结核分枝杆菌KatG基因突变与对异烟肼耐药的关系

目的探讨结核分杖杆菌KatG基因突变与对异烟肼耐药程度的关系。方法对临床分离的6I株结核分枝杆菌异烟肼耐药株（其中高浓度耐药株49株．低浓度耐药株12株）和42株结核分枝杆菌异烟肼敏感株进行DNA序列分析。结果61株异烟肼耐药株中，检测到50株存在KatG S315T（AGC→ACC）基因突变、1株存在Ser315Arg（AGC→AGA）的突变，1株发生Val319Asp（GTC→GAC）突变，突变率为185．2％（52／61）。其中高浓度耐药株中有46株检出发生S315T突变，1株发生Val319Asp突变，突变率为95．9％（47／49）；低浓度耐药株中有4株检出发生S315T突变，1株发生Sex315Arg（AGC→AGA）的突变，突变率为41．7％（5／12）；42株异烟肼敏感株DNA序列分析均没有检测到KatG基因突变。结论KatG基因突变是结核分枝杆菌耐异烟肼的主要分子机制，异烟肼高浓度耐药株的KatG基因突变率远高于低浓度耐药株的基因突变率。     

基于基因芯片技术对耐利福平或异烟肼结核分枝杆菌基因突变位点的检测分析

目的：分析基因芯片技术对耐利福平或异烟肼结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）基因突变位点的检测情况,为耐多药结核的临床诊断提供依据。方法：收集2020年—2023年在苏州市第五人民医院就诊的395例结核患者的痰液标本,采用基因芯片技术对利福平耐药基因ropB(511、513、516、526、531、533)和异烟肼耐药基因KatG(315)、inhA(-15)突变位点进行检测,以罗氏固体培养绝对浓度法作为金标准,分析基因芯片技术对MTB耐利福平或异烟肼的准确性。结果：基因芯片技术对利福平耐药诊断的Kappa值为0.80,符合率为92.15%,灵敏度为87.74%,特异度为93.77%,阳性预测值为83.78%,阴性预测值为95.42%,而对异烟肼耐药诊断的Kappa值为0.87,符合率为93.42%,灵敏度为98.82%,特异度为89.38%,阳性预测值为87.43%,阴性预测值为99.02%。结论：基因芯片技术可以快速、高效地检测MTB耐利福平和耐异烟肼基因突变,与罗氏固体培养绝对浓度法高度一致,可为临床诊疗提供依据。     

新疆部分地区结核分枝杆菌rpoB基因突变与对利福平耐药相关性检测

目的：了解新疆部分地区结核分枝杆菌rpoB基因的突变与对利福平耐药呈水平的关系。方法：采用基因芯片对耐利福平菌株rpoB基因进行检测。结果：36株结核分枝杆菌利福平初始耐药分离株,对利福平高度耐药25株,低度耐药11株。基因芯片检测显示33株存在突变,低度耐药株突变主要在526位,少数在531位;高度耐药株突变主要在526位、531位,其中3株未见突变,3株为526和516位联合突变。结论：本地区结核分枝杆菌对RFP的低度耐药表现为rpoB基因的点突变,而高度耐药则表现为rpoB基因的526位、531位点突变及联合突变形式。     

新疆部分地区结核分枝杆菌rpoB基因突变与对利福平耐药相关性检测

目的：了解新疆部分地区结核分枝杆菌对利福平耐药株rpoB基因的突变情况。方法：通过基因测序对新疆部分地区结核分枝杆菌耐利福平菌株rpoB基因进行检测。结果：从380份痰样本中获得62株结核分枝杆菌初始耐药分离株,利福平耐药株14株,经测序,8株发生在531位的丝氨酸（Ser）转变为亮氨酸（Leu）,编码核苷酸序列由TCG到TTG改变;2株是在516位的天冬氨酸（Asp）转变为甘氨酸（Gly）,编码核苷酸序列由GAC到GGC改变;1株是在526位的组氨酸（His）转变为天冬氨酸（Asp）,编码核苷酸序列由CAC到GAC改变;其余未见变化。结论：本地区结核分枝杆菌对RFP的耐药与rpoB基因的点突变有关,主要为531、526、516位氨基酸的改变,其中531位是最常见的突变位点。     

结核分枝杆菌异烟肼耐药基因katG点突变的快速检测

目的：探讨快速检测结核分枝杆菌异烟肼（INH）耐药基因型的分子药敏方法。方法：用聚合酶链反应－单链构象多态性（PCR－SSCP）检测了30株INH敏感菌株及30株耐药株的katG基因，随后用SSCP方法鉴定扩增产物有无突变，以结核分枝杆菌H37Rv作对照。结果：所有INH敏感株均观察到katG基因扩增产物，30株INH耐药株中28株观察到katG基因扩增产物。以H37Rv标准株为对照，30株敏感株SSCP带谱与对照相同；28株INH耐药株中13株与对照相同，15株有不同程度的差异。与药敏试验比较，PCR－SSCP检测INH耐药结核菌的敏感性为57%，特异性为100％。结论：多数结核分枝杆菌耐INH是由于katG基因突变所致，用PCR－SSCP筛选突变株可达到快速检测结核分枝杆菌INH耐药基因型的目的。     

芯片显色法检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药基因实验条件优化研究

目的优化研究芯片显色法检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药基因的最佳条件。方法自制DNA芯片,每条寡核苷酸探针片段长度为19bp,点样浓度在15μmol/L,以痰液为待检标本,分别用不同引物、Mg2 、核苷酸、DNA聚合酶浓度等进行多重聚合酶链反应;分别在不同时间、温度下进行杂交,分别在不同酶作用时间和显色时间进行分析,比较不同条件芯片检测结果。结果引物、Mg2 、核苷酸、DNA聚合酶浓度分别为0.2μmol/L、1mmol/L、0.2mmol/L、5U效果最好,杂交时间和杂交温度分别为0.5h、60℃信号最强,酶作用时间和显色时间均为0.5h时得到最佳结果。结论在最佳条件下,该技术的重复性、特异性、灵敏度与可靠性均较好,适合基层医院推广应用。     

广东地区结核分枝杆菌利福平耐药与基因rpoB突变关系分析

目的 为了解广东地区结核分枝杆菌rpoB基因突变特点,并探讨其与利福平耐药之间的关系.方法 本研究根据结核病诊断细菌学检验规程从临床结核病疑似患者痰液中分离鉴定结核分枝杆菌,采用绝对浓度法对其进行药敏试验,并用PCR-DNA直接测序法对结核分枝杆菌rpoB基因进行序列分析.结果 结果分离得到利福平耐药株27株,其中低浓度耐药8株,高浓度耐药19株.经测序分析,所有利福平敏感株rpoB基因均未发生氨基酸突变 利福平耐药株rpoB基因的突变率为81.5%（22/27）,突变均发生在利福平耐药决定区内,突变位点为526、531及533,以Ser531Leu突变最为常见（55.6%,15/27）,并且高浓度耐药株的突变率明显高于低浓度耐药株.结论 结果表明广东省结核分枝杆菌rpoB基因突变是结核分枝杆菌利福平耐药性产生的主要分子机制,突变位点同国内外研究基本一致,但各位点突变形式所占比例有自身特点.     

基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性的研究

目的探讨基因芯片技术在检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性的应用。方法收集21例临床诊断结核病患者体液标本经培养得到的分离菌液,进行基因芯片检测,包括利福平的rpoB基因位点和异烟肼的KatG和inhA基因位点,从而判断其耐药性。结果 21例样本中,利福平rpoB基因有10例突变,总突变率为47.6%,其中9例为531位点的（C-T）突变,1例526位点的（C-G）突变。与药敏试验的符合率为81.0%。异烟肼基因突变有6例,总突变率为28.6%,其中4例为KatG 315（G-C）突变,2例为inhA-15（C-T）突变。与药敏试验的符合率为90.5%。利福平的11例耐药株中,基因芯片检测8例为突变型,突变率为72.7%,在利福平的10例敏感株中,基因芯片检测2例为突变型,突变率为20.0%。在异烟肼的6例耐药株中,基因芯片检测5例为突变型,突变率为83.3%,在异烟肼的15例敏感株中,基因芯片检测1例为突变型,突变率为6.7%。结论基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性具有较高的特异性和敏感性,快速准确,可以应用于结核分枝杆菌耐药性的检测。     

结核分枝杆菌耐药检测及其临床意义

耐药结核病(TB)尤其是耐多药结核病(MDR-TB)、广泛耐药结核病(XDR-TB)的快速诊断和有效治疗是TB防控中亟需解决的难题。结核分枝杆菌(Mtb)耐药的主要机制是由于药物作用靶标或药物代谢酶编码基因突变所致。临床上常用的Mtb药物敏感性试验方法主要包括表型药敏方法和分子药敏方法,本文还简要地概述了通过药敏试验所揭示的一些值得临床医师关注的临床意义。     

结核分枝杆菌的耐药机制与治疗进展

目前结核病仍是威胁人类健康重要杀手。据世界卫生组织估计,目前全球约有20亿人感染结核分枝杆菌(结核菌),其中约有5000万人感染耐药结核菌。导致结核病发病率升高的重要原因就是耐药结核杆菌尤其是耐多药结核杆菌(MDR-TB)的出现和传播。我国不仅是全球结核病的第二大重灾区,也是WHO确定耐多药结核病的高发地区。因此对结核菌耐药机制的研究具有非常重要的意义。结核菌耐药性的产生主要是药物作用靶基因突变所致。结核病控制的最好方法即是治疗,目前化学药物仍是治疗耐药结核病的主要武器。本文就结核分枝杆菌的耐药机制及最新治疗进展做一介绍。     

幽门螺杆菌rdxA和cagA基因突变与甲硝唑耐药的相关性研究

目的:研究幽门螺杆菌(Hp)编码基因(rdxA)和细胞毒素相关基因A(cagA)突变与Hp对甲硝唑耐药的关系。方法:从贵阳某医院60例消化内科患者胃黏膜标本中分离出Hp临床分离株11株,体外微需氧条件下培养,用E试验(E-test)检测各株Hp临床分离株对甲硝唑的最低抑菌浓度(MIC),聚合酶链式反应(PCR)方法扩增Hp的rdxA和cagA基因并测序,再将耐药株与标准株Hp26695PCR产物进行碱基序列分析。结果:11株Hp临床分离株的MIC均≥256μg·mL-1,rdxA和cagA基因的扩增率均为100%。与标准株Hp26695相应基因序列对比,11株临床分离株的rdxA基因同源性为95%～98%,cagA基因同源性低于94%,rdxA、cagA基因分别有4、10个规律性突变点。结论:贵阳地区Hp对甲硝唑的耐药性可能与rdxA和cagA基因突变有关,其中高耐药性可能与cagA基因有关。     

东莞市478例肺结核患者原始耐药监测

目的监测东莞市分枝杆菌原始耐药情况,制定科学的防治对策。方法采用WHO制定的结核分枝杆菌耐药监测方案开展东莞市结核分枝杆菌耐药监测,使用比例法对478例新发现无抗结核用药史的441例菌阳肺结核患者的耐药性进行测定。结果441例患者中,原始耐药者101例,总耐药率为22.9%.各药的原始耐药率分别为异烟肼(H):15.19%,利福平(R):10.43%,链霉素(S):12.93%,乙胺丁醇(E):5.22%;原始耐多药率分别为:HR7.94%,HRS4.08%,HRE3.63%,HRSE2.27%。结论本地区结核分枝杆菌原始耐药现状较严重,须进一步加强结核病控制规划。     

Drug resistance in Mycobacterium tuberculosis and targeting the l,d-transpeptidase enzyme

Tuberculosis (TB) is a disease that has afflicted mankind for thousands of years, but in the last seven decades, much progress has been made in anti-TB therapy. Early drugs, such as para-aminosalicylic acid, streptomycin, isoniazid, and rifamycins were very effective in combatting the disease, giving rise to the hope that TB would be eradicated from the face of the earth by 2010. Despite that optimism, TB continues to kill more than a million people annually worldwide. A major reason for our inability to contain TB is the emergence drug resistance in Mycobacterium tuberculosis. This commentary is based on our recent publication on the structure of l ,d -transpeptidase enzyme, relevant to drug resistance. As a background, we briefly outline the history and development of anti-TB therapy. Based on the crystal structure, we suggest a potential direction for designing more potent drugs against TB.     

鲍曼不动杆菌耐药性演变及抗菌药物使用相关性研究

目的 分析鲍曼不动杆菌耐药性与相关抗菌药物用药频度的相关性及鲍曼不动杆菌对不同抗菌药物耐药率的相关性,旨在为抗菌药物临床合理使用及医院感染防控提供科学依据。方法 采用纸片琼脂扩散法测定相关抗菌药物对鲍曼不动杆菌的敏感率,根据世卫组织推荐的限定日剂量（defined daily dose,DDD）值原理及方法,确定DDD值并计算抗菌药物用药强度（antibiotics use density,AUD）,并用SPSS 17.0进行数据分析。结果 2013-2017年汕头大学医学院第一附属医院鲍曼不动杆菌检出率逐年降低,相关抗菌药物总的AUD值从2014年起逐年下降,鲍曼不动杆菌对环丙沙星、头孢曲松、头孢吡肟的耐药率均在2014年后进入下降趋势,对亚胺培南的耐药率在2015年后进入下降趋势。各相关抗菌药物的AUD与鲍曼不动杆菌耐药率的相关性不具有显著性差异,鲍曼不动杆菌对各相关抗菌药物的耐药率间,除替加环素外,大部分都具有相关性,且具有显著性差异（P<0.05）。结论 加强医院感染管理、合理使用抗菌药物是治疗鲍曼不动杆菌感染和降低耐药率的关键,同时还要了解鲍曼不动杆菌耐药率高发的规律,以便更好地控制感染,减少耐药发生。     

1例以心脏受累为特点的DES基因突变鉴定及表型分析

目的:分析1例以心脏受累为特点的DES基因突变病例的临床表型及突变位点.方法:收集1例在我院就诊并通过全外显子测序(WES)显示存在DES基因c.1360C＞T突变,以严重心律失常、心肌病变为特点的患儿及其家系成员的临床资料.采集家系外周血,行Sanger测序鉴定可能致病的基因突变,通过生物信息学分析,预测突变的有害性...     

整合子与细菌耐药性关系的研究进展

细菌耐药性是临床用药的一大难题,对其耐药机制探讨也就成为医学界研究热点,近年研究发现细菌耐药性产生与一种克隆表达载体——整合子密切相关。整合子是一种可移动基因元件,在整合酶的作用下捕获外源基因盒并使之表达,同时整合子又可整合到质粒上,或自身作为转座子的一个组成部分而参与转移,使耐药基因在不同种属间传播,目前整合子已成为革兰阴性杆菌产生耐药性的重要机制。本文就整合子与细菌多重耐药性关系作一综述。     

基因突变与结核分支杆菌耐药性的研究进展

综述结核分支杆茵耐药分离株基因突变的规律，探讨耐药的分子机理。并通过对6例肺结核病人切除肺的组织学、免疫组织学、宿主细胞免疫反应的研究以及通过对所显示的细茵种群的描述，加深对该感染过程动态的了解。     

部分变性高效液相色谱法在结核菌耐药基因突变中的应用

目的 部分变性高效液相色谱法是一种新的技术,使基因突变检测得到很大提高,本课题旨在探索其在结核菌耐药基因突变检测中的应用.方法 部分变性高效液相色谱法.它利用野生和突变的DNA链形成异源双链,借助特殊的分析柱,在一定的温度下,仅突变部分发生变性,利用离子对反相高效液相色谱来检测基因突变.结果 标准菌株和敏感菌株呈现单一的峰形,耐药株因为有基因突变存在而呈现宽大畸形的峰,很容易鉴别.结论 该法在结核菌耐药基因突变检测中取得了很好的效果,因此认为是一种很有潜力的方法 .     

2014-2015年西安市胸科医院结核分枝杆菌耐药性分析

目的 回顾性分析西安市胸科医院2014—2015年结核分枝杆菌的耐药情况,为本地区结核病的诊断、治疗以及预防提供参考.方法 收集西安市胸科医院2014—2015年门诊、住院患者结核分枝杆菌阳性菌株2583株,采用比例法对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、丙硫异烟胺、卷曲霉素、莫西沙星、利福喷丁、阿米卡星、对氨基水杨酸钠、左氧氟沙星共11种抗结核药物的耐药性进行测定.结果 共分离出2583株结核分枝杆菌,其中耐多药、广泛耐药、一线4种全耐药、二线7种全耐药、11种药物全耐药菌株分别为258、139、116、17、16株,耐药率分别为9.99%、5.38%、4.49%、0.66%、0.62%.对11种抗结核药物单一耐药率,由高到低分别为:异烟肼(23.96%)、链霉素(21.76%)、利福喷丁(14.83%)、利福平(14.05%)、左氧氟沙星(10.69%)、乙胺丁醇(9.33%)、莫西沙星(6.93%)、对氨基水杨酸钠(5.81%)、卷曲霉素(3.29%)、阿米卡星(2.09%)、丙硫异烟胺(1.55%).耐多药菌株对利福喷丁和左氧氟沙星的耐药率较高,分别为87.98%、53.88%.对利福喷丁+左氧氟沙星、莫西沙星+利福喷丁组合的耐药率分别高达51.94%、39.92%.广泛耐药菌株对对氨基水杨酸钠的耐药率最高,为32.37%.结论 2014—2015年西安市胸科医院抗结核病药物单一耐药率虽然呈下降趋势,但耐多药、广泛耐药和全耐药菌株的出现和增加提示还需要更加严格的执行结核病防控策略,防止各种耐药菌株的产生、增加和传播.     

耐多药结核分枝杆菌三种基因的快速检测

目的 :探讨耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变与耐药性的关系。方法 :采用 PCR和 PCR- DS技术对 5 7例耐多药结核临床分离株进行 kat G、rpo B和 emb B基因检测和序列分析。结果 :耐 INH(kat G)、RFP(rpo B)、EMB(emb B)基因突变率分别为 6 3.8%、90 .7%、37.1% ,其中同时耐 INH(kat G)和 RFP(rpo B)基因突变率为 5 4 .1% ,同时耐三种药的基因突变率为 6 5 .6 %。结论 :PCR- DS法对耐两种或两种以上药物的结核检出率较高 ,与传统药敏试验互相弥补 ,对临床用药有指导意义。