乙醇、乙醛对红细胞膜ATP酶活性影响的体外实验研究

采用钼酸铵定磷法测定不同剂最的乙醇、乙醛作用下红细胞膜Na^ -K^ -ATPase、Mg^2 -ATPase、Ca^2 -ATPase活性的变化,探讨乙醇、乙醛的细胞膜毒性及其机制。结果显示随着乙醇、乙醛剂量的增加,细胞膜Na^ -K^ -ATPase、Mg^2 -ATPase、Ca^2 -ATPase酶活性逐渐降低,呈现剂量-效应关系。当乙醇剂量为2mmol／L时,各实验组与对照组比差异有显著性,而乙醛剂量为1mmnol／L时,各实验组_卜j对照相比差异已呈现显著性。表明乙醇、乙醛对细胞膜Na^ -K^ -ATPase、Mg^2 -ATPase、Ca^2 -ATPase酶活性均有抑制作用。乙醛是乙醇在机体内的重要代谢产物,在研究乙醇的毒性作用及机制时乙醛的作用不容忽视．     

1,2-二氯乙烷致脑水肿过程中自由基的作用研究

目的：探索自由基在1，2－二氯乙烷（1，2－DCE）致脑水肿过程中所起的作用。方法：在复制DCE脑水肿模型的基础上，检测动物血清和脑组织中丙二醛（MDA），谷胱甘肽（GSH）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活力的变化。结果：随着染毒学的增加，血清中MDA的变化由低到高，除低浓度组与中浓度组比差异无显著性外，其余各组之间相比差异都具有显著性（P＜0．05），而SOD则先增加后降低，对照组的SOD活力在染毒前后变化不明显；低和中浓度组SOD活力在染毒后增加（P＜0．05），高浓度组SOD活力染毒后大幅降低（P＜0．05），GSH随着浓度的增加，含量逐渐降低，降低浓度组与对照组差异无显著性外（P＞0．05），其余各组之间相比差异有显著性（P＜0．05），脑组织中随着染毒浓度的增加，MDA逐渐增加，除低浓度组与对照组差异无显著性外（P＞0．05），高、中浓度组与对照组比差异有显著性（P＜0．05），SOD值逐渐减小，高，中浓度组与对照组相比，差异有显著性（P＜0．05），GSH先升后降、高、低浓度组与对照组相比差异具有显著性（P＜0．05），结论：1，2－DCE致脑水肿过程中，自由基所起的作用不容忽视。     

镉、硒对神经细胞钙稳态及蛋白激酶活性交互影响的体外实验研究

目的：观察镉,硒对神经细胞内[Ca^2 ]i及蛋白激酶（PKA,PKC）活性的交互影响,方法,以分离神经细胞为研究对象,测定不同状态下神经细胞内[Ca^2 ]i及蛋白激酶（PKA,PKC）活性,结果：5－50umol/L,镉可使神经细胞内[Ca^2 ]i及PKA活性降低,而使PKC活性升高,500umol／L镉可使神经细胞内[Ca^2 ]i发生变化,对镉所致神经细胞内[Ca^2 ]i的变化也没有影响,结论：体外实验不适合于硒拮抗镉毒性作用的研究。     

1，2－二氯乙烷对大鼠神经细胞内钙离子浓度的影响

[目的]用体外实验方法研究1,2-二氯乙烷（1,2-DCE）染毒后大鼠神经细胞内钙离子（Ca^2＋）浓度的变化。[方法]体外培养新生SD大乳鼠脑皮质细胞,分别用0．5、1．0、2．0mL/L1,2-DCE染毒,另设对照组,观察各组神经细胞形态学变化。同时应用激光共聚焦显微镜测定各组细胞内Ca^2＋浓度,探讨1,2-DCE对大鼠神经细胞内Ca^2＋浓度的影响。[结果]神经细胞染毒后,神经细胞形态发生明显改变：胞体肿胀崩解、胞核模糊不清、突触变短变粗、细胞间连接减少、细胞膜不完整;随着染毒剂量的增高,神经细胞损伤的严重程度呈上升趋势。各染毒组神经细胞活力较对照组有所下降,差异有统计学意义（P〈0．01）;染毒2h后随着染毒剂量的增加,各组神经细胞内Ca^2＋浓度呈上升趋势,各染毒组细胞与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;染毒24h后,低、中剂量组与对照组细胞内Ca^2＋浓度比较差异有统计学意义（P〈0．01）,高剂量组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。[结论]1,2-DCE可以导致神经细胞水肿坏死,有剂量依赖关系,神经细胞内Ca^2＋浓度亦见升高,提示Ca^2＋可能与1,2-DCE致神经细胞中毒性脑水肿有关。     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体和Ca2+在1,2-二氯乙烷致急性中毒性脑病中的作用

目的 研究1，2-二氯乙烷（1，2-DCE）致大鼠中毒性脑病模型中N-甲基-D-天门冬氨酸受体（NMDAR）和Ca^2＋的相关作用机制。方法 体外培养新生SD大鼠脑皮层细胞，将细胞分为对照组及0．5、1．0、2．0mmol／L染毒组，同时研究染毒后分别用二者的拮抗剂氯胺酮、尼莫地平将二者拮抗后，观察细胞形态学和活力的变化。结果 染毒12h后，神经细胞形态发生明显改变，胞体肿胀崩解，胞核模糊不清，突触变短、变粗，细胞间连接减少，细胞膜不完整，随着染毒剂量的增高，神经细胞损伤的严重程度呈上升趋势；各染毒组与对照组和拮抗组的神经细胞活力比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论 NMDAR和Ca^2＋在1，2-DCE致神经细胞中毒性脑水肿机制中可能起重要作用。     

2—乙氧基乙醇对小鼠肝脏损伤的研究

目的：探讨2－乙氧基乙醇对肝脏的损伤机制。方法：对小鼠进行2－乙氧基乙醇腹腔注射亚慢性染毒并观察小鼠肝脏生化代谢的改变。结果：肝脏一氧化氮含量,一氧化氮合成酶活性自第1周开始比对照组明显增加（P＜0．05）,二者实验组第2,3,4周均比第1周实验组显著增加（P＜0．01）,超氧化物歧化酶活性自第3周开始比对照组和第1周实验组显著增强（P＜0．01）,脂质过氧化产物丙二醛含量自第2周开始比对照组和第1周实验组显著增加（P＜0．01）,上述指标呈良好时间－效应关系,染毒组血清谷丙转氨酶活性自第1周起比对照组显著升高（P＜0．05）,第4周回落。结论：2－乙氧基乙醇能引起肝脏一氧化氮自由基增加并诱发脂质过氧化反应对肝脏发生毒性作用。     

微波预先辐照致γ射线对小鼠骨髓基质细胞毒性作用的改变

[目的]探讨微波预先辐照对γ射线致骨髓基质细胞凋亡、线粒体膜电位、胞内游离Ca^2＋浓度和Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性改变的影响。[方法]将原代培养的骨髓基质细胞随机分为正常对照组、单纯微波组、单纯γ射线组和联合组。12μW／cm。微波对单纯微波组和联合组连续辐照7d,每天1h,第8天对单纯丫射线组和联合组进行5Gy的γ射线照射。用钙离子依赖性磷脂结合蛋白．异硫氰酸荧光素及碘化丙啶（Annexin V-FITC及PI）双标记法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测线粒体膜电位和胞内游离Ca^2＋浓度,试剂盒检测Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性。[结果]与正常对照组相比,各处理组细胞的凋亡率和线粒体膜电位未见明显改变。γ射线照射后24h,单纯微波组、联合组和单纯γ射线组细胞内游离Ca^2＋浓度明显升高（P〈0．05）,Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性明显降低（P〈0．05）.与单纯γ射线组相比,联合组细胞内游离Ca^2＋浓度明显降低（P〈0．05）,Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性明显升高（尸〈0．05o[结论]本实验条件下,900MHz,12μW／cm。的微波辐射和5Gvl,射线均不能引起细胞凋亡率、线粒体膜电位的明显变化,但能导致胞内游离Ca^2＋浓度明显上升和Ca^2＋ ATP酶活性明显降低。预先微波辐照能够明显减弱γ射线引起的胞内游离Ca^2＋浓度和Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性改变。     

软骨藻酸的毒性作用机制研究概况

软骨藻酸是由硅藻产生的兴奋性神经毒素，在过去10年对人类和海洋动物的健康产生了严重危害。国外对其毒性和作用机制做了大量调查和研究。本文从几个方面讨论了其可能的毒性作用机制：（1）软骨藻酸作用于谷氨酸受体，与内源性神经递质协同发挥毒性作用；（2）引起细胞内Ca^2 超载和神经元肿胀；（3）引起细胞能量代谢紊乱。     

太极拳运动对中老年人红细胞膜Na+-K+ATP酶和Ca2+-Mg2+ATP酶活性的影响

目的：探讨太极拳运动对中老年人红细胞膜Na^ -K^ ATP酶和Ca^2 -Mg^2 ATP酶活性的影响。方法：选取64名练习太极拳的中老年人为观察组，另选47名很少参加体育锻炼者为对照组，采两组研究对象的静脉血，检测Na^ -K^ ATP酶和Ca^2 -Mg^2 ATP酶的活性。结果：观察组2种ATP酶活性均高于对照组（P＜0．01）；性别间差异无显著性（P＞0．05）；2种酶活性均与练拳时间呈正相关（P＜0．05）。结论：太极拳运动能提高中老年人红细胞膜Na^ -K^ ATP酶和Ca^2 -Mg^2 ATP酶活性，改善细胞代谢功能，练拳时间越长，效果越好，从而促进健康，延缓衰老。     

调味品中氯丙醇衍生化检测方法研究及应用

本文概述了调味品中氯丙醇形成机理及毒性，报告调味品中氯丙醇的检测技术的研究过程，把其中最主要且成熟的三种气相色谱和质谱检测方法详细论述。（1）衍生化气相色谱／电子捕获检地测定酱油3－氯－1，2－丙二醇（3－MCPD）；（2）衍生化气相色谱／质谱法测定酱油中3－氯－1，2－丙二醇（3MCPD）；（3）衍生化气相色谱／双串联质谱法同时测定酱油中1，2－二氯－2－丙醇、2，3－二氯－1－丙醇和3－氯－1，2－丙醇。应用以上完善的检验技术完成大量样品检测，全面对酱油企业进行管理，解决了输欧酱油遭禁问题，为酱油顺利出口做了大量工作。应用三种气相色谱和质谱方法检测调味品中氯丙醇含量，结果可靠，符合国家调味品最高残留量（MRL）标准。     

ATP酶变化在1,2二氯乙烷致脑水肿过程中的作用研究

为探索Na+ K+ATP酶、Ca2 +、Mg2 +ATP酶在 1,2 -二氯乙烷 (1,2 DCE)致脑水肿过程中所起的作用 ,在复制脑水肿模型的基础上 ,检测受试动物脑组织中Na+ K+ATP酶、Ca2 +、Mg2 +ATP酶活力的变化。结果显示 ,随着染毒剂量的增加 ,Na+ K+ATP酶活力逐渐降低 ,最高剂量组与各组相比 ,具有显著性差异 ;Ca2 +、Mg2 +ATP酶活力显著下降 ,与其余各组相比 ,P <0 0 5。结果提示 :1,2 DCE引起了ATP酶活力的下降导致脑组织能量代谢障碍 ,从而可能引起“Ca2 +超载” ,ATP酶活力下降和“Ca2 +超载”可能是引起脑水肿的主要原因     

1,2-二氯乙烷对血脑屏障的损伤作用

目的 探讨1,2-二氯乙烷对血脑屏障的损伤作用.方法 用1,2-二氯乙烷静式呼吸道急性染毒复制大鼠急性中毒性脑病模型,用硝酸镧染色法测定脑组织的含水量并检测血脑屏障的通透性;同时在体外培养脑微血管内皮细胞和神经胶质细胞,用1,2-二氯乙烷对生长良好的脑微血管内皮细胞和神经胶质细胞染毒,在光镜和电镜下观察细胞形态学特征.结果 （1）脑组织主要表现为细胞外水肿,镧示踪法检测到血脑屏障有镧颗粒的大量渗漏.（2）中高剂量染毒组大鼠大脑皮质含水量较对照组明显升高,并且随着染毒后时间的延长更趋严重;大脑髓质含水量仅在染毒后观察6 h组有统计学意义（P＜0.05）.（3）1,2-二氯乙烷能破坏脑微血管内皮细胞和神经胶质细胞的正常形态学结构,且对神经胶质细胞的损伤表现得较早、较严重.结论 1,2-二氯乙烷可造成血脑屏障的损伤,引起血管源性脑水肿.     

1,2—二氯乙烷中毒性脑病脑水肿类型的实验研究

目的 为研究１,２－二氯乙烷中毒性脑病的脑水肿的类型。方法 以１,２－二氯乙烷为毒物,浓度为６００－８８０００ｍｇ／ｍ＾３,用动式吸入法对ＳＤ大鼠和ＮＩＨ小鼠染毒研制动物模型,后用１０００ｍｇ／ｍ＾３浓度,每天１０ｈ,连续染毒三天,复制ＳＤ大鼠中毒模型,以病理学的光镜和电镜检查为指标,研究其脑水肿类型。     

1,2-二氯乙烷对非洲绿猴肾细胞损伤机理的离体试验研究

目的　了解 1,2 二氯乙烷对非洲绿猴肾细胞的损伤及其机理。方法　采用 0 5、1 0、2 0mmol/L 3个剂量 1,2 二氯乙烷处理非洲绿猴肾细胞 (Vero细胞 ) 2 4h,并运用显微荧光术测定处理后的Vero细胞内活性氧 (ROS)含量及游离Ca2 + 浓度 ,用比色法测定Vero细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活力。设立对照组。结果　接触 1 0、2 0mmol/L 1,2 二氯乙烷的Vero细胞内游离Ca2 + 浓度及其上清液LDH活力均高于对照组 (P <0 0 1) ,而 0 5mmol/L染毒组的Vero细胞内游离Ca2 + 浓度及其上清液LDH活力与对照组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。各剂量组的Vero细胞内ROS含量与对照组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。结论　较高浓度的 1,2 二氯乙烷能损伤Vero细胞 ,其损伤的可能途径是通过增加细胞内游离Ca2 + 浓度。     

1,2-二氯乙烷急性吸入染毒脑组织损伤形态学研究

为了研究 1 ,2 二氯乙烷 (1 ,2 -DCE)在静式吸入染毒条件下对脑组织的急性损害。采用连续静式吸入染毒大鼠 1 2h后 ,观察不同染毒剂量下受试动物脑组织的形态学变化 ;测定脑组织干湿重及含水量。结果显示 :染毒剂量为 2 .5g m3 时 ,脑组织在形态学上无明显变化 ,含水量为 80 .41 % ,与对照组 (79.82 % )相比 ,无明显差异 ;5 .0g m3 染毒组在形态学上出现轻微脑水肿 ,脑组织含水量为 82 .1 4 % ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 5) ;1 0 .0g m3 组脑组织在形态学上水肿明显 ,其含水量 (83 .65 % )与各组之间差异显著 (P <0 .0 5)。结果提示 :1 ,2 -DCE在短期大量吸入的情况下可导致动物出现脑水肿。     

维生素Ｅ对1，2-二氯乙烷中毒性脑水肿保护作用的研究

目的探讨维生素E (vitamin E,Vit E)对1,2-二氯乙烷(1,2-dichloroethane,1,2-DCE)中毒性脑水肿的保护作用。方法将雌性昆明种小鼠随机分为空白对照组、Vit E对照组、1,2-DCE单纯染毒组及Vit E低、中和高剂量干预组。连续给予药物灌胃4 d后,采取静式吸入方式染毒3. 5 h/d,持续3 d。结果与空白对照组相比,单纯染毒组小鼠脑组织呈现明显脑水肿病理改变,脑含水量、脑组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及细胞色素P450 2E1 (cytochrome P450 2E1,CYP2E1)蛋白和mRNA表达水平显著升高,脑组织中还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase assay kit,CAT)活性、Occludin蛋白和mRNA及Claudin 5蛋白表达水平显著降低。与单纯染毒组相比,各干预组小鼠的脑含水量、脑组织MDA含量、CYP2E1蛋白和mRNA表达水平显著降低,GSH含量、Occludin蛋白及mRNA水平显著升高;中和高剂量干预组的小鼠脑组织中SOD和CAT活性及Claudin 5蛋白表达水平亦显著升高(P0. 05)。结论单纯1,2-DCE染毒可引起小鼠脑水肿,诱导脑组织中CYP2E1的表达,诱发脑组织氧化损伤,破坏紧密连接蛋白,并抑制Occludin和Claudin 5的表达;而Vit E干预可显著抑制CYP2E1的表达,缓解CYP2E1介导的氧化损伤,有效预防1,2-DCE引起的中毒性脑水肿。     

镍致小鼠中枢神经毒性机制的研究

对小鼠脑内微量注射硫酸镍0．2mg／kg,0．4mg／kg,0．8mg／kg一次性染毒,制备脑突触小体。检测脑组织Ca^2 -ATP ase活性、钙调素(CaM)以及丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果显示,硫酸镍明显抑制脑突触小体膜Ca^2 -ATP ase活性,使CaM含量降低;脑组织中MDA含量井高的同时SOD活性受抑制,并引起GSH含量减少。说明硫酸镍可导致钙稳态失衡,同时引起神经细胞脂质过氧化作用增强而致脑损伤。     

Carcinogenicity and chronic toxicity in rats and mice exposed by inhalation to 1,2-dichloroethane for two years

Carcinogenicity and chronic toxicity of 1,2-dichloroethane (DCE) were examined by inhalation exposure of groups of 50 F344 rats and 50 BDF1 mice of both sexes to DCE vapor or clean air as control for 6 h/d, 5 d/wk and 104 wk. The rats were exposed to 10, 40 or 160 ppm (v/v) DCE, while the mice were exposed to 10, 30 or 90 ppm. The 2-yr exposure to DCE produced a dose-dependent increase in incidences of benign and malignant tumors, including subcutaneous fibroma, mammary gland fibroadenoma and peritoneal mesothelioma in male rats; subcutaneous fibroma and mammary gland adenoma, fibroadenoma and adenocarcinoma in female rats; and bronchiolo-alveolar adenoma and carcinoma, endometrial stromal polyp, mammary gland adenocarcinoma and hepatocellular adenoma in female mice. No exposure-related change in the incidence of non-neoplastic lesions or in any hematological, blood biochemical or urinary parameter occurred in any DCE-exposed rat or mouse group. The types of tumors and their target organs found in this study were consistent with those observed in rats and mice administered DCE by gavage in a NCI study. Selection of the exposure concentrations was considered appropriate with reference to the maximum tolerated dose for the highest doses and an occupational exposure limit of DCE for the lowest dose. The present findings suggest that those carcinogenic responses be primarily considered for standard setting of occupational and environmental exposure to DCE.     

p38 MAPK/AP-1信号通路在1，2-二氯乙烷中毒性脑水肿形成中对iNOS表达的上调作用

目的探究p38 MAPK/AP-1信号通路在小鼠1?2-二氯乙烷(1?2-DCE)中毒性脑水肿形成过程中对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的作用及其对脑水肿的影响。方法选取40只雌性昆明种小鼠随机分为对照组、染毒组、低剂量以及高剂量p38抑制剂组。染毒小鼠于染毒柜中1.2 mg/L 1?2-二氯乙烷染毒3.5 h/d,连续染毒3 d,低、高剂量抑制剂组小鼠于染毒前1 h腹腔注射200μl 3.75、15 mg/kg的p38 MAPK抑制剂(SB202190)。染毒结束次日取材,测定各组小鼠脑含水量及HE病理观察脑水肿,Western Blot检测各组小鼠脑组织中磷酸化p38、激活蛋白1(AP-1)两个亚基c-fos、c-jun的磷酸化形式表达水平以及iNOS的蛋白表达,Real-Time RT-PCR检测iNOS mRNA表达水平。结果单纯染毒组的小鼠出现抱爪现象,SB202190干预能够明显改善1?2-DCE中毒小鼠的抱爪症状。染毒组小鼠脑组织含水量与对照组小鼠相比明显增加,SB202190干预能够有效缓解小鼠出现脑水肿。单纯染毒组小鼠脑组织中p-p38蛋白、磷酸化c-jun和c-fos表达水平明显上调,iNOS蛋白和mRNA表达水平也显著增加,而SB202190能够显著降低iNOS、磷酸化c-jun和c-fos的表达水平。结论小鼠脑组织iNOS mRNA和蛋白表达水平在1?2-DCE中毒性脑水肿形成过程中显著上调。p38 MAPK/AP-1信号通路参与iNOS表达增多的调控过程。