Ⅰ型大麻素受体对脊髓损伤小鼠和小胶质细胞活化的影响

目的:探讨Ⅰ型大麻素受体(CB1R)对脊髓损伤小鼠和小胶质细胞活化的影响。方法:36只SPF级C57BL/6雌性小鼠,随机分为对照组、模型组和药物组,通过改良Allen’s法,构建小鼠脊髓损伤模型。分别于术后第1天、第7天和第14天,进行行为学评价。术后第14天处死小鼠,Western blotting法检测脊髓组织髓鞘碱性蛋白(MBP)、脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)蛋白表达。酶联免疫吸附法测定小鼠血清IL-6、IL-17和TNF-α含量。免疫荧光双染检测脊髓组织钙离子结合调节因子(IBA)-1和ED-1阳性细胞表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠术后BMS评分和斜板倾斜度明显降低,血清IL-6、IL-17和TNF-α含量、脊髓组织MBP、BNDF和NGF蛋白含量及IBA1/ED1双阳性细胞均明显升高(P<0.05);与模型组比较,药物组小鼠术后BMS评分、斜板倾斜度、脊髓组织MBP、BNDF和NGF蛋白含量均明显升高,血清IL-6、IL-17和TNF-α含量以及脊髓组织IBA1/ED1双阳性细胞均明显降低(P<0.05)。结论:CB1R通过抑制小...     

脊髓小胶质细胞与神经病理性疼痛

<正>疼痛可分为急性疼痛和慢性疼痛。慢性疼痛中最常见的是神经病理性疼痛,具有痛觉过敏、痛觉超敏和自发性疼痛的特点。典型神经病理性疼痛往往伴有外周神经损伤,如手术、感染等[1]。长期以来,大量研究主要集中在外周和中枢神经系统中神经元在神经病理性疼痛发生发展中的作用[2-3]。最近研究显示,外周     

小胶质细胞在神经病理性疼痛中的作用

传统观念认为神经病理性疼痛主要是由神经元的功能改变所引起的。然而,近来有大量的研究证实脊髓小胶质细胞的激活在神经病理性疼痛的发生发展中起着重要的作用。当小胶质细胞被激活后,释放出大量的神经活性物质、细胞因子和炎性介质,这些物质的释放都会引起神经炎症和免疫反应,最终导致神经功能紊乱。尽管目前神经病理性疼痛的发病机制尚不十分清楚,但众多学者认为,小胶质细胞与神经病理性疼痛的发生有着密切的关系。     

脊髓胶质细胞参与糖尿病神经病理性疼痛的研究进展

糖尿病是由于胰岛素分泌缺陷和(或)胰岛素作用障碍所致的以高血糖为特征的代谢性疾病.30％～50％的糖尿病患者会出现糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP),表现为自发痛、痛觉过敏和异常性疼痛,这对患者的身心健康造成了很大危害[1].以往研究认为,由于持续高血糖、长期代谢紊乱、神经营养不足、外周炎症因子以及氧化应激造成的外周Aδ神经纤维和C类神经纤维损伤是患者发生DNP的重要原因.脊髓背角含有丰富的神经递质、神经肽及其受体,是脊髓中神经结构和化学组成最复杂的区域,也是各种感觉的初级整合中枢[23].近年研究表明,存在于脊髓的胶质细胞也参与了DNP的发生与维持.本文就目前这方面的进展综述如下.     

小胶质细胞上P2X受体在神经病理性疼痛中的作用

神经病理性疼痛是由外周和中枢神经系统损伤所引起的疼痛,这些损伤包括糖尿病性神经病变、病毒感染和脊髓损伤等[1].其特点是弱或无伤害的轻微刺激就可以引起剧烈的疼痛感受,与中枢和外周神经重塑性有关.     

益气活血通络方通过抑制P2X7介导的脊髓小胶质细胞活化改善糖尿病大鼠神经病理性疼痛

目的 探讨益气活血通络方对糖尿病神经病理性疼痛（diabetic neuropathic pain,DNP）的影响及其作用机制。方法 高脂喂养大鼠4周后,35 mg/kg链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）腹腔注射复制2型糖尿病大鼠模型,通过观测大鼠机械痛阈和热缩足反应时间作为判定DNP模型复制成功的标准。将DNP大鼠随机分为模型组,益气活血通络方高、中、低剂量组和阳性对照组（甲钴胺）,另设空白对照组。Western blot法和免疫荧光双标检测脊髓中补体受体- 3的单克隆抗体（monoclonal antibody of complement receptor type 3,OX42）和P2X7（purinergic 2X7）的表达水平;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子- α（tumor necrosis factor- α,TNF- α）、白细胞介素- 1β（interleukin- 1β,IL- 1β）和趋化因子配体3（CC- chemokine ligand 3,CCL3）水平。结果 益气活血通络方干预后,DNP大鼠的机械痛阈和热缩足反应时间均得到显著的改善;大鼠血清TNF- α、IL- 1β和CCL3水平显著降低（P<0.05）;脊髓组织中OX42和P2X7表达水平均显著降低（P<0.05）。结论 益气活血通络方对DNP大鼠具有显著的治疗作用,其作用机制可能是通过抑制脊髓小胶质细胞活性,调节P2X7的表达,从而减轻神经炎症反应。     

小胶质细胞表面受体在神经病理性疼痛中的作用研究进展

神经病理性疼痛(NP)是一种顽固性的慢性疼痛综合征,对患者的身心健康有着极大的影响。小胶质细胞是神经元-胶质细胞网络中最为活跃的分子,其细胞膜上存在着许多离子通道和神经递质受体,通过复杂的信号转导通路产生和释放神经活性物质参与疼痛信号的转导与调控,在慢性疼痛的产生过程中起着重要作用。总结分析小胶质细胞表面受体在NP中的作用研究进展,对于促进该领域的基础研究和临床诊疗均有重要意义。     

小胶质细胞在神经病理性疼痛中的作用研究

疼痛的产生是神经元参与的神经网络对伤害性信息处理和分析的结果,包括生理性疼痛及病理性疼痛~([1]).其中病理性疼痛可以是神经性的或者炎症性的疼痛,它是长期的神经可塑性改变导致外周和(或)中枢的伤害性感受神经网络发生病理性改变以至于功能异常的一种反射.     

鞘内注射米诺环素抑制脊髓小胶质细胞激活减轻炎性痛觉过敏

目的 观察米诺环素鞘内注射对佐剂性炎性痛的作用。方法 大鼠鞘内注射生理盐水和米诺环素30min后右侧踝关节皮下注射完全弗氏佐剂（CFA）,观察注射CFA后1、3、7、14d的热刺激回缩潜伏期（PWTL）的变化及脊髓小胶质细胞标志物OX-42的表达。结果 CFA致炎后同侧后肢PTWL缩短,米诺环素鞘内注射抑制PTWL缩短;米诺环素鞘内注射可减少CFA致炎后脊髓OX-42的表达。结论 米诺环素鞘内注射可抑制脊髓小胶质细胞的激活,减轻炎性热痛觉过敏。     

神经胶质细胞与神经病理性疼痛

神经病理性疼痛是一种常见的慢性疼痛,其发生机制复杂,不易治疗,严重影响患者的生活质量,给社会带来巨大的卫生资源压力和经济负担.近年来,人们逐渐认识到神经胶质细胞主导的神经炎症及免疫反应在神经病理性疼痛发生和维持中的重要作用,现就神经胶质细胞与神经病理性疼痛的关系及其调控神经病理性疼痛治疗现状作一综述.     

小剂量氯胺酮抑制慢性神经痛大鼠脊髓背角P2X4受体表达

目的:观察小剂量氯胺酮腹腔注射对慢性坐骨神经收缩损伤（CCI）大鼠的镇痛效应及其对大鼠脊髓背角P2X4受体表达的影响,探讨其可能的镇痛机制。方法:24只SD大鼠随机分为假手术组、CCI组及氯胺酮治疗组（n=8）。CCI组及氯胺酮治疗组大鼠均制备慢性坐骨神经痛CCI模型;术后3 d测定热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)确定痛觉过敏形成后,氯胺酮治疗组大鼠腹腔注射小剂量氯胺酮（10 mg·kg-1）,CCI组腹腔注射等量的生理盐水,给药至术后7 d。假手术组大鼠单纯坐骨神经暴露,不用肠线结扎,也不给药治疗。分别于术前1 d、术后1、3、7 d用热辐射法测定TWL;术后7 d用免疫组织化学法检测大鼠腰段脊髓P2X4受体的表达。结果:术前1 d,3组大鼠TWL无统计学差异;假手术组术后术侧TWL轻度下降,但与术前相比无统计学差异。与术前、CCI组及假手术组相比,氯胺酮治疗组术后3 d始TWL呈进行性下降,以术后7 d为甚(P<0.05);术后7 d氯胺酮治疗组TWL较CCI组显著升高(P<0.05),但仍低于假手术组(P<0.05)。与假手术组相比,CCI组及氯胺酮治疗组大鼠术侧脊髓背角P2X4受体表达显著增加(P<0.01);氯胺酮治疗组P2X4受体表达明显少于CCI组(P<0.05)。结论:小剂量氯胺酮腹腔注射可部分缓解慢性神经痛大鼠的痛觉过敏症状,可能部分与其直接或者间接抑制脊髓背角P2X4受体表达有关。     

慢性疼痛中脊髓小胶质细胞激活机制的研究进展

 慢性疼痛中,神经元-脊髓小胶质细胞间的信号分子可以激活脊髓小胶质细胞,而激活的脊髓小胶质细胞可以释放多种与慢性疼痛有关的活性物质。实验研究表明,脊髓小胶质细胞表面受体的上调及细胞内激酶的激活在细胞的激活和慢性疼痛的发生和发展中起重要作用。     

CT引导下脊髓射频热凝术治疗脊髓损伤性神经病理性疼痛

目的 评价CT引导下脊髓射频热凝术（spinal cord radiofrequency thermocoagulation,SCRT）治疗脊髓损伤继发性神经病理性疼痛的有效性和安全性;探讨SCRT的适应证和禁忌证.方法 根据预设的纳入和排除标准,入组43例完全性脊髓损伤继发性神经病理性疼痛患者,并进行CT引导下SCRT.手术前后分别采用视觉模拟评分（visual analogue scale,VAS）及其加权值（VAS weighted value,VAS-WV）,以及简式McGill疼痛问卷（simplified form of McGill pain questionnaire,SF-MPQ）评价镇痛疗效,术后3、6、12、24和36个月分别进行VAS和合并症随访.结果 术后VAS、疼痛分级指数总分（PRI-T）、疼痛强度（PPI）显著降低;VAS-WV显示术后疼痛缓解率为97.7%;术后3、6、12、24和36个月随访期的疼痛缓解率分别为97.7%、97.5%、94.3%、92.9%和90.5%;合并症包括硬膜刺破后头痛（18.6%）和腹痛（11.6%）,均于术后7日内完全缓解;术后36个月随访期内未发现远期合并症.结论 CT引导下SCRT是脊髓损伤继发性神经病理性疼痛安全、有效的微创介入手术方法.     

右美托咪定通过抑制脊髓小胶质细胞活化减轻吗啡戒断反应痛觉过敏

目的 探讨右美托咪定（Dexmedetomidine, Dex）对吗啡（Morphine, M）戒断反应中痛觉过敏的影响及机制。方法 吗啡腹腔注射创建小鼠吗啡戒断反应痛觉过敏模型,根据药物处理随机分为Control、M、M/Dex、M/Min、M/Dex/Min。Von Frey测定各组小鼠机械性痛阈改变,免疫荧光检测脊髓背角小胶质细胞激活变化,Western blot和PCR检测各组脊髓降钙素基因相关肽（Calcitonin gene-related peptide, CGRP）蛋白和mRNA表达变化,并用微透析测定脊髓内炎症因子水平,最后电生理观察右美托咪定对脊髓抑制性突触后电流（Spontaneous inhibitory postsynaptic current, sIPSC）的影响。结果 同Control组相比,M组机械性痛阈显著降低,吗啡戒断痛觉过敏模型创建成功,同时小胶质细胞激活增加,脊髓背角CGRP及炎症因子表达增加。同M组相比,M/Dex、M/Min、M/Dex/Min组痛阈显著升高在模型创建后4h最明显,同时三组小胶质细胞激活均明显减少,脊髓背角CGRP及炎症因子表达降低。电生理结果显示右美托咪定显著增强脊髓背角神经元sIPSC的振幅和频率。结论 右美托咪定通过抑制脊髓小胶质细胞减少CGRP的表达并减轻脊髓炎症反应,且能够增强脊髓抑制性电活动,从而缓解吗啡戒断反应中的痛觉过敏。     

锌对辣椒素致痛模型小鼠脊髓磷酸化ERK表达和热痛阈的影响

目的 研究锌对辣椒素致痛模型小鼠脊髓磷酸化（p）的细胞外信号调节激酶（extracellularsignal-regulate kinase,ERK）表达和热痛阈的影响。方法 72只C57/BL6小鼠随机分为4组,采用足底注射辣椒素（0.5%,5μl）制备神经病理性疼痛（neuropathic pain,NPP）动物模型：对照组（Con）锌饲料30 mg/（kg·d）喂养2周后足底注射溶剂（吐温80、酒精和0.9%氯化钠注射液混合液）;N-NPP组锌饲料30 mg/（kg·d）喂养2周后给予足底注射辣椒素,L-NPP组锌饲料0.85 mg/（kg·d）喂养2周后注射辣椒素,H-NPP组硫酸锌水溶液227 mg/（L·d）喂养2周后注射辣椒素。应用动物行为学检测、免疫组织化学、免疫印迹和图像分析技术检测注射后7 d锌对动物行为学以及脊髓pERK表达的影响。结果 高锌喂养能显著降低脊髓pERK的表达,降低痛敏,使热痛阈增高（P〈0.01）;而低锌喂养能增加脊髓pERK的表达,增加痛敏,使热痛阈降低（P〈0.01）。结论 锌能抑制辣椒素致痛模型小鼠脊髓pERK的表达和热痛觉过敏。     

阿司匹林诱生型脂氧素A4对小鼠脊髓撞击损伤后神经病理性疼痛的影响及机制探讨

目的  评估阿司匹林诱生型脂氧素A4（ATL）对小鼠脊髓损伤（SCI）模型中神经炎症和神经病理痛的影响。方法  成年FVB小鼠T10节段脊髓进行改良Allen''脊髓撞击损伤。小鼠随机分成ATL组和Vehicle组,分别在SCI手术后4和24 h鞘内注射ATL（300 pmol）或vehicle。采用von Frey方法评估两组小鼠后脚机械刺激的敏感性;采用PCR方法检测两组小鼠脊髓小胶质细胞标记物和细胞因子信使核糖核酸（mRNA）表达;此外,通过小鼠大脑皮层组织小胶质细胞培养来评估ATL对小胶质细胞的激活和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放的直接影响。结果  与Vehicle组小鼠比较,ATL处理导致SCI诱导的小鼠机械痛敏降低;脊髓小胶质细胞标记物和促炎性细胞因子mRNA水平也下降。而且,ATL处理对小胶质细胞标记物IBA-1和促炎性因子TNF-α表达影响。此外,原代皮层小胶质细胞表达ATL相应受体ALX,ATL通过ALX发挥抗炎作用。结论  ATL通过ALX受体调节小胶质细胞激活和TNF-α释放,最终降低小鼠SCI后神经病理性疼痛。

     

经典瞬时感受器电位通道在炎性痛及神经病理性痛大鼠背根神经节表达水平的差异

目的 探讨背根神经节细胞经典瞬时感受器电位通道家族（TRPC）各亚型在炎性痛及神经病理性痛中表达是否存在差异性.方法 选用Sprague-Dawley雄性大鼠,随机分为两大组：炎性痛组和神经病理性痛组.炎性痛组又随机分为：空白对照组,生理盐水对照组,蜜蜂毒炎性痛模型组;神经病理性痛组又随机分为：空白对照组,假手术组,坐骨神经分支选择性结扎模型组.测定各组大鼠机械刺激缩足反射阈值和热刺激缩足潜伏期;然后分别于蜜蜂毒处理后2h及神经结扎后1周,检测各组大鼠背根神经节细胞内TRPC家族各亚型mRNA表达水平和各组背根神经节细胞内TRPC家族相应亚型蛋白表达水平.结果 实时定量基因扩增荧光检测技术显示,背根神经节细胞TRPC3、4、5亚型的mRNA表达水平在蜜蜂毒炎性痛组显著增加（P＜0.001）;而在神经病理性痛组背根神经节细胞TRPC2 mRNA表达水平显著提高（P ＜0.001）,同时TRPC3 mRNA表达水平却显著降低（P＜0.05）.免疫组化结果显示蜜蜂毒炎性痛组大鼠背根神经节内TRPC3、4、5免疫阳性细胞数显著增加;而神经病理性痛组大鼠背根神经节内TRPC2免疫阳性细胞数显著增加.结论 蜜蜂毒炎性痛模型及坐骨神经分支选择性结扎模型大鼠背根神经节细胞TRPC通道各亚型基因及蛋白表达水平存在差异,提示TRPC通道各亚型在炎性痛及神经病理性痛的发病中可能发挥着不同的作用.     

中分子量羟乙基淀粉对脊髓损伤后神经病理性疼痛的影响

目的 研究中分子量羟乙基淀粉对脊髓损伤后损伤平面以下神经病理性疼痛的影响.方法 SD大鼠72只,采用随机数字法,分为4组,3组建大鼠脊髓(T10-11)中度撞击伤模型并经尾静脉分别给予生理盐水、低分子量羟乙基淀粉、中分子量羟乙基淀粉,余下1组仅去除相应椎板.行为学观察大鼠痛阈变化.术后测脊髓组织内伊文氏蓝含量,观察血脊...     

Spinal microglia: A potential target in the treatment of chronic visceral pain

Chronic visceral pain is the predominant symptom of functional gastrointestinal disorders and chronic pancreatitis. Such pain can impair the patients' quality of life, and can also serve as one of the principal reasons for these patients to seek medical help. Nevertheless, the underlying mechanisms of chronic visceral pain have remained unclear, and much of what we know about visceral pain has been derived from studies of somatic nociception. Current treatment of chronic visceral pain has continued to be unsatisfactory, because of unclear pathophysiology. However, recent progress in pain research has identified the important role of spinal microglia in the development of somatic nociception. For visceral pain, several animal studies have demonstrated that spinal cord microglia is activated during the development of visceral hyperalgesia, which can be induced by neonatal colorectal irritation, psychological stress, and trinitrobenzene sulfonic acid-induced pancreatitis. This visceral hyperalgesia is also associated with elevated phosphorylation of p38 mitogen-activated protein kinase. Minocycline (a microglia inhibitor) reversed the hyperalgesia in rat models of chronic visceral pain, whereas fractalkine (FKN, a microglia activator) reproduced the visceral nociception in naïve rats. These preliminary results support the pronociceptive role of spinal microglia in mediating visceral hyperalgesia. Consequently, spinal microglia may serve as a promising target for controlling the chronic visceral pain.     

COX抑制剂对神经病理性疼痛大鼠镇痛效果及机制

目的观察COX抑制剂对慢性坐骨神经缩窄性损伤(CCI)神经病理性疼痛模型大鼠的镇痛效果及脊髓NR2B亚基表达,探讨其可能的机制。方法健康SD雄性大鼠体质量200~280 g,共36只,随机分为4组:CCI假手术组、CCI对照组、CCI吲哚美辛组、CCI帕瑞昔布组。各组大鼠于术前和用药前、用药后1、3、5、7 d测定机械性缩足反射阈。采用Westernblot方法测定脊髓NR2B亚基的蛋白表达。结果 CCI对照组、CCI吲哚美辛组和CCI帕瑞昔布组大鼠机械性缩足反射阈术后较术前明显降低(P<0.05),帕瑞昔布显著减轻CCI大鼠痛敏状态(P<0.05),吲哚美辛未显示镇痛效果;大鼠脊髓NR2B的表达,CCI吲哚美辛组和CCI帕瑞昔布组与CCI对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论本研究观察到高选择性COX-2抑制剂帕瑞昔布治疗能够改善CCI模型神经病理性疼痛大鼠的机械性缩足反射阈,起到一定镇痛效果,但其机制与脊髓背角NR2B亚基系统可能无关。