4株,检出率分别为22.9%、16.7%和8.3%;检出9株（18.8%）菌株存在细胞内主动外排泵出的耐药机制。结论产生金属β-内酰胺酶、ESBLs和AmpC酶以及存在细胞内主动外排泵出机制是我院下呼吸道感染患者铜绿假单胞菌对亚胺培南抗生素耐药的主要原因。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶类型的研究

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌对其它抗菌药物的耐药性及其产金属β-内酰胺酶的类型。方法收集同济医院2004年1月-9月耐亚胺培南铜绿假单胞菌29株，琼脂稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）；通过改良Hodge试验、双纸片协同试验（DDST）、聚合酶链反应（PCR）、序列分析等方法分析金属β-内酰胺酶类型，紫外分光光度法测定金属β-内酰胺酶的活性。结果29株细菌均为多重耐药株。11种常用抗菌药物中，仅对哌拉西林／三唑巴坦和阿米卡星敏感率较高，分别为69．7％和60．6％。29株菌中有2株产VIM-2金属β内酰胺酶（6．9％）。结论本院耐亚胺培南铜绿假单胞菌流行主要为医院感染所致，且里多重耐药，有2株发现产VIM-2型金属β-内酰胺酶．     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药相关基因的研究

目的:研究耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IMPRPa)β-内酰胺类抗菌药物耐药相关基因的存在情况。方法:对60株临床分离的IMPRPa,采用聚合酶链(PCR)方法检测β-内酰胺类抗菌药物耐药相关基因IMP、VIM、OprD2,并对部分IMP、VIM基因的PCR扩增产物进行序列分析。结果:60株受试菌中,β-内酰胺类抗菌药物耐药相关基因检测阳性为:IMP7株,VIM18株,有3株菌同时携带IMP、VIM基因,IMP、VIM基因序列分析为IMP-1型和VIM-2型,OprD2基因缺失29株。结论:OprD2蛋白通道缺失和产金属β-内酰胺酶是IMPRPa耐亚胺培南的主要机制。     

铜绿假单胞菌耐药情况和携带耐药基因分析

目的：分析铜绿假单胞菌（ PA）的耐药情况和携带耐药基因的情况。方法选择2012年6-12月在我院不同来源的50株PA,收集其药敏结果统计分析耐药情况,并用PCR方法检测其携带耐药基因的情况。结果50株细菌中检出7株有TEM基因,6株有OXA-10基因,4株外膜孔蛋白基因OprD2缺失。50株PA菌株对药物的耐药率情况为：亚胺培南6．00％,美罗培南6．52％,多黏菌素7．89％,哌拉西林／他唑巴坦10．42％,左旋氧氟沙星12．77％,阿米卡星14％,环丙沙星14．29％,头孢他啶26．00％,头孢吡肟28．57％,哌拉西林29．55％,庆大霉素30．00％,氨曲南38．00％。结论50株PA菌株中,耐亚胺培南可能是因为OprD2蛋白表达缺失,但并非所有的OprD2缺失均导致亚胺培南耐药。携带TEM和（或） OXA-10基因则可能耐β内酰胺类抗菌药。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药及基因分析

目的分析耐亚胺培南铜绿假单胞菌（IRPA）的耐药性及耐药基因。方法聚合酶链反应（PCR）法对IRPA耐药相关基因（IMP、SPM、VIM、GIM、GES、OXA-10）和膜微孔蛋白基因OprD2进行检测;用脉冲场凝胶电泳进行菌株同源性检测;用VITEK2Compact进行细菌鉴定及药敏试验。结果28株IRPA对哌拉西彬他唑巴坦、妥布霉素耐药率均为32．1％,对环丙沙星、左旋氧氟沙星耐药率分别为46．4％和67．9％,对其他抗菌药物均呈较高的耐药性（82．1％～100．0％）;有4株对16种抗菌药物均耐药。OprD2基因为25．0％（7／28）,SPM基因为14．3％（4／28）,OXA-10基因为3．6％（1／28）;VIM、GIM、GES耐药基因未检出。结论IRPA的多重耐药现象较严重,治疗IRPA引起的感染首选哌拉西林／他唑巴坦、妥布霉素;耐药基因以IMP、OprD2为主。     

糖尿病合并下呼吸道感染203例临床分析

目的：探讨糖尿病下呼吸道感染的细菌特点及耐药情况。方法：回顾性分析203例以下呼吸道感染症状就诊的糖尿病患者住院的临床资料。结果：社区糖尿病患者下呼吸道感染的病原菌以肺炎链球菌为主要致病菌,占45.5%,其次是革兰阴性杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、非典型性致病菌、真菌。除肺炎链球菌外,革兰阳性球菌对万古霉素耐药率为0%,肺炎链球菌对万古霉素耐药率为5%,革兰阴性杆菌中,嗜麦芽假单胞菌对亚胺培南天然耐药,已发现大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌对亚胺培南的耐药菌株,耐药率为分别5%、5%、10%。结论：社区糖尿病下呼吸道感染病原菌以G＋球菌常见,对万古霉素高度敏感。应重视社区糖尿病下呼吸道感染细菌学特点及耐药性,合理使用抗生素,积极改善脏器功能,以提高治愈率。     

老年患者下呼吸道感染革兰阴性杆菌分布及耐药性分析

目的:观察老年患者下呼吸道革兰阴性杆菌感染常见病原菌的分布及耐药状况.方法:对我院老年患者痰液中分离出的186株革兰阴性杆菌选用15种常用抗生索进行药敏试验.结果:分离出的186株革兰阴性杆菌,主要为:铜绿假单胞菌37株,占19.89%,肺炎克雷伯菌55株,占29.57%,鲍曼不动杆菌18株,占19.9%,阴沟肠杆菌16株,占8.60%,大肠埃希菌34株,占18.28%,嗜麦芽寡养单胞菌9株,占4.84%,其他革兰阴性杆菌17株,占9.14%;耐药性分析显示,革兰阴性杆菌对临床常用抗生素的耐药率最低为亚胺培南,最高为氨苄西林,大部分细菌呈多重耐药.结论:老年患者下呼吸道革兰阴性菌耐药谱广,多重耐药严重.     

334株铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的:了解铜绿假单胞菌的耐药性,为临床合理选择抗菌药物提供参考。方法:回顾性总结2006年北京天坛医院铜绿假单胞菌的分布情况及耐药性。结果:临床分离的334株铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率已达到39.8%;铜绿假单胞菌主要来自神经内科、呼吸科和神经外科,3个科室分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率以呼吸科最严重,已达到48.3%,其次为神经内科(40.2%),神经外科的耐药率最低(17.0%)。结论:北京天坛医院临床分离铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率较高,不同科室分离的铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药状况不同,提示医院宜对重点科室的重点菌种进行耐药监测,以控制耐药菌株的产生。     

铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制的研究

目的建立一种检测下呼吸道感染分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南(IMP)耐药的筛选方法并研究其耐药机制。方法114株铜绿假单胞菌，用KB法筛选出亚胺培南耐菌株、可疑耐药株和敏感株；然后提取部分菌株外膜蛋白，进行SDS—PAGE电泳，比较三组菌株外膜蛋白的差异。结果114株铜绿假单胞菌中有13株耐药，37株可疑耐药(IMP抑菌圈内出现散在小菌落)3株中敏，61株敏感。在外膜蛋白SDS-PAGE电泳图谱上发现敏感株存在OprD2、OprE带，但耐药株、可疑耐药株缺乏OprD2；OprE带缺乏或者染色较淡。定量分析发现耐药株和可疑耐药株OprD2、OprE含量明显低于敏感株。结论KB法可以筛选出IMP可疑耐药的铜绿假单胞菌；IMP抑菌圈内出现散在菌落的菌株是耐药株；铜绿假单胞菌对IMP耐药的主要原因与外膜蛋白OprD2和OprE缺失或含量明显减少有关。     

住院患者常见非发酵糖革兰阴性杆菌的分布及耐药性分析

目的:了解住院患者常见非发酵糖革兰阴性杆菌的临床分布和耐药特征,为临床抗感染治疗提供参考依据。方法:收集汕头潮南民生医院2009年4月1日～2010年3月31日住院患者送检标本分离的细菌,采用微量稀释法和部分纸片扩散法(Kirby-Bauer法)进行药敏试验,结果判断按照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2007年版标准。结果:临床分离的156株非发酵糖革兰阴性杆菌中,铜绿假单胞菌49株(31.4%),不动杆菌属74株(47.4%)以及嗜麦芽窄食单胞菌33株(21.2%)。对铜绿假单胞菌敏感率较高的是多粘菌素E(100.0%)、哌拉西林/他唑巴坦(93.9%)、美罗培南(91.8%)、头孢哌酮/舒巴坦(91.8%);对不动杆菌属敏感率较高的是多粘菌素E(100.0%)、头孢哌酮/舒巴坦(74.3%)、亚胺培南(29.7%)和美罗培南(41.9%),对其余14种抗菌药物耐药率均在70%以上;对嗜麦芽窄食单胞菌敏感率较高的是复方磺胺甲唑(100.0%)、左氧氟沙星(72.7%),对其余16种抗菌药物多数呈高度耐药。结论:非发酵糖革兰阴性杆菌是引起医院感染的主要病原菌,对多种抗菌药物呈高度耐药,临床应密切监测并根据药敏试验结果合理选用抗菌药物,避免滥用,以减少耐药菌株的产生;同时应加强对医院环境消毒和增强医务人员的无菌操作意识。