前列腺素E2在肾脏球旁器调节肾素分泌中的作用

目的 观察前列腺素E2（PGE2）对肾脏球旁器颗粒细胞（JGG）肾素分泌的调节作用。 方法 将小鼠肾脏致密斑细胞株（MMDD1）种植在特殊滤器上,滤器上下（细胞顶侧和基底侧）分别用不同培养基培养细胞,改变细胞顶侧培养基中钠离子、氯离子和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）浓度,分别测定不同时间点滤器上、下PGE2浓度。腹腔注射卡托普利（30 mg/kg）前后,放射免疫法测定野生型和环氧化酶基因敲除（COX-2-/-）小鼠血浆肾素活性(PRA)变化;原代分离COX-2-/-小鼠JGG,测定细胞上清肾素活性及其对PGE2刺激的反应。实时定量PCR测定低肾素（JGG细胞特异性Gsα基因缺失）小鼠肾脏皮质COX-2 mRNA表达。免疫组化法检测肾皮质COX-2蛋白表达。代谢笼中留取24 h尿,ELISA方法测定PGE2水平。 结果 (1)低氯刺激能使致密斑细胞分泌PGE2,不论基底侧还是细胞顶端PGE2浓度均显著增加（均P < 0.05）;但AngⅡ对致密斑分泌PGE2没有显著影响;(2)COX-2-/-小鼠基础PRA[（378.3±96.4）比（1115.0±210.0） ng AngI&#8226;ml-1&#8226;h-1,P ＝ 0.0051,n＝10]和JGG细胞肾素分泌[（153.7±14.7）比（672.4±129.0） ng AngI&#8226;ml-1&#8226;h-1,P ＝ 0.0162,n＝3]显著低于相同遗传背景的野生型小鼠;卡托普利能刺激COX-2-/-小鼠PRA增加32.8倍;PGE2能部分恢复COX-2-/-小鼠原代JGG细胞分泌肾素功能;(3)PGE2受体EP4耦联的Gsα基因敲除的低肾素小鼠,肾脏皮质COX-2 mRNA表达增加（8.07±1.08)倍（n=6,P = 0.0022),免疫组化显示致密斑和远端小管COX-2蛋白表达增加,24 h尿PGE2分泌增加[（1235±152） pg/24 h 比（385±140） pg/24 h,P = 0.0065]。 结论 致密斑PGE2直接受低氯调节,COX-2-/-小鼠基础肾素减少;下游的AngⅡ能直接作用于JGG细胞而不是致密斑负反馈调节肾素分泌。阻断JGG细胞自身的肾素产生（Gsα基因敲除）后,能负反馈上调致密斑的COX-2表达,故COX-2-PGE2-肾素在球旁器存在近距离精确调控机制。     

β2肾上腺素能受体缺乏小鼠缺血性脑损伤被削弱

背景一些β肾上腺素能受体（β-adrenergic receptor，βAR）拮抗剂具有针对脑缺血的神经保护作用。然而，研究发现β2肾上腺素能受体激动剂克仑特罗可增强神经生长因子表达、起到神经保护的作用。我们使用β2肾上腺素能受体敲除小鼠和一种选择性的β2受体拮抗剂，来测试β2肾上腺素能受体缺失对短暂性局灶性脑缺血预后的影响。方法以线栓法大脑中动脉阻闭（middle cerebral artery occlusion，MCAO）60分钟后再灌注24小时。再灌注24小时进行神经系统评分，梗死范围用甲酚紫或2，3，5－氯化三苯基四氮唑染色进行测定。我们使用敲除β2肾上腺素能受体的小鼠和野生型同类系的小鼠进行研究。野生型的小鼠分为两组，分别在行MCAO前30分钟给予腹腔注射普萘洛尔118551（0．2mg／kg）或0．9％生理盐水（每组10只）。以免疫组化和Westernblot检测缺血后Hsp72表达的变化。结果和野生型同窝出生的小鼠相比，β2肾上腺素能受体敲除小鼠在大脑中动脉阻闭60分钟、再灌注24小时后，大脑梗死体积减少了22．3％（39．7±10．7mm2vs51．0±11．4mm3，n=10，P=0．034）。同时，用选择性β2肾上腺素能受体拮抗剂普萘洛尔118551预处理的小鼠和注射生理盐水的小鼠相比，其大脑的梗死体积也显著降低（32．8±11．9mm3vs43．8±10．3mm3，n=10，P=0．041）。β2肾上腺素能受体敲除的小鼠和接受普萘洛尔118551预处理的小鼠神经系统评分显著增加。β2肾上腺素能受体敲除小鼠脑缺血后，Hsp72整体水平和免疫阳性细胞的数量都明显增加。结论在β2肾上腺素能受体敲除小鼠和用选择性β2肾上腺素能受体拮抗剂预处理的小鼠中，大脑中动脉阻闭后脑损伤减轻了，神经功能得到改善。这和脑缺血时陡肾上腺素能受体激活会使促存活信号转化为促死亡信号的说法是一致的。神经系统的保护作用和Hsp72的水平升高有关，而Hsp72是一种已知的抗死亡蛋白。β2肾上腺素能受体信号通路在脑缺血中的作用是复杂的，需要进一步研究。     

血管紧张素1a型受体基因敲除小鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统的变化及其对糖尿病肾小球硬化的影响

目的 探讨血管紧张素1a型受体（AT1aR）基因敲除小鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统（RAS）的组分改变对糖尿病肾病（DN）肾小球硬化的影响及其可能机制。 方法 AT1aR基因敲除小鼠和野生型小鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ，300 mg/kg）诱导糖尿病模型12周后，取肾脏组织作冰冻组织切片，用激光捕获微切割技术分离肾小球，提取RNA。用实时定量PCR的方法检测肾小球内AT1aR、血管紧张素1b型受体（AT1bR）、血管紧张素2型受体（AT2R）、血管紧张素原、血管紧张素转化酶（ACE）、肾素、醛固酮合成酶（CYP11B2）的mRNA表达。PAS染色观察肾脏病理变化。免疫组化检测转化生长因子β1（TGF-β1）、1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)和肾素的表达。比较不同基因型小鼠肾小球细胞外基质和各细胞因子的表达变化。 结果 与野生型小鼠相比，AT1aR基因敲除小鼠肾小球内AT1bR、血管紧张素原、肾素、CYP11B2的表达明显上调（P < 0.05），AT2R表达下调，ACE无明显改变；AT1aR基因敲除小鼠肾小球细胞外基质明显增加（P < 0.05），TGF-β1、PAI-1、MCP-1和肾素的表达均明显增加（P < 0.05）。 结论 AT1aR基因敲除并不能使糖尿病小鼠肾脏病变改善。RAS组分的表达改变（AT1bR的上调和AT2 的下调，肾素的上调和CYP11B2的上调）参与糖尿病肾小球病变过程。     

血管紧张素Ⅱ调节肾脏球旁器颗粒细胞合成肾素的机制研究

目的 观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对肾脏球旁器颗粒细胞肾素分泌的调节作用。 方法 密度梯度离心原代分离小鼠肾小球球旁器颗粒细胞（JGC）。实时定量PCR法检测JGC内血管紧张素转换酶（ACE）、AngⅡ受体（AT）1型和2型（AT1和AT2） mRNA表达。不同浓度的AngⅡ与球旁器细胞共孵育后,放射免疫法测定上清中肾素活性;实时定量PCR法测定细胞内肾素mRNA表达;化学发光法测定细胞内、外环磷酸腺苷（cAMP)水平的剂量和时间效应。改变细胞内钙离子浓度后,观察JGC内和上清中cAMP浓度改变。实时定量PCR法检测AngⅡ对JGC内腺苷酸环化酶（AC）5和AC6 mRNA表达的影响。 结果 成功分离的JGC存在ACE、AT基因表达。AngⅡ可抑制JGC肾素分泌[（370.6±36.9）比（299.6±25.7） ng AngI&#8226;ml-1&#8226;h-1,P = 0.014],并能抑制基础状态和前列腺素E2、去甲肾上腺素诱导的肾素mRNA表达。AngⅡ剂量依赖地降低JGC内和上清中cAMP水平。内质网上的Ca-ATP泵抑制剂毒胡萝卜内酯和环盐酸吗甲吡嗪酸均能剂量依赖地降低cAMP水平。细胞内钙离子螯合剂BAPTA-AM可降低细胞内钙离子浓度,进而使细胞内cAMP水平显著升高[（11.09±0.48）比（3.55±0.47） nmol/L,P < 0.01]。AngⅡ能通过减少42.12%的AC5 mRNA 表达,进而抑制肾素分泌。 结论 AngⅡ直接抑制肾素分泌可能是通过影响AC5,进而抑制cAMP表达来实现的。JGC内调节肾素分泌过程中,钙离子途径和GSα-cAMP两大信号传导途径中存在交联对话。     

腺苷A_(2A)受体基因敲除小鼠瘢痕增生中TGF-β的表达及意义

目的 探讨腺苷A_(2A)受体基因敲除小鼠在瘢痕形成中的作用及其机制.方法 4周大腺苷A_(2A)受体基因敲除小鼠和同窝野生型小鼠各12只,制作瘢痕模型,利用HE染色观察瘢痕组织厚度、横截面积变化情况.采用比色氯胺T法测量组织羟脯氨酸含量,利用Western免疫印迹测量TGF-β表达.结果 野生型组小鼠瘢痕增生明显,其厚度、横截面积比自身对照增加倍数显著大于腺苷A_(2A)受体基因敲除组小鼠(P<0.01),腺苷A_(2A)受体基因敲除小鼠瘢痕增生轻,羟脯氨酸含量与同窝野生型组小鼠瘢痕含量相比差异有统计学(P<0.01),野生型组小鼠瘢痕TGF-β表达比自身对照增加倍数显著大于腺苷A_(2A)受体基因敲除小鼠组(P<0.01).结论 腺苷A_(2A)受体基因敲除小鼠瘢痕TGF-β表达降低,瘢痕增生显著减轻.     

肾上腺素能β受体在人膀胱逼尿肌中作用的年龄相关性研究

目的　研究肾上腺素能 β受体与人膀胱逼尿肌功能障碍的年龄相关性。　 方法　采用细胞功能试验、放射性配基结合及RT PCR法检测肾上腺素能 β受体在老年人逼尿肌细胞中的表达情况及对逼尿肌收缩的影响 ,并以青年人的膀胱逼尿肌标本作为对照。　结果　对照组和老年组之间KCl诱导的逼尿肌收缩程度无显著性差异 ;与对照组相比 ,老年组对异丙肾上腺素、BRL37344(选择性β3受体激动剂 )和forskolin(腺苷酸环化酶激活剂 )的反应性分别下降了 1 5 0 %、1 7 6 %和 1 2 6 % ,异丙肾上腺素和BRL37344的pD2 ( lgEC50 )值也显著降低 ;随年龄增加逼尿肌细胞的肾上腺素能 β受体的最大结合部位显著下降 ,但平衡解离常数却无明显差别。　结论　老年人膀胱平滑肌存在对肾上腺素能 β受体的反应性下降 ,这可能是造成老年人膀胱顺应性减退的原因。受体密度的降低和腺苷酸环化酶活性的下降导致的cAMP合成减少可能是造成肾上腺素能 β受体反应性下降的分子基础     

肾上腺素能β受体与逼尿肌老化关系的研究

目的 研究肾上腺素能β受体与老年人膀胱逼尿肌功能障碍的关系。方法 老年组10例，男7例，女3例，年龄63～68岁。对照组7例，均为男性，年龄24～32岁。2组膀胱功能均正常，男性无前列腺病变。膀胱全切术后分离膀胱逼尿肌。采用细胞功能实验，以40mmol／L KCI溶液收缩细胞，检测异丙肾上腺素、BRL37344(选择性β3受体激动剂)、Forskolin(腺苷酸环化酶激活剂)和DBcAMP(二丁基环腺苷酸)对2组逼尿肌细胞的松弛效应。采用放射性配基结合实验检测2组逼尿肌细胞β受体的最大结合部位(Bmax)和平衡解离常数(Kd)。结果 老年组和对照组KCI诱导逼尿肌细胞缩短17．4％和18．6％，P＞0．05。老年组膀胱逼尿肌细胞对异丙肾上腺素、BRL347344和Forskolin的反应性均明显低于对照组(P值均＜0．01)，但对DBcAMP的反应性与对照组比较差异无统计学意义(P＞0．05)。老年组逼尿肌细胞β受体的Bmax与对照组比较差异有统计学意义(26．9和32．4fmol／mg蛋白，P＜0．01)，但Kd差异无统计学意义(0．17和0．18nmol／L，P＞0．05)。结论 膀胱逼尿肌对肾上腺素能β受体的反应性下降可能是造成老年人膀胱顺应性减退的原因。β受体密度降低和腺苷酸环化酶活性下降导致的cAMP合成减少可能是造成肾上腺素能β受体反应性下降的分子基础。     

体外循环心内直视手术对外周血淋巴细胞表面肾上腺素能β受体-腺苷酸环化酶系统的影响

选择40例择期体外循环心内直视术患者,动态监测其围术期间外周血淋巴细胞内cAMP/cGMP比值变化,以探讨心内直视术对患者外周血淋巴细胞膜肾上腺素能β受体-腺苷酸环化酶系统的影响,并讨论其意义。结果发现麻醉后、术毕及术后2周内淋巴细胞内cAMP水平及cAMP/cGMP比值均显著低于麻醉前对照水平,同时发现淋巴细胞白介素-2受体表达及白介素-2诱生水平亦明显降低,术后严重感染率达33％。本文结果提示心内直视术可导致外周血淋巴细胞膜肾上腺素能β受体-腺苷酸环化酶系统损伤,这是导致严重细胞免疫功能障碍的重要因素之一。     

TIPE2在小鼠脓毒症心肌损伤中的作用：与AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路的关系

目的评价肿瘤坏死因子α诱导蛋白家族8样蛋白2(TIPE2)在小鼠脓毒症心肌损伤中的作用及其与丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)/糖原合酶激酶3β(GSK-3β)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法选择16只雄性野生型C57BL/6N小鼠和16只雄性TIPE2基因敲除C57BL/6N小鼠, 6～8周龄, 体质量20～25 g, 按照随机数字表法分为野生型假手术组(WT-Sham组)、野生型CLP组(WT-CLP组)、TIPE2基因敲除型假手术组(WT-Sham组)和TIPE2基因敲除CLP组(KO-CLP组), 每组8只。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症小鼠急性心肌损伤模型。术后24 h时采集下腔静脉血标本, 采用ELISA法检测血清心肌cTnI浓度, 然后处死小鼠, 取心肌组织, HE染色观察病理学结果, 采用q-PCR法检测TNF-α、IL-1β及IL-6的mRNA表达, Western blot法检测TIPE2、磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化(p-GSK-3β)及β-catenin表达。结果与相应Sham组比较, 相应CLP组血清cTnI浓度升高, 心肌组织TNF-...     

12-脂氧化酶对系膜细胞血管紧张素Ⅱ1型受体表达的影响

目的 探讨12-脂氧化酶(12-LO)对系膜细胞血管紧张素(Ang)Ⅱ1型受体(AT1R)表达的影响。方法 用AngⅡ刺激正常和12-LO基因敲除小鼠肾系膜细胞后，观察p38 MAPK活性和细胞外基质(ECM)蛋白的变化。用12-LO的作用产物12(S)-HETE刺激的系膜细胞、转染12-LO基因的系膜细胞和采用显微切割法从正常和12-LO基因敲除小鼠肾脏提取的肾小球来观察AT1R的表达。采用RT-PCR和Western印迹分别检测目标基因mRNA和蛋白的表达。结果 AngⅡ的刺激可诱导正常系膜细胞p38 MAPK活性和ECM蛋白表达增高。然而，AngⅡ的刺激不能诱导12-LO基因敲除小鼠系膜细胞p38 MAPK活性和ECM蛋白表达升高。剂量依赖性和时间依赖性实验结果表明12(S)-HETE刺激可引起系膜细胞AT1蛋白水平增高，且AT1R mRNA水平升高有统计学意义(P < 0.01)。敲除肾小球内12-LO基因可有效地降低AT1R mRNA的表达(P < 0.01)，转染12-LO基因至系膜细胞使AT1R蛋白和mRNA的表达明显增多(P < 0.01)。结论 12-LO可上调系膜细胞AT1R的表达。     

晚期糖基化终产物修饰的β2微球蛋白对人关节滑膜细胞的病理生物学作用

目的：探讨晚期糖基化产物（AGE）修饰的β2微球蛋白（AGE－β2m)对人关节滑膜细胞的病理生物学作用。方法：分离、培养正常人关节B型滑膜细胞，与AGE－β2m共同孵育，用ELISA法检测培养上清中单核／巨噬细胞趋化蛋白1（MCP－1）和RNATES水平，放射免疫法检测透明质酸（HA）、层黏蛋白和Ⅲ型前胶原水平，Northern blot分析培养细胞MCP－1和RANTES的mRNA表达，Western blot分析培养上清中HA的相对分子质量。结果；AGE－β2m以剂量依赖的方式刺激关节滑膜细胞分泌MCP－1和RANTES，同时上调MCP－1和RANTESmRNA的表达。抗人AGE受体（RAGE）IgG和B型滑膜细胞预孵育能明显抑制AGE－β2m的上述作用。AGE－β2m增加滑膜细胞HA的分泌量，便在AGE－β2m刺激下生成的HA的相对分子质量（33000）明显小于正常HA（37000）。AGE－β2m对滑膜细胞层黏蛋白和Ⅲ型胶原分泌无明显影响。结论：AGE－β2m通过RAGE介导的作用，刺激人类关节B型滑膜细胞产生MCP－1和RANTES，并促进滑膜细胞分泌炎症性小分子HA，这种生物学效应可能参与了透析相关性淀粉样变（DRA）时的关节炎症反应。     

异丙肾上腺素和选择性β3-肾上腺素受体阻滞剂对正常、低顺应性和高反射性膀胱的松弛作用

分别在取自正常膀胱和神经源性膀胱患者的逼尿肌标本上 ,比较异丙肾上腺素刺激 β 肾上腺素受体和选择性药物刺激 β 肾上腺素受体亚型的逼尿肌松弛作用。逼尿肌标本分别取自 45例正常膀胱、2 6例低顺应性膀胱和 7例高反射性膀胱患者。异丙肾上腺素对逼尿肌标本的松弛作用为浓度依赖性 ,且对正常膀胱和神经源性膀胱逼尿肌的作用强度相同。 37例正常膀胱、2 5例低顺应性膀胱和 7例高反射性膀胱逼尿肌标本的ｐＤ2 值分别为 6 .36、6 .2 5和 6 .38。三组间最大松弛程度无显著差别。在高达10 -5ｍｏｌ/Ｌ浓度时 ,β1 /β2 肾上腺素受体阻滞剂或…     

甲状旁腺激素促进系膜细胞合成分泌转化生长因子β1

目的：研究甲状旁腺激素（PTH）对大鼠系膜细胞合成与分泌转化生长因子β1（TGF－β1）的影响。方法：（1）分别以10^-12,10^-11,10^-10,10^-9,10^-8mol/l的hPTH1-34刺激大鼠系膜细胞6，12，24，48h后，ELISA方法测定上清中TGF－β1的浓度；（2）分别以10^-12,10^-11,10^-10,10^-9,10^-8mol/L的hPTH1-34刺激大鼠系细胞48h,采用半定量RT－PCR方法检测细胞TGF－β1 mRNA的表达；（3）以10^-8mol/L的hPTH1-34分别刺激大鼠系膜细胞6，12，24，48h，采用半定量RT－PCR方法检测细胞TGF－β1 mRNA的表达，结果：（1）ELISA结果显示，hPTH1-34促进大鼠系膜细胞合成与分泌TGF－β1分泌作用达高峰（P＜0．01），（2）半定量RT－PCR方法结果显示，hPTH1-34促进大鼠系膜细胞TGF－β1 mRNA的表达，并具有浓度依赖和时间依赖性特点（各组与对照组间P＜0．05），结论：hPTH1-34从蛋白和基因水平显著促进系膜细胞TGF－β1的合成与分泌，且呈浓度依赖和时间依赖性特点。     

阻断转化生长因子-β受体信号转导降低瘢痕疙瘩细胞转化生长因子-β1自分泌的研究

目的 研究瘢痕疙瘩成纤维细胞转化生长因子－β1（TGF－β1）的自分泌现象和阻断TGF－β受体信号转导对TGF－β1自分泌的调控。方法 组织块法体外培养瘢痕疾疙瘩成纤维细胞，加入重组人源（rh）TGF－β1（5mg/L）或含缩短型TGF－βⅡ型体的重组腺病毒（50pfu/cell），并用Northern印迹观察它们对TGF－β1极其Ⅰ、Ⅱ型受体的基因调控。结果 rhTGF－β1能上调TGF－β1（30％－50％）和Ⅰ型受体（30％－90％）的基因表达，但不影响Ⅱ型受体的基因表达。短型TGF－βⅡ型受体在瘢痕疙瘩细胞的过度表达减少细胞TGF－β1（50％－65％）和Ⅰ型受体（21％－55％）的基因表达，但不影响Ⅱ型受体的基因表达。结论 瘢痕疙瘩细胞存在TGF－β1的自分泌现象，而缩短型TGF－βⅡ型受体的过度表达可以通过阻断TGF－β的信号转导来降低TGF－β1的自分泌。     

β2-肾上腺素能受体基因转染改善慢性缺氧兔心肌细胞收缩功能及细胞保护作用

长期慢性缺氧可刺激交感神经,血中儿茶酚胺(CA)水平持续升高,导致心肌细胞β-AR脱敏及活性改变[1].本研究旨在观察β2-肾上腺素能受体(β2-AR)基因转染对慢性缺氧心肌细胞收缩功能及细胞凋亡的影响.     

ACE2对5/6肾切除小鼠肾损伤的保护作用

目的:研究血管紧张素转换酶抑制剂(ACE2)在肾素血管紧张素系统(RAS)过度激活和进行性肾损害的作用并探讨其可能的作用机制。方法:选取雄性ACE2基因敲除(KO)小鼠及野生型(WT)小鼠,随机分成5/6肾脏切除模型组和假手术组,每2周测量血压,12周后检测肾脏损伤指标血肌酐,并对残余肾组织进行PAS染色观察病理变化;用RT-PCR检测肾组织纤维化指标α-SMA和炎症指标TNF-α的表达。结果:与野生型小鼠比较,ACE2基因敲除型小鼠出现血压明显升高,血肌酐增加。PAS染色分析结果提示ACE2基因敲除型小鼠较野生型出现更严重的系膜区增宽,系膜基质增生。用RT-PCR检测肾组织α-SMA和TNF-α的表达变化,提示ACE2基因敲除模型组小鼠肾脏纤维化和炎症因子的表达较野生型模型组小鼠显著增加。结论:ACE2基因敲除组小鼠较野生型小鼠在5/6肾脏切除术后出现更严重的肾脏损伤,血压增高,肾脏炎症和纤维化改变。     

外源性IL-6促进IL-6基因敲除小鼠移植肝再生的研究

目的 观察外源性重组白细胞介素6(rIL-6)对白细胞介素6(IL-6)基因敲除小鼠原位肝移植后存活时间和移植肝再生过程的影响.方法 动物为C57BL/6野生型小鼠和IL-6基因敲除小鼠,分为4组进行实验:基因敲除对照组,肝移植供、受者均为IL-6基因敲除小鼠；野生型对照组,以IL-6基因敲除小鼠为供者,野生型C57BL/6小鼠为受者；基因敲除rIL-6组,供、受者均为IL-6基因敲除小鼠,肝移植前1h于受者皮下注射rIL-6,1 mg/kg;野生型rIL-6组,以IL-6基因敲除小鼠为供者,野生型C57BL/6小鼠为受者,受者应用rIL-6,用法和用量同前组.观察受鼠的存活情况.获取移植肝,进行组织学和免疫组织化学检查.结果 供肝冷缺血时间约为50 min.基因敲除对照组受鼠平均存活2.2d,野生型对照组受鼠平均存活1.9 d,基因敲除rIL-6组受鼠平均存活＞17.6 d,野生型rIL-6组受鼠平均存活＞20.4 d.各组间存活时间的差异均有统计学意义(P＜0.01).基因敲除对照组和野生型对照组受鼠移植肝有片状坏死和肝细胞气球样变,有极少数溴脱氧尿核苷染色阳性的细胞存在.基因敲除rIL-6组和野生型rIL-6组受鼠的移植肝无细胞坏死等改变,有散在的肝细胞溴脱氧尿核苷染色阳性.结论 外源性的IL-6能够延长IL-6基因敲除小鼠肝移植后的存活时间,促进其移植肝细胞再生.     

GDF15在肾移植缺血-再灌注损伤中的作用及机制研究

目的  探讨生长与分化因子（GDF）15在肾移植缺血-再灌注损伤（IRI）中的作用及机制。方法  选取野生型供体小鼠9只,野生型受体小鼠9只,分别于术后4、24、72 h取3只受体小鼠的移植肾,进行GDF家族转录组学分析,检测各组肾组织GDF15的表达情况。选取野生型供体小鼠5只,GDF15敲除型供体小鼠5只,野生型受体小鼠10只,根据实验方案将小鼠分为野生型假手术组、野生型移植组、GDF15敲除假手术组、GDF15敲除移植组,于术后72 h提取血清及肾组织样本,对比各组肾功能、肾小管损伤情况、炎症细胞浸润、炎症因子及Toll样受体4（TLR4）、核因子（NF）-κB表达水平。选取野生型供体小鼠9只,GDF15敲除型供体小鼠9只,野生型受体小鼠18只,根据实验方案将小鼠分为野生型移植组、GDF15敲除移植组,观察肾移植术后两组生存率。结果  GDF15是移植肾转录组学中上调最多的GDF家族基因,主要在肾小管中表达。与假手术组比较,移植组小鼠肾功能下降;与野生型移植组比较,GDF15敲除移植组小鼠血清肌酐、血尿素氮水平升高（均为P < 0.05）。野生型移植组小鼠术后1周生存率为87.6%,GDF15敲除移植组小鼠术后1周生存率为41.8%。GDF15敲除移植组肾损伤分子（KIM）-1表达增多,肾小管损伤评分更高。野生型移植组肾小管可见溶解或坏死,髓外和皮质中可见管型形成,而GDF15敲除移植组肾小管坏死及管型更加明显。移植组髓过氧化物酶（MPO）和F4/80表达增多,且GDF15敲除移植组炎症细胞浸润加重。与假手术组比较,移植组肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β和IL-6表达水平升高;与野生型移植组比较,GDF15敲除移植组TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平升高（均为P < 0.05）。移植组肾组织中TLR4、NF-κB表达较假手术组增多;GDF15敲除移植组肾组织中TLR4和NF-κB表达较野生型移植组增多。结论  GDF15可减轻移植肾IRI,其作用机制可能与抑制TLR4-NF-κB信号通路有关。     

围术期心率变异性与β-肾上腺素能受体功能相关性分析

目的 探讨围术期心率变异性(HRV)降低的病理生理机制。方法 成人ASAⅠ—Ⅱ级静吸复合全身麻醉下行胸膜部择期手术20例，60岁以上(A组)和60岁以下(B组)各10例。术前、麻醉后、术后清醒时、术后l、3和7d等时间点监测HRV5min短程频域分析各成分的变化，并测定淋巴细胞β-肾上腺素能受体表面密度分布(Bmax)，以及血浆肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)和异丙肾上腺素刺激淋巴细胞产生的环磷酸腺苷(cAMP)。结果 麻醉和手术后两组HRV较术前下降显著，术后l周恢复，两组病人E和NE于术后显著升高，两组病人Bmax于术后l周内下降，上述结果均以A组尤为显著。两组病人的cAMP于全麻后就出现明显下降，于术后7d恢复，以A组降低更为显著。排除全麻药的影响，围术期NE血浆浓度与cAMP呈线性负相关，HRV与cAMP呈线性正相关。结论 麻醉和手术后l周机体(尤其老年人)心率变异性大幅降低，其与围术期β-肾上腺素能受体下调和脱敏有关。     

CXCR6介导的NKT细胞激活在急性肾损伤小鼠肾纤维化中的作用

目的 CXC趋化因子受体6(CXCR6)介导的自然杀伤T(NKT)细胞激活在急性肾损伤小鼠肾纤维化中的作用。方法雄性野生型C57BL/6小鼠和CXCR6基因敲除型C57BL/6小鼠各18只, 8～10周龄, 体重20～30 g, 采用随机数字表法分为6组(n=6):野生型小鼠对照组(WT-CON组)、CXCR6基因敲除型小鼠对照组(CXCR6-/--CON组)、野生型小鼠急性肾损伤组(WT-AKI组)、CXCR6基因敲除型小鼠急性肾损伤组(CXCR6-/--AKI组)、野生型小鼠急性肾损伤+NKT细胞过继转移组(WT-AKI-NKT组)和CXCR6基因敲除型小鼠急性肾损伤+NKT细胞过继转移组(CXCR6-/--AKI-NKT组)。腹腔注射叶酸250 mg/kg制备急性肾损伤小鼠肾纤维化模型。WT-AKI-NKT组和CXCR6-/--AKI-NKT组分别于注射叶酸后第4和9天时尾静脉注射NKT细胞悬液250 μl(1×106个)。注射叶酸后第14天时, 采取眼眶血标本, 检测血清BUN和Cr浓度。处死小鼠取肾组织, 采用天狼星红染色观察肾纤维化面积, 采用HE染色观察肾损伤情况, 并行...