韧粘素反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的探讨韧粘素 (TN)反义寡核苷酸 (ODN)对培养大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的抑制作用。方法采用细胞计数及快速竞争性逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)等方法 ,观察不同剂量 ( 5、10、2 0 μg/ml)TN反义ODN和正义ODN对体外培养大鼠VSMC的增殖以及TNmRNA表达水平的影响。　结果TN反义ODN可有效抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖 ,作用呈剂量依赖性 (反义组 5、10、2 0 μg/ml剂量细胞计数分别为 10 5/ml× ( 4 .99± 0 .2 1)、( 4 .0 8± 0 .14 )、( 2 .85± 0 .39) ,对照组为 10 5/ml× ( 5 .95± 0 .41) ,(P <0 .0 5 ) ;TN反义ODN亦可下调TNmRNA表达水平 (反义组 0 .32± 0 .0 5 ,对照组为 0 .5 2± 0 .0 8;P <0 .0 1) ;而TN正义ODN则无上述作用。　结论TN反义ODN可能通过下调TNmRNA表达水平而抑制血管平滑肌细胞的增殖。     

曲张大隐静脉平滑肌细胞形态学改变

目的探讨大隐静脉曲张与平滑肌细胞(SMC)形态学改变之间的关系。方法临床术中收集正常及曲张大隐静脉标本,制作石蜡切片进行HE染色观察SMC一般组织学变化;制作超薄切片置透射电镜下观察SMC超微结构变化。结果光镜下曲张大隐静脉内膜增厚,SMC数量增多;中膜增厚,SMC形态异常,排列紊乱;电镜下SMC形态不规则,胞浆中粗面内质网、核糖体和线粒体丰富,肌丝少。结论大隐静脉曲张的发生和发展与SMC细胞形态学改变密不可分。     

慢性静脉功能不全血管重塑与基质金属蛋白酶关系

下肢慢性静脉功能不全是血管外科的常见疾病,发病率高,其病因及发病机制尚未完全阐明。近年来,血管重塑学说在慢性静脉功能不全中的作用已引起重视。基质金属蛋白酶是细胞外基质代谢的主要蛋白酶,参与细胞外基质的降解与重建,在血管重塑中起十分重要的作用。细胞外基质中各种成分的分布和含量发生了不同程度的改变,且对慢性静脉功能不全的形成具有重要的意义。文章对慢性静脉功能不全血管重塑和基质金属蛋白酶的关系进行综述。     

静脉管壁重塑在下肢深静脉血栓后综合征发病机制中的研究进展

深静脉血栓后综合征(post-thrombotic syndrome, PTS)是深静脉血栓(deep vein thrombosis, DVT)形成最棘手的长期并发症。许多学者认为,静脉管壁重塑在PTS中扮演了重要角色。本文从DVT形成后的细胞成分、细胞外基质成分、分子成分3个方面对目前的PTS静脉管壁重塑机制进行综述。     

正常大隐静脉管壁近远端组织学差异观察

①目的　观察正常大隐静脉近远端管壁组织学结构特征,分析其原因及意义。②方法　应用普通光学显微镜、Verhoff铁苏木精染色、透射电子显微镜对正常静脉的近远端管壁组织结构进行了观察。③结果　近端内膜厚度(51.66±26.48)nm,含平滑肌细胞少;远端内膜皱褶增多、加深加大,厚度(180.00±33.32)nm,含平滑肌细胞多;近端内皮细胞扁平、连接紧密,远端内皮细胞则部分变圆,分布稀疏;平滑肌细胞近端以纵行分布为主而远端以环行为主;近端多见瓣膜而远端少见;透射电镜下远、近端内皮细胞形态有明显差异。④结论　正常静脉近远端管壁组织结构存在着明显的差异。     

大鼠移植静脉重塑中Wnt5a表达的变化

 目的研究Wnt5a在自体移植静脉重塑过程中的表达变化。方法建立大鼠颈静脉-腹主动脉移植模型,分别于术后7、14、28d取材移植血管,采用免疫组化方法检测Wnt5a蛋白在移植血管中的表达,Real-timePCR定量检测Wnt5amRNA的表达;以对侧颈静脉作为对照。结果免疫组化结果显示：正常静脉、术后7、14、28d移植静脉Wnt5a阳性细胞比例分别为（4.67±0.21）%、（20.34±0.26）%、（35.25±0.20）%和（57.24±0.52）%,正常静脉与移植静脉之间差异有统计学意义（P<0.01）。Real-timePCR结果显示：术后7、14、28d大鼠Wnt5amRNA表达增加,分别为对照组的3.56、8.44和16.87倍。结论自体静脉移植后,Wnt5a在新生内膜及中膜中高表达,并可能与细胞增殖有关。     

兔自体移植静脉狭窄与细胞外基质的关系

目的观察胶原和弹性纤维的积累及其与自体移植静脉（atuologous vein grafts,AVG)狭窄的关系,方法建立兔自体颈外静脉移植模型,用计算机图像分析,测量胶原和弹性纤维在新生内膜的面积以及Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白表达灰度值,结果,移植后2－12wk胶原和弹性纤维面积逐渐增加,Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白表达也逐渐增强。结论静脉移植后胶原和弹性纤维逐渐积累,其含量与管腔减少正相关,胶原在管腔中的作用大于弹性纤维,胶原蛋白中Ⅰ型胶原作用大于Ⅲ型胶原。     

韧粘素反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的探讨韧粘素(TN)反义寡核苷酸(ODN)对培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用. 方法采用细胞计数及快速竞争性逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,观察不同剂量(5、10、20μg/ml)TN反义ODN和正义ODN对体外培养大鼠VSMC的增殖以及TNmRNA表达水平的影响. 结果TN反义ODN可有效抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖,作用呈剂量依赖性(反义组5、10、20μg/ml剂量细胞计数分别为105/ml×(4.99± 0.21)、(4.08±0.14)、(2.85±0.39),对照组为105/ml×(5.95±0.41),(P＜0.05);TN反义ODN亦可下调TN mRNA表达水平(反义组0.32±0.05,对照组为0.52±0.08;P＜0.01);而TN正义ODN则无上述作用. 结论TN反义ODN可能通过下调TNmRNA表达水平而抑制血管平滑肌细胞的增殖.     

大鼠自体移植静脉血管平滑肌细胞增殖与血浆内皮素变化关系的动态研究

目的 :研究自体静脉移植术后血浆内皮素 (ET)变化与移植静脉血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的关系。方法 :建立大鼠自体颈静脉移植于肾下腹主动脉动物模型 70只 ,于术后 3d～ 8周 ,采用放射免疫法检测血浆ET的变化 ,免疫组化法观察增殖细胞核抗原 (PCNA)在移植静脉VSMC中的表达和分布。结果 :术后 1～ 2周 ,血浆ET比术前明显增高 (P <0 .0 1) ;血浆ET与移植静脉VSMC增殖具有相关性 (r=0 .783,P <0 .0 1)。结论 :静脉移植术后测定血浆ET有助于反映移植静脉VSMC的增殖水平 ,为内膜增生的防治提供线索。     

与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞外基质构筑及含量的变化

目的：探讨联合培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）对内皮细胞（ＥＣ）粘附能力的影响。方法：应用免疫荧光细胞化学、激光共聚焦扫描显微镜和图像分析等技术,以静态条件下单独培养的ＥＣ为对照组,观察与ＶＳＭＣ联合培养的ＥＣ细胞外基质Ｆｎ,Ｌｎ和ＣｏｌⅣ的构筑方式及其含量的变化。结果：与单独培养的ＥＣ相比,联合培养的ＥＣ细胞外基质各组分的构筑有明显的变化,且含量也发生变化,Ｆｎ,Ｌｎ增多,ＣｏｌⅣ减少。结论：与ＶＳＭＣ联合培养的ＥＣ的粘附能力可能增强,为改进血管ＥＣ种植的组织工程技术提供了部分实验依据。     

血管内皮细胞与肺纤维化形成的关系

肺纤维化 (ｐｕｌｍｏｎａｒｙｆｉｂｒｏｓｉｓ,ＰＦ)是一种肺间质增生性疾病 ,病理检查可见全肺弥漫性胶原纤维增生 ,肺泡隔增厚 ,支气管、毛细血管周围的弹力纤维和胶原纤维增生更为明显 ,同时伴有大量炎性细胞侵润 ;肺泡内也有大量炎性细胞及渗出液 ,其中含有大量纤维素 ,肺泡实变及塌陷不均匀分布 ,部分肺泡管扩张[1] 。血管内皮细胞 (ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｃｙｔｅ ,Ｅｃ)是一层血管内皮的扁平细胞 ,由于气体交换的需要肺组织中存在大量微小血管 ,单层Ｅｃ构成的毛细血管是肺泡壁的主要组成部分 ,因此最易受到体内外致病因子的损害。…     

血管内皮细胞对血管平滑肌细胞影响的研究进展

血管内皮细胞(VECs)和血管平滑肌细胞(VSMCs)是血管壁的主要组成细胞。VECs能够保护血管内环境、维持血压以及调节血管运动,是维持血管生理功能平衡的关键。VSMCs可通过舒张和收缩改变血管直径使血管保持适当血压。VECs与VSMCs相邻,它能最先感知血液中的刺激影响VSMCs,进而影响血管的生理状态。在病理条件下,VECs发生损伤和功能失调,导致VSMCs表型转换、增殖及凋亡,进而引发多种心血管疾病。目前,VECs对VSMCs的影响受到越来越多学者的关注,而VECs功能失调对VSMCs的影响与动脉粥样硬化形成之间的关系是今后研究的重点。     

兔血管内皮细胞与平滑肌细胞体外增殖的相互影响

目的　研究在体外培养条件下血管内皮细胞条件培养基（ECCM）、内皮素-1（ET-1）、内皮素转化酶抑制剂phosphoramidon对血管平滑肌细胞（SMC）增殖的影响,同时研究了血管平滑肌细胞条件培养基（SMCCM）对血管内皮细胞（EC）增殖方面的影响. 方法　EC和SMC均来源于兔主动脉,在获得了EC和SMC的条件培养基（CM）后,分别用两者以及ET-1进行实验,细胞的增殖率通过3H掺入法进行测定. 结果　ECCM和ET-1可明显促进SMC的增殖,并呈现剂量依赖性. 其最大效应分别为(190±11)% (100% ECCM)和(166±9)% (100 ng*L-1 ET-1). 而phosphoramidon存在条件下的ECCM使其分裂作用降低了(33±2)%. SMCCM抑制EC的增殖,这种抑制作用并非剂量依赖性,其最大的抑制效应为基本水平的(78±3)%. 结论　ECCM和ET-1可促进SMC的增殖作用. phosphoramidon可明显地抑制ECCM对SMC的增殖作用.同时SMCCM对EC的增殖起抑制作用.     

组织工程静脉血管种子细胞的培养

目的获取可应用于静脉血管组织工程的种子细胞内皮细胞。方法选取北京地区雄性杂种犬,取其双侧颈外静脉,采用翻转后酶消法,获取原代内皮细胞,对其进行原代培养和传代培养,冻存、复苏和鉴定,并利用光学显微镜进行观察。结果获取犬的颈外静脉后,实验采取了翻转后酶消法,所获得的内皮细胞纯度和数量得到了提高;经过鉴定确实为内皮细胞来源;活性好,增殖快,在较短的时间内能够达到后期实验所需数量。结论经体外培养的犬的颈外静脉内皮细胞可以作为组织工程血管的种子细胞。     

曲张大隐静脉平滑肌细胞、弹性纤维和胶原纤维的形态学变化

目的观察曲张大隐静脉的平滑肌细胞、弹性纤维以及胶原纤维组织学的变化,探讨静脉曲张与平滑肌细胞、弹性纤维及胶原纤维之间的关系.方法曲张大隐静脉7例,正常大隐静脉4例,进行HE染色和Weigert染色后在光学显微镜下观察.结果可见曲张大隐静脉内腔增大,管壁增厚,平滑肌细胞形态异常,排列不规则,弹性纤维断裂呈不连续分布,数量明显减少,胶原纤维增生,排列紊乱.结论平滑肌细胞结构的破坏及结缔组织成分的异常与静脉曲张的发生密不可分.     

TGF-β、血管平滑肌细胞与血管成形术后再狭窄

转化生长因子β(TGF-β)是一组多功能的多肽类生长因子,几乎体内的每个细胞都产生TGF-β并存在受体.研究证实TGF-β家族的一些成员参与多种疾病的发生.TGF-β对细胞的增殖与分化、细胞外基质的合成、血管的生成、细胞凋亡均起重要的调节作用.冠状动脉介入治疗后再狭窄的发生中,血管平滑肌细胞(VSMC)及细胞外基质(ECM)的功能异常是最重要的因素之一,TGF-β在其中的作用渐受关注.血管成形术后TGF-β影响血管平滑肌细胞功能及细胞外基质的代谢,可能参与再狭窄的发生.     

高脂血症对血管内皮细胞影响的形态学变化

高脂血症临床很多见 ,且与动脉粥样硬化关系密切。近年来 ,高脂血症时血管内皮细胞及平滑肌细胞在动脉粥样硬化病变形成中的作用研究较多。本文主要从形态学角度 ,观察高脂血症时血管内皮细胞及平滑肌细胞的形态学改变 ,探讨动脉粥样硬化的早期发生基础。1　材料与方法1.1　动物及分组　健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ ,由山东医科大学动物实验中心提供 ,随机分为高脂组和对照组。1.2　动物模型建立　高脂组 :每日服用胆固醇 3ｇ/10 0ｇ基础食料 ,连续喂养 12周 ;对照组 :以普通大鼠饲料喂养 12周。1.3　取材　喂养结束后 …     

恒河猴静脉内皮细胞衬里ePTFE人工血管的实验研究

按原位获取法恒河猴表浅静脉内皮细胞，在体外培养扩增，制备成内皮细胞悬液。用纤维蛋白胶和纤维连接蛋白联合预衬各ｅＰＴＦＥ人工血管腔，将内皮细胞灌入此人工血管，结果内皮细胞的贴壁率明显提高；内皮细胞高密度种植人工血管后２ｈ，扫描电下见人工血管腔表面已形成完整的内皮细胞单层；孵育９ｄ后，透射电镜见内皮细胞骨架已分化成熟，表明此时人工血管腔内皮细胞具有良好的抗切应能力。     

自体移植静脉平滑肌细胞凋亡与增殖关系的实验研究

目的 :探讨移植静脉狭窄的机制。方法 :建立 10 0只 Wistar大鼠自体颈静脉移植于肾下腹主动脉模型。应用 DNA原位缺口末端标记及免疫组织化学 SP法 ,检测术后 1～ 8周移植静脉平滑肌细胞的凋亡和增殖细胞核抗原的表达。结果 :术后 1～ 8周移植静脉平滑肌细胞凋亡及增殖均高于对照静脉 (P <0 .0 1) ;术后 1～ 2周 ,凋亡低于增殖 ,术后 4～ 8周凋亡高于增殖 ,凋亡与增殖具有相关性 (r=0 .813,P <0 .0 5 )。结论 :移植静脉平滑肌细胞凋亡和增殖失衡与移植静脉的狭窄有关 ,防治移植静脉狭窄应调节增殖与凋亡的平衡。