膀胱癌中VEGF、bFGF表达及与微血管定量的关系

探讨膀胱移行细胞癌中血管内皮生长因子 (VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达及与血管形成定量的关系。应用免疫组织化学方法 ,对 6 2例原发性膀胱移行细胞癌组织中VEGF、bFGF进行检测 ,并对其在 30例浸润性膀胱癌组织中的表达与血管形成的定量关系进行相关性研究。结果发现 ,膀胱癌组织中VEGF、bFGF阳性表达率分别为 5 6 5 %和 46 8% ,与病理分级、临床分期、复发和预后有关 (P <0 0 5 ) ;并与浸润性癌组织中微血管定量呈正相关 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。提示VEGF、bFGF是膀胱癌血管形成的主要血管生成因子 ,血管形成与膀胱癌发生和发展密切相关。     

外源性碱性成纤维生长因子对犬急性心肌梗塞后血管生成作用

目的　探讨外源性碱性成纤维生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)对心肌梗塞血管生成的作用。方法　 2 4只犬随机分成对照组 (心梗区注射生理盐水 )和实验组 (心梗区注射bFGF)。每组观察 4个不同的时间点 (1d、3d、10d、17d)。各组分别在术后 3h内及处死前行MR心肌灌注成像。免疫组织化学方法检测各组心肌细胞中血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor ,VEGF)的表达及微血管数量。结果　微血管的数量除第 1天外各个时间点实验组比对照组明显增多 ;VEGF的表达除第 17天外各时间点实验组比对照组明显增强 ;TTC染色和MR心肌灌注成像 2种方法显示心梗范围对照组和实验组各个时间点之间无显著性差异。结论　局部心肌内注射bFGF有促进心梗区域新生血管形成、减小心梗范围的作用 ;VEGF的表达与组织中微血管的密度密切相关 ;MR心肌灌注成像可有效评价心肌血流灌注和定量评价心肌梗死的范围。     

碱性成纤维细胞生长因子联合肝素治疗下肢缺血的实验研究

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)联合肝素治疗下肢慢性缺血的作用.材料与方法采用切除左侧后肢股动脉方法制作兔下肢慢性缺血模型.18只兔随机分为3组,A组为对照组,B、C为治疗组,分别经肌肉注射bFGF 10 μg 5 ml mM Tris缓冲液、bFGF 10 μg 5 ml mMTris缓冲液 肝素1000 U.处死前行血管造影、毛细血管密度检测及病理学检查.结果 治疗组血压显著高于对照组,C组高于B组.治疗组可见丰富的侧支血管形成,微血管密度和微血管/肌纤维束比值较对照组明显增高;C组明显高于B组.结论 肌肉注射bFGF能有效促进缺血肢体血管新生,是治疗下肢远端缺血性病变有效方法之一.肝素对bFGF具有协同促进作用,可显著增强其生物效应.     

碱性成纤维细胞生长因子对兔耳增生性瘢痕形成的影响

目的　观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF )对兔耳增生性瘢痕形成的影响。　方法　复制 96个兔耳增生性瘢痕模型 ,将其随机分为bFGF实验组与磷酸盐缓冲液 (PBS)对照组 ,观察 3个月。通过愈合时间、瘢痕体积、组织学改变及原位杂交 ,检测整合素 β1mRNA表达反映bFGF对瘢痕形成的影响。　结果　 (1)bFGF组与对照组愈合时间分别为 (18.4± 1.6 )和 (2 1.3± 1.4 )d。 (2 )观察 3个月 ,bFGF组瘢痕体积明显小于对照组。 (3)与对照组比较 ,bFGF组在愈合期炎症反应、血管形成及成纤维细胞增殖更明显。但在愈合后的瘢痕组织中胶原纤细排列较规则。(4)bFGF组整合素 β1mRNA表达在愈合期均高于对照组。随后各组随时间推移表达逐渐减弱 ,bF GF组减弱更快。　结论　bFGF具有既促进愈合又改善瘢痕形成的作用     

冻干肌腱复合bFGF移植重建ACL后新生血管的VEGF免疫组化动物实验研究

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)促进冻干肌腱移植重建ACL后早期血管生成作用。方法:将100ng/ml浓度的bFGF与冻干肌腱复合后,移植重建犬一侧ACL,另一侧单纯移植冻干肌腱作为对照,14只家犬分别于术后1~6周取材,进行移植物血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)免疫组化染色,观察比较新血管的生成。结果:实验组术后2~3周出现新生血管,4~5周达到高峰,而对照组4~5周出现新生血管。血管计数显示,实验组在4周时显著多于对照组(P<0.05),5周时非常显著多于对照组(P<0.01),但在6周时无显著性差异。结论:用复合100ng/ml浓度bFGF的冻干肌腱移植重建ACL后,无论在新血管形成的时间、血管形成数量,还是在血管长入肌腱的时间及深度方面,在移植早期(5周内)均优于对照组,表明bFGF在术后早期有明显的促血管生成作用。     

bFGF缓释微粒在缺血心肌促血管生成的实验研究

目的 探讨心肌内注射碱性成纤维生长因子(bFGF)缓释微粒对局部缺血心肌区促血管生成的作用. 材料与方法 12只健康杂种犬按随机数字表法分成实验组(bFGF组)和对照组(生理盐水组),每组6只.分别结扎所有犬的冠状动脉左前降支第一对角支下0.5 cm处;同时,bFGF组中的犬在缺血心肌区5个位点注射包含100 μl bFGF缓释微粒的生理盐水1 ml,而生理盐水组中的犬按相同方法 在相同部位注射包含明胶水凝胶的生理盐水1 ml.在处死所有犬之前采用MR测定左心室射血分数(LVEF),处死后用SABC免疫组织化学技术和Western-blotting法分别测定心肌缺血区血管数量和bFGF蛋白的表达. 结果 术后14天,bFGF组的LVEF比生理盐水组明显高(bFGF组 0.47±0.02,生理盐水组 0.43±0.02;P=0.017),bFGF组的微血管密度比生理盐水组明显增高(生理盐水组163±11,bFGF组189±16;P=0.008),bFGF组的蛋白条带比生理盐水组蛋白条带清晰. 结论 实验表明在缺血心肌应用bFGF缓释微粒体,能够明显提高左心室功能和促进缺血心肌微血管生成.     

兔缺血性肢体bFGF动脉内灌注实验研究

目的　评价局部动脉内灌注碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)改善兔部分缺血的血管重建、血液灌流和肢体功能的功效。方法　选用成年雄性新西兰大白兔 2 7只 ,外科结扎右股动脉各主要分支 ,制成右后肢部分缺血模型。每只兔子的左后肢作为非缺血对照组。 2 7只兔子随机分成 3组 ,动脉内灌注bFGF组 (n =9) ,静脉内灌注bFGF组 (n =9)和动脉内灌注生理盐水组 (n =9)。在动物模型制备当即及术后 8、15d分别给药或生理盐水 1次 ,每次经动脉或静脉内给予bFGF的量为 10 μg(4ml) ,或静脉给予同等量的生理盐水。各治疗组间以及组内缺血与非缺血肢体间的差异由以下指标评价 :①术后2 2d缺血区肌肉组织的血管断面数 (VSC)、血管断面面积 (VSS)和血管断面周长 (VSP)的测算 ;②缺血肢体毛细血管再充盈时间的测定 ;③缺血肢体的功能和营养的观察。各组间的统计差异使用单侧检验的方差分析和t检验。结果　动脉内灌注bFGF组的VSC、VSS及VSP值较静脉内给药组和生理盐水组显著增高 (P <0 .0 1)。术后 2 2d ,所有动脉内灌注bFGF组缺血肢体的毛细血管再充盈时间、新毛生长、功能及外观均接近正常 ;而生理盐水组的肢体缺血性表现、毛细血管再充盈时间和肢体功能却无明显改善。静脉内给药组的各项评价指标与生理盐水组无统计学差     

负载VEGF 、bFGF的聚乳酸-羟基乙酸纳米微囊复合体对放射性损伤创面愈合的作用

 目的 探讨负载VEGF、bFGF的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)纳米微囊复合体对放射性损伤创面愈合的影响。方法 以PLGA为支架联合应用bFGF、VEGF构建纳米微囊,作用于小鼠放射性损伤创面作为实验组,单纯应用PLGA为支架,未用bFGF、VEGF的作为对照组,观察两组创面愈合率、创面的病理改变;于伤后不同时间点检测创面新生血管细胞数目、毛细血管截断面积及成纤维细胞数量;RT-PCR检测创面VEGF mRNA 、bFGF mRNA的表达水平;观察其对放射性创面愈合的影响。结果 实验组创面愈合率明显高于对照组;实验组创面组织中VEGF mRNA、bFGF mRNA的表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);对创面组织进行HE染色,发现实验组肉芽组织增多增厚,成纤维细胞数量及密度均高于对照组;伤后第8天、第15天,实验组的新生毛细血管数量及毛细血管横截面积均较对照组有所增加,实验组的成纤维细胞计数也明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 采用负载VEGF、bFGF的PLGA纳米微囊复合体可以促进小鼠放射性损伤创面的愈合。     

高压喷射载VEGF165、bFGF凝胶促缺血心肌血管新生的实验研究

目的探讨高压喷射心肌内给药的可行性以及载VEGF165、bFGF温敏型壳聚糖水凝胶对缺血心肌的促血管新生和心肌保护作用。方法健康杂种犬32只,随机均分为单纯心肌梗死(SMI)组,高压喷射生理盐水(NS)组,高压喷射温敏型壳聚糖水凝胶(Chitosan)组,高压喷射载VEGF165、bFGF温敏型壳聚糖水凝胶(Chitosan+VEGF165+bFGF)组。结扎左冠状动脉前降支制备急性心肌梗死模型后,SMI组直接关胸,NS组、Chitosan组和Chitosan+VEGF165+bFGF组在结扎线以下左室前壁行高压喷射心肌内给药8～10次,1次/cm2。术后6周取材行组织学、免疫组化检查并计算心肌梗死面积,处死动物前行血流动力学检测。结果术后6周心肌内仅有少量壳聚糖水凝胶样物质残留,其周围无明显的炎性细胞浸润;与SMI组比较,Chitosan组和Chitosan+VEGF165+bF-GF组梗死区新生血管数量增加(P<0.05),梗死面积缩小(P<0.05),左室舒张末压和左室内压最大下降速率明显改善(P<0.05)。结论高压喷射心肌内给药安全、可行;载VEGF165、bFGF温敏型壳聚糖水凝胶心肌内注射能促进...     

碱性成纤维细胞生长因子复合骨髓问充质干细胞的促创面愈合作用

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在体内是否具有诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向皮肤组织分化的作用及其在皮肤创面愈合中的作用. 方法抽取小型猪骨髓,体外分离、纯化、培养MSCs,并用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)进行标记.6只小型猪共做48个创面,随机分为bFGF MSCs治疗组(A组)、MSCs治疗组(B组)、bFGF治疗组(C组)和等渗盐水对照组(D组),观察伤后愈合情况.在伤后3,7,14,21,42 d取标本,并用病理学、免疫组化方法对创面的修复质量进行评估. 结果 A组的皮肤创面愈合速度明显快于B、C和D组;A组在皮肤愈合的组织病理等级评分上优于B、C组;A组双染阳性细胞多于B组. 结论在皮肤修复过程中,bFGF具有促进MSCs向血管内皮细胞分化,促进皮肤愈合的作用.     

bFGF和硫糖铝对扩张后皮瓣成活长度及回缩率影响的实验研究

为观察bFGF和硫糖铝对扩张皮瓣成活长度及回缩率的影响 ,采用小猪制作持续扩张动物模型 ,同时注入bFGF加硫糖铝(实验Ⅰ组 )、bFGF加生理盐水(实验Ⅱ组 )和生理盐水 (对照组 )。扩张结束后第 3天制作扩张皮瓣和正常任意皮瓣。结果显示 ,实验Ⅰ组皮瓣存活长度大于对照组和正常任意皮瓣 (P <0 0 5 ) ,皮瓣早期回缩小于对照组 ,大于正常皮瓣 ,术后 8周皮瓣有增宽趋势 ;实验Ⅱ组与对照组比较差异无显著性意义。研究表明 ,bFGF和硫糖铝能增加扩张皮瓣的成活长度 ,降低皮瓣回缩率。     

缺氧对肺腺癌细胞生长特性及血管形成的影响

目的探讨缺氧对肺腺癌肿瘤生长及血管形成的影响。方法人肺腺癌细胞株A549暴露于常氧(空气，5%CO2)、缺氧(1％O2，5％CO2，94%N2)、无氧(95％N2，5%CO2)环境48h后，将细胞接种于裸鼠皮下，观察其生长情况。通过免疫组化染色计数微血管密度，测定移植瘤组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平。结果移植10天后，缺氧组肿瘤体积显著大于常氧组。移植25天后缺氧组肿瘤体积、重量、微血管密度以及瘤组织中VEGF、bFGF水平均显著高于常氧组，而无氧组显著低于常氧组。结论适度缺氧可以刺激肺癌细胞VEGF、bFGF等生长因子的表达，促进移植瘤血管形成，提高肿瘤的生长能力；而严重缺氧损伤癌细胞，影响生长因子合成表达，阻碍血管形成，抑制肿瘤的生长。     

MEBT/MEBO对血管内皮细胞粗面内质网影响的实验研究

目的:本课题旨在进一步探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)对皮肤溃疡局部血管内皮细胞粗面内质网结构的影响,以期可以从不同侧面揭示MEBT/MEBO的改善微循环、祛腐生肌、促进创面再生与修复作用的分子生物学机制.方法:将40只SPF级SD雄性大鼠随机分为美宝湿润烧伤膏(MEBO)治疗组和贝复济对照组,每组20只,造模后于次日开始用药,观察用药后治疗组和对照组溃疡创面愈合情况、肉芽组织生长情况,并记录创面愈合时间.在造模后第8天,取两组同时相点创面组织,用电镜观察标本的超微结构,主要观察血管内皮细胞中粗面内质网的结构形态.结果:MEBO组大鼠的皮肤溃疡创面愈合情况明显好于贝复济组,创面愈合时间明显短于贝复济组,有显著性差异(P<0.05).组织病理学检测MEBO组治疗的创面,造模后第8天标本中血管内皮细胞中粗面内质网结构形态多于贝复济组.结论:MEBO较贝复济能明显的缩短实验性SPF级SD雄性大鼠体表皮肤溃疡模型皮肤慢性难愈合创面的修复愈合时间,具有促进创面愈合,减少瘢痕愈合的作用.其部分愈合机制:促进新生毛细血管的增殖等以加速肉芽组织形成.     

脂肪来源干细胞促进放射损伤骨骼肌血管生成的实验研究

目的 观察新西兰兔脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)植入放射损伤骨骼肌后的微血管密度改变,分析组织中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维生长因子(bFGF)的变化,探讨ASCs移植对兔放射损伤骨骼肌血管生成的影响.方法 64只实验动物单侧臀部予9 MeV电子线一次性照射80 Gy,采用随机数字表法分为ASCs组和磷酸缓盐冲溶液(PBS)组,每组为32只.照射后24 h,ASCs组和PBS组照射侧分别肌肉注射1 ml含5×10⁷个ASCs的细胞悬液及 PBS.免疫组织化学法检测照射后1、4、8和26周骨骼肌组织中CD31阳性的微血管、VEGF和bFGF的表达.蛋白印迹法检测骨骼肌组织中VEGF、bFGF蛋白表达.ELISA法检测ASCs在条件培养基中分泌的VEGF、bFGF浓度.结果 ASCs组受照射骨骼肌组织中CD31染色阳性的微血管密度较PBS组在照射后4、8和26周增高(t=8.14、7.44、18.58,P<0.05).ASCs组受照射骨骼肌组织VEGF、bFGF的累计光密度值(IOD)较PBS组在照射后1、4、8和26周增高(VEGF:t=3.13、4.66、2.19、6.79,P<0.05;bFGF:t=3.14、3.84、4.28、3.61,P<0.05).ASCs组VEGF蛋白的表达水平较PBS组在照射后1、4、8和26周增高(t=4.28、5.02、4.24、4.56,P<0.05).ASCs组bFGF蛋白的表达水平较PBS组在照射后4、8和26周增高(t=3.36、3.16、5.77,P<0.05).ASCs在放射损伤肌肉匀浆上清条件培养基中较在正常肌肉匀浆上清条件培养基中分泌的VEGF浓度在48、72和96 h增高(t=2.81,9.96,4.75,P<0.05),分泌的bFGF浓度在72和96 h增高(t=3.80,4.33,P<0.05).结论 ASCs能上调骨骼肌放射损伤组织VEGF和bFGF分泌、增加新生血管形成,可能是修复骨骼肌放射损伤的部分机制.     

无排卵性功能失调性子宫出血患者VEGF与MVD的相关性研究

目的探讨无排卵性功血患者血管内皮生长因子（VEGF）及受体与子宫内膜微血管密度（MVD）的相关性。方法选择2011年1月～2012年1月32例无排卵功血患者为研究组,同时选择30例健康体检者为对照组。检测两组子宫内膜微血管密度、VEGF、碱性成纤维细胞生长因子、TNF-α及相关受体,讨论其相关性。结果VEGF及受体Flkl,bFGF及体FGFRl与MVD均呈正相关（r=O．516,0．623,0．573,0．474,P均〈0．05）;TNF-α及TNFRl与MVD呈负相关（r=0．552．-0．673,P均〈O．05）。结论VEGF及受体Flkl,bFGF及受体FGFRl,TNF—α及其受体TNFRl与MVD存在相关性,均参与了子宫内膜血管生成的调节。     

刖瘤微血管计数和碱性成纤维细胞生长因子与乳腺癌预后的关系

目的 肿瘤微血管计数和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)是反映肿瘤微血管形成的重要指标。本文研究它们与乳腺癌预后的关系。方法 收集我院近年收治的乳腺癌32例,并随访。采用免疫组化LSAB法,检测vWf和bFGF有乳腺癌组织中的表达。采用Weidner法进行微血管计数。通过影响率单因素和多因素分析,确定影响预后的因素。结果 平均肿瘤微血管计数为36．42。T3＋T4与T1＋T2相比,肿瘤微血管计数明显增高。肿瘤微血管计数增高对预后有明显影响。bFGF阳性表达率为68．75％,阳性组中肿瘤微血管计数明显增高。bFGF的表达对预后无明显影响。结论 肿瘤微血管计数可作为乳腺癌预后的指标,而bFGF在胪瘤形成和肿瘤生长有重要作用但不能作为临床预后的指标。     

Angiogenesis model for ultrasound contrast research: exploratory study

RATIONALE AND OBJECTIVES: To optimize an angiogenesis model for imaging research that is stable and can be imaged several times over the angiogenic time course. MATERIALS AND METHODS: Mice and rats received two injections of 0.4 mL of extract of basement membrane matrix (Matrigel; Becton Dickinson Labware, Bedford, MA) in the subcutaneous spaces on either side of the spine. One of the two Matrigel plugs in each animal had either 0.1 microg/mL of basic fibroblast growth factor (bFGF) (11 mice), 1.0 microg/mL of bFGF (12 mice, 5 rats), or 1.0 microg/mL of bFGF and 60 U/mL of heparin (11 mice). Three to 12 days after implantation, animals were imaged before and after the administration of up to four injections of 0.1 mL AF0150. Phase inversion imaging was used on a Siemens Elegra (Siemens ultrasound, Issaquah, WA) equipped with a 13 MHz VFX transducer. Three observers subjectively assessed the pattern of enhancement using a four-point scale. The Matrigel plugs were then removed and two observers graded the angiogenic response on a four-point scale. Ten Matrigel plugs, five with 1.0 microg/mL bFGF and five without, were evaluated histologically following immunohistochemical staining with anti-CD31. RESULTS: The angiogenic response was greater in Matrigel plugs with 1.0 than with 0.1 microg/mL of bFGF. Heparin did not increase the angiogenic response. Vessels were predominantly at the periphery of the plugs with variable central penetration. Plugs appeared anechoic and homogeneous on ultrasound. Contrast enhancement within the plug occurred in 44% of mice with an angiogenic response at or after day 6 and the enhancement increased with the angiogenic response. In the others, peripheral enhancement could not be distinguished from the enhancement of surrounding tissues that were also hyperemic. The thicker rat skin interfered with plug assessment. CONCLUSION: A stable angiogenesis model without the complexity of tumors is described. This model offers the opportunity to image the development and/or inhibition of angiogenesis. Neovasculature in Matrigel was detectable using ultrasound contrast. Quantitative studies correlating the degree of enhancement to microvascular density will be determined in subsequent studies.     

Digital imaging with a photostimulable phosphor in the chest of newborns

To evaluate use of a digital photostimulable phosphor imaging system in the neonatal nursery, 150 newborns were divided into three groups of 50. In the first two groups, screen-film and computed radiographs of the chest were obtained at the same radiation exposure; in the third group, computed radiographs were obtained with a 50% dose reduction (half-exposure computed radiographs). All images were blindly evaluated by three readers who scored the quality of visualization of the mediastinum, lung, bone, soft tissues, and endotracheal and nasogastric tubes, and also image density. No statistical differences in visualization of tubes existed among the three groups. Visualization of the mediastinum, lung, bones, and soft tissues was statistically significantly better on computed radiographs than on half-exposure computed radiographs; visualization of the lungs, bones, and soft tissues was statistically significantly better on screen-film radiographs than half-exposure computed radiographs. Image density was statistically better on computed and half-exposure computed radiographs than on screen-film radiographs.