二甲双胍对肾癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨二甲双胍对肾癌细胞凋亡的影响及其机制。方法通过Annexin V-FITC/PI染色镜下观察及流式细胞仪检测观察二甲双胍对786-O细胞凋亡的影响,通过免疫印迹检测AMPK信号及Caspase 9表达探讨可能分子机制。结果二甲双胍能够诱导786-O在低浓度血清环境凋亡,激活Caspase 9,二甲双胍能够激活786-O细胞中AMPK信号,但与其凋亡诱导效应无关。结论二甲双胍能够诱导肾癌细胞在低浓度血清环境凋亡,具有潜在治疗肾癌作用。     

二甲双胍对结肠癌细胞增殖、周期及凋亡的影响

  目的 研究二甲双胍对人结肠癌细胞株SW480增殖、周期及凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制。方法 体外培养人结肠癌细胞株SW480,给予不同浓度二甲双胍干预,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,Real time-PCR法检测相关基因mRNA的表达。结果 二甲双胍可以抑制SW480细胞的增殖,并呈时间-剂量依赖性。20mmol/L二甲双胍干预48h后与对照组相比,细胞G0/G1期比例升高,S及G2/M期比例均降低;细胞凋亡比率增高;Real time-PCR示周期相关基因CyclinD1 mRNA表达明显下调（P0.05),凋亡相关基因BCL-2 mRNA表达明显下调,CASP3及BAX mRNA 表达明显上调(P<0.01)。结论 二甲双胍能够抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,G0/G1期细胞周期阻滞,促进细胞凋亡;其机制可能与上调及下调某些周期、凋亡相关基因的mRNA表达有关。     

二甲双胍影响人结直肠癌细胞增殖和凋亡的机制研究

目的 探讨二甲双胍对人结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 二甲双胍处理体外常规培养人结直肠癌细胞HCT-15、COLO205,通过MTT检测结直肠癌细胞的生长活力;流式细胞仪检测细胞的周期及凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bad、Bcl-2、Cleaved caspase-3及信号通路蛋白Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、S6K、p-S6K的表达变化.结果 不同浓度的二甲双胍作用HCT-15、COLO205细胞72 h后细胞活力明显受到抑制,并呈现浓度依赖性;经流式细胞术分析,二甲双胍能够促使细胞停滞于G0/G1期,同时上调细胞早期及晚期凋亡所占比率;Western blot分析发现,Bad、cleaved caspase-3表达量随着二甲双胍浓度的升高而上调,Bcl-2表达量随着二甲双胍浓度升高而下降;同时,p-Akt及p-mTOR、p-S6K的表达量均明显被抑制,但Akt、mTOR、S6K总蛋白表达量无明显变化.结论 二甲双胍能够抑制结直肠癌细胞增殖,促进细胞凋亡;而具体机制可能与抑制Akt及mTOR通路活性有关.     

二甲双胍对人肝细胞癌SMMC7721增殖的抑制作用

[摘要]目的检测二甲双胍作用下肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖和凋亡情况,并初步探讨了其中的机制。方法以不同浓度(0.2、1、2、5 mmol/L)二甲双胍处理SMMC-7721,用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,Hochest33342 DNA染色检测细胞凋亡,实时定量PCR法检测Bcl-2和Bid mRNA的表达情况。结果二甲双胍处理48 h 和96 h后,人肝细胞癌SMMC7721细胞的增殖明显受到抑制(P<0.05),以2 mmol/L和5 mmol/L组最为明显(P<0.01),并呈时间和剂量依赖性。Hochest33342染色发现,1 mmol/L和5 mmol/L浓度的二甲双胍可促进细胞凋亡,细胞凋亡率与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍处理后,SMMC7721细胞内抗凋亡分子Bcl-2表达下降(P<0.01),促凋亡分子Bid表达升高(P<0.05)。结论二甲双胍能抑制人肝细胞癌SMMC7721细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与细胞内抗细胞凋亡分子Bcl-2表达下降及促凋亡分子Bid表达升高有关。     

二甲双胍对类风湿性关节炎患者滑膜细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨二甲双胍对类风湿性关节炎患者滑膜细胞增殖与凋亡的影响.方法 取类风湿性关节炎患者滑膜组织,用胰酶消化法分离其滑膜细胞,分别用流式细胞术和CCK-8法检测三种浓度的二甲双胍(10、20、30 mmol/L)对滑膜细胞增殖的影响,TUNEL和流式细胞仪检测滑膜细胞凋亡情况,ELISA法检测二甲双胍处理的滑膜细胞上清中的炎性因子和抗炎性因子.结果 三种浓度(10、20、30 mmol/L)的二甲双胍分别干预滑膜细胞24、48、72 h,均不同程度抑制了滑膜细胞的增殖,且成时间-浓度依赖性.CCK-8法检测结果显示20、30 mmol/L二甲双胍处理显著抑制了滑膜细胞的增殖(P＜0.05),流式细胞术结果表明20 mmol/L二甲双胍处理48 h后,Go/G1期滑膜细胞的百分比与对照组相比显著增加了约20％ (P ＜0.05),S期和G2/M期的细胞比例分别显著下降了9％和11％ (P ＜0.05).凋亡结果表明,20、30 mmol/L二甲双胍处理48、72 h,较对照组显著促进滑膜细胞的凋亡(P＜0.05),流式细胞术显示早期和晚期的滑膜细胞凋亡率约17.5％.检测炎性因子发现,20、30 mmol/L二甲双胍处理后显著降低炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的水平(P＜0.05),增加抗炎因子IL-10水平约66％和76％ (P ＜0.05).结论 二甲双胍可显著抑制体外培养的人滑膜细胞的增殖,诱导其凋亡,可能与二甲双胍降低炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平和增加抗炎因子IL-10水平有关.     

二甲双胍联合顺铂对黑色素瘤细胞的抑制作用及其机制研究

目的 探讨二甲双胍联合顺铂对黑色素瘤细胞的抑制作用及机制.方法 小鼠恶性黑色素瘤细胞B16,设空白组、对照组、给药组A、给药组B、给药组C、给药组D、给药E组.给药A、B、C、D、E组分别加入稀释后的二甲双胍(1、2.5、5、10、15mmol/L)和顺铂(5、12.5、25、50、75μmol/L)混合物,室温处理2...     

二甲双胍对肝星状细胞凋亡的调控作用

目的探究二甲双胍对肝星状细胞(HSC)的作用及其可能的抗肝纤维化的作用机制。方法 将人HSC LX-2分为对照组(PBS)、模型组(PDGF-BB)和药物组(PDGF-BB+Met)。将30只SPF级C57BL/6J小鼠随机分为3组,对照组(n=10,橄榄油)、模型组(n=10,CCl4)和药物组(n=10,CCl4+Met)。用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活力,AnnexinV-PE/7-AAD染色法检测细胞凋亡率;Western blot检测α-SMA、Beclin1、PARP、Bax及bcl-2蛋白表达;取小鼠肝脏石蜡包埋,石蜡切片进行Masson染色检测小鼠组织病理学情况。结果 二甲双胍能抑制活化的HSC的增殖(IC50=42.66),细胞流式检测发现,二甲双胍能促进HSC凋亡(C=5 mM,P﹤0.001);与模型组相比,药物组α-SMA表达量减少(P﹤0.001);且药物组PARP、Bax表达量升高(P=0.03,P﹤0.001),Bcl-2表达量明显降低(P﹤0.001);Masson染色发现药物组胶原纤维分泌少于模型组(P=0.03)。结论 二甲双胍促进肝星状细胞的凋亡,从而改善CCl4诱导的肝纤维化。     

二甲双胍抗肿瘤作用机制

二甲双胍是目前治疗2型糖尿病的一线用药,近年来,国内外大量研究发现,二甲双胍在发挥其降血糖作用之外,还具有抗肿瘤作用,可抑制肝癌、胰腺癌、乳腺癌、结肠癌、前列腺癌等恶性肿瘤的增殖及生长,延缓肿瘤的发生、发展,但其抗肿瘤机制尚不明确。目前,国内外关于二甲双胍抗肿瘤机制的实验室及临床研究相继开展。本文对二甲双胍抗肿瘤作用机制的相关研究进行综述。     

二甲双胍联合异羟肟酸对骨肉瘤细胞增殖凋亡的影响

目的 研究二甲双胍(Met)联合异羟肟酸(SAHA)应用对人骨肉瘤细胞MG-63增殖和凋亡的影响。方法MTS法分别检测二甲双胍、SAHA和二甲双胍联合SAHA对MG-63细胞生长的抑制作用;平板克隆实验检测二甲双胍联合SAHA对MG-63细胞克隆形成能力的影响;流式细胞仪检测二甲双胍联合SAHA对MG-63细胞凋亡的影响;Western Blot检测联合用药后细胞周期和凋亡相关蛋白的变化。结果二甲双胍和SAHA分别对MG-63细胞生长有抑制作用,二甲双胍联合SAHA应用对MG-63细胞生长的抑制作用更加显著;二甲双胍联合SAHA应用与单药相比能够明显降低MG-63细胞克隆形成率,并且促进细胞凋亡;联合用药后P27,P21,Cyclin D1,Mcl-1,XIAP,Bim,Cytochrome C蛋白发生明显改变。结论二甲双胍联合SAHA应用与单药相比能够显著抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,促进其凋亡,可见两药联用对肿瘤细胞的杀伤具有协同性。     

重组人骨形态发生蛋白7对原发性开角型青光眼小梁网细胞增殖的影响

目的 建立原发性开角型青光眼(POAG)小梁网细胞体外原代培养体系; 分析不同终浓度重组人骨形态发生蛋白7(rhBMP7)对POAG小梁网细胞增殖的影响; 探讨rhBMP7与POAG发生、进展的相关性。 方法 取术中切除的带小梁网组织块(未使用丝裂霉素C),进行体外原代及传代培养,取3代小梁网细胞,在CFDA SE标记后,分别加入终浓度为0(对照组),20,50,80,100,200 ng/mL的rhBMP7无血清培养基,采用CCK8、荧光显微镜、流式细胞仪等方法检测POAG小梁网细胞增殖情况。 结果 细胞经传代培养,经鉴定为POAG小梁网细胞; 采用CCK8法检测发现:经终浓度为0(对照组),20,50,80,100,200 ng/mL的rhBMP7处理后,POAG小梁网细胞吸光度(OD值)分别为:(0.561 2±0.026 9),(0.724 2±0.039 3),(1.416 0±0.016 2),(1.740 4±0.039 2),(1.853 8±0.014 5),(1.936 4±0.054 6); 实验组细胞增殖率分别为1.37%,2.96%,3.70%,3.96%,4.15%; 实验组与对照组及各实验组间增殖率比较,差别具有统计学意义(P<0.05); 荧光显微镜示:随着rhBMP7终浓度的增加,经CFDA SE标记的POAG小梁网细胞荧光染色变浅、细胞量及密度增加; 采用流式细胞仪检测经20,50,80,100,200 ng/mL终浓度rhBMP7干预的POAG患者小梁网细胞,分裂、增殖细胞所占的比例分别为17.85%,18.63%,20.10%,27.45%,72.41%。 结论 运用组织块培养法,可体外原代培养出POAG患者的小梁网细胞; rhBMP7在一定程度上可促进POAG小梁网细胞的增殖,且在一定范围内呈剂量依赖性。     

脂肪酸合酶抑制剂阻遏人结肠癌细胞增殖的实验研究

目的：探讨脂肪酸合酶抑制剂对人结肠癌细胞增殖的影响。方法：应用细胞形态学、ＭＴＴ法及成集落实验方法进行检测和观察。结果：癌细胞在脂肪酸合酶抑制剂浅蓝菌素作用下,细胞增殖被阻遏,并呈现剂量—效应关系。同时发现癌细胞呈现细胞凋亡的形态学改变。凋亡细胞表现为细胞固缩,核染色质凝聚、边集或断裂。浅蓝菌素对人成纤维细胞增殖无明显影响。结论：脂肪酸合酶抑制剂可能通过抑制ＬｏＶｏ细胞内源性脂肪酸合成,诱发细胞凋亡来阻遏ＬｏＶｏ细胞的增殖。     

HT-29人结肠癌细胞缺氧对鞘氨醇激酶-1表达的影响

目的：研究体外缺氧对HT-29人结肠癌细胞鞘氨醇激酶-1（SK-1）表达及细胞迁移的影响。方法：模拟体外缺氧环境,应用RT-PCR及Western blot检测缺氧对HT-29细胞SK-1表达的影响,以及观察细胞迁移能力的情况。结果：缺氧状态下HT-29细胞SK-1 mRNA及蛋白表达增强,细胞迁移能力增强;且U0126具有抑制SK-1表达增强的作用。结论：缺氧状态下HT-29细胞迁移能力和SK-1基因表达存在一定关系。     

双氢青蒿素逆转人结肠癌耐药细胞耐药性的研究

【目的】评价双氢青蒿素逆转人结肠癌细胞HCT8/ADR耐药性的能力,研究其逆转耐药的机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞术分别进行细胞毒性、细胞凋亡实验评价双氢青蒿素和阿霉素联合用药的药效,采用Western blot法研究逆转耐药的机制。【结果】双氢青蒿素和阿霉素联用后对人结肠癌耐药细胞有较高的毒性,能诱导耐药细胞凋亡,增强耐药细胞的自噬。【结论】双氢青蒿素能逆转耐药性,恢复耐药细胞对化疗药物的敏感性。     

miR-138在鼻咽癌患者中的预后价值及其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨miR-138在鼻咽癌中的临床意义以及对癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。 方法 采用实时荧光定量PCR检测鼻咽癌组织和癌细胞CNE1中miR-138的表达量。采用Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析评估miR-138的预后价值。构建体外调控miR-138表达量的鼻咽癌细胞体系,采用MTT法和Transwell实验法分析miR-138对癌细胞CNE1生命活动的影响。 结果 miR-138在鼻咽癌组织和细胞中的表达量均显著下调(P<0.001),且与癌症患者的淋巴结转移(P=0.007)及TNM分期(P=0.003)密切相关。生存曲线表明,低表达miR-138的鼻咽癌患者较高表达患者具有较差的总生存率(P=0.002),且可以作为一个独立的预后因子(HR=2.603,95%CI=1.245～5.441,P=0.011)应用在鼻咽癌的治疗中。体外细胞实验证明,高表达miR-138具有抑制鼻咽癌细胞CNE1增殖、迁移和侵袭的能力(P<0.05),而抑制miR-138的表达则显著促进癌细胞的各种生命活动(P<0.05)。 结论 miR-138与鼻咽癌的预后密切相关,且可以明显抑制鼻咽癌细胞CNE1的增殖、迁移和侵袭能力。     

血根碱抑制肺腺癌A549细胞生长及机制初探

目的 研究血根碱(sanguinarine,SAN)对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 将肺腺癌A549细胞随机分为空白组、SAN不同浓度(1.25、2.5、5、10 μmol/L)组、阳性组.采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thia-zolyl)-2,5-di...     

A20在浸润性乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的 探讨A20在乳腺癌中的表达情况,并分析其表达结果与患者的临床病理特征以及预后情况的关系。 方法 收集具备完整生存资料的人乳腺癌组织145例及相对应的癌旁组织46例,采用免疫组织化学两步法检测A20蛋白的表达,并分析A20的表达情况与患者的临床病理特征及预后情况的关系。 结果 A20蛋白主要表达于胞质中,在35例乳腺癌组织及与之配对的癌旁组织中,癌组织中A20蛋白的表达率高于癌旁组织(71.4% vs 34.3%)(P<0.01)。145例中,A20蛋白高表达71例(49.0%)、低表达74例(51.0%),高、低表达组的生存率分别为59.2%(42/71)及81.1%(60/74),二者差别有统计学意义(P<0.01)。对与乳腺癌患者总生存率相关的因素进行单因素和多因素的分析显示,A20的表达状态是一个独立的预后指标。 结论 A20蛋白有可能作为评估乳腺癌患者预后差的潜在指标。     

加味扶正抑瘤汤含药血清对结肠癌HT－29细胞的抑制效应及其机制研究

目的观察加味扶正抑瘤汤含药血清对结肠癌HT－29细胞株增殖及细胞凋亡抑制基因Bcl－2、促凋亡基因p53表达的影响。方法选取结肠癌HT－29细胞株,随机分不同浓度含药血清组及空白血清组,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法、实时无标记动态细胞分析（RTCA）法、逆转录—聚合酶链反应（RT－PCR）法检测细胞增殖以及Bcl－2、 p53 mRNA表达情况。结果加味扶正抑瘤汤含药血清对结肠癌HT－29细胞株增殖具有抑制作用（P＜0．05）,且呈浓度与时间的依赖关系;体积分数12％、15％含药血清作用48 h可显著降低HT－29细胞株Bcl－2 mRNA表达,升高p53 mRNA表达,与空白血清组比较,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论加味扶正抑瘤汤对结肠癌HT－29细胞增殖具有明显的抑制作用,其机制可能与下调Bcl－2和上调p53的表达相关。