IL-33/ST2信号通路及相关药物研究进展

目的：介绍IL-33/ST2信号通路,总结其与各项疾病的发生发展机制之间的关系以及相关药物的研发进展,为相关疾病的治疗策略提供新的思路。方法：通过汇总分析现有的研究IL-33/ST2信号通路与多种疾病的发病机制关联的文献,对IL-33/ST2信号通路与各项疾病之间的关系以及相关药物的研发进展进行讨论总结。结果与结论：IL-33作为免疫反应和细胞损伤的警报分子,其信号转导通路在过敏性疾病、慢性炎症性疾病、恶性肿瘤和心血管疾病等多种疾病的发病过程中发挥了十分关键的作用,这些研究成果为多种疾病的治疗策略提供了新的思路。多家国内外公司已经开始研发针对IL-33/ST2的靶向药物,绝大多数为单抗药物,且已经进入不同的临床试验阶段,具有重要的应用前景。     

IL-33/ST2轴在急性脑梗死大鼠炎性损伤中的作用

目的:观察IL-33/ST2信号通路对急性脑梗死大鼠炎性损伤的调控作用.方法:利用Western-blot检测急性脑梗死大鼠出血24h(MCAO-24h)组和假手术组(Sham)大鼠脑组织中IL-33和ST2蛋白表达水平.ELISA检测血清中Th2分泌的抗炎性细胞因子IL-5和IL-13水平.流式细胞术计数大鼠脾脏中T...     

维生素D对特应性皮炎小鼠的保护作用研究

目的 探讨维生素D对特应性皮炎小鼠的保护作用及其作用机制。方法 将清洁级的50只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、模型组、对照组和低、高剂量实验组,每组10只。除空白组外,其余组小鼠用2,4-二硝基氟苯(DNCB)进行建模,低、高剂量实验组小鼠建模后分别每天背部均匀涂抹5、10μg·kg^-1的1,25(OH)₂D₃,对照组每天均匀涂抹氢化可的松溶液(1 mg·cm^-2),每天2次,连续给药10 d,空白组和模型组小鼠每天涂抹等量的0.9%NaCl。给药结束后对皮肤病变状况进行评估,眼眶采血并收集小鼠背部皮肤组织备用。以苏木精-伊红染色观察皮肤表皮厚度,以甲苯胺蓝染色法检测肥大细胞数量,以酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素(IL)-13、IL-4、IL-17表达水平,以流式细胞术检测血清Th1、Th2细胞比例,以免疫组化法检测背部皮肤组织组胺1型受体(HIR)、蛋白酶激活受体2(PAR2)、瞬时受体电位香草素1(TRPV1)表达情况。结果 空白组、模型组、低剂...     

复方甘草酸苷调控SDF-1/CXCR-4轴治疗特应性皮炎小鼠的作用机制

摘要：目的:探讨复方甘草酸苷调控基质细胞衍生因子-1/趋化因子受体-4（SDF-1/CXCR-4）轴治疗特应性皮炎小鼠的作用机制。方法:120只Nc/Nga小鼠随机分成6组:正常对照组、模型组、复方甘草酸苷低(10 mg·kg-1)、中(20 mg·kg-1)、高(40 mg·kg-1)剂量组、地塞米松组(30 mg·kg-1),每组20只。模型组、地塞米松组、复方甘草酸苷各剂量组建立特应性皮炎模型。造模成功24 h后地塞米松组、复方甘草酸苷各剂量组分别灌胃给予相应药物,1次/d,连续给药14 d,正常对照组及模型组给予等体积生理盐水。试验结束后,游标卡尺测量小鼠右耳厚度,实时荧光逆转录法（RT-PCR）法及蛋白质免疫印迹（Western-blot）法测定右耳组织SDF-1、CXCR-4 mRNA及蛋白表达水平。结果:模型组右耳厚度、耳部皮炎组织SDF-1、CXCR-4 mRNA及蛋白表达水平显著高于正常对照组（P<0.05）;地塞米松组、复方甘草酸苷各剂量组右耳厚度、耳部皮炎组织SDF-1、CXCR-4 mRNA及蛋白表达水平显著低于模型组（P<0.05）,且随着复方甘草酸苷给药剂量的增加,各指标呈下降趋势（P<0.05）;复方甘草酸苷低、中剂量组各指标与地塞米松组差异有统计学意义（P<0.05）。模型组耳部皮肤结构缺失,细胞水肿明显,大量淋巴细胞浸润;地塞米松组及复方甘草酸苷高剂量组皮肤结构较为完整,细胞水肿及炎细胞浸润明显减少;复方甘草酸苷低、中剂量组皮肤结构仍有缺失,细胞水肿、淋巴细胞浸润较模型组减轻。结论:复方甘草酸苷能明显抑制小鼠耳部特应皮炎反应、抑制小鼠耳部炎症细胞浸润;其机制与复方甘草酸苷能抑制SDF-1、CXCR-4 mRNA及蛋白表达水平有关。     

IL －33／ST2信号通路在比索洛尔治疗舒张性心力衰竭中的作用

目的：观察IL－33／ST2信号通路在比索洛尔治疗舒张性心力衰竭（ DHF）中的作用。方法24只舒张性心力衰竭老鼠随机分为对照组（n＝12）及比索洛尔组（n＝12）,分别用蒸馏水及比索洛尔溶液治疗,疗程6周。观察2组的左室压力、左室充盈时间（ LVFT）、左室舒张压、等容收缩期左心室内压最大上升速率及心肌细胞ST2蛋白及血清肿瘤坏死因子（ TNF－α）的浓度。结果比索洛尔组小鼠左室收缩压、左心室平均压均显著低于对照组（P＜0.05）,但2组左室舒张压差异无统计学意义（ P＞0.05）。比索洛尔组等容收缩期左心室内压最大上升速率显著高于对照组（ P＜0.05）;等容舒张期左心室内压最大下降速率显著低于对照组（P＜0.05）,而左室充盈时间2组差异无统计学意义（P＞0.05）。比索洛尔组IL－33蛋白表达显著降低（ P＜0.05）,但ST2表达量和血清中TNF－α浓度2组差异均无统计学意义（ P＞0.05）。结论比索洛尔可有效降低舒张性心力衰竭小鼠的左室血压,改善左心室顺应性,其机制可能与心肌细胞内IL－33蛋白表达量显著减少有关。     

甘草酸载入普朗尼克F127/聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯混合纳米胶束的制备及对小鼠特应性皮炎的研究

目的:研究甘草酸(glycyrrhizic acid,GL)载入普朗尼克F127/聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)混合纳米胶束(MMs)后对小鼠特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)的治疗作用.方法:采用薄膜分散法制备GL-F127/TPGS-MMs,并对其粒径、包封率、形态等进行表征.用2...     

丹参凝胶对特应性皮炎小鼠的作用研究

目的研究丹参凝胶对特应性皮炎小鼠治疗作用并探讨其机制。方法用DNCB制备BALB/c小鼠特应性皮炎模型,观察丹参凝胶对皮炎小鼠的胸腺指数和脾指数、血清IgE、IgG2a及体外培养脾细胞中IL-4、IL-12、IFN-γ的含量差异。结果丹参凝胶能明显改善皮损情况,降低皮炎模型的胸腺指数和脾指数,并能降低血清IgE和脾细胞上清IL-4水平,显著升高血清IgG2a和脾细胞上清的IFN-γ水平(P<0.05)。结论丹参凝胶可以通过降低IgE、IL-4,以及提高IgG2a和IFN-γ的水平而发挥治疗特应性皮炎的作用。     

特应性皮炎患者Th1/Th2细胞因子谱的检测及意义

目的：检测特应性皮炎（atopic dermatitis,AD）患者Th1/Th2细胞因子谱的变化,探讨其在AD发病中的作用。方法：采用Flowcytomix流式检测技术对35例青年成人期特应性皮炎患者血清中多种Thl/Th2细胞因子进行芯片式集成测定,同时以30名正常人作为对照组。结果：与对照组比较,特应性皮炎患者组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）水平显著降低（P〈0.05）;Th1型细胞因子白介素-1α（IL-1α）、IL-2及干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平显著降低;Th2型细胞因子白介素-4（IL-4）、IL-5、IL-6、IL-10水平显著升高。结论：Th1/Th2细胞因子网络失衡,在AD的免疫发病机制中发挥重要作用。     

小鼠变应性接触性皮炎模型各时期IL-33水平探索

<正>IL-33通过与二型固有淋巴细胞(group 2 innate lymphoidcells,ILC2s)[1-2]上的ST2和IL-1受体辅助蛋白(IL-1RAc P)结合[3],参与多种过敏性疾病发病机制,是引发过敏性疾病的关键因素[4]。上皮细胞可经刺激产生IL-33,作用于ILC2s并使其产生Th2型细胞因子,促进Th2型过敏性疾病的发生,如过敏性皮炎[5]、哮喘[6]、过敏性鼻炎[7]等。利用小鼠变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)模型探索其在过敏性疾病不同时期表达水平,有助于了解变态反应的发病机制,同时为准确评价药物对IL-33的影响选     

Salidroside suppresses group 2 innate lymphoid cell-mediated allergic airway inflammation by targeting IL-33/ST2 axis

Salidroside, an active component extracted from Rhodiola rosea, has been reported to inhibit allergic asthma. However, its mechanism has not been fully elucidated. Group 2 innate lymphoid cells (ILC2s) accumulate in the lung and cooperate with other cells to drive type 2 inflammation stimulated by inhaled allergens. The study aims to explore the suppressive effect of salidroside on ILC2s and IL-33/IL-33R (ST2) axis in allergic airway inflammation. The ovalbumin (OVA)-sensitized/challenged mice were established. Airway eosinophil recruitment, increased total IgE in the serum and type 2 cytokines IL-4, IL-5, and IL-13 in the bronchoalveolar lavage fluids and lung tissues were identified in the OVA-induced mice model, all of which were inhibited by pretreatment with different doses of salidroside. Moreover, salidroside suppressed lung total ILC2 and ST2-expressing ILC2 accumulation, lung IL-33 and ST2 expressions in mice. In vitro, OVA could induce IL-33 expression in BEAS-2B cells, which was also effectively inhibited by salidroside. This study firstly reveals salidroside as a potential therapeutic drug for allergic asthma by inhibiting ILC2-mediated airway inflammation via targeting IL-33/ST2 axis.     

紫草素对特应性皮炎小鼠TSLP/OX40L通路及Th1/Th2平衡的影响#br# #br#

摘要：目的　探究紫草素对特应性皮炎（AD）小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）/OX40配体（OX40L）通路及辅助性T细胞（Th）1/Th2平衡的影响。方法　采用局部外涂2,4-二硝基氟苯（DNFB）法制备AD小鼠模型。采用随机数字表法将模型小鼠分为模型组,紫草素低（20 mg/kg）、中（30 mg/kg）、高（40 mg/kg）剂量组和阳性对照组（泼尼松龙,10 mg/kg）,每组15只;另取15只作为正常对照组。各给药组大鼠按10 mL/kg灌胃相应药物,模型组和正常对照组灌胃等体积溶剂,每日1次,连续15 d。分别于给药后第5、10和15天观察小鼠搔抓行为;于给药后第7、15天评价小鼠皮损状况;末次给药结束后,HE染色观察小鼠皮损组织病理学变化;流式细胞术检测小鼠外周血中Th1/Th2比例;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中TSLP、肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-4和干扰素（IFN）-γ水平;Western blot法检测小鼠皮损组织TSLP和OX40L蛋白表达水平。结果　与正常对照组相比,模型组小鼠搔抓行为增加,皮肤炎性损伤加重;皮损组织中表皮和真皮区域均有密集的炎性细胞浸润,表皮增厚;外周血Th2细胞、TSLP、TNF-α和IL-4水平以及皮损组织TSLP和OX40L蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）,外周血Th1细胞、Th1/Th2比例和IFN-γ水平显著下降（P＜0.05）。与模型组相比,紫草素低、中、高剂量组小鼠第5、10、15天的搔抓行为减少,第7、15天皮肤炎性损伤依次减轻（P＜0.05）;小鼠表皮和真皮区域炎性细胞浸润和表皮增厚依次减轻,外周血Th2细胞、TSLP、TNF-α和IL-4水平以及皮损组织TSLP和OX40L蛋白表达水平依次降低（P＜0.05）,Th1细胞、Th1/Th2比例和IFN-γ水平依次升高（P＜0.05）。结论　紫草素可能通过抑制TSLP/OX40L通路维持AD小鼠外周血中Th1/Th2平衡,改善皮肤炎性损伤。     

Expression of IL-31 gene transcripts in NC/Nga mice with atopic dermatitis

To search for the pruritogen of atopic dermatitis, a characteristic symptom in atopic dermatitis patients, we examined interleukin-31 (IL-31) mRNA expression in NC/Nga mice as an animal model of atopic dermatitis. The expression of IL-31 mRNA in the skin of NC/Nga mice with scratching behavior was significantly higher than that in NC/Nga mice without scratching behavior. Our findings suggest that IL-31 may participate in the cause of itch sensation and promote scratching behavior in NC/Nga mice with atopic dermatitis.     

ST2325抑制HER2/neu受体酪氨酸激酶信号转导途径及其对乳腺癌细胞周期的影响

目的　本文研究ST2 32 5对HER2 /neu受体的下游信号转导途径的抑制作用及其对乳腺癌BT4 74细胞周期的影响。方法　免疫印迹法检测蛋白表达量和磷酸化蛋白量的变化 ;流式细胞术检测细胞周期的分布。结果　ST2 32 5抑制BT4 74细胞HER 2 /neu受体的自身磷酸化 ,IC50 为 8 7μmol·L-1,对HER2 /neu的表达没有任何影响。ST2 32 5抑制BT4 74细胞磷酸化的MAPK和AKT。ST2 32 5处理BT4 74细胞 2 4h后 ,流式细胞仪分析可见细胞周期停止于G1期 ;Westernblot法检测呈现在在ST2 32 5处理后 ,细胞中p2 7上调 ,Rb的高磷酸化状态下降 ,CyclinD1蛋白水平下降。 结论　ST2 32 5能抑制乳癌BT4 74细胞HER2 /neu受体酪氨酸激酶信号转导途径 ,诱导乳腺癌细胞BT4 74停止于G1期 ,且与 p2 7上调、Rb的高磷酸化状态下降、CyclinD1蛋白水平下降有关。     

孟鲁司特对哮喘患者肺功能及炎症因子IL-25、IL-33的影响

目的 观察白三烯受体拮抗剂孟鲁司特对哮喘患者外周血白细胞介素25（IL-25）、白细胞介素33（IL-33）及肺功能的影响.方法 将78例哮喘患者分为2组：哮喘对照组和哮喘观察组,哮喘对照组给予常规吸入糖皮质激素及β受体激动剂加安慰剂治疗,哮喘观察组在哮喘对照组治疗的基础上给予孟鲁司特片口服,用药前均行肺功能检测及哮喘控制评分,并应用ELISA检测血清中IL-25、IL-33的水平,治疗3个月后再次测量肺功能、哮喘控制评分及血清中IL-25、IL-33的含量.结果 两组治疗后肺功能及ACT评分均较前好转,但哮喘观察组改善更明显（P＜0.05）,治疗后血清中IL-25、IL-33的水平均降低,但以哮喘观察组降低更明显（P＜0.05）.结论 应用白三烯受体拮抗剂可显著改善哮喘患者的炎症指标,并显著改善患者肺功能.     

清热止痒颗粒对特应性皮炎小鼠外周血Th1／Th2细胞的调控作用

目的探讨清热止痒颗粒对特应性皮炎小鼠外周血Th1／Th2细胞的调控作用。方法采用2,4-二硝基氟苯建立特应性皮炎小鼠模型,观察清热止痒颗粒对特应性皮炎小鼠的治疗效果,用流式细胞仪检测小鼠外周血Th1、Th2细胞浓度。结果特应性皮炎小鼠外周血Th1细胞水平、Th1/Th2比值低于正常小鼠,Th2细胞水平高于正常组小鼠（P〈0．01）。清热止痒颗粒治疗后,外周血Th1细胞水平、Th1／Th2比值上升,Th2细胞水平下降,且Th2细胞水平与正常小鼠比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论清热止痒颗粒能调节Th1、Th2细胞水平,纠Th1／Th2失衡,是其治疗特应性皮炎小鼠的可能机制之一。     

Targeting IL-33/ST2 signaling: regulation of immune function and analgesia

Introduction: IL-33 signals through ST2 receptor and promotes inflammation by activating downstream pathways culminating in the production of pro-inflammatory mediators such as IL-1β, TNF-α, and IL-6 in an NF-κB-dependent manner. In fact, compelling evidence has demonstrated the importance of IL-33/ST2 in both innate and adaptive immune responses in diseases presenting pain as an important clinical symptom.

Areas covered: IL-33 is a pleiotropic cytokine with varied immune functions. Dysregulation of this pathway has been described as a key step in varied immune responses. Further, IL-33 contributes to peripheral and spinal cord nociceptor neuron sensitization in innate and adaptive inflammatory immune responses as well as in neuropathic and cancer pain. In this sense, targeting IL-33/ST2 signaling is a promising therapeutic approach.

Expert opinion: The modulation of IL-33/ST2 signaling represents a possible approach in regulating immune functions. In addition to immune function, strategies targeting IL-33/ST2 signaling pathway display a favorable preclinical analgesic profile in both acute and chronic models of pain. Therefore, IL-33-targeting therapies represent a potential target for the development of novel analgesic drugs given that IL-33 activates, for instance, neutrophils, mast cells, macrophages, astrocytes, and microglia that are important cells in the induction and maintenance of chronic pain states.     

sST2/IL-33与Th17/Treg相关细胞因子在原发免疫性血小板减少症中的作用研究

目的 观察可溶性ST2（sST2）和白细胞介素（IL）-33在原发免疫性血小板减少症（ITP）中的表达水平变化及其对Th17/Treg细胞平衡的调节机制。方法 30例ITP患者作为ITP组,选取同期健康体检者20例作为对照组,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测 2组外周血血清中 IL-33、sST-2、IL-17和转化生长因子-β（TGF-β）的水平。结果 与对照组比较,ITP组血清sST2及IL-17水平均升高（P＜0.01）,TGF-β表达水平降低（P＜0.01）,而IL-33的表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）;在 ITP 组中 sST2 与 TGF-β 呈负相关（r=-0.471,P＜0.01）,与 IL-17 无相关性（r=0.189,P＞0.05）。结论 sST2表达水平增加和Th17/Treg细胞失衡可能是导致ITP发病的免疫机制之一。     

消风止痒颗粒通过降低白三烯水平对小鼠特应性皮炎急性瘙痒的治疗作用研究

目的 建立小鼠特应性皮炎急性瘙痒模型,研究消风止痒颗粒的止痒作用及其机制探讨。方法 采用诱导法制备特应性皮炎小鼠模型。小鼠每天先后用卡泊三醇和卵清蛋白（OVA）涂抹右耳致敏10 d,然后在小鼠右颊皮内注射OVA进行激发,致使小鼠出现急性瘙痒,记录小鼠激发后30~60 min的抓挠次数。实验分为5组：空白对照组、模型组、消风止痒颗粒低剂量组（7.2 g/kg）和高剂量组（14.4 g/kg）、阳性对照组（孟鲁司特5 mg/kg）。各组于激发前12 h及30 min各灌胃给药一次。通过Elisa检测小鼠血清中白三烯水平,通过流式细胞术检测血液中嗜碱性粒细胞比例及激活状态。结果 小鼠经致敏和激发后出现明显的抓挠行为,模型组小鼠激发后30~60 min内抓挠次数均值为56次,消风止痒颗粒低和高剂量组小鼠抓挠次数均值分别为42次和23次,较模型组均显著降低（P<0.05）。消风止痒颗粒低、高剂量组血清中白三烯水平和嗜碱性粒细胞比例与模型组比较,均明显降低（P<0.05）。结论 消风止痒颗粒对小鼠特应性皮炎急性瘙痒具有一定治疗作用,作用机制与其降低特应性皮炎小鼠血清中白三烯水平和降低嗜碱性粒细胞比例有关。     

Louki Zupa decoction attenuates the airway inflammation in acute asthma mice induced by ovalbumin through IL-33/ST2-NF-κB/GSK3β/mTOR signalling pathway

ContextAsthma is a common respiratory system disease. Louki Zupa decoction (LKZP), a traditional Chinese medicine, presents a promising efficacy against lung diseases.ObjectiveTo investigate the pathogenic mechanism of asthma and reveal the intervention mechanism of LKZP.Materials and methodsForty-eight female Balb/c mice were randomly divided into 6 groups: normal control group (NC), ovalbumin (OVA)/saline asthma model group, OVA/LL group, OVA/LM group, OVA/LH group and OVA/DEX group (n = 8 per group). The asthmatic mice were modelled through intraperitoneal injecting and neutralizing OVA. LKZP decoction was administrated by gavage at the challenge stage for seven consecutive days (2.1, 4.2 and 8.4 g/kg/day). We investigated the change in lung function, airway inflammation, mucus secretion and TH-1/TH-2-related cytokines. We further verify the activated status of the IL-33/ST2/NF-κB/GSK3β/mTOR signalling pathway.ResultsLKZP was proved to improve asthmatic symptoms, as evidenced by the down-regulated airway resistance by 36%, 58% and 53% (p < 0.01, p < 0.001 vs. OVA/saline group), up-regulated lung compliance by 102%, 114% and 111%, decreased airway inflammation and mucus secretion by 33%, 40% and 33% (p < 0.001 vs. OVA/saline group). Moreover, the content of cytokines in BALF related to airway allergy (such as IgE) and T helper 1/T helper 2 cells (like IL-2, IL-4, IL-5, IL-13, TNF-α and IFN-γ), were also markedly reduced by 13–65% on LKZP intervention groups compared with model group. Mechanistic research revealed that the IL-33/ST2-NF-κB/GSK3β/mTOR signalling pathway was activated in the OVA/saline group and LKZP significantly down-regulated this pathway.Discussion and conclusionLKZP improves lung function, airway inflammation, mucus secretion and correct immune imbalance by intervening with the IL-33/ST2-NF-κB/GSK3β/mTOR signalling pathway, presenting a promising therapeutic choice for asthma.