基于HPLC指纹图谱研究60Co-γ射线辐射灭菌对除脂生发片化学成分的影响

摘要：目的:考察60Co-γ射线辐照灭菌对除脂生发片中阿魏酸、藁本内酯、洋川芎内酯A、洋川芎内酯H、丹皮酚5个化学成分含量的影响及辐照前后指纹图谱变化,为除脂生发片辐照灭菌提供指导依据。方法:采用Waters Atlantis T5-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5μm）,以甲醇（A）-0.3%磷酸溶液（B）为流动相,梯度洗脱,检测波长为254 nm（检测丹皮酚）及280 nm（检测阿魏酸、藁本内酯、洋川芎内酯A和洋川芎内酯H）,建立除脂生发片HPLC指纹图谱,同时比较0,3,6,9 kGy剂量下60Co-γ射线辐照对除脂生发片化学成分中阿魏酸、藁本内酯、洋川芎内酯A、洋川芎内酯H、丹皮酚的影响,以及对指纹图谱相似度的影响。结果:在指纹图谱研究中,共确定除脂生发片HPLC指纹图谱21个共有峰,不同剂量辐照前后指纹图谱的相似度均>0.90。在建立的色谱条件下试验5个化学成分分离度良好,方法精密度和重复性RSD值均<1.5%,供试品溶液在36 h内稳定,各成分具有良好的线性关系。结论:60Co-γ射线辐照灭菌剂量不超过6 kGy时,对除脂生发片化学成分和指纹图谱影响较小,可作为除脂生发片的有效灭菌手段。     

不同厂家缩泉丸的高效液相指纹图谱研究

目的研究不同厂家和不同批次缩泉丸的HPLC指纹图谱,为完善该制剂的质量评价体系奠定基础。方法采用甲醇超声提取的方法制备供试品溶液,以乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速:1 m L·min-1,柱温30℃,分段切换检测波长。结果建立了缩泉丸的HPLC指纹图谱共有模式,确立了14个共有峰,15批样品指纹图谱中各共有峰相对保留时间的相对标准偏差均<1.5%。结论该方法准确可靠、重复性好,建立的指纹图谱为缩泉丸质量评价提供依据。     

葛根与粉葛饮片的色谱指纹图谱研究

目的建立葛根与粉葛质量比较的色谱方法,并用于二者的质量分析与评价,为其质量控制提供新依据,为其药效物质基础的分析奠定基础。方法采用薄层色谱(TLC)法对7个葛根样品和17个粉葛样品进行比较,并采用高效液相色谱(HPLC)法进行指纹图谱测定,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)软件进行分析。采用对照品对比和HPLC-MS技术对其部分色谱峰进行定性鉴别。结果建立的TLC和HPLC指纹图谱能区别葛根和粉葛。HPLC指纹图谱粉葛饮片共有峰14个,野葛根饮片共有峰19个,初步指认了葛根与粉葛HPLC指纹图谱中13和7个成分。结论该文为葛根与粉葛质量控制和临床应用提供可靠依据。     

不同产地玄参饮片高效液相色谱指纹图谱及6种化学成分含量测定

目的建立玄参饮片的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及6种化学成分同时定量分析的方法。方法采用HPLC测定了16个不同批次的玄参样品,色谱柱为Syncronis C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.03%磷酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱,检测波长210 nm,柱温40℃,流速1 mL·min~(-1),运行时间80 min,建立玄参饮片的指纹图谱并进行含量测定,采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)对16批样品进行共有峰确认及相似度评价;通过SPSS 21.0统计软件采用主成分分析(PCA)和聚类分析(CA)对HPLC指纹图谱进行模式识别分析。结果以肉桂酸为参照物,建立了玄参饮片的HLPC指纹图谱共有模式,标定了20个共有峰,并指认了其中桃叶珊瑚苷、哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、类叶升麻苷和肉桂酸6个峰,并对其中6种主要成分进行含量测定;对16批样品进行了相似度评价,其相似度为0.881～0.980。结论建立的HPLC指纹图谱结合主成分分析、聚类分析方法,可以客观、有效、全面地用于玄参饮片的质量评价;不同厂家、批号、产地的玄参饮片样品质量不一,应加强中药规范化生产。     

木香药材水提液的HPLC指纹图谱

采用水加热回流法制备木香供试品溶液,以乙腈-0.1％甲酸梯度洗脱,检测波长280 nm,建立了木香水提液的HPLC指纹图谱,并对18批不同产地和不同采收期的木香药材进行相似度、主成分和聚类分析,结果表明不同产地和不同采收期的木香药材水溶性成分的差异较小.从18批样品的指纹图谱中确定了21个共有峰,通过与对照品比对,确认其中的6个特征峰分别为5-乙氧基甲基糠醛、紫丁香苷、绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A和异绿原酸B.以绿原酸峰为参照峰,18批样品指纹图谱中各共有峰相对保留时间的RSD均小于0.36％.     

采用特征图谱分析~(60)Co-γ射线辐照灭菌技术对丁香质量的影响

目的评价~(60)Co-γ射线辐照灭菌技术对丁香药材质量的影响。方法建立10批丁香的GC特征图谱,比较辐照前后(5或10kGy辐照10h)丁香样品特征图谱色谱峰的变化,并利用GC-MS法对共有峰成分进行确认,利用SPSS 17.0对共有峰面积进行方差分析及配对t检验。结果 GC特征图谱分析显示,10kGy辐照剂量辐照10h对4个共有峰面积无影响。结论辐照剂量在10kGy以下对丁香药材质量无影响。     

丹参脂溶性成分指纹图谱标准的对照品对照法研究

目的:建立丹参脂溶性成分 HPLC 指纹图谱标准及指纹对照品,为丹参质量控制提供可靠方法。方法:以乙醚为溶剂提取丹参药材脂溶性特征成分,制备对照品溶液及供试品溶液。以甲醇-水为流动相梯度洗脱,在不同品牌的 ODS 柱上,考察色谱分离系统及适用性,制备指纹图谱标准,并计算供试品的相似度。结果:建立的各 HPLC 指纹图谱测定条件分离良好,以指纹对照品为参比,测得各产地道地丹参药材的相似度一致性良好。结论:利用中药特征指纹对照品,可使以指纹图谱标准法进行中药质量控制更为实用。     

大黄煮散颗粒与大黄饮片的HPLC指纹图谱对比研究

目的:通过对比分析大黄煮散颗粒与大黄饮片的指纹图谱,探讨两者之间质量是否存在差异。方法:采用HPLC指纹图谱,对大黄煮散颗粒与大黄饮片进行指纹图谱研究,并建立共有模式,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"对所得图谱进行相似度分析。结果:大黄煮散颗粒与大黄饮片的指纹图谱中,共有色谱峰有均有14个,相似度评价均大于0.9。结论:大黄煮散颗粒与大黄饮片的指纹图谱之间无明显差异,品质基本一致。     

雷公藤多苷片的HPLC指纹图谱和模式识别研究

目的:建立雷公藤多苷片的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱评价体系。方法:采用Agilent ZORBAX SBC18分析柱,以水-乙腈为流动相梯度洗脱,流速0.75 m L/min,检测波长218 nm,柱温35℃,测定6个厂家的15批雷公藤多苷片,运用"中药指纹图谱相似度评价系统"软件计算相似度,并用对照品指认部分色谱峰。结果:建立了雷公藤多苷片指纹图谱共有模式,确定了22个特征峰,指认了3个色谱峰,通过聚类分析和主成分分析将6个厂家的样品分为两大类。结论:HPLC指纹图谱结合模式识别可以较好地反映雷公藤多苷片的内在质量。     

玄参饮片-破壁粉体-破壁粉粒的HPLC指纹图谱研究

目的:建立玄参饮片、破壁粉体和破壁粉粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为玄参破壁粉粒的质量评价提供依据。方法:色谱柱为GLSciences Wondasil C1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸水(梯度洗脱),流速为1.0mL.min-1,检测波长为280nm,柱温为30℃。结果:10批玄参饮片、10批破壁粉体和10批破壁粉粒的HPLC指纹图谱中均有14个共有峰;各样品的相似度均>0.900。结论:本方法稳定、可靠、重复性好,对玄参破壁粉粒的质量评价具有参考价值。     

黄芪益气胶囊指纹图谱研究

目的建立黄芪益气胶囊的指纹图谱检测标准。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC-ELSD）法分别检测黄芪药材和黄芪益气胶囊，以黄芪甲苷对照品为参照物，计算相对保留时间和峰面积比值，标定共有指纹峰。结果对10批黄芪益气胶囊样品进行了HPLC-ELSD，建立了该制剂的指纹图谱。结论HPLC-ELSD指纹图谱中6个共有峰的相对保留时间和峰面积比值，可作为黄芪益气胶囊质量评价的重要依据之一。     

玄参HPLC指纹图谱的比较研究

目的:建立HPLC指纹图谱测定方法,分析测定玄参商品饮片和不同加工方法制成的玄参饮片的指纹图谱。方法:色谱条件为Zorbax SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,0.025%磷酸水溶液和乙腈梯度洗脱,检测波长210 nm,流速1 mL.min-1,柱温25℃。结果:发现16个色谱峰为玄参商品饮片的共有峰,确定了其相对保留时间和相对峰面积的范围。指纹图谱的数据表明,20批玄参饮片相似度为0.488～0.929,质量差异较大;不同加工方法制成的玄参饮片化学成分差异较大,提示先润后切和先蒸后切加工的玄参质量有差异。结论:玄参HPLC指纹图谱测定是评价玄参药材及饮片质量的较好方法。     

贞芪扶正颗粒的HPLC指纹图谱研究

目的:建立贞芪扶正颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLCELSD)。色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse XDB-C_(18),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为40℃,检测器蒸发光温度为50℃,进样量为10μL。以特女贞苷为参照,测定7批贞芪扶正颗粒的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004 A)版进行共有峰指认和相似度评价。结果:7批贞芪扶正颗粒的HPLC图谱有13个共有峰。经验证,7批样品HPLC图谱中有3批样品相似度>0.9,与对照指纹图谱具有较好一致性;4批样品相似度<0.9,与对照指纹图谱一致性较差。结论:该研究所建指纹图谱可为贞芪扶正颗粒的质量评价提供参考。     

余苣降酸茶的HPLC指纹图谱研究

目的:建立余苣降酸茶HPLC指纹图谱,以控制该中药复方茶剂的质量。方法:采用HPLC梯度洗脱法测定余苣降酸茶的指纹图谱,色谱柱为Waters Sun Fire C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.2%磷酸水溶液-乙腈,柱温:30℃,检测波长:308 nm,进样量:10μl,流速:1.0 ml·min^-1。结果:测得10批余苣降酸茶供试品HPLC色谱图,并标示出20个共有峰,确定其中2个已知峰分别为没食子酸和葛根素;并明确了20个共有峰的原药材归属。结论:该方法建立的余苣降酸茶HPLC指纹图谱重复性好,色谱峰信息量大,为全面控制该制剂的质量提供了可靠的方法。     

参花胶囊的HPLC指纹图谱研究及4种成分含量测定

目的研究建立参花胶囊的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,并测定该制剂中的绿原酸、羟基红花黄色素A、迷迭香酸、丹酚酸B的含量,为其质量控制提供依据。方法用HPLC法,采用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);用乙腈-5.0g·L-1磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;以254nm为检测波长。在参花胶囊样品的HPLC图中,以迷迭香酸为对照参比物,对各共有色谱峰与迷迭香酸色谱峰的相对保留时间与相对峰面积比值的RSD值进行分析,用中药色谱指纹图谱对10批参花胶囊进行相似度评价。采用外标法,以320nm为检测波长,运用绿原酸、羟基红花黄色素A、迷迭香酸、丹酚酸B的混合对照品测定其在10批该制剂中的含量。结果在选定的条件下确定39个峰构成参花胶囊的指纹特征,各批次样品均具有上述特征,且特征峰的相对含量分布基本一致;各批次样品中迷迭香酸色谱峰所对应的保留时间一致;每批样品的各色谱峰与迷迭香酸色谱峰的相对峰面积和相对保留时间的比值RSD均符合中药指纹图谱的相关要求,10个批次样品的指纹图谱相似度均大于0.966,4种物质在10批该制剂中的含量基本一致。结论 HPLC指纹图谱方法与4种物质的含量测定方法准确、稳定、简便,均可用于参花胶囊的质量控制。     

苦参生物碱类成分的HPLC指纹图谱研究

目的:建立苦参生物碱类成分的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:色谱柱为Kromasil NH2(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-乙醇(8∶1,V/V)-3%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1 ml/min,检测波长为220 nm;采用《中药色谱指纹图谱评价系统》(2004A版)对3批样品进行相似度评价。结果:建立的HPLC指纹图谱中,苦参生物碱类成分各峰分离度较好,一共确定了17个共有峰,并对其中5个峰进行了定位指认;3批样品的相似度均>0.9。结论:该方法可得到精密度、重复性、稳定性较好的苦参生物碱类成分的HPLC指纹图谱,为苦参提取物的质量控制提供另一种检测方法。     

保济丸HPLC指纹图谱研究

目的 建立保济丸的HPLC指纹图谱.方法 色谱柱为Agilent Extent-C18（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（梯度洗脱）,检测波长为225nm,流速为2.0mL·min-1,柱温为35℃.结果 通过对10批样品进行检测,拟定了保济丸的HPLC指纹参照图谱;以和厚朴酚峰为参照峰,确定了图谱中22个共有峰,并对15个特征峰进行了归属性研究.10批样品相似度均在0.95以上.结论 本方法准确、可靠,建立的指纹图谱能较全面客观地反映保济丸的质量水平.     

白头翁及其疑似品的HPLC指纹图谱法鉴别

建立了白头翁药材的高效液相色谱指纹图谱用于鉴别白头翁及其疑似品.采用XB-C18色谱柱,以乙腈-0.1％磷酸为流动相,梯度洗脱,检测波长210 nm.从白头翁HPLC指纹图谱中得到29个共有峰.利用相似度和聚类分析对图谱数据进行分析,其中聚类分析可依据指纹图谱将白头翁及其疑似品区别开.所建立的白头翁药材的指纹图谱特征性及专属性强,可用于全面控制白头翁药材的质量.     

川楝子乙醇部位HPLC指纹图谱研究

目的建立川楝子乙醇提取部位的HPLC指纹图谱。方法色谱柱Agilent zorbax SB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇/乙腈(1∶10)(A)-0.4%磷酸溶液(B),梯度洗脱;检测波长360 nm;柱温25℃;流速1.0 mL.min 1。结果建立了川楝子药材乙醇提取部位的HPLC色谱指纹图谱。在指纹图谱中共有峰20个,并指认了3个色谱峰。结论该方法准确可靠,重复性好,可为川楝子药材及其饮片的质量控制提供参考依据。     

乙肝益气解郁颗粒的HPLC指纹图谱研究

目的:建立乙肝益气解郁颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18,流动相为水-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为230 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以芍药苷为参照,测定10批样品的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004 A版)进行相似度评价,确定共有峰。结果:10批样品的HPLC图谱有34个共有峰,相似度均大于0.98;经验证,10批样品HPLC图谱与对照指纹图谱具有较好的一致性。结论:该研究所建指纹图谱可为乙肝益气解郁颗粒的真伪鉴别和质量评价提供参考。