血平板纸片法分离嗜血杆菌的方法学研究

目的建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法。方法利用万古霉素杆菌肽氯林可霉素巧克力法（ＶＢＣ法）、血平板纸片法和传统巧克力法，对含正常菌群的标本进行嗜血杆菌的分离。结果巧克力平板上流感嗜血杆菌生长佳，但正常菌群影响嗜血杆菌分离，对１００份模拟痰标本分离情况进行比较，结果ＶＢＣ法、纸片法及巧克力法的分离率分别为７６％、８４％和６４％，进行配对卡方检验，巧克力法与ＶＢＣ法和纸片法的Ｐ值均小于０．０１，其结果差异有显著性；对２４１份临床痰标本进行ＶＢＣ法和纸片法分离，流感嗜血杆菌分离率分别为４．３％和４．９８％，进行卡方检验，Ｐ＞０．０５，两法结果无差异。结论血平板上纸片分离嗜血杆菌的方法简便、实用、效果较好，初次分离时可观察卫星现象和溶血情况，有应用推广价值     

血平板纸片法分离嗜血杆菌的疗效观察

目的：建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法。方法：利用万古霉一杆菌肽一氯林可霉素巧克力法（VBC法）、血平板纸片法和传统巧克力法，对含正常菌群的标本进行嗜血杆菌的分离。结果：巧克力平板上流感嗜血杆菌生长佳，但正常菌群影响嗜血杆菌分离，对100份模拟痰标本分离情况进行比较，结果VBC法、纸片法及巧克力法的分离率分别为76％、84％和64％，进行配对卡方检验，巧克力法与VBC法和纸片法的P值均小于0．01，其结果差异有显著性；对241份临床痰标本进行VBC法和纸片法分离，流感嗜血杆菌分离率分别为4．3%和4．98％，进行卡片检验，P〉0．05，两法结果无差异。结论：血平板上纸片分离嗜血杆菌的方法简便、实用、效果较了，初次分离时可观察卫星现象和溶血情况，有应用推广价值。     

流感嗜血杆菌对三种培养基的试验与评价

目的建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法.方法利用万古霉素巧克力法、血平板点种金黄色葡萄球菌法和传统巧克力法,对合正常菌群的痰标本进行嗜血杆菌的分离.对120份痰标本用以上三种方法进行分离,结果加万古霉素巧克力平板上流感嗜血杆菌阳性率高,为16%,传统巧克力法为4.1%,而血平板点种金黄葡萄球菌法仅为2.5%.结论利用万古霉素巧克力平板分离嗜血杆菌方法简便、实用、效果好.     

122株嗜血杆菌的分离鉴定及抗生素耐药性分析

嗜血杆菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）是专性寄生于人类上呼吸道的常居菌群 ,属苛养性细菌 ,与许多严重感染性疾病有关 ［１］。笔者对本院１９９９年１０月～２００１年４月住院患者呼吸道标本分离到的１２２株嗜血杆菌及药敏结果进行分析如下。１材料和方法１．１分离培养基及药敏试剂含有Ｖ、Ｘ因子的嗜血杆菌专用培养基巧克力平板和ＡＴＢ -ＮＨ药敏系统 ,为法国ＢｉｏＭｅｒｉｅｍ公司产品。１．２菌株的分离将标本接种在专用的ＨＡＥ巧克力平板 ,置１０%的ＣＯ２培养箱３５℃培养１８～２４ｈ,观察灰白色、圆形、光滑半透明菌落。１．…     

嗜血杆菌对β—内酰胺类抗生素耐药模式的分析

我们对我院近期分离到的１５２株Ｈａｅｍｏpｈｉｌｕｓ（嗜血杆菌）进行了耐药模式的分析，旨在探讨其对β－内酰胺类抗生素可能有的耐药机理，结果如下。１材料和方法１．１分离培养基含有Ｖ、Ｘ因子的嗜血杆菌专用培养巧克平板（ＨＡＥ，商品编号４３５６）。１．２鉴定及药敏试剂ＡＰＩＮＨ鉴定及ＡＴＢＮＨ药敏系统，均由ＢｉｏＭｅｒｉｅｕｘ公司提供。１．３菌株的分离将标本接种在专用的ＨＡＥ巧克力平板，放入 ５％～ １０％ＣＯ２气袋中 ３５℃± ０． ５℃培养 １８～２４ ｈ后观察，在ＨＡＥ平板上可见灰白色，圆形，光滑半透明…     

嗜血杆菌的分离鉴定及耐药性研究

[目的]进行嗜血杆菌的分离鉴定及耐药性研究。[方法]对临床1120份呼吸道标本进行分离培养,并对分离的101株嗜血杆菌应用纸片扩散法进行7种抗生素药物敏感性试验。[结果]1120份标本中,阳性标本565份,检出嗜血杆菌101株,检出率为17．9％,101株嗜血杆菌对氨苄西林耐药率为加．8％,其中19株卜内酰胺酶阳性(18．8％),阿莫西林／棒酸、阿齐霉素、氯霉素耐药率低2％-7．9％,头孢噻肟,亚胺培南、氧氟沙星未见耐药。[结论]采用胰蛋白胨大豆巧克力平板(TSCA)有助于提高嗜血杆菌检出率,合理使用抗生素,加强嗜血杆菌耐药性监测是防止耐药菌株上升的好办法。     

两种嗜血杆菌在呼吸道感染患者痰培养中的检出情况及耐药分析

目的:通过对呼吸道感染患者痰标本的培养,以建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法,为临床提供诊断及用药依据.方法:利用嗜血杆菌分离专用巧克力平板对痰标本进行嗜血杆菌的分离,用HTM平板作药敏试验,用β-内酰胺酶纸片测定β-内酰胺酶.结果:在分离出的236株嗜血杆菌中,流感嗜血杆菌有124株,占52.5%,副流感嗜血杆菌112株,占47.5%,其中流感嗜血杆菌生物型以Ⅰ型(50.8%)、Ⅲ型(29.8%)为主,Ⅳ、Ⅷ型各占9.7%;副流感嗜血杆菌以Ⅰ型(61.6%)、Ⅱ型(25.0%)为主,Ⅲ型占13.4%.β-内酰胺酶产酶率为2.7%,对β-内酰胺类抗生素的敏感率较高.结论:用嗜血杆菌专用巧克力平板分离嗜血杆菌,方法简便、实用,效果较好,能满足临床需要.     

嗜血杆菌属耐药性研究

目的：对呼吸道感染口才的痰或拭标本中分离到的２０株嗜血杆菌属病原菌的各类、耐药性和β－内酰胺酶产生情况进行分析，以了解嗜血杆菌的耐药游行特点。方法：用ＡＰＩ系统对所分离菌株进行鉴定。Ｎｉｔｒｏｃｅｆｉｎ纸片法检测β－内酰胺酶产生情况。Ｅｔｅｓｔ法检测２０株嗜血菌对６种抗生素的ＭＩＣ值，并用ＷＨＯＮＥＴ４软件进行分析。结果：嗜血杆菌检出率１４．９％，其中副流感嗜血杆菌检出率为１０．４％，流感嗜血杆菌     

改良GCYSB培养基分离流感嗜血杆菌的应用评价

用自配的改良ＧＣＹＳＢ－Ｖ选择培养基从２２５份临床标本中分离到嗜血杆菌属细菌９７件，而用加万古霉素的普通巧克力选择培养基从相同标本中只分离到嗜血杆菌属细菌２９株，分离率相差显著（Ｐ＜０．０１）。流感嗜血杆菌在两种培养基上的平均生长指数分别为７．７２和５．９４。结果表明，ＧＣＹＳＢ培养基比Ｃｈｏｃ培养基更适合流感嗜血杆菌生长。     

温州地区嗜血杆菌的检出及耐药性分析

目的 了解本地区成人呼吸道嗜血杆菌的感染情况及其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗提供参考。方法 用嗜血杆菌专用巧克力培养基（ＨＡＥ）进行分离培养,用ＮＨＩ鉴定卡和ＡＴＢＮＨ药敏检测条鉴定其生物种型及其对多种抗生素的耐药性,用Ｎｉｔｒｏｃｅｆｉｎ纸片法测定被试菌的β－内酰胺酶。结果 １１９０例呼吸道感染病人痰液和咽拭标本中检出１４７株嗜血杆菌,总检出率１２．３５％,其中流感嗜血杆菌３２株（２１．７７％）,副流感嗜血杆菌１１３株（７６．８７％）,杜克雷嗜血杆菌２株（１．３６％）。检测株对头孢噻肟、阿莫西林／克拉维酸、利福平的耐药率较低,分别为６．１２％、１０．８８％、１９．０５％。产β－内酰胺酶的共６４株,产酶率为４３．５４％。结论 本地区成人呼吸道嗜血杆菌感染中以副流感嗜血杆菌为主,产酶率较高,对嗜血杆菌引起的呼     

572例呼吸道标本嗜血杆菌的分离及其耐药性分析

目的了解我院呼吸道标本流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌的分离率及耐药性，为临床合理使用抗生素及感染控制经验用药提供依据。方法标本接种于嗜血杆菌巧克力平板，对分离到的嗜血杆菌进行鉴定，头孢硝噻酚试验检测β内酰胺酶及K-B法进行药敏试验。结果2005年6月-2007年6月共572例呼吸道标本，检出嗜血杆菌81株，其中流感嗜血杆菌59株，占72．8％，产p内酰胺酶株26．4％；副流感嗜血杆菌22株，占27．2％，产β内酰胺酶株22．7％；检出1株β内酰胺酶阴性氨苄西林耐药株，且显示多重耐药。结论我院呼吸道嗜血杆菌感染以流感嗜血杆菌为主，耐药率比国内文献报道的高，且多重耐药的菌株较多。头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛钠、氨曲南、阿莫西林／克拉维酸、亚胺培南是目前治疗嗜血杆菌感染的有效抗生素，加强嗜血杆菌耐药谱监测、合理谨慎使用抗生素是延缓耐药菌株快速上升的最好办法。     

嗜血杆菌培养及耐药性初步研究

目的：选择合适的嗜血杆菌分离培养基提高分离率及对抗生素的敏感性。方法：比较3种培养基上嗜血杆菌的平均生长指数（GI）和分离率。结果：兔血巧克力培养基较羊血巧克力培养基的GI值为高（P＜0．001）；兔血巧克力培养基－V分离出嗜血杆菌59株，分离率为28．23％。兔血巧克力培养基分离出18株，分离率为8．61％。共检测出5株β－内酰胺酶阳性，氨苄西林耐药率最高为33．9％，其次为红霉素及复方新诺明的耐药率分别为30．51和20．34％。结论：培养基中加入新鲜牛肉浸液可促进嗜血杆菌的生长，制培养基所用血源以兔血最佳，其次为羊血。     

嗜血杆菌分离培养基的评价与应用

目的：选择合适的嗜血杆菌分离培养提高嗜血杆菌分离率。方法：将嗜血杆菌接种于7种培养基上,计算和比较7种培养基上嗜血杆菌的平均生长指数（GI）;对325份呼吸道标本进行检测,比较巧克力琼脂（BRchoc）和加万古霉素巧克力琼脂(BRchoc-V）的嗜血杆菌分离率。结果：添加2％鲜酵母浸液和50％鲜牛肉浸液的各种培养基,较未加者的GI值明显增高;兔血巧克力琼脂培养基较羊血巧克力琼脂培养基的GI值为高（P＜0.001）;加万古霉素（50μg/ml）的兔血巧克力琼脂培养基,较未加者对嗜血杆菌的分离率（77.2％／32.0％）明显提高（P＜0.001）。结论：培养基中增加鲜酵母浸液等营养物质可促进流感嗜血杆菌的生长,制培养基所用血源以兔血最佳,其次为羊血;分离培养基加入50μg/ml的万古霉素,可显著提高嗜血杆菌的分离率。     

同种不同株型阴沟肠杆菌引起的肺部感染

阴沟肠杆菌是临床感染的常见菌 ,属于耐药性较强的菌。我们从一例肺部感染住院患者痰中分离到 2株同种不同株型的阴沟肠杆菌 ,其生化表型及耐药表型均显示差异 ,报道如下。一、材料和方法1 标本分离 :患者清晨痰标本 ,分别接种血琼脂和嗜血杆菌巧克力琼脂 ,置ＣＯ2 孵箱 35℃培养 2 4ｈ ,长出灰白色扁平菌落 ,为革兰阴性杆菌。2 方法 :生物梅里埃ＶＩＴＥＫ 32微生物自动分析仪进行细菌鉴定和药敏试验 ,并用纸片扩散法补充部分药敏试验。二、结果生化鉴定 (ＧＮＩ 卡 )为阴沟肠杆菌 (6 46 4772 6 32 ) ,药敏(ＧＮＳ ＧＡ卡 ) :氨苄西林、头…     

院内分离的铜绿色假单胞菌对17种抗生素的耐药特性

为了了解铜绿色假单胞菌的耐药特性，将１９９４年１２月－１９９６年３月从临床痰、尿、创面分泌物，血以及其他标本中分离的４５９株铜绿色假单胞进行常用较新的１７种抗生素敏感性测定，应用纸片扩散法和ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ药敏卡，分型鉴定标准菌株为ＡＴＣＣ２７８５３，其结果用电脑网络统计分析。结果发现对头孢噻甲羧肟，环丙氟哌酸，头孢哌酮，亚胺硫霉素、舒普深和多粘菌素Ｂ耐药率分别为１６％，３９％，３２％，３４％     

仪器法和手工法在副流感嗜血杆菌鉴定和分型的结果比较

目的：比较Vitek-60微生物自动分析系统与传统手工方法对嗜血杆菌鉴定与生物分型的结果，了解Vitek-60微生物自动鉴定仪对嗜血杆菌鉴定与生物分型结果的可靠性。方法：用嗜血杆菌专用平板（HAE）进行分离培养，同时用椎荐的手工方法和Vitek-60微生物自动分析系统对114株嗜血杆菌进行鉴定和生物分型。结果：手工法与仪器法对嗜血杆菌鉴定结果的符合率为100％，而生物分型的符合率仅为66．4％。我院分离的嗜血杆菌以副流感嗜血杆菌为主，其生物分型主要为I型。结论：Vitek-60微生物自动分析系统能正确鉴定嗜血杆菌，但对其生物分型结果与手工方法存在着一定差异。     

超广谱β—内酰胺酶常用检测方法的评价

目的 对三种常用超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）测定方法进行评价。方法 采用纸片扩散法、双纸片增效试验、双纸片协同试验三种方法测定３０株ＥＳＢＬｓ阳性和５０株ＥＳＢＬｓ阴性的革兰氏阴性杆菌及临床分离的６５株革兰氏阴性杆菌产ＥＳＢＬｓ情况。结果 纸和扩散法、双纸片增效试验、双纸片协同试验三种方法敏感性分别为９３．３％、８６．７％、９３．３％,特异性分别为９０．０％、１００．０％、１００．０％,临床分     

温州地区儿童下呼吸道感染嗜血杆菌的耐药性调查

目的了解温州地区下呼吸道感染患儿嗜血杆菌的感染状况及其耐药性。方法采集下呼吸道感染患儿痰液标本,用嗜血杆菌专用巧克力培养基(HAE)进行分离培养,用NHI卡鉴定,ATB-NH做药敏试验,用Nitrocefin纸片法检测β-内酰胺酶。结果516份标本中共分离出126株嗜血杆菌,分离率24.4%。其中流感嗜血杆菌(HI)112株占88.8%,副流感嗜血杆菌(PHI)14株占11.2%。药敏试验结果显示检测株对阿莫西林/克拉维酸的敏感率最高达95.4%,对复方新诺明耐药率最高达63.1%。对氧氟沙星、头孢噻肟、头孢呋新、头孢克洛、利福平、氯霉素、四环素的耐药率分别为9.2%、7.6%、10.7%、6.2%、24.6%、26.2%。56株嗜血杆菌的β-内酰胺酶检测试验为阳性,产酶率为45.2%。结论温州地区小儿下呼吸道感染嗜血杆菌以HI为主,且生物分型多见于Ⅷ型,对氨苄西林的耐药率较高,嗜血杆菌对头孢类抗生素和β-内酰胺类加酶抑制剂的复合制剂较敏感。     

两种培养基对嗜血杆菌属分离鉴定的比较

目的比较两种分离嗜血杆菌的培养基对呼吸道嗜血杆菌进行鉴定与分型。方法采用进口原料配制的培养基（Ｈ１）和国产原料配制的培养基（Ｈ２）分离２５４份呼吸道标本中的嗜血杆菌，从菌落生长、杂菌抑制和分离率等方面比较两种培养基的分离效果。结果Ｈ１与Ｈ２培养基差异无显著性，副流感嗜血杆菌、流感嗜血杆菌分离率分别为１０．２％、３．５％，儿童、成人嗜血杆菌属，流感嗜血杆菌分离率分别为３６．１％、１３．１％、８．８％、０．５％。９株流感嗜血杆菌中非ｂ型８株，ｂ型１株，均产β－内酰胺酶。结论国产原料配制的培养基可用于嗜血杆菌属的鉴定与分型，对大多数细菌室有参考价值     

干扰素治疗前丙肝患者血清及外周血单个核细胞中HCV—RNA的检测

本文采用ＲＴ－ＰＣＲ方法对２６例干扰素治疗前丙肝患者血清ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测，并对１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性的标本进行外周血单个核细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测，发现２６例血清标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率为２６．９％，而１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性标本，其ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ有３例阳性，阳性率为２１．１％。因此，ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ是丙肝病毒血症的又一个诊断指标，是否可作为干扰素疗效判断的