糖皮质激素受体在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

目的 评价糖皮质激素受体(GR)在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用及可能机制.方法 成年雄性SD大鼠60只,体重180 ～ 230 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组:对照组(C组,n=6)、RU486组(GR特异性拮抗剂组,R组,n=6)、急性肺损伤组(ALI组,n=24)、RU486+ ALI组(RA组,n=24).ALI组尾静脉注射内毒素(LPS)5 mg/kg制备大鼠急性肺损伤模型,C组给予等容量生理盐水,R组皮下注射GR拮抗剂RU486 20 mg/kg,RA组注射RU486 20 mg/kg 90 min后注射LPS.ALI组及RA组分别于注射LPS后1、3和6 h(T1～3)时,各组随机取8只大鼠,C组与R组于注射生理盐水、RU486 1 h后处死取肺,检测p-p38MAPK、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)的表达.T3时回收支气管肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白和TNF-α的浓度;计算细胞凋亡指数;观察肺组织病理学结果.另取32只大鼠,体重180 ～ 230 g,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=16):急性肺损伤组(ALI1组)、RU486+ ALI组(RA1组),处理方法同上.观察48 h内大鼠生存情况.结果 与C组相比,ALI组、RA组BALF蛋白浓度和TNF-α浓度、细胞凋亡指数升高(P＜0.05)、病理学损伤加重;T1～3时p-p38MAPK表达上调,ALI组T2,3时MKP-1表达下调,RA组T1-3时MKP-1表达下调(P＜0.05);与ALI组相比,RA组BALF蛋白浓度和TNF-α浓度、细胞凋亡指数增加,T1～3时p-p38MAPK表达上调(P＜0.05),T2.3时MKP-1表达差异无统计学意义(P＞0.05),RA1组大鼠生存率低于ALI1组(P＜0.05).结论 GR参与大鼠内毒素急性肺损伤的发生发展,其机制与抑制p38MAPK信号转导通路,降低肺组织细胞凋亡有关.     

丙泊酚对脂多糖刺激人单核细胞丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的 研究丙泊酚对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激人单核细胞(human mononuclear macrophage cell,THP-1)丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响.方法 将体外培养的THP-1细胞按完全随机方法分为4组:对照组(C组):给予脂肪乳20 mg/L;LPS刺激组(L组):给予LPS10mg/L;丙泊酚处理组(P组):给予丙泊酚20 mg/L;丙泊酚处理合并LPS刺激组(P+L组):给予丙泊酚20mg/L及LPS10 mg/L.在刺激后0.5、1、2、6h4个时间点通过免疫蛋白印迹分析(Western blot)法检测磷酸化p38MAPK (p-p38MAPK),磷酸化细胞外信号调节激酶(P-extracellular-signal regulated protein kinase,p-ERK)1/2及磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-c-Jun amino-terminal kinase,p-JNK)1/2含量的变化.结果 给予LPS刺激THP-1细胞0.5 h时,L组p-p38MAPK、p-ERK1/2及p-JNK1/2的相对灰度值分别为14.67±0.82、1.34±0.05、4.49±0.51,与C组比较表达均显著增加(P＜0.05).给予刺激1h时,L组p-p38MAPK、p-ERK1/2及p-JNK1/2的相对灰度值分别为11.78±0.75、0.58±0.05、3.31±0.55,与C组比较表达均显著增加(P＜0.05);P+L组p-ERK1/2的相对灰度值为0.14±0.02,与L组比较磷酸化水平显著降低(P＜0.05).给予刺激2h时,L组p-p38MAPK和p-JNK1/2的相对灰度值分别为15.60±0.96、8.33±0.70,与C组比较表达均显著增加(P＜0.05);P+L组p-p38MAPK和p-JNK1/2的相对灰度值分别为4.52±0.23、1.80±0.70,与L组比较磷酸化水平显著降低(P＜0.05).给予刺激6h时,L组p-p38MAPK及p-JNK1/2的相对灰度值分别为18.89±1.22、2.58±0.50,与C组比较表达均显著增加(P＜0.05);P+L组p-p38MAPK的相对灰度值为3.91±0.30,与L组比较磷酸化水平显著降低(P＜0.05).结论 丙泊酚抑制由LPS刺激THP-1细胞引起的p-p38MAPK、p-ERK1/2及p-JNK1/2表达增加,这可能是其抗炎的重要作用机制之一.     

异丙酚对机械通气相关肺损伤大鼠肺组织p38MAPK信号通路的影响

目的 探讨异丙酚对机械通气相关肺损伤大鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响.方法 雄性清洁级Wistar大鼠30只,体重230～300 g,2～3月龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=10):对照组(C组)保留自主呼吸;机械通气组(V组)和异丙酚组(P组)行机械通气4h,P组在机械通气开始时静脉注射异丙酚5 mg/kg,机械通气期间以10mg·kg-1 ·h-1的速率静脉输注异丙酚.于机械通气15 min、1h、2h和4h时记录MAP,并采集股动脉血样,进行动脉血气分析,记录PaO2;机械通气结束时,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、TNF-α和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)的浓度;取肺组织,测定湿干重比(W/D比)、MDA含量、SOD活性、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和p38MAPK、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白的表达水平,计算p-p38MAPK/p38MAPK,并观察病理学结果,进行肺损伤评分.结果 与C组比较,V组和P组肺损伤评分、W/D比、肺组织MDA含量、ICAM-1表达、BALF中总蛋白浓度、TNF-α和MIP-2浓度和肺组织p-p38MAPK蛋白表达水平和p-p38MAPK/p38MAPK升高,V组肺组织SOD活性降低(P＜0.05),P组SOD活性差异无统计学意义(P＞0.05);与V组比较,P组肺损伤评分、W/D比、肺组织MDA含量、ICAM-1表达、BALF中总蛋白浓度、TNF-α和MIP-2浓度和肺组织p-p38MAPK蛋白表达和p-p38MAPK/p38MAPK降低,肺组织SOD活性、MAP和PaO2升高(P＜0.05).三组肺组织p38MAPK蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异丙酚可能通过抑制p38MAPK信号转导通路的活化减轻大鼠机械通气相关肺损伤.     

p38MAPK信号通路在内毒素性休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织HO-1表达上调中的作用

目的 评价p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在内毒素性休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织血红素加氧酶-1(HO-1)表达上调中的作用.方法 雄性SD大鼠48只,8周龄,体重180～ 200g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=12):对照组(C组)、内毒素性休克组(LS组)、内毒素性休克+ p38MAPK特异性抑制剂SB203580组(LSS组)和SB203580组(SB组).C组和SB组股静脉注射生理盐水0.5 ml;LS和LSS组股静脉注射LPS 10 mg/kg(溶于0.5ml生理盐水)；2h内MAP下降至基础值的75％时,C组和IS组股静脉输注10％二甲基亚砜0.1ml；LSS组和SB组股静脉输注SB203580 5 μmol/kg(溶于0.1 ml 10％二甲基亚砜),输注速率0.01 ml/min.给予LPS或生理盐水后6h时采集动脉血样,进行血气分析,计算氧合指数(PaO2/FiO2)；然后处死大鼠取肺组织,光镜下观察病理学结果,并进行病理学损伤评分,计算肺含水率,测定SOD活性、MDA含量、HO-1 mRNA及其蛋白、p38MAPK蛋白和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白的表达.结果 与C组比较,IS组和LSS组氧合指数和SOD活性降低,病理学损伤评分、肺含水率和MDA含量升高,肺组织HO-1 mRNA及其蛋白和p-p38MAPK蛋白的表达上调(P＜0.05),p38MAPK蛋白表达差异无统计学意义,SB组各指标差异无统计学意义(P＞0.05)；与LS组比较,LSS组氧合指数和SOD活性升高,病理学损伤评分、肺含水率和MDA含量降低,肺组织HO-1 mRNA及其蛋白表达上调,p-p38MAPK蛋白表达下调(P＜0.05),p38MAPK蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 抑制p38MAPK信号通路可导致内毒素性休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织HO-1表达上调.     

地塞米松对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织MKP-1表达的影响

目的 评价地塞米松对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠54只,体重180～ 230 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组:对照组(C组,n=6)、急性肺损伤组(ALI组,n=24)和地塞米松组(D组,n=24).ALI组和D组尾静脉注射LPS 5 mg/kg制备大鼠急性肺损伤模型,C组给予等容量生理盐水,D组于注射LPS前30 min时腹腔注射地塞米松6 mg/kg.C组于注射生理盐水后1 h(T1)时,ALl组和D组分别于注射LPS后1、3和6 h(T1-3)时,随机处死8只大鼠,取肺组织,检测MKP-1和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶MAKP(p-p38MAPK)的表达.T3时回收支气管肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白和TNF-α的浓度;观察肺组织病理学结果.另取32只SD大鼠,体重180～ 230 g,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=16):急性肺损伤组(ALI1组)和地塞米松组(D1组),处理方法同上.观察48 h内大鼠生存情况.结果 与C组比较,ALI组BALF中蛋白和TNF-α的浓度升高,T1-3时p-p38MAKP表达上调,T2.3时MKP-1表达下调,D组BALF中TNF-α浓度升高,T1-3时p-p38MAKP和MKP-1表达上调(P＜0.05);与ALI组比较,D组BALF中蛋白和TNF-α的浓度下降,T1-3时p-p38MAKP表达下调,MKP-1表达上调(P＜0.05),病理学损伤减轻.D1组大鼠生存率高于ALI1组(P＜0.05).结论 地塞米松减轻大鼠内毒素性急性肺损伤的机制与上调肺组织MKP-1的表达,抑制p38MAPK的磷酸化,降低炎性反应有关.     

p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用.方法 成年雄性SD大鼠60只,体重180～230 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组:对照组(C组,n=6)、急性肺损伤组(ALI组,n=24)、p38MAPK特异性抑制剂SB203580+ALI组(SB+ALI组,n=24)和SB203580组(SB组,n=6).ALI组尾静脉注射内毒素5 mg/kg制备大鼠急性肺损伤模型,C组给予等容量生理盐水,SB+ALI组于注射内毒素前30 min经尾静脉注射SB20358010 mg/kg.ALI组和SB+ALI组于注射内毒素后1、3、6 h(T1-3)时随机取8只大鼠,C组和SB组分别于给予生理盐水、SB203580后1 h处死取肺组织,检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达.T3时回收支气管肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白浓度.计算细胞凋亡指数,观察肺组织病理学结果.另取32只大鼠,采用随机数字表法,将大鼠随机分为2组(n=16):ALI组和SB+ALI组,观察48 h内大鼠生存情况.结果 与C组相比,ALI组和SB+ALI组BALF中蛋白浓度、细胞凋亡指数、肺组织p-p38MAPK蛋白表达水平升高(P＜0.05);与ALI组相比,SB+ALI组上述指标降低(P＜0.05).SB+ALI组病理学损伤程度较ALI组明显减轻.ALI组大鼠生存率较SB+ALI组降低(P＜0.01).结论 p38MAPK信号转导通路参与了大鼠内毒素性急性肺损伤的发生和发展,可能与肺组织细胞凋亡有关.

Abstract：

Objective To investigate the role of p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) signal transduction pathway in lipopolysaccharide (LPS)-induced acute lung injury (ALI).Methods Sixty male SD rats weighing 180-230 g were randomly divided into 4 groups: control group (group C, n = 6), ALI group ( n = 24),p38MAPK specific inhibitor SB203580 + ALI group (group SB + ALI, n = 24), SB203580 group (group SB,n =6). LPS 5 mg/kg was injected intravenously via tail vein in group ALI and SB + ALI, while the equal volume of normal saline was given instead in group C. Group SB + ALI received iv injection of SB203580 10 mg/kg via tail vein 30 min before LPS administration. Group SB received injection of SB203580. The rats were sacrificed at 1, 3 and6 h agter LPS administration (T1-3) in group ALI and SB + ALI (8 rats at each time point) andat 1 h after administration in C and SB groups. The lungs were immediately removed for microscopic examination and determination of phosphorylated p38MAPK (p-p38MAPK) expression, the concentration of protein in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) and apoptotic index (AI). Another 32 rats were selected and randomly divided into 2 groups for survival study: ALI group and SB + ALI group ( n = 16 each), and then they were treated as mentioned above and observed for 48 h. Results The concentration of protein in BALF, AI and p-p38MAPK expression were significantly increased in group ALI and SB + ALI compared with group C, while decreased in group SB + ALI compared with group ALI ( P ＜ 0. 05 ). LPS-induced pulmonary histological changes were significantly attenuated in group SB + ALI compared with group ALI. The survival rate was significantly decreased in group ALI compgred with group SB + ALI ( P ＜ 0.01 ). Conclusion p38 MAPK signal transduction pathway is involved in LPS-induced ALI, which may be related to the apoptosis in the cells in the lung.     

乌司他丁和地塞米松对脂多糖致大鼠急性肺损伤肺的保护

目的 研究乌司他丁(ulinastatin,UTI)和地塞米松(dexamethasone,DXM)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)肺的保护作用及其可能机制. 方法 成年雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分为4组:空白对照组(control group,Con组),LPS组,LPS+乌司他丁组(lipopolysaccharide plus ulinastatin group,UTI组),LPS+地塞米松(lipopolysaccharide plus dexamethasone group,DXM组),每组6只.在8h后放血处死大鼠,采用蛋白印迹分析(Westernblot)技术检测糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的表达,实时荧光定量PCR检测GRmRNA的表达,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测肺组织匀浆液中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白介素(interleukin,IL)-10的浓度,同时检测肺湿干比(wet/dry weight ratio,W/D)以及肺组织病理学的变化. 结果 GR蛋白的表达:LPS组大鼠肺组织中GR蛋白的表达量(0.418±0.018)较Con组(0.841±0.021)降低(P＜0.05),UTI组为(0.692±0.018),DXM组为(0.702±0.024),高于LPS组(P＜0.05),但二者比较差异无统计学意义(P＞0.05)；GRmRNA的表达:LPS组大鼠肺组织中GRmRNA的表达量较Con组降低,UTI组大鼠肺组织GRmRNA的表达量略高于LPS组,但差异无统计学意义(P＞0.05),DXM 组GRmRNA的表达量高于UTI组、LPS组、Con组(P＜0.05)；TNF-α的表达:LPS组中TNF-α的表达量(374±8) ng/L较Con组(102±6) ng/L升高(P＜0.05),UTI组为(343±6) ng/L,DXM组为(282±8) ng/L,较LPS组下降,其中DXM组下降更明显,但都高于Con组(P＜0.05); IL-10的表达:LPS组中IL-10的表达量(264±10)ng/L,较Con组(43±3) ng/L升高(P＜0.05),UTI组为(369±10) ng/L,较LPS组进一步升高(P＜0.05),DXM组为(180±7) ng/L,较LPS组下降(P＜0.05),但高于Con组(P＜0.05)；肺组织W/D:LPS组肺组织W/D(5.58-0.28)较Con组(4.33±0.27)升高(P＜0.05),UTI组为(5.15±0.18),DXM组为(4.79±0.21),均较LPS组下降(P＜0.05),DXM组肺组织W/D较UTI组更低(P＜0.05)；组织病理学检查显示:LPS组肺组织见肺泡结构破坏,炎性细胞浸润,肺泡间隔增宽、出血、水肿,UTI组肺组织病理损害较LPS组明显减轻,DXM组肺组织病理损害较UTI组进一步减轻.结论 UTI和DXM改善ALI的机制不完全相同,DXM改善ALI的效果优于UTI.     

MLK3-MKK3/6-p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

目的 探讨MLK3-MKK3/6-p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠78只,体重200～250 g,随机分为4组:对照组(C组,n=6)、急性肺损伤组(ALI组,n=24)、MLK3抑制剂K252a组(MK组,n=24)和p38MAPK特异性抑制剂SB203580组(MS组,n=24).ALI组尾静脉注射内毒素5 mg/kg制备大鼠急性肺损伤模型,C组给予等容量生理盐水,MK组和MS组于注射内毒素前30 min经尾静脉分别注射K252a 75μg/kg、SB203580 10 mg/kg.ALI组、MK组和MS组于注射内毒素后1、3、6、12 h(1-4)时各组随机取6只大鼠,C组于给予生理盐水后即刻处死取肺,采用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度,称重后计算肺湿干重比,采用Western b1ot法测定p-MLK3、p-MKK3/6及p-p38MAPK的表达,观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组、MK组和MS组各时点支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度、肺湿干重比、p-MLK3、p-MKK3/6及p-p38MAPK的表达水平升高(P＜0.01);与ALI组比较,MK组上述指标降低,MS组支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度、肺湿干重比、p-p38MAPK表达水平降低(P＜0.05).病理学结果显示:MK组和MS组肺组织损伤较ALI组减轻.结论 MLK3-MKK3/6-p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中起重要作用.     

炎性痛大鼠背根神经节中p38丝裂原活化蛋白激酶激活调节嘌呤2X3受体对痛觉过敏的影响

目的 研究完全弗氏佐剂(complete freund's adjuvant,CFA)导致的炎性痛大鼠的背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)中,磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(phospho-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38MAPK)与嘌呤2X3(purine 2X3,P2X3)受体的相互关系,及其对于痛觉过敏的影响. 方法 选择雄性SD大鼠72只,体重200 g～250 g.采用随机数字表法分为6组,每组12只:Sham+二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO) (Sham+DMSO)组、CFA+DMSO组、Sham+P2X3抑制剂A-317491 (Sham+A)组、CFA+A-317491(CFA+A)组、Sham+p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)抑制剂SB203580(Sham+SB)组和CFA+SB203580(CFA+SB)组,6组大鼠每组又分为两个亚组,每组6只,即行为学组和Western blot组.行为学组在造模前及造模后1、2、4d检测热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL),观察各组大鼠行为学变化.Western blot组在造模后2d处死,取DRG检测p-p38MAPK及P2X3的表达. 结果 与造模前及Sham+DMSO组比较,CFA+DMSO组、CFA+A组、CFA+SB组大鼠TWL均明显降低[造模后2 dTWL分别为(16.3±1.1)、(5.0±0.7)、(12.6±1.5)、(10.7±1.6)s](P＜0.05),而CFA+A组及CFA+SB组大鼠TWL均较CFA+DMSO组升高(P＜0.05).CFA致炎2d后p-p38MAPK以及P2X3表达均显著增加(P＜0.05);鞘内注射SB203580后,p-p38MAPK与P2X3的表达水平都有明显降低(P＜0.05);鞘内注射A-317491后,P2X3的表达水平显著降低(P＜0.05),而p-p38MAPK表达并未有明显变化(P＞0.05). 结论 炎性痛时p38MAPK的激活可介导P2X3受体的上调.     

氢气对内毒素血症大鼠心肌损伤的影响

目的 探讨氢气对内毒素血症大鼠心肌损伤的影响.方法 清洁级健康雄性SD大鼠48只,体重200 ～ 220 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=12):正常对照组(C组)、氢气对照组(HC组)、内毒素血症组(E组)和氢气+内毒素血症组(LH组).E组和LH组腹腔注射脂多糖(LPS) 20 mg/kg建立内毒素血症模型,C组和HC组给予等容量生理盐水.HC组和LH组于给予LPS后立即开始吸入2％氢气6h,C组和E组吸入空气6h.采用ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)浓度以及心肌组织TNF-α和IL-6的含量.采用Western blot法检测心肌组织磷酸化NF-kB抑制蛋白α(p-IκB-α)和磷酸化p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)(p-p38MAPK)的表达.结果 与C组比较,HC组血清cTnI浓度、心肌组织TNF-α、IL-6、p-IκB-α和p-p38 MAPK水平差异均无统计学意义(P＞0.05),E组及LH组血清cTnI浓度升高,心肌组织TNF-α、IL-6的含量、p-IκB-α和p-p38 MAPK表达升高(P＜0.05);与E组比较,LH组血清cTnI浓度降低,心肌组织TNF-α、IL-6的含量、p-IκB-α和p-p38MAPK表达降低(P＜0.05).结论 氢气可减轻内毒素血症大鼠心肌损伤,其机制与抑制p38MAPK及NF-κB促炎通路、减轻心肌组织炎性反应有关.     

糖皮质激素对人肝癌细胞系增殖的抑制作用

目的 探讨糖皮质激素在体外环境下对肝癌细胞增殖的影响及可能机制.方法 以不同浓度(0.1、0.01、1×10-3、1×10-4、1×10-5、1×10～mmol/L,均为终浓度)的地塞米松(Dex)在体外作用于人肝癌细胞系Bel7402、H7402和Hep G2细胞,计算细胞生长抑制率.再以Bel7402细胞为对象,分别加入1×10-4 mmol/L的Dex(Dex组)、1×10-4mmol/L的Ru486(Ru486组)、Dex和Ru486(浓度均为1×10-4mmol/L,Dex+Ru486组),并设加人培养液的阴性对照组,计算各组细胞生长抑制率,流式细胞仪测定各组的细胞周期分布,Western免疫印迹法检测Bel7402细胞的P21蛋白的表达;报告基因法检测Dex和Ru486对Bel7402细胞的核因子κB(NF-κB)启动子的影响.结果 各浓度Dex对3种肝癌细胞的增殖均有抑制作用,且呈浓度依赖性.Dex组Bel7402细胞的增殖受到抑制,其G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,其细胞内的P21蛋白表达上调,NF-κB启动子的激活受到抑制,而加入Ru486后(Dex+Ru486组),Dex的这些作用被逆转.结论 Dex可以抑制Bel7402细胞的增殖,并使细胞周期停滞在G上/G1,期,其机制可能包括上调P21蛋白的表达和抑制NF-κB的表达,这种作用由糖皮质激素胞内受体介导.     

七氟烷对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的影响及其机制

目的 观察吸入七氟烷对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺组织细胞凋亡的影响,探讨可能机制.方法 18只雄性SD大鼠按照随机数字表分入3组,每组6只:①对照组;②模型组(LPS组);③七氟烷预处理组.LPS组气管内滴注LPS 5 mg/...     

右美托咪定对全脑缺血/再灌注大鼠海马CA1区神经元GluR2蛋白表达的影响

目的 探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)预处理对全脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)大鼠海马CA1区神经元GluR2蛋白[α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methyl4-isoxa-zolep-propionate acid,AMPA)受体中限制Ca2+通透的亚基]表达以及学习记忆能力的影响. 方法 按照随机数字表法将48只雄性SD大鼠分为4组(每组12只):假手术组(S组),I/R组,Dex组(D组),育亨宾+Dex组(YD组).使用四血管阻断法制作脑I/R模型,脑缺血5 min后行再灌注.D组于缺血前30 min腹腔注射Dex 100 μg/kg,YD组于对应时间点同时腹腔注射Dex 100 μg/kg和育亨宾0.1 mg/kg,S组和I/R组腹腔注射等量生理盐水.各组于再灌注后7d进行Morris水迷宫实验,测试各组大鼠的空间学习记忆能力.于再灌注72 h时,处死大鼠并分离海马CA1区,应用Western blot法测定GluR2蛋白的表达. 结果 与S组比较,I/R组大鼠的逃避潜伏期明显延长(P＜0.05)、停留目标象限时间[(32.1±5.0)s比(48.7±5.5)s]和穿越平台次数[(1.5±0.8)次比(5.0±1.2)次]明显减少(P＜0.05);与I/R组比较,D组的逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05),停留目标象限时间[(40.6±2.1)s比(32.1±5.0)s]和穿越平台次数[(3.3 ±0.5)次比(1.5±0.8)次]明显增加(P＜0.05);与D组比较,YD组的逃避潜伏期明显延长,停留目标象限时间[(32.2±6.0)s比(40.6±2.1)s]和穿越平台次数[(1.6±0.8)次比(3.3±0.5)次]明显减少(P＜0.05);I/R组与YD组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);I/R 72 h,I/R组大鼠海马CA1区GluR2蛋白表达显著下调(P＜0.01),D组GluR2蛋白表达下调比I/R组明显减小(P＜0.05),YD组GluR2蛋白表达水平明显低于D组(P＜0.05),YD组与I/R组比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 Dex可减轻大鼠全脑I/R的学习记忆能力障碍,其机制可能与抑制脑缺血后海马CA1区GluR2蛋白表达的下调有关.     

右美托咪定预处理对内毒素血症大鼠海马区Bcl-2、Bax表达及认知功能的影响

目的 探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)预处理对内毒素血症大鼠海马区凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达及认知功能的影响. 方法 健康清洁SD雄性大鼠24只,6周龄,体重200～250 g,采用随机数字表法将其分为3组(每组8只):对照组(C组)、内毒素组(E组)和Dex组(D组).D组腹腔注射Dex 50 μg/kg,30min后尾静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)5 mg/kg;E组腹腔注射等容量(2ml)生理盐水,30 min后尾静脉注射LPS 5 mg/kg;C组腹腔注射等容量生理盐水,30 min后尾静脉注射等容量生理盐水.各组于给药后12h,用Morris迷宫测试大鼠认知功能的变化,其后处死大鼠,取大脑海马组织.TUNEL法检测组织凋亡指数(apoptosis index,AI),免疫组织化学法分别检测Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 与C组比较,E组和D组潜伏期和游泳总距离增加,穿越平台次数减少(P＜0.05);与C组比较,E组Bcl-2表达差异无统计学意义(P＞0.05),Bax表达上调,Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05);D组Bcl-2和Bax表达上调,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.05).与E组比较,D组AI明显降低,Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Bcl-2/Bax升高(P＜0.05). 结论 Dex可以改善内毒素血症大鼠的认知功能,其机制可能与调节Bcl-2和Bax蛋白表达,减轻海马区神经元凋亡有关.     

右美托咪啶对腹腔镜胆囊切除术全麻效果的影响

目的 探讨预先注射小剂量右美托咪啶( dexmedetomidine,Dex)对腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)患者全麻效果的影响.方法 择期行LC患者50例,ASA Ⅰ ～Ⅱ级,年龄21岁～57岁,体重42.5 kg～80 kg,按随机数字表法分为生理盐水组(C组)和...     

电刺激迷走神经对脓毒症大鼠凝血功能的影响

目的 观察电刺激迷走神经对脓毒症大鼠凝血功能的影响.方法 采用经左侧股静脉注射脂多糖(LPS,10mg/kg)复制脓毒症模型.将雄性SD大鼠96只随机分成4组:生理盐水组(SHAM组)、脓毒症组(LPS组)、迷走神经切断组(VGX组)、电刺激迷走神经组(VNS组).将左侧迷走神经远端与双铂电极连接,于模型制备成功即刻行电刺激(5 V,2 ms,1 Hz)20 min.于注射脂多糖前(0 h),注入后2、4、6 h各个时间点取6只动物,经腹主动脉取血查血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(aPTT)、血浆凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原(Fbg)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 在予以LPS 2 h后,LPS组(316.34±23.96)ng/L和VGX组(325.77±39.77)ng/L血浆TNF-α水平较VNS组(252.72±30.36)ng/L升高(P＜0.05);6 h时,LPS组(10.68±0.66)s和VGX组(10.72±0.57)s与VNS组(9.67±1.04)s比较PT时间延长(P＜0.05);2 h时,LPS组(23.4 ±0.5)s和VGX组(23.9±0.5)s与VNS组(18.4±1.1)s比较aPTT时间延长(P＜0.05);4 h时,LPS组(32.0±1.0)s和VGX组(32.7±0.8)s与VNS组(28.7±1.9)s比较,TT时间延长(P＜0.05);4 h时,LPS组(1.909±0.224)g/L和VGX组(1.822±0.329)g/L与VNS组(2.376±0.138)g/L比较,Flg浓度降低(P＜0.05).结论 电刺激迷走神经不仅可以有效地抑制脓毒症大鼠血浆TNF-α水平,抑制炎症反应,而且还可以改善脓毒症大鼠的凝血功能紊乱.     

Global adiponectin suppress the high expression of monocyte chemotactic protein-1 induced by high glucose in NRK52E cells

Objective To investigate the effect of globular adiponectin on the high expression of monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1) induced by high glucose in rat renal tubular epithelial cells(NRK52E), and its relationship with adiponectin receptors and p38MAPK. Methods NRK52E cells were cultured in vitro and divided into six groups: normal glucose group (NG, 5.6 mmol/L glucose), high glucose group(HG, 25 mmol/L glucose), gAd group1 (HG+gAd 2 mg/L), gAd group2 (HG+gAd 5 mg/L), gAd group3 (HG+gAd 10 mg/L), p38MAPK antagonist group：(SB, HG+SB203580 10 μmol/L). The protein expression of phosphorylated p38MAPK (p-p38MAPK), total p38MAPK (t-p38MAPK), MCP-1 and AdipoR1/AdipoR2 were examined by western blotting. The mRNA expression of MCP-1 and AdipoR1/AdipoR2 were detected by RT-PCR and real-time PCR respectively. Results Compared with NG group, the mRNA and protein expression of MCP-1 increased significantly in HG group (all P＜0.05). The phosphorylation of p38MAPK increased (P＜0.05) with no change in t-p38MAPK protein. The addition of gAd or SB203580 inhibited the unregulation of MCP-1 and p-p38MAPK induced by HG. Two kinds of adipoR,adipoR1 and adipoR2,were all detectable in NG group, and mRNA and protein expression of adipoR1 was higher than that of adipoR2 (P＜0.01). Compared with NG group, the expression of adipoR decreased in HG group, but the difference had no statistical significance(P＞0.05). Compared to HG group, the mRNA and protein expression of adipoR1 increased in gAd groups (all P＜0.01). Conclusion The gAd can dose-dependently attenuate the overexpression of MCP-1 induced by high glucose, and this protective effect may be mediated by adipoR1 and p38MAPK.     

右美托咪定对术后老龄小鼠海马组织caspase-3、Bax表达的影响

目的 探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对手术创伤后老年小鼠caspase-3、Bax表达水平及术后认知功能障碍(postoperative cognitive decline,POCD)的影响. 方法 健康老龄昆明小鼠105只,13～15月龄,体重45～55 g.采用随机数字表法分为4组:空白对照组(C组,15只);麻醉药物组(A组,30只),实验动物接受异氟醚、氯胺酮药物达到相应手术麻醉深度,给药后第1天和第3天分别设为A1组、A3组;麻醉药物手术组(P组,30只),实验动物接受复合麻醉药物后实施剖腹探查脾切除手术,术后第1天和第3天分别设为P1组、P3组;Dex干预组(D组,30只),术前30 rmin各取15只小鼠分别给予Dex15、25 μg/kg腹腔内注射(D15组、D25组).术后第1天、第3天行Y迷宫试验观察神经行为学改变(Dex干预组术后第3天进行);Western blot和免疫组化检测各组海马组织caspase-3、Bax表达. 结果 Y迷宫试验中,与C组(27±8)比较,A组术后第1天[(50±10)次]、P组术后第1天[(70±15)次]和第3天[(65±16)次]训练次数增加,差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05),D15组、D25组术后第3天与C组比较,差异无统计学意义(P＞0.05):与P组第3天[(65±16)次]比较,D25组[(29±6)次]训练次数差异有统计学意义(P＜0.05).与C组比较,A组、P组术后第1天、第3天caspase-3、Bax蛋白的表达量及阳性细胞数升高(P＜0.01,P＜0.05);D15、D25组第3天与C组caspaLse-3、Bax蛋白的表达量及阳性细胞数比较,差异无统计学意义(P＞O.05).与P组第3天比较,D15、D25组caspase-3、Bax蛋白表达量及阳性细胞数降低(P＜0.01,P＜0.05). 结论 Dex预处理能降低caspase-3、Bax蛋白的表达量及阳性细胞数,减弱海马神经细胞损伤,从而改善小鼠POCD.