利拉鲁肽对结肠癌细胞增殖、凋亡及转录活化因子6通路的影响

目的探究利拉鲁肽对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及对转录活化因子 6(ATF6)通路的影响。方法按照利拉鲁肽浓度 0、10、100、1 000 nM培养人结肠癌 HCT116细胞 24、48、72 h,人胆囊收缩素 /缩胆囊素八肽(CCK?8)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期、凋亡情况,蛋白质印迹法(Western Blot)检测作用后细胞中 21KD蛋白(Bax)半胱胺酸蛋白酶 ?3(Caspase?3)及 ATF6通路蛋白 ATF6 p50、CCAAT?增强子结合蛋白( C/EBP)同源蛋白( CHOP)的表达水平。结果、与对照组相比,利拉鲁肽各浓度间增殖率均有显著变化( P＜0.05)同一时间点随着利拉鲁肽浓度的增加, 0、10、100、1 000 nM各组细胞的增殖率分别为( 97.16±35.67)%、(81.69±33.37)%、(76.12,±30.23)%、(70.65±28.89)%;(86.17±33.98)%、(58.68±26.77)%、(39.74±10.67)%、(30.17±9.24)%;(83.82±31.19)%、(38.77±10.19)%、(22.98±6.78)%、(16.63±6.12)%,均呈下降趋势。同一浓度随着时间推移, 24、48、72 h各时间点细胞增殖率分别为( 97.16±35.67)%、(86.17±33.98)%、(83.82±31.19)%;(81.69±33.37)%、(58.68± 26.77)%、(38.77±10.19)%;(76.12±30.23)%、(39.74±10.67)%、(22.98±6.78)%;(70.65±28.89)%、(30.17±9.24)%、(16.63± 6.12)%。不同浓度利拉鲁肽作用于 HCT116细胞 72 h后, 10、100、1 000 nM浓度的利拉鲁肽组的 G2/M期细胞比例较 0 nM组显著减少( P＜0.05),且随着浓度的增加 G2/M期细胞呈现下降趋势。 0、10、100、1 000 nM利拉鲁肽作用下细胞凋亡率分别为(9.06±0.98)%、(10.45±1.12)%、(13.89±1.54)%、(56.08±14.33)%,依次升高( P＜0.05)。与 0 nM组比较, 10、100、1 000 nM浓度的利拉鲁肽组细胞的凋亡率依次显著升高( P＜0.05);与 10 nM组比较, 100、1 000 nM组凋亡率依次显著升高( P＜0.05);与 100 nM组比较, 1 000 nM组凋亡率显著升高( P＜0.05)。蛋白质印迹法结果显示, 10、100、1 000 nM利拉鲁肽作用后细胞中 Bax蛋白表达量分别为( 0.69±0.13)、(0.93±0.24)、(1.19±0.25)显著升高( P＜0.05)1 000 nM组 Bax蛋白表达量显著高于 10 nM组( P＜0.05),100、1 000 nM两组间差异无统计学意义( P＞005); Caspase?3蛋白表达量分别为( 0.26±0.06)、(0.76±0.15)、(1.15±0.16)依次显著升高(P＜0.05),100、1000 nM组Caspase?3蛋白表达量显著高于 10 nM组(P＜0.05),1 000 nM组Caspase?3蛋白表达量显著高于 100 nM组( P＜0.05); ATF6 p50蛋白表达量分别为( 0.69±0.11)、(0.96±0.09)、(1.20±0.08); CHOP蛋白表达量分别为( 0.27±0.06)、(0.79±0.08)、(0.99±0.09)均显著升高( P＜0.05)100、1 000 nM组 ATF6 p50、CHOP蛋白表达量显著高于 10 nM组( P＜0.05)1 000 nM组 ATF6 p50、 CHOP 蛋白表达量显著高于100 nM组( P＜0.05)。结论 利拉鲁肽对结肠癌 HCT116 细胞具有增殖抑制和凋亡促进作用,且呈时间?剂量的依赖性,其可能通过激活 ATF6通路发挥促凋亡作用。     

微小 RNA?204?3p通过靶向调控 Krüppel样因子 6对高糖诱导小鼠足细胞损伤的保护作用

目的探讨微小 RNA?204?3p(miR?204?3p)对高糖诱导小鼠足细胞 MPC5损伤的保护作用及其分子机制。方法采用高糖(30 mmol/L D?葡萄糖)处理 MPC5细胞。实时定量 PCR(qPCR)检测细胞中 miR?204?3p与锌指蛋白 Krüppel样因子 6(KLF6) mRNA水平。 MPC5细胞分为 NG组(正常对照)HG组(高糖刺激)HG+miR?204?3p组、 HG+miR?NC组、 HG+si?KLF6组、 HG+si? NC组, HG+miR?204?3p+pcDNA?KLF6组和HG+m,iR?204?3p+pcDNA组,。蛋白质印迹法(Western Blot)检测肌动蛋白微丝偶联蛋白(synaptopodin)、结蛋白(desmin)、 B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、 Bcl?2相关 X蛋白(Bax)与活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3(cleaved?caspase?3)蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡,生物学信息预测和双荧光素酶报告基因分析 miR?204? 3p和 KLF6的靶向关系。结果与正常对照相比,高糖可显著降低 MPC5细胞中 miR?204?3p表达量［(0.41±0.04)比(1.02± 0.08)］上调 KLF6 mRNA［(2.86±0.27)比(1.03±0.08)］和蛋白［(0.89±0.08)比(0.46±0.04)］水平,还可上调 KLF6、desmin［(0.81± 0.07)比(,0.34±0.03)］、 Bax、cleaved?caspase?3蛋白表达及细胞凋亡率［(22.46±2.08)%比(5.26±0.64)%］下调 synaptopodin蛋白［(0.34±0.03)比(0.76±0.07)］及 Bcl?2蛋白表达量(P＜0.05)。与 HG+miR?NC组比较, HG+miR?204?3p组明,显提高 synaptopodin［(0.67±0.06)比(0.32±0.03)］及 Bcl?2蛋白水平,降低 desmin［(0.41±0.04)比(0.83±0.08)］、 Bax、cleaved?caspase?3蛋白水平及细胞凋亡率［(11.25±1.65)%比(24.58±2.47)%］(P＜0.05)。与 HG+si?NC组比较, HG+si?KLF6组明显提高 synaptopodin［(0.62±0.06)比(0.28±0.03)］及 Bcl?2蛋白水平,降低 desmin［(0.49±0.05)比(0.86±0.08)］、 Bax蛋白水平及细胞凋亡率［(14.69±1.87)%比(25.47±2.68)%］(P＜0.05)。 miR?204?3p直接靶向 KLF6。与 HG+miR?204?3p+pcDNA组比较, HG+miR?204?3p+pcDNA?KLF6组显著增加高糖刺激小鼠肾脏足 MPC5细胞中 KLF6、desmin［(0.68±0.06)比(0.36±0.04)］、 Bax蛋白表达量和细胞凋亡率［(18.41±1.67)%比(11.05±1.02)%］,显著减少 synaptopodin蛋白［(0.38±0.03)比(0.69±0.07)］和 Bcl?2蛋白表达量(P＜0.05)。结论 miR?204?3p通过直接靶向 KLF6抑制高糖刺激的足细胞凋亡,保护细胞损伤。     

罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制

目的探讨罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养骨肉瘤细胞 MG63,分为对照组、低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组、 anti?miR?NC组、 anti?miR?199b?5p组、中剂量罗哌卡因 +miR?199b?5p组和中剂量罗哌卡因 +miR?NC组。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,白质印迹法(Western Blot)检测细胞中细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)、 P21、B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、 Bcl?2相关 X蛋白蛋(Bax)表达水平,实时荧光定量逆转录 PCR(RT?qPCR)检测细胞中 miR?199b?5p表达水平。结果与对照组比较,低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组 MG63细胞增殖能力［(0.88±0.08)、(0.49±0.05)、(0.34±0.03)比(0.92±0.09)］、 Cyclin D1蛋白［(0.85±0.08)、(0.66±0.06)、(0.41±0.04)比(0.95±0.09)］表达降低(P＜0.05),而 P21［(0.18±0.02)、(0.37±0.04)、(0.71±0.07)比(0.14±0.01)］蛋白表达升高(P＜0.05)中剂量罗哌卡因组 Bcl?2蛋白［(0.20±0.02)比(0.76±0.07)］及 miR?199b?5p［(0.13±0.01)比(0.82±0.08)］的表达降低(P＜0.05),而,MG63细胞凋亡率［(23.51±2.42)%比(7.66±0.75)%］和 Bax蛋白［(0.89±0.09)比(0.28±0.03)］表达升高(P＜0.05)。与 anti?miR?NC组比较, anti?miR?199b?5p组 MG63细胞增殖能力［(0.64±0.06)比(0.98±0.09)］及 Cyclin D1蛋白［(0.40±0.04)比(0.95±0.09)］和 Bcl?2蛋白［(0.36±0.03)比(0.76±0.07)］的表达降低(P＜0.05),而 MG63细胞凋亡率［(19.56±1.58)%比(7.66±0.75)%］及 P21［(0.53±0.05)比(0.14±0.01)］和 Bax［(0.71±0.07)比(0.28±0.03)］的蛋白表达升高(P＜0.05)。与中剂量罗哌卡因 +miR?NC组比较,中剂量罗哌卡因 +miR?199b?5p组 MG63细胞增殖能力［(0.58±0.06)比(0.36±0.03)］及 Cyclin D1蛋白［(0.71±0.07)比(0.40±0.04)］和 Bcl?2蛋白［(0.53±0.05)比(0.21±0.02)］的表达升高(P＜0.05),而 MG63细胞凋亡率［(12.68±1.23)%比(23.35±2.34)%］及 P21［(0.37±0.03)比(0.72±0.07)］和 Bax［(0.57±0.06)比(0.88±0.09)］的蛋白表达降低(P＜0.05)。结论罗哌卡因可能通过下调 miR?199b?5p降低了骨肉瘤细胞的增殖,并促进了其凋亡。     

隐丹参酮通过 G蛋白偶联受体 55调节 Wnt/β?catenin信号通路抑制舌鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡及其作用机制研究

目的探讨隐丹参酮对舌鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法实验设置不同浓度隐丹参酮( CT)组、空白对照( NC)组、 pcDNA?con组、 pcDNA?GPR55组、 CT+si?con组、 CT+si?GPR55组。 MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡; qRT?PCR检测 GPR55 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测蛋白表达。结果 MTT法检测显示, 0 CT组、 2 CT组、 4 CT组、 8 CT组、 16 CT组、 32 CT组细胞增殖抑制率分别为( 0.00±0.02)%、(25.04±2.50)%、(68.56±5.86)%、(85.44±8.54)%、(88.25±8.82)%、(80.11±8.01)%,与不含隐丹参酮的细胞相比,不同浓度隐丹参酮处理组 TSCC细胞的增殖抑制率均显著升高( F＝284.028,P＜0.05)。隐丹参酮可抑制舌鳞状癌细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制 Bcl?2、β?catenin表达,促进 Bax、 GPR55表达。过表达 GPR55也抑制舌鳞状癌细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制 CyclinD1、Bcl?2表达,促进 Bax表达。低表达 GPR55逆转了隐丹参酮对舌鳞状癌细胞的增殖抑制、凋亡促进及对 β?catenin表达的抑制作用。与 NC组( 0.75±0.08)相比, CT组 TSCC细胞中 β?catenin表达水平( 0.26±0.03)显著降低;与 CT+si?con组( 0.30±0.03)相比, CT+si?GPR55组 TSCC细胞中 β?catenin表达水平( 0.62±0.06)显著升高( F＝176.212,P＜0.05)。结论隐丹参酮可抑制舌鳞状癌细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与调控 GPR55及 Wnt/β?catenin信号通路有关。     

柴胡皂苷 A通过抑制内质网应激信号通路减轻乌头碱中毒大鼠脑组织细胞凋亡的机制分析

目的探讨柴胡皂苷 A对乌头碱中毒大鼠脑组织细胞凋亡、内质网应激信号通路的影响。方法自 2018年 10月至2019年 7月,选取购自武汉大学中南医院动物实验中心 SPF级健康雄性 SD大鼠 100只,随机数字表法分为对照组、模型组、干预组 1、干预组 2、干预组 3,每组各 20只。采取乌头碱( 20 μg/kg)尾静脉注射制备乌头碱中毒大鼠模型,干预组 1、干预组 2、干预组 3分别注射不同剂量的胡皂苷 A(5 mg·kg.1 ·d.1、10 mg·kg.1 ·d.1、20 mg·kg.1 ·d.1),模型组与对照组注射等剂量的生理盐水。观察各组大鼠干预后 12 h、24 h脑组织的凋亡情况以及内质网应激信号通路相关蛋白水平变化。结果干预 12 h、24 h后,型组超氧化物歧化酶( SOD)活性低于对照组,丙二醛( MDA)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)、白细胞介素 -6(IL-6)水平高于对照组,模模型组 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)蛋白表达［( 0.29±0.05)、(0.18±0.0)］低于对照组［( 0.84±0.07)、(0.86±0.06)］模型组凋亡率［(34.24±2.11)%、(54.65±4.68)%］、 Bcl相关 X蛋白( Bax)蛋白表达［(1.25±0.06)、(1.39±0.05)］、 CCAAT/增强子结合,蛋白同源蛋白( CHOP)蛋白表达［(0.98±0.08)、(1.26±0.06)］、葡萄糖调节蛋白 78(GRP78)蛋白表达［(1.45±0.08)、(1.62±0.07)］高于对照组［凋亡率( 2.33±1.03)%、(2.42±1.15)%,Bax蛋白表达( 0.33±0.06)、(0.35±0.07), CHOP蛋白表达( 0.54±0.06)、(0.53±0.05), GRP78蛋白表达( 0.68±0.06)、(0.69±0.06)］差异有统计学意义( P<0.05)。干预 12 h、24 h后,干预组 1、干预组 2、干预组 3的 SOD活性、 Bcl-2蛋白表达高于模型组, MDA、T,NF-α、IL-6含量、凋亡率和 Bax、CHOP、GRP78蛋白表达低于模型组(P<0.05)。结论柴胡皂苷 A可以降低乌头碱中毒大鼠脑组织凋亡及脑组织氧化应激反应,可能与抑制内质网应激信号通路有关。     

基于缺氧诱导因子?1α/Bcl2/腺病毒 E1B相互作用蛋白 3通路探讨速效救心丸对冠心病大鼠的保护机制

目的探究速效救心丸对冠心病大鼠的保护作用,初步探究其可能作用机制。方法将 40只 SD大鼠分为健康组、单纯模型组、速效救心丸组、缺氧诱导因子 ?1α(HIF?1α)激活剂奥替普拉( Oltipraz)组、速效救心丸 +奥替普拉组,每组 10只大鼠。对大鼠心电图 ST段、 T波变化进行检测,采用酶法测定一氧化氮及血脂指标总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白( HDL)、低密度脂蛋白( LDL)水平,酶联免疫吸附试验( ELISA)检测大鼠肿瘤坏死因子 α(TNF?α)、单核细胞趋化蛋白 ?1(MCP?1)、细胞间黏附分子?1(ICAM?1)、内皮素 ?1(ET?1)、前列环素 I2(PGI2)水平, HE染色观察心肌组织病理形态学变化情况; DNA断裂的原位末端标记法( TUNEL法)检测心肌组织细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测心肌组织中 HIF?1α、Bcl2/腺病毒 E1B相互作用蛋白 3(BNIP3)、 B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、 Bcl?2相关 X蛋白( Bax)、半胱氮酸天冬氨酸蛋白酶 ?3(caspase?3)蛋白表达。结果与健康组相比,单纯模型组 ST段( 0.36±0.05)mV、T波( 0.26±0.05)mV升高,三酰甘油( 1.08±0.14)mmol/L、总胆固醇升高, HDL(0.59±0.05)mmol/L降低, TNF?α(38.27±1.36)pg/mL、ET?1(11.63±1.84)ng/L升高,一氧化氮( 28.58±1.53)μmol/L降低,心肌组织细胞凋亡率( 46.72±4.37)%升高, HIF?1α(1.12±0.15)、 caspase?3(0.54±0.05)蛋白表达升高, Bcl?2(0.36±0.05)蛋白表达降低( P＜ 0.05)。速效救心丸组 ST段( 0.23±0.04)mV、T波( 0.15±0.04)mV、三酰甘油( 0.85±0.07)mmol/L、TNF?α(24.69±1.53)pg/mL、ET?1(7.18±1.57)ng/L、细胞凋亡率( 15.66±3.51)%、HIF?1α(0.49±0.06)、 caspase?3(0.42±0.04)蛋白表达低于单纯模型组,一氧化氮(36.43±1.65)μmol/L、Bcl?2(0.67±0.07)高于单纯模型组( P＜0.05)。奥替普拉组 ST段( 0.41±0.05)mV、T波( 0.35±0.03)mV、三酰甘油( 1.27±0.12)mmol/L、TNF?α(43.42±1.59)pg/mL、ET?1(12.76±1.45)ng/L、细胞凋亡率( 62.88±8.35)%、HIF?1α(1.37±0.26)、 caspase?3(0.91±0.09)蛋白表达高于单纯模型组,一氧化氮( 23.52±1.84)μmol/L、Bcl?2(0.25±0.04)低于单纯模型组( P＜0.05)。速效救心丸 +奥替普拉组 ST段( 0.34±0.06)mV、T波( 0.24±0.05)mV、三酰甘油( 1.06±0.13)mmol/L、总胆固醇、 TNF?α(35.23± 1.65)pg/mL、ET?1(11.24±1.73)ng/L、细胞凋亡率( 42.76±5.16)%、HIF?1α(1.06±0.17)、 caspase?3(0.52±0.06)蛋白表达低于奥替普拉组,一氧化氮( 27.24±1.32)μmol/L、Bcl?2(0.38±0.06)高于奥替普拉组( P＜0.05)。结论速效救心丸可改善冠心病大鼠血脂、内皮功能,降低机体炎症反应,其可能是通过抑制 HIF?1α/BNIP3通路、降低心肌细胞凋亡实现的。     

双苯氟嗪对脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的研究双苯氟嗪对局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法采用endothelin1诱导的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,流式细胞术检测大脑皮层和纹状体神经细胞凋亡百分率、Bcl2和Bax蛋白表达量。结果假手术组皮层和纹状体细胞凋亡率低,分别为(1.26±0.15)%和(2.50±0.35)%,溶剂组细胞凋亡率明显增高,分别为(9.34±1.22)%和(10.58±1.44)%;双苯氟嗪可以降低皮层和纹状体细胞凋亡率,并呈现明显的剂量依赖关系〔皮层:10mg·kg-1组(7.92±0.76)%,20mg·kg-1组(6.78±0.77)%,40mg·kg-1组(6.00±0.71)%,r=0.9559,P<0.01;纹状体:10mg·kg-1组(9.76±1.47)%,20mg·kg-1组(8.52±0.60)%,40mg·kg-1组(7.22±1.39)%,r=0.9845,P<0.01〕。Flu20mg·kg-1组可以降低缺血后大脑皮层的细胞凋亡百分率(8.12±0.94)%(P<0.05),但对纹状体细胞凋亡百分率无明显影响(P>0.05)。对Bcl2和Bax蛋白表达量的测定结果显示,假手术组皮层和纹状体均显示高水平的Bcl2表达,Bcl2和Bax比值最高,分别为:皮层1.30±0.08,纹状体1.64±0.10;溶剂组皮层和纹状体Bax表达增加,Bcl2和Bax比值明显低于假手术组,为1.03±0.12和1.00±0.04;Dip20、40mg·kg-1可以明显增加Bcl2表达,皮层和纹状体的Bcl2和Bax比值均高于溶剂组,而Dip10mg·kg-1组和Flu20mg·kg-1组不能对抗Bcl2和Bax比值的降低。结论双苯氟嗪可以明显抑制脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡,其抗凋亡作用与增加Bcl2表达有关。     

基于磷脂酰肌醇 3?激酶/蛋白激酶 B信号通路探讨针刺对超负荷运动致骨骼肌损伤大鼠氧化应激损伤及骨骼肌细胞凋亡的影响

目的探究针刺对超负荷运动致骨骼肌损伤大鼠氧化应激损伤及骨骼肌细胞凋亡的影响,初步了解针刺对超负荷运动致骨骼肌损伤的治疗机制。方法于 2018年 12月至 2019年 6月选取 60只 6周龄 SPF级 SD大鼠,采用随机数字表法将 SD大鼠分为四组:空白组(Control,C)、超负荷运动组(Overload,O)、针刺组(Acupuncture,A)和超负荷运动 +针刺组(Overload and Acupuncture,OA),各 15只; O组及 OA组实行超负荷运动,运动结束立即针刺 A组及 OA组足三里、阳陵泉、内关和肾俞穴,留针 20 min,持续 14 d;检测各组 SD大鼠骨骼肌中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、琥珀酸脱氢酶(SDH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH?Px)活性;使用流式细胞仪检测 SD大鼠骨骼肌细胞凋亡情况,使用蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白 B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、 Bcl?2相关 X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(Caspase?3)活性;检测 SD大鼠血清中肌酸激酶水平并使用苏木精 ?伊红(HE)染色观察 SD大鼠骨骼肌情况;使用蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇 3?激酶 /蛋白激酶 B(PI3K?Akt)信号通路相关蛋白表达情况。结果相比 C组丙二醛水平(4.75±0.29)mol/L、骨骼肌细胞凋亡水平(9.89±1.02)%和肌酸激酶(457.54± 45.02)kU/L,O组丙二醛水平(13.97±0.55)mol/L、骨骼肌细胞凋亡水平(32.58±3.50%)、 Bax、Caspase?3蛋白表达水、血清肌酸激酶水平(1985.50±88.87)kU/L均显著升高(P＜0.05);相比 C组 GSH?Px水平(142.25±8.39)kU/L、SOD水平(2.50±0.25)kU/L、SDH水平(35.75±8.78)kU/L,O组 GSH?Px水平(55.68±6.97)kU/L、SOD水平(1.02±0.17)kU/L、SDH水平(10.58±6.50)kU/L、Bcl?2、 PI3K、磷酸化蛋白激酶 B(p?AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m?TOR)水平均显著降低(P＜0.05)Akt蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);相比 O组, A组丙二醛水平(4.99±0.32)mol/L、骨骼肌细胞凋亡水平(11.52±1.02)%、B,ax、Caspase?3蛋白表达水、血清肌酸激酶水平均(557.56±54.25)kU/L显著降低, GSH?Px水平(130.25±7.14)kU/L、SOD水平(2.38±0.30)kU/L、SDH水平(31.25±5.50)kU/L、Bcl?2、PI3K、p?AKT、m?TOR蛋白水平显著升高(P＜0.05)Akt蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);相比 A组, OA组丙二醛水平(7.89±0.41)mol/L、骨骼肌细胞凋亡水平(22.58±2.51)%、B,ax、Caspase?3蛋白表达水、血清肌酸激酶水平(1402.51±64.50)kU/L均显著升高, GSH?Px水平(135.58±8.14)kU/L、SOD水平(2.10±0.21)kU/L、SDH水平(24.28±4.99)kU/L、 Bcl?2、PI3K、p?AKT、m?TOR蛋白水平显著降低(P＜0.05),Akt蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);相比 O组, OA组丙二醛水平、骨骼肌细胞凋亡水平、 Bax、Caspase?3蛋白表达水、血清肌酸激酶平均显著降低, GSH?Px水平、 SOD水平、 SDH水平、 Bcl? 2、PI3K、p?AKT、m?TOR蛋白水平显著升高(P＜0.05),Akt蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05)。 HE染色观察结果显示: O组纤维弯曲,肌红蛋白溶解,肌细胞核固缩、溶解,肌束膜破裂; OA组少量肌纤维断裂溶解弯曲,余未见异常。结论针刺可以通过调控 PI3K?Akt信号通路抑制 SD大鼠氧化应激和骨骼肌细胞凋亡来实现治疗超负荷运动致骨骼肌损伤。     

长春瑞滨诱导人肺癌Calu-3细胞凋亡及机制

目的　观察长春瑞滨 (VRB)诱导人肺癌Calu 3细胞凋亡时Bcl 2和半胱天冬酶 3的表达有无变化。方法　以不同浓度的VRB( 2 0 ,40和 60 μmol·L-1)作用于体外培养的人肺癌Calu 3细胞 2 4h后 ,TUNEL法和吖啶橙染色法观察肺癌细胞凋亡形态学特征 ;流式细胞仪检测肺癌细胞凋亡率和肺癌细胞Bcl 2蛋白表达水平 ;以半胱天冬酶 3荧光分析检测试剂盒测定肺癌细胞半胱天冬酶 3活性。结果　VRB( 2 0 ,40和60 μmol·L-1)处理细胞 2 4h ,TUNEL法及吖啶橙染色均观察到典型的凋亡细胞形态学特征。流式细胞仪检测VRB处理的肺癌细胞凋亡率分别为 ( 3 .1±0 .6) % ,( 7.8± 1 .2 ) %和( 1 9.6± 4.3 ) % ,较对照组 (凋亡率为 0 )显著增高且呈剂量依赖性 (P <0 .0 1 ) ;Bcl 2蛋白阳性表达细胞率分别为 ( 3 7.6±6.9) % ,( 2 5 .4±6.2 ) %和( 8.4±2 .5 ) % ,较对照组 ( 4 8.3±7.1 ) %显著降低且呈剂量依赖性 (P <0 .0 5 ) ;肺癌细胞半胱天冬酶 3活性分别为 ( 3 3 2± 1 6) ,( 4 1 7± 1 1 )和 ( 63 1± 2 7)μmol·L-1·h-1,较对照组 ( 1 95±1 2 ) μmol·L-1·h-1显著增高且呈剂量依赖性(P <0 .0 1 )。结论　VRB可以诱导肺癌细胞凋亡 ,抑制Bcl 2表达及增强半胱天冬酶 3活性     

苯丁酸钠对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察分析苯丁酸钠( Sodium phenylbutyrate,NaPB)对乳腺癌 MDA?MB?231细胞增殖和凋亡的影响,初步探究其可能的作用机制。方法以不同剂量 NaPB(0 mmol/L、2 mmol/L和 4 mmol/L)处理乳腺癌 MDA?MB?231细胞株并进行实验分组:对照组, 2 mmol/L NaPB组 4 mmol/L NaPB组。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法( MTT法)检测各组乳腺癌细胞的增殖情况,使用流式细胞仪检测细胞凋亡,应用蛋白质印迹法(Western Blot)检测凋亡相关蛋白 B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、Bcl?2相关 X蛋白( Bax)和乳腺癌易感基因 1(BRCA1)蛋白表达的水平。结果 NaPB能显著抑制乳腺癌 MDA?MB?231细胞的生长增殖,并可诱导乳腺癌细胞凋亡,对照组、 2 mmol/L NaPB组和 4 mmol/L NaPB组乳腺癌细胞的凋亡率分别为( 4.25±0.89)%、(14.11±2.98)%和( 32.73±1.89)%,两两比较均差异有统计学意义( P＜0.05)NaPB可诱导凋亡相关蛋白 Bcl?2表达水平下降,而 Bax表达水平升高, NaPB的抗肿瘤作用在高剂量组中表现得更明显。与对相比 NaPB可显著下调 BRCA1蛋白的表达,差异照组,有统计学意义(P＜0.05)。结论 NaPB可抑制乳腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与 NaPB下调 BRCA1表达有关。