蒙药胃舒安对束缚-水浸应激致胃溃疡的预防作用及对TGF-β_1表达的影响

[目的]评价蒙药胃舒安对束缚-水浸应激所致大鼠胃溃疡的预防作用。[方法]将Wistar实验大鼠,分正常组、给药组和对照组3组,正常组不给药,无束缚-水浸应激压力,对照组给淀粉,给药组灌胃给蒙药胃舒安,给药剂量为0.9~1.3mL/只(82.5 g/L),连续给胃舒安7 d后,停食24 h,建立3 h束缚-水浸应激性胃溃疡模型,取胃,肉眼观察胃黏膜损伤,用ImageJ图像分析法测定胃黏膜溃疡面积,并进行比较。用酶联免疫吸附测定法检测胃溃疡大鼠血清转化生长因子(TGF-β1)含量并进行比较。[结果]蒙药胃舒安对3 h束缚-水浸应激所致大鼠胃溃疡形成有抑制作用。胃舒安组大鼠血清TGF-β1含量明显低于对照组。[结论]蒙药胃舒安对实验大鼠束缚-水浸应激3 h所致胃溃疡的形成有显著抑制作用。     

胃舒安胶囊对动物实验性胃溃疡的影响

目的 :研究胃舒安胶囊对动物实验性胃溃疡的影响。 方法 :应用大鼠幽门结扎胃溃疡模型、大鼠醋酸胃溃疡模型、小鼠利血平所致胃溃疡模型,观察胃舒安胶囊对各型溃疡的影响。 结果 :胃舒安胶囊对幽门结扎性大鼠胃溃疡有明显防治作用;能显著抑制大鼠的胃液分泌,降低胃总酸度,抑制胃蛋白酶活性;对醋酸性大鼠胃溃疡有促进溃疡愈合的作用;对利血平所致小鼠胃溃疡有抑制作用 结论 :胃舒安胶囊对动物实验性胃溃疡具有明显的防治作用。     

寒、热方剂对束缚水浸应激型胃溃疡寒、热证模型大鼠血清TXB_2、NT含量的影响

目的：探讨水浸应激型胃溃疡寒、热证模型的形成机制及寒、热方剂对该模型的作用机理及其方证相应的客观规律。方法：采用寒、热因素结合水浸应激法建立大鼠胃溃疡寒、热证模型,采用酶联免疫法检测受试大鼠血栓素B2（TXB2）和神经降压素（NT）的含量。结果：各模型组与空白组相比,TXB2含量均有不同程度的升高,且差异显著（P〈0.01）。且水浸应激型胃溃疡寒、热证之病证结合模型较单证、单病模型TXB2含量明显升高。各模型组与空白组比较NT含量均明显降低,有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）。但各模型组间比较无明显差异。大黄黄连泻心汤、理中丸可分别显著降低热模型组、寒模型组TXB2含量,升高NT含量（P〈0.05或P〈0.01）。结论：通过＂方证相应＂理论验证了＂病证结合＂胃溃疡寒、热证模型的可行性,大黄黄连泻心汤对热性胃溃疡、理中丸对寒性胃溃疡的治疗作用,可通过降低血清TXB2、升高血清NT的含量而实现。     

寒、热方剂对水浸应激型胃溃疡寒、热证模型大鼠胃组织SOD活性、MDA含量的影响

目的:探讨水浸应激型胃溃疡寒、热证模型的自由基代谢机制及寒、热方剂对该模型的自由基代谢的影响,阐明其方证相应的客观规律。方法:采用寒因素(冰水,0.3mol/LNaOH液)、热因素(8%干辣椒粉的60%乙醇混悬液)分别结合水浸应激法,建立实验性大鼠胃溃疡寒、热证模型。采用黄嘌呤氧化酶法(羟氨法)、硫代巴比妥酸法检测胃组织中SOD活力及MDA含量。结果:SOD方面,水应激胃溃疡组、水应激胃溃疡寒证组、水应激胃溃疡热证组与空白比较活力下降,有显著性差异(P<0.01),但寒证与热证间比较无明显差异。MDA方面,水应激胃溃疡组、水应激胃溃疡热证组、单纯热证组与与空白比较含量明显升高,有显著性差异(P<0.01),且以水应激胃溃疡热证组升高最为显著。大黄黄连泻心汤、理中丸可选择性针对相应的寒性、热性模型体现出对自由基代谢的调节作用。结论:通过"方证相应"理论验证了"病证结合"胃溃疡寒、热证模型的可行性。水浸应激型胃溃疡寒、热证模型存在自由基代谢异常。MDA可作为水浸应激型胃溃疡热证的微观指征。     

大黄黄连泻心汤、理中丸对消炎痛型及水浸应激型胃溃疡寒热证模型大鼠胃组织EGF、TGF-α含量的影响

目的：探讨消炎痛型、水浸应激型胃溃疡中医寒热证模型的形成机制及寒热方剂对胃溃疡寒热证模型的基本作用机理和方证相应的客观规律。方法：采用寒热因素结合腹腔注射消炎痛和水浸应激法,分别建立大鼠胃溃疡寒、热证模型,用酶联免疫法检测大黄黄连泻心汤、理中丸对受试大鼠胃组织中EGF和TGF-α含量的影响。结果：各模型组大鼠胃组织EGF和TGF-α含量显著降低,与空白组比较具有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）;大黄黄连泻心汤可显著升高热性溃疡组大鼠胃组织EGF和TGF-α的含量,理中丸可显著升高寒性溃疡组大鼠胃组织EGF和TGF-α的含量（P〈0.05或P〈0.01）。结论：通过＂方证相应＂理论验证了＂病证结合＂的胃溃疡寒热模型复制成功,大黄黄连泻心汤可以治疗热性消炎痛型胃溃疡,预防热性水浸应激型胃溃疡的形成;理中丸可以治疗寒性消炎痛型胃溃疡,预防寒性水浸应激型胃溃疡的形成,均可通过升高大鼠胃组织中EGF和TGF-α的含量而实现。     

痔愈喷剂对大鼠创面TGF-β1表达的影响

目的:探讨痔愈喷剂对大鼠术后创面愈合的作用机制。方法:30只SD大鼠随机分为痔愈喷剂组、空白对照组、湿润烧伤膏组。按照制备大鼠皮肤创伤模型,分别于造模后第7、14、21天,取创伤周围少量皮肤组织。采用免疫组织化学技术观察创面肉芽组织中TGF-β1表达的变化。结果:造模术后第7、14、21天痔愈喷剂组TGF-β1含量明显高于空白对照组(P0.05),与湿润烧伤膏组相比无明显差异。结论:痔愈喷剂可增加术后创面TGF-β1表达量,促进创面愈合的作用。     

中医药对TGF-β1调控作用的研究进展

从肝纤维化、肾脏疾病、肺纤维化、骨科疾病、创伤修复、动脉粥样硬化等6个方面，系统阐述了中医药对TGF-β1调控作用的研究进展，并提出了存在问题及思考，以进一步将该研究引向深入。     

清肺化痰通络方对大鼠肺纤维化的干预作用及对TGF-β_1表达的影响

目的：观察清肺化痰通络方对肺间质纤维化大鼠肺内胶原纤维沉积和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法：Wistar雌性大鼠72只,随机分为对照组、模型组、中药组。模型组和中药组大鼠气管内一次性滴注博莱霉素A5（BLMA5）,对照组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后2h开始给药,模型组和对照组灌服生理盐水,中药组灌服清肺化痰通络方药物,每天一次。各组动物分别于第3、7、14、28天各处死6只,取肺组织进行HE和Masson染色,观察肺内胶原的沉积部位和数量;同时进行免疫组化染色,结合图像分析来检测各组肺组织中TGF-β1的表达水平。结果：对照组肺内结构正常,胶原沉积不明显;模型组可见支气管黏膜下、血管壁及其周围、肺间质、肺泡壁有大量胶原沉积;中药组胶原沉积明显轻于模型组。第14天模型组、中药组TGF-β1在肺内的表达呈强阳性,高于对照组,差异有显著性意义（P〈0.01）。中药组TGF-β1表达数量少于同一时段模型组,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：清肺化痰通络方可以抑制肺间质纤维化大鼠肺组织内胶原的沉积,可以减缓肺纤维化的形成,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现。     

骨碎补对骨折愈合中TGF-β_1表达的影响

目的 :骨碎补是骨伤科常用的一味中药 ,为了进一步探讨其促进骨折愈合的机理 ,设计了该实验以期为临床运用骨碎补提供理论依据。方法 :将 3 6只 SD大鼠随机分成三组 :生理盐水组 (A)、骨碎补组 (B)、伤科接骨片组 (C)。按标准骨折模型方法造模 ,不作任何外固定 ,分笼饲养。从手术后第二天开始灌胃给药 ,骨碎补组每天以骨碎补水煎液分早晚 2次灌胃 ,伤科接骨片组每天给药 2次 ,对照组同时给予等量生理盐水。于术后第 7天、1 4天、2 1天每组分别处死动物 4只 ,取出骨标本。骨标本制成切片测量骨痂厚度及 TGF-β1 免疫组化染色。结果 :骨碎补组骨痂组织形成丰富 ,厚度明显优于对照组 (P<0 .0 1 ) ;骨碎补组骨痂组织中 TGF-β1表达量及阳性定位与伤科接骨片组相同 ,均明显强于对照组。结论 :实验结果表明骨碎补能增加骨痂厚度 ,提高骨折愈合质量。增加 TGF-β1 在骨痂组织中的表达 ,可能是骨碎补促进骨折愈合的机制之一。     

安胃汤对胃溃疡大鼠胃黏膜EGFR及TGF-β1表达的影响

目的:通过实验性乙酸大鼠胃溃疡模型,研究安胃汤免煎剂治疗慢性胃溃疡机理。方法:采用免疫组织化学方法观察安胃汤免煎剂对实验性乙酸大鼠胃溃疡模型愈合时溃疡周围胃黏膜EGFR及TGF-β1表达的影响,并进行图像分析及统计学处理。结果:与模型组相比,安胃汤治疗组和雷尼替丁组可显著增强胃黏膜表皮生长因子受体(EGFR)表达(P<0.01)及TGF-β1表达(P<0.01),安胃汤大剂量组强于雷尼替丁组(P<0.01)。结论:安胃汤通过增强溃疡周围胃黏膜EGFR及TGF-β1的表达而促进溃疡愈合、提高溃疡愈合的质量。     

清胃汤联合四联疗法治疗幽门螺杆菌阳性胃溃疡临床研究

目的:观察清胃汤联合四联疗法治疗幽门螺杆菌(HP)阳性胃溃疡的临床疗效,初步探讨相关机制。方法:将86例HP阳性胃溃疡患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组各43例,对照组予以四联疗法,治疗组予以清胃汤联合四联疗法,疗程均为6周,比较两组治疗前后中医证候评分、HP根除率、溃疡复发率和血清转化生长因子-β1(TGF-β₁)、细胞外调节蛋白激酶 1/2(ERK1/2)和表皮生长因子受体(EGFR)水平,治疗前后对两组进行胃镜检查,比较两组溃疡直径、底部厚苔面积、再生上皮面积和溃疡周围黏膜充血面积,并比较两组胃镜疗效。结果:治疗组治疗后胃脘疼痛、胸胁胀满、嗳气反酸、纳差食少、胃脘烧灼感评分均低于对照组(均P<0.05),溃疡直径、底部厚苔面积、溃疡周围黏膜充血面积均小于对照组(均P<0.05),再生上皮面积大于对照组(P<0.05); 血清TGF-β₁水平低于对照组(P<0.05),ERK1/2、EGFR水平均高于对照组(均P<0.05),胃镜疗效、HP根除率均高于对照组(均P<0.05),复发率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:清胃汤联合四联疗法可有效改善中医证候,促进溃疡愈合,提高HP根除率和内镜疗效,降低溃疡复发率,治疗HP阳性胃溃疡效果显著,其机制可能与调节患者血清TGF-β₁、ERK1/2、EGFR含量有关。     

除幽愈疡免煎颗粒对大鼠实验性胃溃疡表皮生长因子的影响

目的:研究除幽愈疡免煎颗粒对乙酸致大鼠实验性胃溃疡的愈合效果。方法:将清洁级SD大鼠随即分为5组:A组(正常组/对照组)、B组(模型组)、C组(西药治疗组)、D组(中西医结合组)及E组(纯中药治疗组)。各组均10只,雌雄各半。采用冰乙酸腐蚀法制作胃溃疡大鼠模型。观察除幽愈疡免煎颗粒干预胃溃疡大鼠模型的胃黏膜病理形态学变化,酶联免疫(ELISA)方法检测血清标本VEGF含量变化。免疫组化法检测各组大鼠VEGF表达,Real-Time PCR检测各组大鼠VEGF表达。结果:同模型组相比,中药、西药和中西药组溃疡面积均显著缩小,差异均有统计学意义(P0.05);同时分别与西药组、中西药组相比,中药组溃疡面积均显著缩小,差异都有统计学意义(P0.05);中药组溃疡抑制率为62.8%,高于中西药组27.1%和西药组34.6%。免疫组织化学结果表明,正常组、中药组和中西医结合组大鼠胃溃疡黏膜有较强的VEGF蛋白表达,其余2组VEGF蛋白表达较弱;其中,对照组中VEGF mRNA表达水平显著高于其他组,而中药组和中西药结合组中VEGF mRNA表达水平与对照组相近,明显高于模型组与西药组,差异有统计学意义(P0.05)。ELISA分析发现,中药组血清VEGF水平与对照组水平相当,而西药组、中西药结合组中VEGF水平低于其他组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:除幽愈疡免煎颗粒可增强胃溃疡大鼠胃组织VEGF及VEGFmRNA的表达,促进血管新生,促进溃疡愈合。     

大黄黄连泻心汤抑制NLRP3炎症小体活性对急性胃溃疡的保护作用及机制研究

[目的] 研究不同浸渍条件下大黄黄连泻心汤抑制 NOD 样受体热蛋白结构域相关蛋白 3（NLRP3）炎症小体活性对急性胃溃疡小鼠的保护作用,探讨其作用机制并筛选最佳浸渍条件。[方法] 对小鼠进行无水乙醇灌胃以建立急性胃溃疡模型,并给予不同浸提条件下的大黄黄连泻心汤进行实验,同时选用 MCC950 抑制剂作为阳性药。对各组小鼠进行胃组织苏木精-伊红（HE）染色,观察胃组织病理变化;统计溃疡指数（UI）;用酸碱度（pH）试纸测试胃液 pH值;检测胃液胃蛋白酶活性（PA）;采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清中白细胞介素 1β（IL-1β）和白介素 18（IL-18）的水平;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测药物组小鼠胃组织中 NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1（caspase-1）的蛋白表达。[结果] 与空白组相比,模型组小鼠胃组织出现明显的溃疡病变,各项指标异常。与模型组相比,药物组可降低乙醇诱导下急性胃溃疡模型小鼠的溃疡指数（P＜0.05 或 P＜0.01）,抑制胃酸的分泌（P＜0.05）,抑制胃蛋白酶活性（P＜0.01）;各药物组中促炎细胞因子 IL-1β、IL-18 的表达明显降低（P＜0.01）;通过各药物组灰度值/对照模型组蛋白灰度值的比较,表明药物组能够降低 NLRP3、Caspase-1 蛋白表达（P＜0.01 或 P＜0.05）。最后,对不同浸渍条件下大黄黄连泻心汤的药效进行综合评分,结果表明 E（85 ℃、15 min）组评分最高。[结论] 大黄黄连泻心汤对无水乙醇灌胃诱导的急性胃溃疡小鼠有保护作用,其机制可能与抑制 NLRP3 炎症小体活性有关。通过各药物组抑制 NLRP3 炎症小体的表达差异,得出 85 ℃、15 min 的最佳浸渍条件。     

吴茱萸碱磷脂复合物自微乳给药系统的胃溃疡靶向效应及保护作用评价

目的 对吴茱萸碱磷脂复合物自微乳给药系统（evodiamine phospholipid complex self-emulsifying drug delivery system,Evo-PC-SMEDDS）的胃溃疡靶向效应进行评价，并验证其药效。方法通过分析荧光成像结果与激光共聚焦显微镜荧光成像结果，对该制剂的胃溃疡靶向性做出评价；通过胃组织形态学观察、HE染色结果，评价Evo-PC-SMEDDS对乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型的改善作用，并计算胃溃疡指数、胃溃疡抑制率对胃溃疡情况进行量化和评分；通过测定胃分泌物与氧化应激相关因子，推测Evo-PC-SMEDDS可能的作用机制。结果 动物荧光成像结果显示，Evo-PC-SMEDDS在大鼠体内存在胃滞留。通过激光共聚焦显微镜观察到，荧光探针FITC标记的Evo-PC-SMEDDS集中分布于模型大鼠的溃疡黏膜表面。药效学结果与HE染色分析结果均显示，Evo-PC-SMEDDS对乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型有较好的保护作用，且测得给药组大鼠胃组织中的MPO和NO含量显著降低（P<0.01）。且与吴茱萸碱组相比，其胃组织中GSH水平显著提高（P...     

中西医结合疗法治疗肝胃郁热型消化性溃疡的临床观察

目的观察愈疡汤联合西医常规疗法治疗肝胃郁热型消化性溃疡的临床疗效。方法将104例肝胃郁热型消化性溃疡患者随机分为治疗组与对照组,每组52例。对照组予西医常规疗法,治疗组在对照组治疗措施基础上加用愈疡汤。两组疗程均为1个月,随访半年,观察胃镜疗效,比较中医证候积分、复发率、Hp再感染率的情况。结果 1治疗组、对照组胃镜总有效率分别为84.62%、63.46%;组间胃镜疗效比较,差异有统计学意义(P0.05)。2治疗前后组内比较,两组中医证候积分差异均有统计学意义(P0.05);组间治疗后比较,中医证候积分及其差值的差异有统计学意义,治疗组优于对照组(P0.05)。3疗程结束后3个月、半年,治疗组复发率分别为4.76%(1/21)、23.81%(5/21),对照组复发率分别为30.77%(4/13)、53.85%(7/13);两组3个月、半年的复发率比较,差异均有统计学意义(P0.05)。4疗程结束后3个月、半年,治疗组Hp再感染率分别为9.38%(3/32)、25.00%(8/32),对照组Hp再感染率分别为19.05%(4/21)、61.90%(13/21);两组3个月、半年的Hp再感染率比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论愈疡汤联合西医常规疗法治疗肝胃郁热型消化性溃疡,可明显改善患者的临床症状,降低复发率与Hp再感染率。     

Effect and mechanism of methyl helicterate isolated from Helicteres angustifolia (Sterculiaceae) on hepatic fibrosis induced by carbon tetrachloride in rats

Ethnopharmacological relevance

Methyl helicterate is a triterpenoid isolated from Helicteres angustifolia (Sterculiaceae), one of the valuable traditional Chinese herbs. Antifibrotic activities of H. angustifolia have been extensively proved.

Aim of the study

The purpose of this study was to investigate the effect of methyl helicterate (MH) on liver fibrosis in rats induced by carbon tetrachloride (CCl₄) and to explore its underlying mechanism.

Materials and methods

Hepatic fibrosis was induced in male Sprague–Dawley (SD) rats by intragastric administration with 2 ml/kg CCl₄ (mixed 1:1 in peanut oil) twice a week for 12 weeks. To evaluate the effect of MH (16.72, 33.45, 66.90 mg/kg) on hepatic fibrosis, liver function, histological study and hepatic fibrosis evaluation were performed. Liver function was assessed by determining the serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), albumin (Alb) and total protein (TP). The biomarkers such as hydroxyproline (Hyp), hyaluronic acid (HA), type III precollagen (PCIII) and laminin (LN) were examined for the evaluation of hepatic fibrosis. The underlying mechanism was investigated by measuring oxidative stress level and detecting the expression of TGF-β1 mRNA and Smad3 protein.

Results

MH (33.45, 66.90 mg/kg) treatment significantly inhibited the loss of body weight and the increase of liver index in rats induced by CCl₄. MH also improved the liver function as indicated by decreasing serum enzymatic activities of ALT, AST, TP and Alb (P<0.05). Histological results indicated that MH alleviated liver damage and reduced the formation of fibrous septa. Moreover, MH significantly decreased liver Hyp, HA, LN and PCIII (P<0.05). Research on mechanism showed that MH could markedly reduce liver malondialdehyde (MDA) concentration, increase activities of liver superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px), and inhibit the expression of TGF-β1 mRNA and Smad3 protein (P<0.05).

Conclusions

Our findings indicated that MH can inhibit CCl₄-induced hepatic fibrosis, which may be ascribed to its radical scavenging action, antioxidant activity, and modulation of TGF-β-Smad3 signaling pathway.     

慢性束缚应激抑郁症大鼠海马Belin-1、LC3的表达变化及逍遥散的调节作用

目的:观察慢性束缚应激抑郁症大鼠模型中海马自噬标志蛋白Belin-1及LC3的表达变化情况,探讨逍遥散对其的调节作用。方法:20只Wistar大鼠随机分为4组(n=5):正常组、模型组、逍遥散组、氟西汀组。采用21 d慢性束缚应激方法建立抑郁症大鼠模型,利用免疫组织化学方法检测大鼠海马CA3区Belin-1、LC3表达情况。结果:Belin-1、LC3在各组中较正常组均有较明显的表达(P0.05)。与模型组相比,逍遥散能明显下调Belin-1、LC3的表达(P0.05)。结论:慢性束缚应激抑郁症大鼠海马自噬相关蛋白Belin-1、LC3表达有变化,提示自噬可能是抑郁症发病机制之一,且逍遥散治疗抑郁症的机制可能与调节自噬标志蛋白Belin-1、LC3有关。     

Study on the drug selection law for treatment of chronic gastritis with spleen deficiency and stomach dryness by complex system entropy cluster

Objective：To study on Prof. GAO Zhong-ying＇s drug selection law for treatment of chronic gastritis with data mining technique. Methods： The 407 medical records of chronic gastritis treated by Prof. GAO Zhong-ying were collected and the study on these drugs in the recipes was carried out with data mining method. Among them, the recipe composed of one drug was studied with frequency statistical method, correlativity between drug pairs with improved mutual information, correlativity among multi-drugs with complex system entropy cluster technique. Results： In treatment of chronic gastritis by Prof. GAO Zhong-ying there were 30 drugs with a higher use frequency of over 38 times, 94 commonly-used drug pairs with correlation coefficient of over 0.05, 11 commonly-used drug core combinations. Conclusion： The results attained with data mining technique for studying experience of famous and old TCM physicians conform to the clinical practice and the method is of an important significance for summarization of famous and old TCM physicians＇ experiences.     

补肾活血方对高糖高脂诱导损伤的小鼠脑微血管内皮细胞内质网应激和RAGE/LRP-1蛋白表达的影响

目的:在细胞水平探索补肾活血方对高糖高脂诱导的小鼠脑微血管内皮细胞(BEND3细胞)损伤的改善作用,并探究补肾活血方对高糖高脂导致的内质网应激和转运A β相关受体蛋白的作用.方法:采用高糖高脂(25mmol/L葡萄糖,200μ mol/L棕榈酸)刺激BEND3细胞,用CCK-8法筛选合适的补肾方(BS)、活血方(HX)...