多发性骨髓瘤患者外周血T细胞亚群及细胞免疫功能研究

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血T细胞亚群和CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的表达特点,分析MM与健康者之间的细胞免疫功能差异。方法检测28例初诊的MM患者及22例健康志愿者外周血淋巴细胞中总T细胞(CD3+)、辅助/诱导T细胞(CD3+CD4+)、抑制/细胞毒T细胞(CD3+CD8+)的比例、(CD3+CD4+)/(CD3+CD8+)、CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25+FoxP3+/CD4+CD25+比值,并比较MM患者与健康者之间细胞免疫指标(Th1/Th2比值、AgNOR比值、TGF-β)的差异。结果初诊MM患者与对照组相比,外周血淋巴细胞中总T细胞(CD3+)比例、辅助/诱导T细胞(CD3+CD4+)比例差异无统计学意义(P>0.05);抑制/细胞毒T细胞(CD3+CD8+)比例增加(P<0.05);CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25+FoxP3+/CD4+CD25+比值明显高于健康组(P<0.05);血清中Th1/Th2比值、AgNOR比值均明显低于健康组(P<0.05);血清TGF-β含量较健康组上升(P<0.01)。结论 MM患者外周血T细胞亚群的异常、Treg表达增加及细胞免疫功能低下可能与疾病的发生、发展相关,对判断MM疗效及预后有一定的指导价值。     

间歇性变应性鼻炎患者外周血调节性T细胞和白细胞介素17的变化

目的 观察不同时期间歇性变应性鼻炎(intermittent allergic rhinitis,IAR)患者外周血中调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)和白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)的变化,探讨Treg和IL-17在IAR中的作用.方法 采集19例IAR患者间歇期、发作期前及发作期外周静脉血,应用流式细胞术检测外周血Treg和IL-17水平,并与对照组进行比较.结果 IAR患者外周血中Treg和IL-17占外周血中CD4+T淋巴细胞的比例从间歇期至发作期逐步升高,但Treg均低于对照组(P＜0.05),IL-17在间歇期低于对照组(P＜0.05),在发作期高于对照组(P＜0.05).结论 Treg细胞数量或功能不足可能是IAR的主要原因,IL-17可能对IAR的发展起促进作用.     

自身免疫性疾病患者外周血CD8~+调节性T细胞的表达及临床意义

目的研究自身免疫性疾病(AID)患者外周血CD8+调节性T细胞的表达及其临床意义。方法对53例系统性红斑狼疮(SLE)患者和55例类风湿性关节炎(RA)患者及38例健康者(对照组)外周血以双抗体标记流式细胞术测定CD8+CD28-和CD8+CD28+T细胞亚群比例及CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值,分析检测数据与疾病活动变化的关系。结果 SLE患者稳定期CD8+CD28-T细胞亚群比例较活动期及对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);活动期CD8+CD28+T细胞亚群比例较稳定期和对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值较稳定期和对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。SLE活动性指数评分(SLEDAI)与CD8+CD28+T细胞亚群比例负相关(P=0.001,r=-0.56),与CD8+CD28-/CD8+CD28+比值正相关(P=0.002,r=0.51)。RA患者稳定期CD8+CD28-T细胞较活动期和对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05),CD8+CD28+T细胞及CD8+CD28-/CD8+CD28+比值RA活动期和稳定期患者与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AID患者存在CD8+T细胞亚群比例的改变,反映机体细胞免疫功能紊乱。     

放射治疗对恶性肿瘤患者T淋巴细胞亚群和IL-2的影响

放射治疗在杀伤恶性肿瘤细胞的同时对机体的免疫功能也造成了一定的影响,T淋巴细胞亚群和白介素(IL-2)作为机体抗肿瘤的免疫指标,放射治疗对它们的影响报道结果不一,大多数研究倾向于放射治疗抑制了恶性肿瘤患者的免疫功能,表现为患者外周血T淋巴细胞亚群比例失衡,IL-2水平降低.     

Chemerin/chemR23对银屑病患者外周血Th9/Treg细胞平衡的影响

目的：探究chemerin对银屑病患者外周血辅助性T淋巴细胞9(helper T cells 9,Th9)/调节性T淋巴细胞 (regulatory T cells,Treg)免疫平衡的调节作用及其潜在的机制。方法：选取25例银屑病患者和20例健康志愿者,采用 磁珠分离法分离出受试者外周血中CD4+ T细胞,行实时RT-PCR和ELISA检测细胞中chemerin和其受体chemR23的表 达;用不同浓度的chemerin(50,100,150,200 ng/mL)分别处理从健康志愿者外周血分离得到的CD4+ T细胞,行MTT 比色法检测细胞活力以筛选最适浓度;采用ELISA检测炎性细胞因子水平;行流式细胞术检测Th9和Treg细胞数。 结果：与对照相比,银屑病患者外周血中chemerin和chemR23的表达均显著增加,Th 9/Treg比例明显上升(均P<0.05); 选取最适浓度150 ng/mL的chemerin处理CD4+ T细胞后,细胞中白细胞介素(IL)-6,IL-9和IL-17的水平均显著增加, Th9/Treg比例明显上升(均P<0.05),而chemR23沉默可反转chemerin对CD4+ T细胞的上述作用(均P<0.05)。结论： Chemerin通过chemR23调节银屑病患者外周血CD4+ T淋巴细胞中的Th 9/Treg细胞免疫平衡。     

不明原因习惯性流产患者外周血Treg细胞和Th17细胞表达及其临床意义

目的 研究不明原因习惯性流产（UHA）患者外周血调节性T细胞（regulatery T cell,Treg）和辅助性T细胞17（T help cell 17,Th17）的表达及其临床意义.方法 42例不明原因习惯性流产患者为UHA组,选择同期20例健康体检正常女性作为对照,分别对两组采集与分离外周血单个核细胞,并用流式细胞仪分析UHA外周血Treg细胞、Th17细胞的表达,同时用ELISA检测外周血单核细胞（PBMC）培养上清中IL-17的水平.结果 Treg细胞在UHA组中明显降低（t＝6.68,P＜0.01）,Th17细胞在UHA组中明显升高（t＝-17.52,P＜0.01）,UHA组PBMC培养上清中IL-17水平明显升高,与正常对照组比较差异有统计学意义（t＝-11.32,P＜0.01）.结论 Treg/Th17免疫平衡对不明原因习惯性流产患者免疫调节有重要作用.     

免疫性血小板减少症患者外周血Th17/Treg相关因子的表达及意义

目的:探讨辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)在免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血的表达情况及临床意义.方法:选取60例ITP患者作为ITP组和同期60名健康体检者作为对照组,应用流式细胞术进行Th17、Treg细胞比例的测定,应用ELISA法进行血清白细胞介素17(IL-17)、IL-1...     

梅毒血清固定患者外周血调节性T细胞／T h17细胞平衡的变化

目的观察外周血调节性T(Treg)细胞/Th17细胞平衡在梅毒血清固定患者体内的变化。方法将2010年1月至2012年9月东南大学附属中大医院皮肤性病科诊治的梅毒血清固定患者28例纳入观察组,同期选取健康人30例纳入对照组,利用流式细胞仪分别检测外周血Treg细胞、Th17细胞、相关特异性转录因子Foxp3及ROR-γ表达情况并进行比较分析。结果观察组外周血Treg细胞比例[(34.02±12.31)%]高于对照组[(21.86±8.24)%,P<0.05],观察组外周血Th17细胞比例[(3.08±2.17)%]低于对照组[(9.13±1.96)%,P<0.01];观察组CD4+T细胞转录因子Foxp3的表达量[(2 946.35±995.63)]高于对照组(2 468.74±869.63,P<0.05),ROR-γ表达量(1 438.29±659.31)低于对照组(1 831.25±426.37,P<0.05)。结论梅毒血清固定患者外周血存在Treg细胞/Th17细胞失衡,这种机体细胞免疫抑制可能是导致梅毒患者产生血清固定的原因。     

反复种植失败患者的外周血Th17/调节性T淋巴细胞的失衡情况

目的 探讨反复种植失败(RIF)患者外周血Th17/调节性T淋巴细胞(Treg)的失衡情况。方法 纳入26例RIF患者(RIF组)和27例非妊娠期且生育功能正常的女性(对照组)。于月经周期的增殖晚期,检测两组外周血单核淋巴细胞中叉头状/翅膀状螺旋转录因子P3(FOXP3)与视黄酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)的mRNA表达量,以及CD4⁺IL-17A⁺Th17/CD4⁺T淋巴细胞比值和CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺Treg/CD4⁺T淋巴细胞比值;并检测两组血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-17A、IL-23蛋白水平。结果 RIF组CD4⁺IL-17A⁺Th17/CD4⁺T淋巴细胞比值及RORγt mRNA表达量均高于对照组,而CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺     

血液系统恶性肿瘤患者CD4+CD25+调节性T细胞的变化及意义

目的 分析血液系统恶性肿瘤患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(简称CD4 CD25 Treg)比例变化,并探讨其意义.方法 采用流式细胞术检测32例急性白血病、11例淋巴瘤患者及15例正常健康对照者外周血CD4 CD25 Treg及CD4 CD25 Foxp3 Treg细胞的比例. 结果 血液系统恶性肿瘤患者外周血CD4 CD25 Treg比例明显高于正常对照[(3.86±1.56)% vs (1.98±0.63)%,P《0.01].同时血液系统恶性肿瘤患者外周血CD4 CD25 Foxp3 Treg比例为(3.71±1.01)%,显著高于正常对照[(1.13±0.32)%,P《0.01]. 结论 血液系统恶性肿瘤患者CD4 CD25 Treg比例增高可能是患者抗肿瘤免疫功能低下的重要原因之一.     

恶性肿瘤患者血型抗体分析及输血对策

目的研究恶性肿瘤患者体内抗体效价的变化及输血对策。方法选取该院2011年11月—2011年12月恶性肿瘤患者69例和同期健康体检者40例,采用抗体效价测定盐水法检测血清中的抗-A、抗-B IgM抗体效价。结果肿瘤组血清中的抗-A效价主要分布于4~256,抗-B效价主要分布于8~128;对照组抗-A效价主要分布于32~512,抗-B效价主要分布于16~512。肿瘤组抗-A、抗-B IgM抗体效价与积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在给肿瘤患者交叉配血时,注意血型的正确鉴定,如遇正反定型不符又需紧急输血时,应给予O型洗涤红细胞,以确保输血安全。     

人恶性实体瘤患者外周血淋巴细胞亚群计数分析

目的：探讨CD3,CD4,CD8,CD4／CD8,CD19诸项免疫指标与恶性实体瘤发生,发展及受化疗影响的关系。方法：用常规免疫荧光流式细胞仪技术测定受试外周血T,B淋巴细胞亚群百分数,恶性实体瘤患才各项指标分析与正常人群比较,并按接受和未接受化疗与否进行异种人群比较,按化疗前后进行同种人群比较,按化疗后一般状况P,S,得分进行分组比较。结果：恶性实体瘤患者CD3,CD4,CD3／CD4／CD19均值低于正常,CD8高于正常,不同人群比较,接受化疗者CD3测得值低于正常值的百分率较之未接受化疗者或高,其他各项指标差异无显著性,同一患者群化疗前后比较,化疗后CD3,CD4的测得值低于正常值的在分率较之化疗前显著升高,其他各基指标差异无显著性,化疗后按P．S．得分分组,P．S．得分分组,P．S．得分大于等于3组群CD3,CD4测得值低于正常值的百分率较之P．S．得分小于等于2组群显著升高,其他各项指标差异无显著性,结论：恶性实体瘤患者免疫功能可能与发病和病情进展有关,化疗可以同时杀灭免疫细胞,但个体的免疫反应可能与人体特征有关。     

Early changes of CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cells and Th1/Th2, Tc1/Tc2 profiles in the peripheral blood of rats with controlled hemorrhagic shock and no fluid resuscitation

Background  Hemorrhagic shock induces immune dysfunction. Regulatory T cells (Tregs), T-helper (Th) cells, and cytotoxic T-lymphocytes (CTLs) can execute many crucial actions in immune and inflammatory responses. This study was conducted to investigate the early pathophysiological changes of CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg and Th1/Th2, Tc1/Tc2 profiles in the peripheral blood of rats with controlled hemorrhagic shock and no fluid resuscitation.

Methods  A rat model of controlled hemorrhagic shock with no fluid resuscitation was established. Peripheral blood samples were taken before and four hours after hemorrhagic shock with no fluid resuscitation. Three color flow cytometry was used to detect Tregs, Th1, Th2, Tc1 and Tc2 cells in the samples.

Results  In the peripheral blood of rats, the percentage of Tregs four hours after hemorrhagic shock was significantly lower than before hemorrhagic shock (P=0.001). The ratios of Th1/Th2 and Tc1/Tc2 were changed from (23.08±8.98)% to (23.91±15.36)%, and from (40.40±21.56)% to (65.48±23.88)%, respectively.

Conclusions  At an early stage, the advent of hemorrhagic shock is related to an early decrease of Tregs, and a mild shift in the Th1/Th2, Tc1/Tc2 balance toward Th1 and Tc1 dominance. These changes are part of a hyper-inflammatory state of the host, and will deteriorate the maintenance of immune balance. Further influences and detailed mechanisms need to be investigated.     

恶性实体瘤患者外周血细胞因子诱导的杀伤细胞增殖与杀瘤活性

 【目的】探讨恶性实体瘤患者外周血来源的细胞因子诱导的杀伤细胞的增殖能力、免疫表型及杀瘤活性。【方法】用rhlFN-1，rhlL-2，Anti-CD3mAb与恶性实体瘤患者外周血单个核细胞共孵育。分别在培养第4、7、10、13天进行细胞计数，通过流式细胞术检测细胞免疫表型及MTT法检测对K562细胞的杀伤活性。【结果】恶性实体瘤患者外周血单个核细胞与rhIFN-γ，rhIL-2，Anti-CD3mAb孵育4、7、10、13d，细胞数分别增加（2．5±1．6）、（11．9±3．5）、（22．3±7．8）和（29．5±6．1）倍。CD3^＋、CD4^＋,CD8^＋和CD3^＋CD16^＋CD56^＋细胞在培养第13天分别从（62．8±7．6）％、（31．5±5．8）％、（44．9±8．2）％和（1．3±1．1）％增加到（89．3±9．5）％、（50．1±7．2）％、（57±9．0）％和（37．0±12．7）％。对K562细胞的杀伤效应在第4、7、13天分别为（23．6~8．5）％、（56．4±7．2）％和（80．1±4．5）％。【结论】rhIFN-γ,rhIL-2和Anti-CD3mAb诱导恶性实体瘤患者外周血单个核细胞活化为以CD34^＋CD16^＋CD56^＋为主的细胞因子诱导的杀伤细胞，细胞增殖力强，并对K562细胞有强大的杀伤活性。     

骨肿瘤患者外周血淋巴细胞染色体畸变的探讨

作者对１４例恶性骨肿瘤和１４例良性骨肿瘤患者与１５例正常成人的外周血淋巴细胞染色体数目改变。结果畸变及微核变进行了研究，结果：恶性组染色体的平均值，正常二倍体８１．９％，非正常二倍体１８．１％，结构畸变率５．９％，微核率７．３‰，与良性骨肿瘤组的９４．４％，５．６％，２．１４％，３．１‰及正常人群的９７．６％，２．４％，０．９３％〉２．４‰相比较，存在高显著差异，Ｐ〈０．０１。     

FOXP3+Tregs、IL-6在滤泡性淋巴瘤微环境中的表达及意义

目的 探讨FOXP3+调节性T细胞(Tregs)、白细胞介素-6(IL-6)在滤泡性淋巴瘤(FL)组织中的表达及其意义.方法 采用免疫组化法检测43例FL、10例反应性增生的淋巴结及10例慢性扁桃体炎中的FOXP3+Tregs及IL-6的表达情况.结果 滤泡内的FOXP3+Tregs及IL-6在FL中的表达与对照组比较...     

CD8+CD28-T细胞在哮喘小鼠发病机制中的作用及地塞米松对其的影响

目的 探讨CD8+CD28-T细胞在哮喘发病机制中的作用及地塞米松对该细胞的影响.方法 30只BALB/c小鼠随机分为哮喘组、地塞米松组、正常对照组,各10只.哮喘组和地塞米松组给予卵白蛋白致敏后雾化吸入卵白蛋白溶液,地塞米松组每次雾化吸入前腹腔注射地塞米松1 mg/kg,各组分别于末次雾化激发后测定小鼠的气道反应性;对支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数;取肺组织作HE染色病理切片;测BALF中IgE含量;流式细胞仪检测小鼠血、BALF中CD8+CD28-T细胞占淋巴细胞百分比;分析BALF中IgE、EOS计数与血液中CD8+CD28-T细胞百分比的相关性.结果 哮喘组、地塞米松组气道反应性明显高于正常对照组.哮喘组BALF中细胞总数和EOS计数分别为(5.56±4.06)× 102/L和(3.29±2.23)× 102/L,均明显高于地塞米松组[(2.59±1.69)× 102/L,P=0.044和(1.11±0.73)×102/L,P=0.008]及正常对照组[(0.91±0.65)×102/L,P=0.003和(0.43±0.37)× 102/L,P=0.001)];而后两组之间差异均无统计学意义(均P>0.05).哮喘组、地塞米松组、正常对照组BALF中IgE含量分别为(23.85±5.97)g/L、(13.15±2.22)g/L、(6.54±1.03)g/L,三组间差异有统计学意义(F=38.558,P=0.000).哮喘组、地塞米松组、正常对照组CD8+CD28-T细胞百分比在外周血中分别为(18.68±4.12)%、(13.43±2.90)%、(8.43±4.60)%;在BALF中分别为(1.25±0.40)%、(0.66±0.49)%、(0.21±0.19)%,组间差异均有统计学意义(F=11.837,P=0.001;F=12.885,P=0.000).哮喘组BALF中IgE含量和EOS计数与外周血中CD8+CLY28-T细胞百分比均呈正相关(r=0.864,P=0.012和r=0.804,P=0.029).结论 CD8+CD28-T细胞数量与哮喘小鼠气道炎症有明显相关性,地塞米松可有效抑制哮喘气道炎症并可能抑制了CD8+CD28-T细胞的表达和功能.

Abstract：

Objective To explore whether or not CD8+ CD28- T cell play a pathogenic role in asthma and detect the effects of dexamethasone ( DXM ). Methods A total of 30 mice were randomly divided into 3 groups: asthmatic group, DXM group and control group ( n = 10 each). The asthmatic and DXM groups were sensitized twice and inhaled ovalbumin. The DXM Group received an intraperitoneal injection of DXM lmg/kg before inhaling ovalbumin. After successful modeling, 3 mice were selected randomly from each group to measure the airway responsiveness. Also a bronchoalveolar lavage cytological study was performed and lung tissue sections were prepared for histopathologic examination to evaluate the airway inflammation. The content of IgE in bronchoaleolar lavage fluid ( BALF) was detected with a murine IgE ELISA kit. And the fractions of CD8 + CD28- T cell of peripheral blood and BALF were tested by flow cytometry to analyze the correlation between IgE, eosinophils ( EOS) of BALF and CD8 + CD28 - T cell of blood. Results The airway hyperresponsiveness in asthmatic and DXM groups were significantly higher than that in the control group. The number of total cells and EOS of BALF in the asthmatic group [ ( 5. 56 ±4. 06) × 102/L; (3. 29 ±2. 23) × 102/L] were significantly higher than that in control group [ (0. 91 ±0.65)×102/L, P = 0.003; (0.43 ±0.37) × 102/L, P = 0.001] and DXM group [(2.59 ±1.69) ×102/L, P =0.044; (1. 11 ±0.73) ×l02/L, P = 0.008]; while the DXM group was insignificantly higher than the control group (P=0. 234, P=0. 363). There were significant differences in the contents of IgE of BALF for the asthmatic, DXM and control groups [ (23. 85 ±5. 97) g/L, (13. 15 ±2.22) g/L, (6.54±1. 03) g/L, F = 38. 558, P = 0. 000 ] . The percentages of CD8 + CD28- T cell in peripheral blood in asthmatic and DXM groups [ (18. 68 ±4. 12)% and ( 13.43 ± 2. 91) % ] were significantly higher than those in control mice [ (8. 43 ± 4. 60) % , both P < 0. 05 ]. The percentages of CD8 + CD28 - T cell of BALF in asthmatic group and DXM group [(1.25±0. 40)% and (0. 66 ± 0. 49) % ] were also significantly higher than those in control mice [ (0. 21 ± 0. 19) % , both P < 0. 05 ]. The percentages of CD8 + CD28 - T cell of blood and BALF in the DXM mice were significantly lower than those in asthmatic group. The correlations between IgE ( r = 0. 864, P = 0. 012), EOS ( r = 0. 804, P = 0.029) and CD8 + CD28- T cell were significant. Conclusion The fraction of CD8 + CD28- T cell is closely correlated with the inflammation of asthmatic airway. The airway hyperresponsiveness and inflammation in asthmatic mice may be relieved by DXM through its effect of inhibiting the expression of CD8 + CD28- T cell.     

Th17、Treg细胞及其相关细胞因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 探讨Th17、CD4+CD25+调节性T（Treg）细胞及其相关细胞因子在子痫前期中的表达及在其发病过程中的作用。方法 选取子痫前期患者胎盘组织30例及正常妊娠胎盘组织（对照组）25例,采用实时荧光定量PCR法检测胎盘组织中Treg细胞转录因子Foxp3和与Th17表达相关的细胞因子孤儿核受体RORc、IL-17及与调节Th17、Treg细胞发育和功能相关的IL-23、IL-27及 IL-27受体mRNA的表达量。结果 子痫前期组胎盘组织中Treg细胞转录因子Foxp3表达较对照组明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;子痫前期组胎盘组织中与Th17表达相关的细胞因子RORc、IL 17表达与对照组相比明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;而与对照组相比,子痫前期组胎盘组织中IL-23、IL-27、IL-27受体表达也明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 Th17、Treg细胞及其相关细胞因子的表达在子痫前期中均有明显变化,可能参与了子痫前期的发病过程。     

下调Foxp3基因表达对人调节性T细胞功能的影响

目的 利用RNA干扰技术下调Foxp3表达,观察其对人CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表型及功能的影响.方法 利用Foxp3 siRNA转染人CD4+CD25+Treg,荧光显微镜和流式细胞仪(FACS)检测转染效率,实时定量PCR和Western印迹分别鉴定Foxp3基因及Treg功能相关基因表达、Foxp3蛋白表达,细胞增殖实验检测Treg抑制功能,FACS测Treg表型标记,ELISA检测细胞因子表达.结果 Foxp3 siRNA转染人CD4+CD25+Treg效率为68%,与对照组相比,转染后的细胞Foxp3基因下调了61.4%(P<0.01),Foxp3蛋白表达较低,Treg功能相关基因和主要表型标记也较对照组有改变,差异有统计学意义.功能试验提示无论是在异种还是同种抗原刺激的淋巴细胞反应中,Foxp3 siRNA转染的Treg与对照组相比,对效应性T细胞的抑制作用较弱(异种抗原组83%比48%,P<0.05;同种抗原组65%比28%,P<0.01),且主要抑制性和效应性细胞因子的表达下降,差异有统计学意义.结论 Foxp3是人天然Treg 维持其抑制性功能的核心细胞内标志.

Abstract：

Objective To employ the technology of interfering RNA (RNAi) to identify the role of Foxp3 in the in vitro suppressive effect of human regulatory T cell (Treg) on effector T cells. MethodsExpanded human Treg were transfected with siRNA targeting Foxp3 genes. The transfection efficiency, the level of corresponding gene and its protein expression were measured by fluorescent microscopy, fluorescence-activated cell sorting (FACS), real-time PCR and Western blot respectively. The phenotypes of Treg were analyzed by FACS. The siRNA transfected Treg was then co-cultured with porcine PBMC or human PBMC-stimulated autologous CD4+CD25- T cells. Their proliferations were examined by WST-1. Treg and autologous CD4+CD25- T cell-related suppressive cytokines were assessed by ELISA. ResultsA 68% transfection efficiency in expanded Treg was achieved for Foxp3 siRNA. Real-time PCR revealed a 61.4% mRNA knockdown induced by siRNA targeting Foxp3 genes in Treg versus the control (P<0.01). Some Treg-associated surface markers were significantly altered versus the control. And the production of suppressive cytokines was lowered. These changes were correlated with the diminished Treg activity in suppressing the proliferation of effector CD4+CD25-T cells. There was 83% suppression by non-transfected Treg vs 48% suppression by Foxp3 siRNA transfected Treg in xeno-immune response (P<0.05);and 65% suppression by non-transfected Treg vs 48% suppression by Foxp3 siRNA transfected Treg in allo-immune response (P<0.01). Conclusion Foxp3 is a key intracellular marker for maintaining the phenotypes and functions of Treg.