全层皮肤缺损创面移植异种脱细胞真皮基质与薄自体皮重塑基底膜的实验观察

背景：异种脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植修复全层皮肤缺损创面取得了良好的效果，但对移植后基底膜的重塑尚不十分清楚。目的：观察异种(猪)脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植模型中基底膜重塑的变化规律。设计：随机对照实验研究。地点和材料：动物实验在上海市烧伤研究所完成，指标检测在上海第二医科大学细胞生物学教研室完成。清洁级雄性SD大鼠(由中国医学科学院上海实验动物中心提供)，体质量200-250g。干预：将SD大鼠随机分为两组，每组42只。所有动物均饲养在层流房间内，恒定的湿度与温度，单笼饲养。A组：单纯移植薄自体皮组；B组：脱细胞猪真皮基质(江苏启东医疗用品研究所提供)+薄自体皮复合移植。将异种(猪)脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植于大鼠创面，分别于移植后1，2，3，4，8，12，16周留取标本，采用免疫组化、透射电镜等方法。主要观察指标：观察基底膜中层粘连蛋白的变化规律及12周时基底膜的超微结构，同时以单纯薄自体皮移植进行对照。结果：B组移植后1，2，3，4，8，12，16周，层粘连蛋白的表达分别为88．32&;#177;2．72，89．22&;#177;2．16，88．84&;#177;3．43，93．49&;#177;4．59，87．57&;#177;3．33，95．87&;#177;1．84，86．57&;#177;2．45，A组分别为78．96&;#177;1．68，85．37&;#177;5．41，82．49&;#177;3．73，84．27&;#177;2．69，72．88&;#177;3．57，88．19&;#177;3．36，82．82&;#177;2．86，12周时复合皮移植组基底膜结构清晰连续，而单纯移植薄自体皮组基底膜模糊、不连续。结论：异种脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后，基底膜中层粘连蛋白表达增高，可能有利于复合皮移植后基底膜的重塑，增强表皮和真皮之间的连接，进而改善创面愈合质量。     

异种(猪)无细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植修复深度烧伤创面的实验研究

目的　观察异种 (猪 )无细胞真皮支架与自体微粒皮加同种异体皮复合移植修复全层皮肤缺损的效果。方法　 4 8只 SD大鼠背部全层皮肤缺损创面 ,分别行异种 (猪 )无细胞真皮支架与自体微粒皮移植(复合皮组 )和单纯微粒皮移植 (对照组 ) ,术后定期观察创面愈合情况并行创面愈合率和收缩率的计算 ,同时取创面组织进行组织学观察。结果　复合皮组的创面愈合情况良好 ,未见明显挛缩 ,皮肤弹性较好 ,两组异体皮成活情况及创面愈合情况相近 ,但是复合皮组创面收缩率显著低于对照组。组织学观察复合皮组上皮化良好 ,胶原纤维排列有序 ,基底膜结构完整。结论　异种 (猪 )无细胞真皮支架与自体微粒皮复合移植能修复全层皮肤缺损 ,改善创面愈合质量。     

猪无细胞真皮基质在体移植后的稳定性

目的：采用一步法将组织工程的支架材料猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植，动态观察猪无细胞真皮基质在体移植后的稳定性。方法：动物实验于2001-01／2002-03在上海市烧伤研究所完成，指标检测在上海第二医科大学细胞生物学教研室完成。以清洁级雄性SD大鼠90只为动物模型，在其背部造成4cm&;#215;5cm的全层皮肤缺损。取模型大鼠84只随机分为薄自体皮移植组和猪无细胞真皮基质＋薄自体皮移植组两组，每组各42只。复合皮移植组采用一步法将猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植，在创面上先移植猪无细胞真皮基质，然后立即在无细胞真皮基质上移植薄自体皮片，缝合固定后覆盖凡士林纱布及干纱布，环形包扎。薄自体皮移植组直接将薄自体皮移植在创面上，然后固定包扎。分别于移植1,2，3，4，8，12，16周取标本，通过大体观察和组织学观察，动态观察猪无细胞真皮基质移植后创面修复效果、皮片移植成活率及猪无细胞真皮基质的稳定性和可降解性。皮片成活率=[（移植皮片总面积-皮片坏死面积）／移植皮片总面积]&;#215;100％。另取6只大鼠进行复合皮移植，其中3只观察至移植后24周，另外3只观察至移植后32周，分别取全层皮肤标本。结果：实验动物SD大鼠共90只，全部进入结果分析。①无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植2周，皮片成活良好，与薄自体皮移植组比较，皮片成活率差异无显著性[（87.29&;#177;13．80）％，（88．59&;#177;10．30）％，t=0．8509，P〉0．05]。②复合皮移植后愈合创面外观平整，色泽与周围皮肤相似，柔韧有弹性，而薄自体皮组移植区皮肤比正常皮肤薄，无弹性。③猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后皮片成活率与薄自体皮移植组无显著性差异，猪无细胞真皮基质早期完整，随着时间的推移，猪无细胞真皮基质逐渐被降解，并被自体新生的胶原所替代，直到移植后32周，在真皮的网状层仍可见到残留的猪真皮基质。在32周的观察期内未见急慢性排斥反应。结论：采用一步法将猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植，并不影响覆盖其上的自体皮的成活率，且其在体内具有较好的稳定性，对于引导真皮组织的再生和减轻瘢痕形成可能具有积极的意义。     

猪无细胞真皮基质在体移植后的稳定性

目的:采用一步法将组织工程的支架材料猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植,动态观察猪无细胞真皮基质在体移植后的稳定性。方法:动物实验于2001-01/2002-03在上海市烧伤研究所完成,指标检测在上海第二医科大学细胞生物学教研室完成。以清洁级雄性SD大鼠90只为动物模型,在其背部造成4cm×5cm的全层皮肤缺损。取模型大鼠84只随机分为薄自体皮移植组和猪无细胞真皮基质 薄自体皮移植组两组,每组各42只。复合皮移植组采用一步法将猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植,在创面上先移植猪无细胞真皮基质,然后立即在无细胞真皮基质上移植薄自体皮片,缝合固定后覆盖凡士林纱布及干纱布,环形包扎。薄自体皮移植组直接将薄自体皮移植在创面上,然后固定包扎。分别于移植1,2,3,4,8,12,16周取标本,通过大体观察和组织学观察,动态观察猪无细胞真皮基质移植后创面修复效果、皮片移植成活率及猪无细胞真皮基质的稳定性和可降解性。皮片成活率=犤植皮(移片总面积-皮片坏死面积)/植皮片总面积犦×100%。另取6只大鼠进行移复合皮移植,其中3只观察至移植后24周,另外3只观察至移植后32周,分别取全层皮肤标本。结果:实验动物SD大鼠共90只,全部进入结果分析。①无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植2周,皮片成活良好,与薄自体皮移植组比较,皮片成活率差异无显著性犤87.29±13.80)%,(88.59±10.30)%,t=0.8509,P(>0.05犦②复合皮移植后愈合创面外观平整,色泽与周围皮肤相似,柔。韧有弹性,而薄自体皮组移植区皮肤比正常皮肤薄,无弹性。③猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后皮片成活率与薄自体皮移植组无显著性差异,猪无细胞真皮基质早期完整,随着时间的推移,猪无细胞真皮基质逐渐被降解,并被自体新生的胶原所替代,直到移植后32周,在真皮的网状层仍可见到残留的猪真皮基质。在32周的观察期内未见急慢性排斥反应。结论:采用一步法将猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植,并不影响覆盖其上的自体皮的成活率,且其在体内具有较好的稳定性,对于引导真皮组织的再生和减轻瘢痕形成可能具有积极的意义。     

不同方法制备猪脱细胞真皮基质及创面移植的实验研究

目的比较两种方法制备的猪脱细胞真皮基质分别与自体刃厚皮复合移植修复大鼠全层皮肤缺损的效果。方法使用DispaseⅡ／TritonX-100(中性蛋白酶／曲拉通)和高渗盐水／十二烷基硫酸钠(SDS)两种方法去除猪表皮及真皮中的细胞成分，分别得到猪脱细胞真皮基质Ⅰ和Ⅱ。63只SD大鼠背部全层皮肤缺损分别使用猪脱细胞真皮基质Ⅰ 自体刃厚皮及猪脱细胞真皮基质Ⅱ 自体刃厚皮覆盖，术后观察移植物成活率和植皮区收缩率，同时取移植物进行组织学观察，并与单纯自体刃厚皮移植相比较。结果两种方法制备的猪脱细胞真皮基质分别与自体刃厚皮复合移植的移植物成活率和植皮区收缩率差异无显著性，组织学观察显示复合皮上皮化良好，胶原纤维排列有序，基底膜结构完整。两复合皮组术后第6周移植物成活率与自体刃厚皮组比较差异均无显著性，术后第4周开始两复合皮组移植物收缩率明显降低。结论两种方法制备的异种脱细胞真皮基质与自体皮复合移植都能很好地修复全层皮肤缺损，改善创面愈合质量。     

交联型猪脱细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植的临床应用

目的:观察交联型异种(猪)脱细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植修复大面积深度烧伤早期切痂创面的疗效。方法:选择2001-09/2006-10在珠海市人民医院暨南大学医学院第三附属医院整形烧伤科就诊的中面积和大面积深度烧伤患者16例共48个观测创面,患者均知情同意。患者于伤后3～5d休克期平稳渡过后行肢体创面切痂术,自体微粒皮移植组观测24个创面,均位于复合皮移植组创面的邻近或对侧肢体相同部位。①复合皮移植组:切痂创面用交联型异种(猪)脱细胞真皮基质(由江苏启东医疗用品研究所提供) 自体微粒皮复合移植 异体皮覆盖。②自体微粒皮移植组:切痂创面用自体微粒皮移植 异体皮覆盖。术后6周异体皮脱落,两组散在肉芽创面行小邮票状皮片补充移植修复创面。术后定期观察创面愈合情况,计算创面愈合率及收缩率,并行创面组织学检测。结果:两组48个创面均进入结果分析,无脱落。①两组异体皮成活情况相近。②术后6周,复合皮移植组患者的创面愈合率均显著低于自体微粒皮移植组(P<0.05);经补充植皮后即术后8周两组创面愈合率差异无显著性意义(P>0.05)。③移植术后6,8,12周,复合皮移植组患者的移植创面收缩率均显著低于自体微粒皮移植组[(10.28±2.36)%,(16.25±3.78)%;(15.68±1.79)%,(30.42±3.65)%;(22.07±1.39)%,(42.83±2.74)%(P<0.05)]。④术后8周组织学观察结果显示,复合皮移植组创面愈合处上皮化良好,胶原纤维排列有序,基底膜结构完整;自体微粒皮移植组上皮层仍较薄,细胞分化不良,真皮内胶原排列较紊乱。结论:交联型异种(猪)脱细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植修复大面积深度烧伤早期切痂创面,能够抑制瘢痕增生,改善创面愈合质量,疗效满意。     

异体异种脱细胞真皮与自体刃厚皮复合移植的比较

背景:尽管真皮基质的生物模板作用可减少瘢痕形成,改善创面愈合质量已得到共识,但不同种属脱细胞真皮基质作为真皮添充物的成活机制和重建过程等生物学性能是否有差异仍需进一步探讨.目的:对比分析异体及异种脱细胞真皮基质与自体刃厚皮复合移植的近期效果.设计、时间及地点:随机分组,自身对照观察实验,于2008-01/06在海南省人民医院医学动物实验中心完成.材料:J-1型人脱细胞异体真皮基质由北京桀亚莱福生物技术有限公司提供.小型香猪1只以低含量胰蛋白酶消化加反复冻融法制备制备猪脱细胞真皮基质.方法:选取近交系小型香猪15只,在每头猪脊背两侧制作6 cm×6 cm全层皮肤缺损创面各3处,共6处,按移植物的不同将创面随机分为3组:猪脱细胞真皮基质与猪刃厚自体皮复合移植组与人脱细胞真皮基质与猪刃厚皮复合移植组在脱细胞真皮基质植入后,在其表面重叠覆盖自体刃厚皮,对照组单纯行猪薄皮片移植.主要观察指标:移植后9 d、21 d及3个月各组移植物成活情况、创面收缩率和组织学变化.结果:移植后第9,21天各组移植皮片大部分均成活良好,局部无红肿,3个月时两复合移植组皮肤外观相似,均光滑、柔软、丰满、有弹性,与周围正常组织结合部平坦,对照组创面收缩凹陷明显,皮片薄弱,韧性也较复合移植组差,3组移植物成活率差异无显著性意义(P>0.05),自体刃厚皮移植创面收缩率高于其他两组(P<0.05).移植后8 d,2个复合移植组脱细胞真皮基质引导形成丰富的毛细血管结构,复合皮表皮层形成且分化良好;移植后21 d,已有完整的皮肤结构,真皮层内可见胶原纤维排列规整,表皮-真皮连接区"钉突"结构明显,移植后3个月结构更加接近正常真皮,对照组组织致密,胶原排列紊乱,与瘢痕组织结构相似.结论:与自体皮复合移植时,异体及异种脱细胞真皮基质具有相近的生物学性能,且效果优于单纯刃厚自体皮移植.     

异种(猪)脱细胞真皮与自体微粒皮复合移植的疗效观察

目的用异种(猪)脱细胞真皮与自体微粒复合移植解决烧伤患者自体微粒皮移植术后功能欠佳的问题。方法5例男性,TBSA50％～95％,Ⅲ度30％～70％,异种脱细胞真皮移植100～150cm2,采用两步法,外层覆盖异体皮。结果术后4～6周异体皮脱落,创面愈合80％左右,复合皮移植处外观平整,皮肤弹性及关节功能较对照部位好。半年后复诊关节功能正常,疤痕增生不明显。结论异种(猪)脱细胞真皮来源容易、价格低廉,与自体微粒皮复合移植,疗效满意。     

无细胞异种真皮与自体表皮片复合移植改善创面愈合质量

目的研究用无细胞异种真皮与自体表皮片复合移植的效果及组织学变化.方法将48只SD大鼠分为实验组于背部全层皮肤缺损创面移植无细胞异种真皮及自体表皮片,对照组单纯移植自体表皮片.术后定期评价创面愈合情况,并活检作组织学检测.结果两组移植的表皮片成活均良好,但对照组创面收缩严重,表皮质地薄,胶原纤维紊乱,表皮-真皮连接结构重建不明显;而实验组创面收缩程度轻,外观平整、质地良好,胶原纤维排列有序,基底细胞桥粒-半桥粒结构及基底膜重建明显,未见明显的急性排斥反应.结论无细胞异种真皮与自体表皮片复合移植应用创面,可改善创面愈合质量.     

真皮替代物修复皮肤缺损减少增生性瘢痕的作用

目的探讨真皮替代物治疗增生性瘢痕的新方法。方法用异种(猪)脱细胞真皮基质作为人真皮层替代物与自体刃厚皮复合移植修复瘢痕切除后的创面。结果16例复合移植后创面一次修复,皮片成活好,瘢痕增生少,弹性好,远期复合皮肤可达全厚或中厚皮移植效果。结论采用脱细胞异种(猪)真皮基质作为正常真皮层的替代物为治疗大片成熟不良,久年不退的瘢痕提供一种新的可行方法,显示用真皮替代物修复缺如的真皮层可以起到控制瘢痕增生的作用。     

脱细胞异体敷料皮在烧伤治疗中的应用

目的:探讨脱细胞异体敷料皮在烧伤创面应用的效果。方法:2003—2004年在15例烧伤患者中应用脱细胞异体敷料皮覆盖烧伤创面及切削痂创面,分期自体植皮。结果:所有创面顺利愈合,取得良好效果。结论:脱细胞异体敷料皮使用简便,能促进创面愈合及提高植皮成功率,是一种良好的创面覆盖材料。     

深度手烧伤的治疗及功能康复

目的 :探讨深度手烧伤早期创面修复及功能康复最好的治疗方法。方法 :应用中厚皮、异体去细胞真皮基质作支架加自体刃厚皮片移植 ,腹部真皮血管网皮片及超薄皮瓣移植等手术方式 ,进行深度手烧伤早期切削痂。结果 :2 94例 4 6 2只手功能良好者 138例 2 32只手 (5 0 % ) ,功能较好者 79例 134只手 (2 9% ) ,功能障碍者 77例 96只手 (2 1% )。结论 :应用早期切削痂植皮的方法可减少瘢痕增生和畸形 ,使深度手烧伤后获得满意的外形和功能     

异体表皮干细胞与猪脱细胞真皮构建复合皮移植6例

2005-01/2006-10在南昌大学第一附属医院烧伤科就诊的深度烧伤患者6例,均为四肢Ⅲ度烧伤创面.异种(猪)脱细胞真皮与异体表皮干细胞构建的复合皮由南昌大学第一附属医院烧伤中心提供.清创消毒后,6例患者均进行复合皮移植、自体刃厚皮移植,共移植复合皮12块,自体刃厚皮96块.复合皮移植是将复合皮剪成1.5 cm×1.5 cm,粗糙面向下、光滑面向上植于创面上;自体刃厚皮移植是将大片自体刃厚皮铺于矾土林纱布上,剪成1.5cm×1.5 cm,植于复合皮的四周.移植后3 d揭去创面外层纱布,见复合皮及自体刃厚皮与创面粘连好、湿润,呈淡红色:7 d复合皮及自体刃厚皮大部分成活,随后成活的皮片向四周扩展,至14 d大部分皮片接近融合,21 d时创面已基本愈合.移植的复合皮、自体刃厚皮成活数量比较,差异无显著性意义(P＞0.05).因复合皮扩展情况不如自体刃厚皮,所以复合皮移植后的创面愈合面积小于自体刃厚皮移植(P＜0.01).在临床观察中6例患者暂末发生不良事件和副反应.提示表皮干细胞和(猪)脱细胞真皮构建的人工复合皮移植到受区,可建立血液循环,并保持一定的活力,达到覆盖创面、防止感染、防止体液流失的目的.     

脱细胞异体真皮与自体大张薄皮修复功能部位创面的疗效观察

目的：总结功能部位创面用脱细胞异体真皮与自体大张薄皮修复后的疗效。方法：对感染创面清创，控制感染。移植脱细胞异体真皮与自体大张薄皮封闭创面。结果：该技术操作简单，皮片成活良好，外观平整,皮肤弹性好,修复区无功能障碍。结论：关节功能部位创面用脱细胞异体真皮与自体大张薄皮移植能恢复关节功能，避免或减少后期整形。     

异种脱细胞真皮替代睑板材料重建眼睑的可行性

背景：眼睑后层重建是眼睑重建的重点和难点,其中睑板替代物更是研究的焦点。异种脱细胞真皮作为一种新型的组织工程材料,在国内外烧伤整形领域,正得到广泛的研究和应用。目的：观察异种（猪）脱细胞真皮植入兔眼睑后的组织相容性极其组织病理学变化。方法：剥取健康小白猪全层皮肤20cm×20cm,制备异种（猪）脱细胞真皮基质。同时制备兔睑板全层缺损模型并植入脱细胞真皮基质,观察大体情况,并分别于第1,2,3周取移植交界处眼睑组织光镜下观察组织学的改变。结果与结论：大体观察未见明显排斥反应及眼睑的变形;光镜下1周时可见局部炎症细胞浸润,2周时炎症细胞减少,3周时正常纤维组织长入,逐渐分割代替植入的胶原纤维,炎症反应消失。提示异种脱细胞真皮免疫原性低,并可引导新生胶原的生长,是一种良好的睑板替代物。     

Acellular porcine dermal matrix produced with different methods and an experimental study on its transplantation to skin wound.]

OBJECTIVE: To observed the effect of healing quality of composite skin grafting consisting of acellular porcine dermal matrix combined with autologous split-thickness skin graft. METHODS: Porcine skin was treated with dispase II/triton X-100 or hyperosmotic saline/sodium-dodecyl-sulfate (SDS) respectively, and acellular porcine dermal matrix I (APDMI) and APDM II were obtained. Sixty-three Sprague-Dawley rats with full-thickness skin defects on the back were separately covered with APDMT + split-thickness autologous skin, or APDM II + split-thickness autologous skin. The quality of wound healing was observed, the rates of survival and contraction of the grafts were calculated, the tissue samples were harvested for histological examination, and compared with that of autologous split-thickness skin graft. RESULTS: The wound healing quality of composite skin I, and II was good. There was no significant difference in the rate of survival and contraction of the grafts between the two composite skin grafting groups. It was indicated by histological examination intact basal membrane. There was no significant difference in the survival rate between composite skin grafting groups and autologous split-thickness skin at the 6 th week after operation, but the contraction rates of the grafts in the composite skin groups were lower. CONCLUSION: Full-thickness skin defect can be healed by covering with acellular porcine dermal matrix produced by two methods combined with split-thickness autolograft, and it can help improve the quality of wound healing.     

皮能快愈敷料在深度烧伤创面治疗中的改良应用

目的 探讨皮能快愈敷料对深度烧伤患者的治疗效果.方法 2008年8月至2010年8月我们收治深度烧伤患者22例.患者入院后立即进行创面深度及烧伤严重程度评估,待生命体征稳定,创面水肿高峰期结束后行创面治疗,1期清创手术,行皮能快愈敷料移植术,皮能快愈敷料外加湿性敷料(德湿威);2周后Ⅱ期手术,去除皮能快愈敷料硅胶膜行自身刃厚皮移植.结果 22例深度烧伤创面均愈合,皮能快愈敷料无感染及溶解.皮片移植存活,创面外观满意,供皮区瘢痕增生轻.结论 改良皮能快愈敷料与自体刃厚皮复合修复深度烧伤创面具有较好的临床应用价值.     

应用真皮模板改善创面愈合质量的研究

目的:动态观察真皮模板应用后对创面微血管形成的影响,为真皮模板应用改善创面愈合质量提供依据。方法:选取2001/2002Ш度小面积烧伤患者,采用真皮模板(异体无细胞真皮基质)加自体薄皮复合移植的方法,修复Ш度烧伤患者切痂后创面,并以单纯自体薄皮移植作为对照,分别于术后1,2,3,4,6周取材,实验组与对照组各15例次,采用苏木精-伊红染色观察、免疫组化技术检测标本中CD34的表达。结果:在术后1～6周,随着创面的修复,真皮模板组CD34表达逐渐降低,而薄皮组CD34持续高表达,且有逐渐升高趋势,其结果与HE染色所见一致。两组比较具有显著性差异。结论:真皮模板与自体薄皮复合移植后,可以抑制创面毛细血管超常增生,从而减少瘢痕形成,改善创面愈合质量。     

脱细胞猪角膜表面基底膜成分的检测

背景:前期实验显示脱细胞猪角膜具有良好的组织相容性,可以支持角膜细胞和皮肤上皮细胞的生长。目的:检测脱细胞猪角膜是否保存了利于角膜上皮细胞生长的重要组织结构—基底膜。方法:利用荧光抗体对脱细胞猪角膜表面的基底膜成分(层粘蛋白和Ⅳ型胶原)进行免疫组织化学检测,荧光显微镜下观察脱细胞猪角膜表面是否保存了基底膜成分。结果与结论:免疫荧光染色显示脱细胞猪角膜前基质表面层粘蛋白和Ⅳ型胶原呈阳性表达,与新鲜猪角膜表面基底膜的荧光表达相同,表明脱细胞猪角膜保存了利于角膜上皮细胞生长的基底膜。