miR-186-5p靶向CXCL13基因通过Wnt/β-catenin信号调节胃癌HGC-27细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移和侵袭

目的 探讨miR-186-5p对胃癌HGC-27细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 在胃癌HGC-27细胞中通过脂质体转染miR-186-5p模拟物（mimics）,采用实时荧光定量PCR检测转染效果, MTT实验分析HGC-27细胞增殖水平,流式细胞术分析细胞周期变化和细胞凋亡情况,Transwell实验分析HGC-27细胞迁移和侵袭能力,生物信息学、双荧光素酶报告基因实验以及Western blotting分析miR-186-5p和CXCL13的靶向关系,Western blotting分析Wnt/β-catenin信号通路活化情况。结果 体外转染miR-186-5p mimics可上调HGC-27细胞中miR-186-5p的表达。上调miR-186-5p表达能够抑制HGC-27细胞体外增殖、细胞周期进程、迁移和侵袭能力,并促进细胞凋亡。miR-186-5p可靶向抑制CXCL13的表达,上调miR-186-5p表达能够抑制β-catenin和c-Myc的表达。结论 miR-186-5p可靶向抑制CXCL13的表达,阻断Wnt/β-catenin信号通路,并抑制胃癌HGC-27细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。     

右美托咪定调控miR-526b-3p/S100A4表达影响胰腺癌细胞增殖及凋亡的机制研究

摘要：目的:探讨右美托咪定（Dex）对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法:应用MTT法检测Dex对人胰腺癌Capan-1细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）与蛋白免疫印迹法检测Dex对微小RNA-526b-3p（miR-526b-3p）和钙结合蛋白A4（S100A4）表达的影响;检测miR-526b-3p过表达与干扰S100A4表达对Capan-1细胞增殖及凋亡的影响;双荧光素酶报告实验验证miR-526b-3p与S100A4的靶向作用关系;抑制miR-526b-3p表达验证Dex对Capan-1细胞增殖和凋亡的作用机制; Western blot法检测细胞周期蛋白1（CyclinD1）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、p21、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）蛋白表达。结果:用不同浓度的Dex处理后,细胞抑制率、细胞凋亡率与miR-526b-3p、p21、Bax的表达水平显著高于对照组（P<0.05）,S100A4、CyclinD1、Bcl-2的表达水平显著降低（P<0.05）,且呈明显的浓度依赖性（P<0.05）;双荧光素酶报告实验与Western blot实验证实miR-526b-3p与S100A4存在靶向结合关系,且miR-526b-3p可负性调控S100A4的表达; miR-526b-3p过表达或干扰S100A4表达后细胞抑制率、细胞凋亡率与p21、Bax的表达水平显著升高（P<0.05）,CyclinD1、Bcl-2的表达水平显著降低（P<0.05）;抑制miR-526b-3p表达可逆转Dex对Capan-1细胞增殖与凋亡的作用。结论:Dex可通过调控miR-526b-3p/S100A4表达抑制胰腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

lncRNA FOXD2-AS1靶向miR-3194-3p对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡影响的体外研究

摘要：目的:探讨lncRNA FOXD2-AS1对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响及分子机制。方法:实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测口腔鳞癌细胞系中lncRNA FOXD2-AS1和miR-3194-3p的表达水平;将FOXD2-AS1干扰表达载体、miR-3194-3p模拟物、miR-3194-3p抑制剂+FOXD2-AS1干扰表达载体转染至CAL27细胞中,Western blot法检测蛋白表达; MTT检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA FOXD2-AS1和miR-3194-3p的靶向关系。结果:口腔鳞癌细胞系中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-3194-3p表达水平降低（P<0.01）。lncRNA FOXD2-AS1低表达或miR-3194-3p高表达,口腔鳞癌CAL27细胞中细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）表达水平和细胞存活率降低,裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved-caspase-3）表达水平和细胞凋亡率升高（P<0.01）;且lncRNA FOXD2-AS1低表达降低了β-连环蛋白（β-catenin）蛋白表达。lncRNA FOXD2-AS1靶向调控miR-3194-3p,低表达miR-3194-3p逆转了FOXD2-AS1低表达对口腔鳞癌细胞CAL27增殖和凋亡及Wnt/β-catenin信号通路的影响。结论:下调lncRNA FOXD2-AS1表达可能通过上调miR-3194-3p抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。     

蒺藜皂苷通过上调PDCD4表达阻滞肺癌A549细胞周期并诱导细胞凋亡

摘要：目的:研究蒺藜皂苷（STT）对肺癌A549细胞周期和凋亡的影响和机制。方法:肺癌A549细胞分成Control、STT、STT+si-NC、STT+si-PDCD4组,使用噻唑蓝（MTT）方法测定细胞增殖,平板克隆实验测定细胞克隆能力,碘化丙啶（PI）单染法检测细胞周期,膜联蛋白V-FITC（Annexin V-FITC）/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、p27、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（C-caspase-3）、caspase-3、程序性细胞死亡4（PDCD4）蛋白表达。结果:与Control组比较,STT组细胞增殖能力、克隆能力显著降低（P<0.05）,细胞G0/G1比例和凋亡率显著升高（P<0.05）,Cyclin D1蛋白表达明显减少（P<0.05）,p27、C-caspase-3、caspase-3、PDCD4等蛋白表达水平升高（P<0.05）。与STT+si-NC组比较,STT+si-PDCD4组细胞存活率和克隆形成数目明显增加（P<0.05）,G0/G1细胞比例降低与细胞凋亡率明显降低（P<0.05）,细胞中Cyclin D1蛋白水平升高（P<0.05）,p27、C-caspase-3、caspase-3、PDCD4等蛋白水平下降（P<0.05）。结论:蒺藜皂苷通过上调PDCD4表达阻滞肺癌A549细胞周期并诱导细胞凋亡。     

过表达微小 RNA-877-5p通过靶向叉头框转录因子 M1调控胃癌细胞活力和凋亡

目的探讨微小 RNA-877-5p(miR-877-5p)对胃癌细胞活力、凋亡的影响及其分子机制。方法本研究时间为 2020年 1—7月。胃癌和正常胃黏膜上皮细胞株购自美国典型培养物保藏中心。实时定量基因扩增荧光检测( qPCR)检测胃癌细胞株 HGC-27、SUN-1、AGS和正常胃黏膜上皮细胞株 GES-1中 miR-877-5p和叉头框转录因子 M1(FOXM1)信使核糖核酸( mRNA)表达。建立 miR-877-5p过表达或抑制 FOXM1表达细胞株,观察其在 HGC-27细胞的活力、凋亡中的作用。 MTT法检测细胞的活力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法( Western blotting)检测 FOXM1、细胞周期蛋白 D1(cyclinD1)、细胞周期依赖性激酶抑制因子 p21、p27、B细胞淋巴瘤 /白血病 -2(Bcl-2)、 Bcl-2相关 X蛋白( Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3(cleaved-caspase 3)蛋白表达。 TargetScan预测结合双荧光素酶报告实验分析 miR-877-5p和 FOXM1的靶向关系。共转染 miR-877-5p模拟物和 FOXM1过表达载体( pcDNA-FOXM1),研究 FOXM1过表达对 miR-877-5p过表达诱导的 HGC-27细胞增殖和凋亡的影响。结果与正常胃黏膜上皮细胞 GES-1比较,胃癌细胞 HGC-27、SUN-1、AGS中的 miR-877-5p表达下调( 1.00±0.08比 0.34±0.03,0.51±0.05,0.44±0.04,P<0.05)FOXM1 mRNA和蛋白表达上调( 1.00±0.09比 2.41±0.23,2.58±0.24,2.26±0.23,P< 0.05)。 miR-877-5p过表达显著降低 HGC-27细,胞 48 h、72 h的细胞活力( P<0.05),明显提高细胞凋亡率、 p21、p27、Bax、cleaved-caspase3蛋白的水平( P<0.05)显著减少 cyclinD1、Bcl-2蛋白表达量( P<0.05)。抑制 FOXM1表达显著降低 48 h、72 h的细胞活力( P<0.05)提高细胞凋亡率、 p,21、Bax蛋白水平( P<0.05),减少 cyclinD1、Bcl-2蛋白表达量( P<0.05)。 miR-877-5p靶向调控 FOXM1的表达,。FOXM1过表达后, miR-877-5p过表达对 HGC-27细胞增殖、 cyclinD1、Bcl-2蛋白表达的抑制作用被逆转,其对细胞凋亡、 p21、Bax蛋白表达的促进作用也被逆转。结论过表达 miR-877-5p通过靶向调控 FOXM1表达抑制胃癌细胞的活     

沉默ciRS-7通过靶向miR-944逆转胃癌细胞顺铂耐药性机制

目的 探讨沉默环状RNA(circRNA)ciRS-7对胃癌细胞顺铂耐药性的影响及相关机制。方法 构建顺铂耐药胃癌细胞HGC-27/DDP,沉默ciRS-7并用顺铂处理HGC-27/DDP细胞后，用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7、微小RNA-944(miR-944)表达水平，细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率、克隆形成实验检测克隆形成数，蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)蛋白表达水平，流式细胞术检测细胞凋亡率，原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数，双荧光素酶实验验证ciRS-7与miR-944的靶向关系。结果 ciRS-7在顺铂耐药胃癌组织和细胞中高表达，miR-944在顺铂耐药胃癌组织和细胞中低表达，沉默ciRS-7明显降低顺铂处理的HGC-27/DDP细胞存活率、克隆形成数、cyclinD1、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平...     

miR-1915-3p在胃癌细胞中的表达水平及其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 检测miR-1915-3p在胃癌细胞中的表达水平,探讨其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测胃癌细胞MGC-803、SGC-7901、MKN-45和永生化胃上皮细胞GES-1中miR-1915-3p的相对表达水平;转染实验将miR-1915-3p质粒和对照质粒（miR-NC）转染至MGC-803和SGC-7901中,分别设置MGC-803细胞miR-1915-3p组和miR-NC组及SGC-7901细胞miR-1915-3p组和miR-NC组;细胞增殖实验和凋亡实验分别检测miR-1915-3p组和miR-NC组细胞的光密度（OD）值和凋亡率;蛋白免疫印迹（Western blot）实验检测miR-1915-3p组和miR-NC组细胞的Bcl-2蛋白表达情况。结果 MGC-803、SGC-7901、MKN-45细胞中miR-1915-3p的相对表达水平分别为（0.46±0.06）、（0.42±0.05）、（0.33±0.04）,均低于GES-1细胞中miR-1915-3p的相对表达水平（P<0.05）。MGC-803细胞中,miR-1915-3p组与miR-NC组相比,OD值降低、细胞凋亡率增加、Bcl-2蛋白表达减弱（P均<0.05）;SGC-7901细胞中,miR-1915-3p组与miR-NC组相比,OD值降低、细胞凋亡率增加、Bcl-2蛋白表达减弱（P均<0.05）。结论 miR-1915-3p在胃癌细胞系中表达降低,上调miR-1915-3p的表达可抑制胃癌细胞增殖,减弱Bcl-2蛋白表达以促进细胞凋亡。     

虫草素对人胃癌细胞系HGC-27的影响及分子机制

目的 探讨虫草素对HGC-27细胞增殖、运动性和凋亡的影响及相关机制。方法 用不同浓度虫草素处理人胃癌细胞系HGC-27、AGS和MGC-803,利用CCK-8法检测细胞活力,集落形成试验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,体外划痕试验检测细胞运动性。Western blot检测Bcl-2、Bax、ERK、磷酸化ERK（p-ERK）和糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）蛋白表达水平。结果 与对照组相比,虫草素处理组明显抑制细胞增殖、集落形成率、细胞运动性并诱导细胞凋亡,下调Bcl-2、GSK-3β和p-ERK蛋白表达水平,且呈浓度和时间依赖性,但对Bax蛋白表达水平没有影响。结论 虫草素通过调节ERK/GSK-3β信号通路起到抗肿瘤作用,有望成为临床干预和治疗胃癌的潜在药物。     

七氟醚通过lncRNA MEG3调控miR-222对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探究七氟醚通过lncRNA MEG3调控miR-222对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法本实验采用人正常胃粘膜细胞GES-1和人胃癌细胞株MKN45进行研究。将胃癌细胞MKN45随机分为对照组、1.7%七氟醚组、3.4%七氟醚组和5.1%七氟醚组。CCK-8实验检测七氟醚对MKN45细胞活力的影响,流式细胞术检测胃癌MKN45凋亡情况,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果七氟醚可明显抑制胃癌细胞MKN45的细胞增殖,增加胃癌细胞MKN45的凋亡率。胃癌细胞MKN45中lncRNA MEG表达明显降低,miR-222表达水平明显增加,且lncRNA MEG3可负调控miR-222的表达。与七氟醚+si-con组相比,七氟醚+si-MEG3组miR-222并无明显下降。结论七氟醚通过lncRNA MEG3调控miR-222抑制胃癌细胞增殖,促进胃癌细胞凋亡。     

大黄素通过上调lncRNA MEG3表达并抑制PI3K/AKT信号通路影响喉癌细胞的增殖和凋亡

摘要：目的:探讨大黄素对喉癌M4E细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:大黄素作用于M4E细胞24 h,四噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,实时定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测母系表达基因3（MEG3）水平,Western Blot检测细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、活化的半胱天冬酶-3（Cleaved-caspase-3）、磷酸化磷酸化磷脂酞肌醇3-激酶p85亚单位（p-PI3Kp85）和磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）蛋白。转染MEG3过表达载体至M4E细胞,上述相同方法检测MEG3过表达对M4E细胞增殖、凋亡及相关蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,大黄素作用后,M4E细胞增殖抑制率、凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白水平和MEG3水平显著升高（P<0.05）,p-PI3Kp85和p-AKT蛋白水平显著降低（P<0.05）。MEG3过表达可提高M4E细胞增殖抑制率、凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白水平（P>0.05）,降低CyclinD1蛋白水平（P<0.05）。低表达MEG3逆转了大黄素对M4E细胞增殖、凋亡及p-PI3Kp85和p-AKT蛋白表达的影响（P<0.05）。结论:大黄素可能通过上调MEG3表达并抑制PI3K/AKT信号通路抑制喉癌细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

miR-149抑制结直肠癌细胞迁移的分子机制研究

目的 探讨miR-149对结直肠癌（CRC）细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响及其作用机制。方法 实时荧 光定量PCR（q-PCR）方法检测miR-149在CRC细胞SW620、LS174T和人结肠上皮细胞FHC中的表达水平;荧光素酶 分析法验证 STAT3 与 miR-149 之间的靶向结合关系;q-PCR 和 Western blot 检测 miR-149 过表达对 CRC 细胞中 STAT3、p-STAT3 mRNA和蛋白表达的影响。将miR-149 mimics与STAT3过表达质粒单独或者共转染至CRC细胞 中,并分为miR-NC组、miR-149 mimics组、miR-149 mimics+pEGFP/STAT3组。采用CCK-8法、Transwell法、细胞划 痕法、流式细胞术分别检测各分组CRC细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡情况。结果 与正常结肠上皮细胞FHC相比, CRC 细胞 SW620、LS174T 中 miR-149 表达水平受到抑制（P＜0.01）。荧光素酶实验证实,在 CRC 细胞中 STAT3 是 miR-149的一个直接靶基因。过量表达miR-149抑制STAT3、p-STAT3 mRNA和蛋白的表达,降低CRC细胞增殖能 力、侵袭能力以及迁移能力（P＜0.01）。同时,过量表达 miR-149 也可促进 CRC 细胞的凋亡（P＜0.01）。但过表达 STAT3可解除miR-149对CRC细胞增殖、侵袭以及迁移能力的抑制作用。结论 miR-149通过靶向STAT3抑制结直 肠癌细胞的增殖、侵袭与迁移,同时促进细胞的凋亡。     

蒺藜皂苷抑制胃癌细胞AGS增殖并促进其凋亡的机制研究

摘要：目的:研究蒺藜皂苷对胃癌细胞AGS增殖和凋亡的影响及机制。方法:以胃癌细胞AGS作为研究对象,用蒺藜皂苷处理细胞,噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖,碘化丙啶（PI）单染法检测细胞周期,膜联蛋白V-FITC（Annexin V-FITC）/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase3）、Nin1结合蛋白（NOB1）蛋白表达。在胃癌细胞中转染pc DNA3.1-NOB1,给予蒺藜皂苷处理,检测细胞增殖、周期、凋亡和Cyclin D1、cleaved caspase 3、NOB1蛋白表达变化。结果:蒺藜皂苷处理后,胃癌细胞增殖能力和Cyclin D1、NOB1蛋白表达水平下降（P<0.05）,细胞G1期比例、细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白表达水平升高（P<0.05）。转染pc DNA3.1-NOB1后,胃癌细胞增殖能力和Cyclin D1、NOB1蛋白表达水平升高（P<0.05）,细胞G1期比例、细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白表达水平下降（P<0.05）。结论:蒺藜皂苷通过下调NOB1抑制胃癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

姜黄素通过调控miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌发展进程的分子机制研究

目的 探讨姜黄素通过调控miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌发展进程的分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测乳腺癌患者癌组织及细胞系中miR-7641表达情况;使用Kaplan-Meier方法作乳腺癌患者生存曲线;采用不同浓度的姜黄素处理细胞,或转染miR-7641 mimic、Anti-miR-7641及pcDNA-PTPN14载体,采用qRT-PCR检测miR-7641表达情况,MTT实验及克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭,western blotting检测Ki67、pcDNA、CyclinD1、Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-8蛋白表达水平,采用双荧光素酶报告基因系统检测miR-7641与PTPN14靶向调控关系。结果 与癌旁组织或乳腺正常上皮细胞比较,miR-7641在乳腺癌患者癌组织及乳腺癌细胞系中高表达（P<0.01、0.001）,且miR-7641能够明显促进乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭（P<0.05、0.01、0.001）,并促进Ki67、pcDNA、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax、caspase-3、caspase-8蛋白表达;miR-7641与PTPN14 3''-UTR靶向结合,姜黄素通过miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭（P<0.01、0.001）,并抑制Ki67、pcDNA、CyclinD1、Bax蛋白表达,促进Bcl-2、caspase-3、caspase-8蛋白表达。结论 姜黄素可通过下调miR-7641促进PTPN14表达,进而抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

lncRNA HOTAIR调控miR-206影响类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的分子机制研究

目的：探讨lncRNA HOTAIR调控miR-206影响类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的分子机制。方法：收集30例类风湿关节炎的滑膜组织；培养类风湿关节炎滑膜细胞MH7A，实验分为siNC组、si-HOTAIR组、miR-NC组、miR-206 mimic组、si-HOTAIR+NC inhibitor组、si-HOTAIR+miR-206 inhibitor组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HOTAIR、miR-206表达水平。CCK-8法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot检测细胞CyclinD1、p21、Bax和Bcl-2蛋白表达；双荧光素酶报告实验检测HOTAIR与miR-206靶向结合关系。结果：与健康对照组比较，类风湿关节炎患者HOTAIR表达水平明显上调，miR-206表达水平明显下调（P<0.05）。与si-NC组比较，si-HOTAIR组HOTAIR表达水平明显下调，细胞存活率明显下调，细胞凋亡率明显上调（P<0.05）。与miR-NC组比较，miR-206 mimic组miR-206表达水平明显上调，细胞存活率明显下...     

miR-143对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响以及对Bcl-2表达的调节

目的研究miR-143对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,探讨miR-143对宫颈癌HeLa细胞系Bcl-2蛋白及mRNA表达的调节作用。方法将miR-143,anti-miR-143以及microRNA空对照高表达质粒用脂质体转染进宫颈癌He-La细胞中,MTT法检测宫颈癌HeLa细胞增殖的变化,His-tone/DNA ELISA检测细胞凋亡;Western blot和RT-PCR检测Bcl-2蛋白和mRNA的表达情况;双荧光素酶报告基因法检测miR-143的靶位点。结果 MiR-143抑制HeLa细胞的增殖,促进细胞凋亡,而anti-miR-143促进HeLa细胞增殖,抑制细胞凋亡;高表达的miR-143抑制Bcl-2蛋白的表达,anti-miR-143增加Bcl-2蛋白的表达量,而Bcl-2 mRNA的变化很小;miR-143抑制Bcl-2 3'端的荧光素酶的活性,突变miR-143与Bcl-2的预测结合位点后,荧光素酶的活性恢复。结论 MiR-143至少部分通过打靶Bcl-2抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,并且促进HeLa细胞凋亡。     

翠云草提取物调控miR-145对肝星状细胞增殖、凋亡的影响

摘要：目的:探讨翠云草提取物对肝星状细胞增殖、凋亡的影响及分子机制。方法:分别用12.5,25.0,50.0μg·ml-1翠云草提取物处理肝星状细胞HSC-T6,分别记为翠云草提取物低、中、高浓度组;未经任何处理的细胞作为对照组。将miR-145转染至HSC-T6细胞中,记为miR-145组;将miR-145转染至HSC-T6细胞后再用50.0μg·ml-1翠云草提取物处理,记为翠云草提取物+miR-145组。细胞计数试剂盒8（CCK-8）检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;蛋白质印迹（Western blot）法检测细胞增殖核抗原Ki67、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-145表达水平。结果:与对照组比较,翠云草提取物中、高浓度组肝星状细胞的吸光度（A）值、克隆形成数、Ki67表达水平显著降低,细胞凋亡率、caspase-3和miR-145表达水平显著升高,且呈浓度依赖性（P<0.05）。过表达miR-145可抑制肝星状细胞HSC-T6增殖,促进细胞凋亡,且miR-145增强了翠云草提取物对肝星状细胞增殖、凋亡的影响。结论:翠云草提取物可通过上调miR-145抑制肝星状细胞增殖、促进细胞凋亡。     

吉非替尼通过靶向circ-0000745/miR-421轴调控胃癌细胞N87增殖、凋亡的分子机制

摘要：目的:探讨吉非替尼是否通过环状RNA（circRNA）circ-0000745/微小RNA-421（miR-421）轴调控胃癌细胞N87增殖、凋亡。方法:运用细胞计数试剂盒8（CCK-8）、平板克隆实验、蛋白印迹（Western blot）分析、流式细胞术与定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）测定空白对照（NC）组、0.125,0.25,0.5μmoL·L-1吉非替尼组、si-NC组、si-circ-0000745组、NC+si-NC组、吉非替尼+si-NC组、吉非替尼+si-circ-0000745组、si-NC+anti-miR-NC组、si-circ-0000745+anti-miR-NC组、si-circ-0000745+anti-miR-421组胃癌细胞N87的活力、克隆形成、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、P21、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达、凋亡率与circ-0000745、miR-421表达。双荧光素酶实验分析circ-0000745与miR-421间的关系。结果:与NC组相比,0.125,0.25,0.5μmol·L-1吉非替尼组细胞活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量、miR-421表达量逐渐降低,而P21蛋白表达量、凋亡率、Bax蛋白表达量、circ-0000745表达量逐渐增加,且不同剂量组差异有统计学意义（P<0.05）。circ-0000745靶向负调控miR-421。与si-NC组相比,si-circ-0000745组胃癌细胞N87活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量升高,P21蛋白表达量、凋亡率和Bax蛋白表达量降低,差异有统计学意义（P<0.05）。与吉非替尼+si-NC组相比,吉非替尼+si-circ-0000745组N87细胞中活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量增加,P21、Bax蛋白表达量、凋亡率减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。与si-circ-0000745+anti-miR-NC组相比,si-circ-0000745+anti-miR-421组N87细胞活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量降低,P21、Bax蛋白表达量、凋亡率升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:吉非替尼通过上调circ-0000745靶向miR-421,抑制胃癌细胞N87增殖,并诱导其凋亡。     

蓝萼乙素通过NF-κB信号通路调控舌鳞状细胞癌细胞的增殖与凋亡

摘要：目的:探讨蓝萼乙素调控舌鳞状细胞癌（TSCC）细胞增殖、凋亡的分子机制。方法:体外培养人TSCC细胞SCC15,使用不同浓度的(3,6,12μmol·L-1)蓝萼乙素处理24 h。甲基噻唑基四唑（MTT）检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测蓝萼乙素对核因子-κB（NF-κB）信号通路相关蛋白[磷酸化核因子κB抑制蛋白α（p-IκBα）、磷酸化p65（p-p65）、p65、核因子κB抑制蛋白α（IκBα）]表达的影响; NF-κB信号通路的激活剂脂多糖（LPS）预处理SCC15细胞后,MTT法与流式细胞术分别检测细胞增殖能力及细胞凋亡率; Western blot法检测细胞周期蛋白1（CyclinD1）、增殖细胞核抗原（PCNA）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3总蛋白（T-caspase-3）的蛋白水平。结果:与空白组相比,蓝萼乙素不同浓度组细胞增殖率显著降低,CyclinD1、PCNA、Bcl-2、p-IκBα、p-p65蛋白水平显著降低,细胞凋亡率显著升高,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高（P<0.05）;与蓝萼乙素高浓度+PBS组相比,蓝萼乙素高浓度+LPS组细胞增殖率显著升高,CyclinD1、PCNA、Bcl-2蛋白水平显著升高,细胞凋亡率显著降低,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论:蓝萼乙素能够抑制TSCC细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能是通过抑制NF-κB信号通路的活化而发挥作用。     

LncRNA-MALAT1通过miR-142-3p/TEAD1分子轴调控结直肠癌细胞增殖与凋亡#br#

目的　探讨长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录子1（LncRNA-MALAT1）对结直肠癌细胞增殖与凋亡的影响及相关作用机制。方法　通过Real-time PCR与Western blot实验检测结直肠癌细胞株与人正常结肠上皮细胞中LncRNA-MALAT1、miR-142-3p基因以及TEA结构域转录因子1（TEAD1）蛋白的表达;使用si-MALAT1转染HCT116细胞,在此基础上共转染miR-142-3p inhibitor,利用Real-time PCR与Western blot检测细胞中LncRNA-MALAT1与miR-142-3p基因以及TEAD1、Bax、Bcl-2与Cyclin D1蛋白的表达,通过CCK-8实验检测细胞的增殖水平,通过流式细胞术检测细胞的凋亡水平,通过双荧光素酶实验检测LncRNA-MALAT1与miR-142-3p以及miR-142-3p与TEAD1的结合。结果　与人正常结肠上皮细胞相比,结直肠癌细胞株中LncRNA-MALAT1基因与TEAD1蛋白呈高表达,miR-142-3p基因呈低表达（P＜0.05）;沉默LncRNA-MALAT1能够促进miR-142-3p基因与Bax蛋白表达,抑制LncRNA-MALAT1基因以及Bcl-2、Cyclin D1与TEAD1蛋白表达,抑制细胞增殖,并促进细胞凋亡;在此基础上沉默miR-142-3p能够对上述调控作用实现部分逆转;双荧光素酶实验结果显示,LncRNA-MALAT1与miR-142-3p以及miR-142-3p与TEAD1能够结合。结论　LncRNA-MALAT1能够结合miR-142-3p,促进miR-142-3p靶基因TEAD1表达,进而促进结直肠癌细胞增殖,抑制其细胞凋亡,促进结直肠癌的病理进程。     

microRNA-34a对食管鳞癌细胞增殖、凋亡的影响

分析microRNA-34a（miR-34a）对人食管鳞癌（ESCC）细胞Eca109增殖、凋亡的影响。用miR-34a模拟物/抑制剂转染Eca109,实时荧光定量PCR检测Eca109细胞中miR-34a的表达;MTT法、流式细胞仪和Western blot分别检测转染miR-34a模拟物/抑制剂后对Eca109细胞增殖、凋亡的影响及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax变化。（1）转染miR-34a模拟物/抑制剂后miR-34a的表达明显增高（P＜0.01）/降低（P＜0.05）。（2）转染miR-34a模拟物组细胞的吸光度明显下降（P＜0.05）且凋亡率显著增加（P＜0.05）;而转染miR-34a抑制剂组细胞的存活率高于NC组（P＜0.05）且凋亡率明显降低（P＜0.05）。（3）miR-34a过表达能够使抗凋亡基因Bcl-2蛋白表达水平显著下降,促凋亡基因Bax的蛋白表达水平明显增加（P＜0.05）。（1）过表达miR-34a能抑制食管癌细胞的增殖,促进其凋亡。（2）抑制miR-34a能促进食管癌的增殖,抑制其凋亡。（3）miR-34a在食管癌中可能发挥着抑癌基因的作用。