HPLC法同时测定田基黄颗粒中3种黄酮类成分的含量

摘 要 目的：建立测定田基黄颗粒中3种黄酮类成分含量的高效液相色谱方法。方法: 用ZORBAX Eclipse XDB C₁₈色谱柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(42∶58),检测波长为350 nm,流速1.0 ml·min^-1。结果: 异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素分别在4.572～114.300 μg·mL^-1、7.028～175.700 μg·mL^-1、2.195～54.880μg·mL^-1浓度范围内呈良好线性关系（r分别为0.999 8、0.999 8、0.999 9）;平均加样回收率分别为98.01％（RSD=1.24％,n=6)、98.14%（RSD=0.98％,n=6)、97.00%（RSD=1.09％,n=6)。结论:该方法专属性强、操作简便,可以用于田基黄颗粒的质量控制。     

HPLC法同时测定川楝子中芦丁、异槲皮苷和槲皮素的含量

目的:采用高效液相色谱法同时测定川楝子药材中芦丁、异槲皮苷和槲皮素的含量。方法:采用Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈(1∶10)为流动相A,0.4%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱;流速1.0 mL.min-1;检测波长360 nm;柱温25℃。结果:芦丁、异槲皮苷和槲皮素浓度在5.0～500.0μg.mL-1(r=0.9995)、0.5～50.0μg.mL-1(r=0.9999)、1.0～100.0μg.mL-1(r=0.9996)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率(n=9)分别为96.5%、97.4%、96.3%。所测22份川楝子药材中,芦丁、异槲皮苷和槲皮素的含量范围分别为19.82～120.21、1.43～38.12、4.30～20.48μg.g-1。结论:不同购买地川楝子药材中3个黄酮类成分含量差异较大;该方法适用于川楝子中3个黄酮的含量测定。     

四种不同炮制方法对山楂中7种成分变化的影响

摘要：目的:考察不同炮制方法对山楂中7种成分含量变化的影响。方法:应用HPLC多波长切换梯度洗脱技术,采用InertSustain DQ-C18（250 mm×4.6 mm, 5μm）色谱柱,以甲醇（A）-乙腈（B）-0.2%乙酸铵溶液（C）为流动相梯度洗脱,流速：1.0 ml·min-1,检测波长：210 nm（检测枸橼酸、齐墩果酸和熊果酸）、284 nm（检测5-羟甲基糠醛、绿原酸）、360 nm（检测金丝桃苷和异槲皮苷）,柱温：35℃,进样量：10μl。结果:5-羟甲基糠醛、金丝桃苷、异槲皮苷、绿原酸、枸橼酸、齐墩果酸、熊果酸分别在0.812～12.990μg·ml-1、2.326～37.220μg·ml-1、1.303～22.440μg·ml-1、1.332～21.310μg·ml-1、1.221～19.540μg·ml-1、0.778～12.450μg·ml-1和1.508～24.120μg·ml-1范围内线性关系良好（r≥0.999 2）,平均回收率分别为98.84%（RSD=1.02%）,100.16%（RSD=0.96%）,99.11%（RSD=0.68%）,99.86%（RSD=0.47%）,99.15%（RSD=0.67%）,99.22%（RSD=1.05%）,99.84%（RSD=0.71%）（n=6）。山楂中黄酮类金丝桃苷和异斛皮苷及有机酸成分的含量均为净山楂>炒山楂>焦山楂>山楂炭,5-羟甲基糠醛含量为山楂炭>焦山楂>炒山楂>净山楂,熊果酸和齐墩果酸的含量在炮制前后基本上无变化。结论:基于HPLC法测定山楂中7种成分在4种不同炮制方法下的含量,为进一步对山楂的不同炮制方法引起的质量变化和药效物质基础提供参考依据。     

中药川楝子炮制前后总三萜的含量变化研究

目的 采用紫外-可见分光光度法测定中药川楝子炮制前后总三萜的含量变化。方法 以川楝素为对照品,5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸显色后,在515 nm处测定其吸光度值。结果 川楝子生品中总三萜含量为9.223 mg·g^-1,3批炒制品中总三萜含量平均值为8.584mg·g^-1。结论 川楝子炮制品中总三萜含量较生品有所降低,此试验结果可为川楝子的炮制减毒机制提供理论参考。     

川楝子及其炮制品中川楝素含量测定研究

目的：比较不同炮制方法对川楝子中川楝素含量的影响。方法：以川楝素作为指标,对川楝子生品、炒品、醋炙品、盐炙品、酒炙品进行含量测定,采用高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil ODS2（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（30∶70）,流速为1 ml/min,检测波长为210 nm,柱温为35℃。结果：样品平均回收率为100.458%,RSD为1.069%（n=6）,4种不同炮制方法川楝子饮片中川楝素的含量分别为0.178%、0.127%、0.177%和0.112%。结论：建立的检测川楝子中川楝素的方法,简便、可靠、重复性好。     

HPLC法同时测定黄葵胶囊中5种成分的含量

目的:测定不同批次黄葵胶囊中金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮苷、槲皮素-3′-葡萄糖苷和槲皮素的含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Zorbax SB-C18柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸(梯度洗脱),检测波长为360nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,进样量为10μL。结果:3个批次黄葵胶囊中金丝桃苷的平均含量为1.64%,RSD=1.09%;异槲皮苷的平均含量为1.06%,RSD=1.13%;棉皮苷的平均含量为3.87%,RSD=1.15%;槲皮素-3′-葡萄糖苷的平均含量为1.50%,RSD=1.22%;槲皮素的平均含量为0.08%,RSD=1.45%。结论:黄葵胶囊3个批次中5种黄酮类成分的含量相似,其中棉皮苷、金丝桃苷、槲皮素-3′-葡萄糖苷、异槲皮苷含量较高。该方法简便、准确、重复性好,可为黄葵胶囊提供质量控制依据。     

RP-HPLC法测定鱼腥草生药中4种黄酮类化合物的含量

目的:建立 HPLC 测定鱼腥草生药中芦丁、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素含量的定量分析方法。方法:HPLC 外标法。采用色潜柱:Kromasil—C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,10 μm);流动相1:水-乙睛-磷酸(400:100:0.2),30 min 时手动切换为流动相2:乙腈-甲醇-水-磷酸(375:75:50:0.1);检测波长350 nm;流速1.0 mL·min~(-1);柱温:室温。结果:在上述色谱条件下,芦丁、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素获良好分离,进样量分别在0.055～0.550μg(r=0.9979)、0.248～2.480μg(r=0.9977)、0.52～5.200μg(r=0.9998)和0.062～0.623μg(r=0.9961)范围内与其峰面积线性关系良好,加样回收率分别为103.5%,104.0%,102.6%,103.7%,重复性试验 RSD 分别为3.9%,0.8%,1.0%,1.6%。结论:该方法分离度好,简便快速,为鱼腥草生药及其制剂的质量控制提供可借鉴的分析办法。     

HPLC测定新疆药桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷和槲皮素

目的 建立新疆药桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷和槲皮素的高效液相色谱测定方法。方法 采用BDS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温：25 ℃,流动相：乙腈(A)-0.01 mol·L^-1醋酸铵溶液(100 mL中含0.2 mL 三乙胺,用冰醋酸调pH至4.8)(B),梯度洗脱[ 0 min,A-B(8∶92);30 min,A-B(30∶70)],流速：1.0 mL·min^-1,检测波长350 nm。结果 绿原酸在1.052 0 μg～5.067 9 μg(r=0.999 3)、芦丁在1.029 4 μg～5.031 7 μg (r=0.999 8)、异槲皮苷在1.076 8～5.065 5 μg(r=0.999 0)、槲皮素在1.075 0 μg～5.055 0 μg (r=0.999 1)内线性关系良好。绿原酸、芦丁、异槲皮苷和槲皮素的平均回收率分别为102.2%(RSD=1.3%)、104.6%(RSD=0.9%)、104.0%(RSD=1.9%)、104.7%(RSD=1.2%)。检出限(S/N=3)分别为0.160,0.081,0.033,0.640 μg·mL^-1。结论 此法操作简便、快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,适于同时测定新疆药桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷和槲皮素。     

黄葵胶囊中3种成分与人血浆蛋白结合率的测定

目的 研究黄葵胶囊中芦丁、金丝桃苷和异槲皮苷与人血浆蛋白的结合率.方法 采用平衡透析法测定芦丁、金丝桃苷和异槲皮苷与人血浆蛋白的结合率,用HPLC测定透析内、外液中3种成分的质量浓度,计算血浆蛋白结合率.结果 芦丁、金丝桃和异槲皮苷的线性关系、精密度、提取回收率和稳定性均符合方法学要求;黄葵胶囊低、中、高(1、2、4 mg·mL-1)浓度中,芦丁与人血浆蛋白的结合率分别为58.58％±1.40％、61.83％±2.19％、57.17％±5.48％,金丝桃苷的为79.90％±0.22％、76.96％±0.54％、71.61％±1.76％,异槲皮苷的为80.69％±0.23％、78.10％±0.60％、72.57％±1.86％.结论 黄葵胶囊中3种成分与人血浆具有中等强度的蛋白结合率.     

HPLC法同时测定金钮扣中芦丁和异槲皮苷的含量

目的建立以高效液相色谱法同时测定金钮扣中芦丁和异槲皮苷含量的方法。方法色谱柱为Agela Promosil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-质量分数为0.2%的磷酸溶液(体积比为15:85),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为360 nm,柱温为35℃。结果芦丁和异槲皮苷的质量浓度分别在0.032～1.920 mg·L(-1),检测波长为360 nm,柱温为35℃。结果芦丁和异槲皮苷的质量浓度分别在0.032～1.920 mg·L^(-1)(r=0.999 5)和0.800～48.000 mg·L(-1)(r=0.999 5)和0.800～48.000 mg·L^(-1)(r=0.999 5)内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.2%和99.7%,RSD分别为1.0%和1.5%。结论本方法可作为金钮扣的质量控制方法之一。     

HPLC法测定黄蜀葵花中7种黄酮类成分的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定黄蜀葵花药材中7种黄酮类成分的含量.方法:采用Zorbax SB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.5％磷酸溶液(梯度洗脱)为流动相,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为360 nm,柱温为35℃,进样量为10μl.结果:芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮...     

HPLC法同时测定三叶青块根中6个黄酮类成分的含量

目的:建立同时测定三叶青块根中芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、槲皮素和山柰酚含量的方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法。色谱柱为Alliance SilGreen C18,流动相为0.2%磷酸水溶液-乙腈溶液(梯度洗脱),流速为1.0mL/min,柱温为35℃,检测波长为360 nm,进样量为15μL。结果:芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、槲皮素和山柰酚的检测质量浓度线性范围分别为21.77～217.77、12.37～123.75、13.23～132.31、4.63～46.30、5.75～57.50、3.36～33.66μg/mL(r均=0.999 9);检测限分别为0.217 8、0.123 8、0.066 2、0.046 3、0.191 7、0.112 3μg/mL;定量限分别为0.435 6、0.247 5、0.165 4、0.154 3、0.575 0、0.421 2μg/mL;精密度(n=6)、稳定性(24 h,n=7)、重复性(n=6)试验的RSD均≤3.20%;平均加样回收率分别为96.23%、86.88%、97.51%、97.67%、97.50%、87.46%,RSD分别为1.85%、1.90%、1.84%、1.87%、1.25%、2.01%(n=9)。结论:该方法快速、简便,可用于同时测定三叶青块根中芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、槲皮素和山柰酚的含量。     

HPLC-MS/MS法测定川楝子中川楝素的研究

目的建立HPLC-MS/MS法测定川楝子中川楝素的方法。方法采用XTerra C18色谱柱(150mm×2.1mm,5μm),以乙腈-0.2mL·L-1甲酸溶液(31∶69)为流动相,采用多反应监测(MRM)模式进行质谱测定。结果川楝素检出限(LOD)为0.17ng,定量限(LOQ)为0.51ng;川楝素质量浓度在0.05~5.00μg·mL-1范围内,与峰面积线性关系良好,r=0.999 9;精密度良好,平均回收率为98.0%,RSD为1.5%。结论该方法具有较好的专属性和灵敏度,能够简便、快速地测定川楝子药材中川楝素的含量。     

一测多评法测定柿叶提取物中6种黄酮类成分

目的 建立一测多评（quantitative analysis of multi-components by single-marker,QAMS）法同时测定柿叶提取物中6种黄酮类成分的含量。方法 采用Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长360 nm,柱温30℃,进样量10 μL。应用QAMS法,以槲皮素为内参物,测定5种黄酮类成分之间的相对校正因子,分别采用外标法和QAMS法测定柿叶提取物中的6种指标性成分的含量,并对2种方法计算结果进行对比分析,以验证QAMS法的实用性与稳定性。结果 建立了用于测定柿叶提取物中6种黄酮类成分的QAMS法,各成分相对校正因子的稳定性和重复性良好,QAMS法和外标法的测定值差异较小。结论 本研究建立的一测多评法测定柿叶提取物中6种黄酮类成分,方便快捷,结果准确可靠,可用于柿叶提取物多指标成分的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定田基黄注射液中槲皮苷、异槲皮苷的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定田基黄注射液中槲皮苷、异槲皮苷含量的方法。方法:色谱柱为MerckLichrospher RP18,流动相为乙腈-(pH=3.0)磷酸盐缓冲液(18∶82),流速为1ml/min,柱温为25℃,检测波长为350nm。结果:槲皮苷、异槲皮苷进样量分别在0.278μg～4.440μg(r=0.9991)、0.315μg～2.520μg(r=0.9991)范围内与峰面积积分值线性关系良好;平均加样回收率分别为98.60%(RSD=2.23%)、97.79%(RSD=1.74%)。结论:本方法准确可靠、应用性强,可用于本品的质量控制。     

荆芥炮制前后指纹图谱及主要成分含量变化研究

摘要：目的:建立荆芥及其炮制品的HPLC指纹图谱,并对其所含的6个有效成分进行定量分析。方法:采用HPLC,Agilent ZORBAX-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相乙腈-0.3%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长为235 nm（检测迷迭香酸、咖啡酸、薄荷酮、橙皮苷及槲皮苷）; 252 nm（检测胡薄荷酮和薄荷酮）,流速:0.9 ml·min-1,建立荆芥和荆芥炭的HPLC指纹图谱,通过相似度评价、聚类分析对荆芥炮制前后指纹图谱进行分析,并对胡薄荷酮、迷迭香酸、咖啡酸、薄荷酮、橙皮苷及槲皮苷进行含量测定。结果:建立了荆芥及其炮制品的指纹图谱,以橙皮苷为参照峰,荆芥标定了14个共有峰,荆芥炭标定了12个共有峰,与各自对照指纹图谱的相似度均>0.945。胡薄荷酮、迷迭香酸、咖啡酸、薄荷酮、橙皮苷及槲皮苷在炮制前的质量分数分别为0.041 9%,0.022 7%,0.015 1%,0.018 7%,1.133%,1.052%;经炮制后,上述6种成分中的胡薄荷酮、迷迭香酸和薄荷酮在炮制后消失,咖啡酸、橙皮苷及槲皮苷在荆芥炭中的含量分别为0.054 3%,1.094%,1.041%。结论:荆芥的HPLC指纹图谱在炮制前后发生了明显变化,6个有效成分含量在炮制前后均发生了一定程度的变化,样品中橙皮苷及槲皮苷含量不显著,样品中胡薄荷酮、迷迭香酸、薄荷酮含量排序为荆芥>荆芥炭,样品中咖啡酸含量排序则为荆芥炭>荆芥。     

桑叶中绿原酸和主要黄酮苷含量的RP—HPLC测定

目的:考察不同品种、不同采摘时间和不同种植基地桑叶中绿原酸、芦丁和异槲皮苷的含量差异。方法:采用反相高效液相色谱法,以 Zorbax SB C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为分离柱,90%乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱[0 min,A-B(12:88);10 min,A-B(16:84);20 min,A-B(20:80);30 min,A-B(25:75)],流速1.0 mL·min~(-1),检测波长358 nm。结果:不同种植基地的桑叶中绿原酸、芦丁和异槲皮苷的含最有一定的差异;不同品种和采摘时间的桑叶中上述三成分含量差异较大。结论:桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷的含量与种植基地、采摘季节、品种等有关,其中尤以季节和品种影响较大。     

高效液相色谱法同时测定醉鱼草中五种黄酮成分

目的：建立同时测定中药材醉鱼草中黄酮成分蒙花苷、芦丁、木犀草素、槲皮素和芹菜素含量的方法,为醉鱼草的质量控制提供理论依据。方法：采用高效液相色谱法对醉鱼草中五种黄酮类有效成分进行同时测定。色谱柱型号：Hypersil ODS色谱柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）,柱温：25℃;流速：1.0 mL·mL^-1;流动相：甲醇-0.2%磷酸水溶液;检测波长：256 nm,梯度洗脱。结果：中药材醉鱼草中的黄酮成分蒙花苷、芦丁、木犀草素、槲皮素和芹菜素在质量浓度为1.63~75 μg·mL^-1（r=0.999 5）,0.42~26 μg·mL^-1（r=0.999 7）,0.77~152 μg·mL^-1 （r=0.999 4）,1.02~108 μg·mL^-1（r=0.999 6）,0.91~99 μg·mL^-1（r=0.999 2）范围内与峰面积线性相关,醉鱼草样品加标回收率均值分别为99.7%,97.9%,99.7%,99.5%,99.1%,RSD分别为1.3%,1.7%,0.7%,1.1%,1.0%。结论：该测定方法适用性强、快捷,重复性好,适用于中药材醉鱼草的质量控制。     

不同炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的影响

目的比较醋煮、醋烘、醋炙、酒炙等炮制方法对延胡索有效成分含量的影响,为优化延胡索炮制方法提供参考。方法采用醋煮、醋烘、醋炙、酒炙等炮制方法对延胡索生品进行炮制,通过高效液相色谱法测定延胡索乙素含量。结果延胡索乙素含量在0.10~1.35μg范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为84.05%,RSD为1.94%(n=6);醋烘、醋炙、酒炙延胡索炮制品含量有所上升,差异有统计学意义(t=3.265~6.342,P<0.05)。结论高效液相色谱法检测延胡索乙素具有线性关系良好、精密度稳定、可重复检测的优点,醋烘、醋炙、酒炙等炮制方法能增加延胡索有效成分含量。