咖啡因暴露对小鼠胚胎发育的影响及机制

目的观察孕前和孕期咖啡因对雌性小鼠受孕及胚胎发育的影响,探讨咖啡因的生殖毒性及其机制。方法灌胃给予雌鼠不同剂量咖啡因(60、120和240mg/(kg.d)),连续7d后雌雄合笼,检雌鼠阴栓日为孕第0天,继续给药至孕第18天,处死孕鼠,剖腹取胎。记录各组孕鼠体重增长率和受孕率,胎鼠活胎体重、身长、尾长,胎盘重量及病理改变。测定胎盘组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(Cat)活力,胎鼠肾上腺急性调节蛋白(StAR)和胆固醇侧链裂解酶(P450scc)mRNA表达。结果与正常对照组比较,咖啡因暴露组雌鼠受孕率明显降低,受孕延迟,呈剂量依赖性,孕鼠体重增长率明显降低,胎鼠平均体重、身长、尾长以及胎盘重均明显低于正常对照组(P<0.01,P<0.05),吸收胎和死胎数亦增加,胎鼠宫内发育迟缓(IUGR)发生率分别为6.8%、23.3%和98.3%。光镜下见咖啡因组胎盘滋养层细胞减少,血管壁增厚。咖啡因大剂量组胎盘MDA含量升高(P<0.05),SOD活力降低(P<0.05),Cat酶活力呈降低趋势。咖啡因组胎鼠肾上腺StAR表达均比正常对照组低。结论孕前和孕期咖啡因暴露可致小鼠受孕延迟,胎鼠IUGR发生率升高。胎盘抗氧化功能改变和胎鼠甾体激素合成功能减弱可能是咖啡因致小鼠胚胎发育毒性的重要机制。     

咖啡因所致IUGR胎儿HPA轴发育异常：基于海马GR的表达调控改变

目的：已知不良宫内环境（如缺血、应激）可引起胎儿下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴发育异常,导致宫内发育迟缓（IUGR）;胎海马作为HPA轴的重要调节中枢,其糖皮质激素受体（GR）的发生与HPA轴功能发育相关。本研究旨在观察孕期咖啡因暴露所致IUGR大鼠的HPA轴功能变化,并探讨其发生机制。方法：建立孕中晚期咖啡因（20、60、180mg／kg&#183;d,ig）暴露所致大鼠1UGR模型,孕20d取胎鼠,real．timePCR技术检测胎海马GR、胎肾上腺甾体激素合成急性调节蛋白（STAR）和P450胆固醇侧链裂解酶（P450scc）、胎盘2型1113．羟类固醇脱氢酶（11β-HSD-2）的mRNA表达;ELISA试剂盒检测胎血促肾上腺皮质激素（ACTH）及皮质酮（CORT）浓度;进一步建立胎海马神经元培养系统,以咖啡因（0-300μM,24h或300μM,0-72h）处理神经元,real-timePCR技术检测GR、DNA甲基转移酶（Dnmtl、Dnmt3a和Dnmt3b）的mRNA表达。结果及结论：孕期咖啡因暴露可显著抑制胎肾上腺StAR／P450scc的表达,同时胎盘11β-HSD-2表达降低,胎鼠外周血ACTH及CORT水平增加,胎海马GR表达增高,证实孕期咖啡因暴露存在“母源性糖皮质激素过暴露”现象,进而影响胎海马GR功能并导致HPA轴发育异常;结合体外研究发现,咖啡因能直接引起海马GR表达增加,同时Dnmt3a和Dnmt3b表达降低,进一步提示胎海马GR的表达调控改变参与了咖啡因所致HPA轴发育异常,这可能与咖啡因引起胎海马GR的甲基化改变有关。     

尼古丁能非AhR依赖性的改变宫内发育迟缓大鼠胎肾上腺的甾体合成功能

目的：孕期尼古丁暴露是导致胎儿宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation，IUGR）的重要原因。IUGR与胎儿内分泌功能的紊乱密切相关。胎盘的11β-羟基类固醇脱氢酶-2（11β-hydroxysteroid dehydrogenase-type2，11β-HSD-2）是胎儿和母体之间的糖皮质激素屏障，可防止母体过多糖皮质激素所导致的胎儿生长受限。肾上腺是与生长发育密切相关的重要内分泌器官，研究发现，胎肾上腺已具备基本的甾体激素合成功能，     

孕期尼古丁暴露加重高脂饮食所致成年子代大鼠肾上腺功能紊乱及其性别差异

目的通过观察孕期尼古丁暴露(PNE)所致的宫内发育迟缓(IUGR)仔鼠出生后,在高脂饮食(HFD)模型下,血中皮质酮(CORT)浓度和肾上腺甾体合成功能的变化及其性别差异,从胰岛素样生长因子~(-1)(IGF~(-1))信号通路角度探讨其发生机制。方法 PNE(2.0 m L·kg~(-1)·d~(-1))建立大鼠IUGR模型,子代断奶后给予HFD喂养直至出生后第24周。检测仔鼠血CORT含量、肾上腺甾体合成功能、IGF~(-1)信号通路及11β-HSDs/CR系统表达。结果与HFD对照组相比,PNE组♂子代血CORT浓度呈降低趋势,♀呈升高趋势;PNE组♂子代肾上腺甾体合成酶表达(如St AR、3β-HSD、P450c11)明显降低,PNE组♀子代肾上腺甾体合成酶表达(如SF~(-1)和P450c21)增加;PNE组♂子代IGF~(-1)信号通路中IGF~(-1)、IGF~(-1)R升高,PNE组♀子代IGF~(-1)信号通路各基因表达明显增加;PNE组♂子代11β-HSD2、GR表达降低,11β-HSD1/11β-HSD2比值升高,而PNE组♀子代相应的基因表达以增加为主。结论 PNE可致HFD子代大鼠肾上腺甾体合成功能异常变化,并呈现较明显的性别差异,其发生机制与尼古丁所致的肾上腺甾体合成低功能宫内编程及出生后IGF~(-1)介导的追赶性生长有关。     

L-精氨酸防治胎儿宫内发育迟缓的疗效和机制

目的探讨L-精氨酸(L-Arginine,L-Arg)防治胎儿宫内发育迟缓的疗效,并阐明其治疗机理。方法被动吸烟法建立IUGR孕鼠模型,20只IUGR孕鼠随机分为非干预组和干预组,另选10只孕鼠作为正常对照组。在IUGR孕鼠妊娠的第7~20天给予干预组L-精氨酸。第21天处死孕鼠,测定胎仔体重,鼻-臀长和重量系数,分别测定妊娠末期孕鼠血中NO、ET-1含量和尿液中8-epi-PGF2α的含量。结果干预组胎仔的体重明显增加(P<0.01),孕鼠血清NO水平明显升高(P<0.01),血浆ET-1明显降低(P<0.01),NO/ET-1明显升高(P<0.01),尿液中8-epi-PGF2α的含量明显降低(P<0.01)。结论L-Arg能调节IUGR孕鼠体内NO/ET-1失衡,改善胎盘-子宫-胎儿的血供,减轻其体内的脂质过氧化作用,对IUGR具有较好的干预效果。     

孕中晚期咖啡因暴露对胎鼠宫内发育的影响及其胎盘损伤机制

目的：建立孕中晚期咖啡因暴露的大鼠宫内发育迟缓（IUGR）模型，观察咖啡因对胎鼠生长发育的影响，并探讨其胎盘损伤机制。方法：成年Wistar大鼠雌雄2：1合笼受孕，孕鼠随机分为四组，于孕第12天咖啡因灌胃（20、60和180mg&#183;kg^-1&#183;d^-1），对照组给予等体积蒸馏水，孕第21天处死孕鼠，颈动脉取血，记录各组胎仔的体重、身长、尾长和胎盘重量。透射电镜观察胎盘超微结构改变，放免法测定孕鼠血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）浓度，RT—PCR检测胎盘血管紧张素受体ATI和AT2表达水平。结果：与对照组比较，咖啡因组胎仔体重、身长、尾长和胎盘重量均明显降低（P〈0．01），且呈剂量依赖性；中、大剂量组IUGR发生率明显升高，分别为19．6％和60．4％（P〈0．01）。透射电镜下见咖啡因大剂量组胎盘绒毛血管数量明显减少，管腔狭窄，滋养层细胞间间距缩小，细胞损伤明显。孕鼠血中AngⅡ浓度高于对照组，尤以大剂量组明显（F〈0．01）。胎盘组织AT2的mRNA表达呈上升趋势，而AT1无显著变化。结论：孕中晚期咖啡因暴露叮明显影响胎鼠的宫内发育，提高IUGR发生率。     

吸烟所致宫内发育迟缓孕鼠肝脏药物代谢酶及抗氧化酶活性的变化

目的:研究和探讨吸烟所致宫内发育迟缓(IUGR)大鼠母体肝脏药物代谢酶活性和抗氧化功能的改变及其所带来的毒理学和药理学意义。方法:妊娠天数明确的Wistar大鼠16只,分为对照组和吸烟组。采用吸烟法建立大鼠IUGR模型,孕21d剖腹取胎,测量胎鼠生长发育指标(体重、身长、尾长)和胎盘重。差速离心法制备孕鼠肝亚细胞组分,测定多种药物代谢酶和抗氧化酶活性。结果:IUGR大鼠胎仔平均体重、身长、尾长、胎盘重都明显低于对照组,分别为对照组的87.7%、94.5%、95.3%和83.0%(P<0.01)。母体肝脏微粒体细胞色素P450(CYP)1A1活性升高,为对照组的137.9%(P<0.05);而CYP3A活性降低,为对照组的73.3%(P<0.05),谷胱甘肽S转移酶(GST)活性也降低,为对照组的86.5%(P<0.05)。母体肝脏胞浆超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(Cat)活性降低(P<0.05);谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性升高,为对照组的1.11倍(P<0.05)。结论:孕期吸烟可致IUGR大鼠母体肝脏部分药物代谢酶活性和抗氧化系统功能改变,这些改变可能是导致IUGR发生的原因之一,同时吸烟可能改变孕期用药的疗效,增加药物毒性。     

当归注射液对烟酒所致大鼠宫内发育迟缓的拮抗作用及机制

目的 :了解烟酒所致胎儿宫内发育迟缓 (IU GR)时孕鼠胎盘组织抗氧化功能的改变 ,探讨当归注射液的保护作用及机制。方法 :采用烟酒混合因素建立大鼠IUGR模型 ,部分孕鼠给予当归注射液0 .2 5g·kg-1治疗 ,测定胎盘组织中还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛 (MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶 (Cat)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)的活性。结果 :IUGR孕鼠胎盘组织MDA和GSH含量均明显增加 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,SOD、GSH Px和Cat活性显著下降 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。经当归注射液治疗后 ,胎儿宫内生长发育接近正常 ,上述指标也得到改善。结论 :胎盘氧化损伤可能是IUGR发病的一个重要机制。当归注射液能提高IUGR孕鼠胎盘的抗氧化能力 ,促进胎儿宫内生长发育。     

叶酸对IUGR大鼠胎盘VEGF及其受体1表达的影响

摘要：目的　观察叶酸对宫内发育迟缓（IUGR）大鼠胎盘中血管内皮生长因子（VEGF）及其受体1（Flt1）表达的影响和对胎鼠发育迟缓的治疗效果。方法　将20只雌性Wistar大鼠随机均分成4组：正常对照（N）组,正常饮食;IUGR组,妊娠期给予低蛋白饮食;叶酸+IUGR（A+IUGR）组,交配前2周至妊娠期给予叶酸每日2.0 mg/kg灌胃处理,受孕成功后妊娠期给予低蛋白饮食;叶酸+正常对照（A+N）组,交配前2周至妊娠期给予叶酸每日2.0 mg/kg灌胃处理,正常饮食。各组孕鼠在孕20 d时剖宫产取胎鼠,观察每组胎鼠体质量、胎盘质量、胎盘系数的变化,采用免疫组化染色和Western blot检测胎盘VEGF和Flt1蛋白表达,qPCR检测胎盘VEGF和Flt1 mRNA表达。结果　与N组相比,IUGR组的胎鼠体质量、胎盘质量、胎盘系数均明显降低,且胎盘中VEGF和Flt1的表达明显降低（P＜0.05）。A+IUGR组较IUGR组胎盘质量、胎盘系数显著增加（P＜0.05）,A+IUGR组胎盘组织中VEGF和Flt1表达明显高于IUGR组（P＜0.05）。结论　叶酸可以通过上调IUGR大鼠胎盘中VEGF及Flt1的表达,进一步提高胎盘血管密度,从而促进胎盘和胎鼠发育,降低IUGR子代不良结局的发生风险。     

母体孕期维生素D缺乏诱发胎儿生长受限

胎儿宫内生长受限(fetal intrauterine growth restriction,IUGR)是指胎儿未能达到其遗传决定的全部生长潜能[1]。IUGR不仅与死胎风险的增加有关,同时也是造成围产期胎儿高发病率和死亡率主要原因[2]。维生素D(vitamin D,VD)是一种甾体类固醇激素,近年来母体孕期维生素D缺乏(vitamin D deficiency,VDD)与IUGR的关系受到越来越多的关注,流行病学发现孕期VDD增加了IUGR的发生风险[3],但是机制不清。因此,本研究旨在通过低维生素D饲料喂养构建VDD诱发IUGR孕鼠模型,并从胎盘糖皮质激素屏障功能方面探讨VDD诱发IUGR的可能作用机制。     

氟他胺诱导尿道下裂大鼠模型的建立及其作用机制

目的 用氟他胺诱导建立尿道下裂大鼠模型并在分子水平研究其导致尿道下裂的作用机制.方法 将孕鼠在第12～17天用氟他胺(6 054.6μg/kg)连续每天皮下注射染毒建立子代雄鼠尿道下裂模型,另在第20天行破宫产取子代雄鼠的睾丸组织,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测睾酮合成过程中细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和细胞色素P450 17α-羟化酶(P450c17)等关键酶基因的活性表达水平.结果 氟他胺诱导的尿道下裂胚胎鼠睾丸组织中P450scc、3β-HSD和P450c17等的基因活性表达水平较正常对照组均有不同程度的下降.结论 氟他胺通过在性发育期干扰子代雄鼠睾丸组织中睾酮的生物合成途径,降低了睾酮水平,导致子代雄性大鼠尿道下裂的发生.     

芹菜对小鼠生育力及胎鼠生长发育的影响

目的探讨芹菜对雄性小鼠生殖能力及胎鼠生长发育的影响。方法160只成年健康SPF级昆明种雄性小鼠按体质量随机分为7d和56d两个时间组,各时间组随机分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每天定时给各剂量组小鼠以不同浓度的芹菜汁0．3ml灌胃,对照组0．3ml生理盐水灌胃,灌胃结束后与同种同龄的健康雌性小鼠按雄雌1：1合笼;次日起每日阴道涂片,以查到阴栓为孕0d（合笼7d未见阴栓者,以合笼第4天为孕0d）,并分笼饲养,分别在孕18d剖腹取胎,记录各组孕鼠受孕及子宫仔鼠着床情况,同时测定胎鼠身长及体质量。结果各剂量组与对照组比较雌鼠受孕率、着床数、胎鼠身长、体质量差异均无统计学意义。结论芹菜对胎鼠生长发育无明显影响,对雄鼠生育力的影响不能排除。     

胎儿宫内生长迟缓患者子宫胎盘血管病变对围产儿预后的影响

目的 :探讨胎儿宫内生长迟缓 (IUGR)患者子宫胎盘床及胎盘血管的免疫病理变化对脐动脉波形、围产儿预后的影响。方法 :对孕37周以上入院患者进行脐动脉血流监测 ;对无合并症胎儿宫内生长迟缓孕妇40例(IUGR组 )及正常妊娠孕妇25例 (对照组 )子宫胎盘床螺旋动脉和胎盘绒毛血管病变进行观察 ,应用免疫组化技术进行IgA、IgG、IgM和C3 的检测。结果 :(1)IUGR组子宫胎盘血管免疫组化标记IgM和C3 的阳性表达率 (均40 % )显著高于对照组 (均阴性表达 ,P<0.01) ,且免疫复合物和补体沉积处可见纤维素样坏死和急性动脉粥样硬化病变。 (2)IUGR血管病变组脐动脉波形异常的发生率 (为68.75 % )显著高于无血管病变组 (为16.67% ,P<0.01)。 (3)IUGR血管病变组胎盘质量、新生儿体质量和Apgar评分≥8分者均显著低于无血管病变组 (P<0.01或P<0.05)。结论 :子宫胎盘血管壁上免疫复合物沉积在IUGR发病中起重要作用。子宫胎盘血管病变可导致脐动脉波形异常及影响围产儿预后     

补锌对PKA/CREB信号通路及边缘锌缺乏小鼠生精功能的影响CSCD

目的探讨补锌对蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)(PKA/CREB)通路及边缘锌缺乏(marginal zinc dificiency,MZD)雄性小鼠生精功能的影响。方法75只4周龄SPF级ICR雄性小鼠随机分为对照组(饲料锌含量为30 mg/kg)、MZD组(饲料锌含量为10 mg/kg)和低(MZD+ZnY2,饲料锌10 mg/kg+补锌2 mg/kg·bw)、中(MZD+ZnY4,饲料锌10 mg/kg+补锌4 mg/kg·bw)、高(MZD+ZnY8,饲料锌10 mg/kg+补锌8 mg/kg·bw)剂量组,每天1次灌胃补锌。35 d后,检测精子质量、锌含量、血清性激素水平、以及CREB、PKA和激素合成相关基因StAR、3β-HSD、P450scc和CYP17A1 mRNA相对表达水平。结果各实验组小鼠间体重和饮水、摄食量差异无统计学意义。与对照组比较,MZD组精子存活率、低渗肿胀率、血清锌和T含量均降低,精子畸形率升高;CREB、PKA以及StAR、3β-HSD、P450scc mRNA相对表达量降低(P<0.05)。与MZD组比较,MZD+ZnY 4和MZD+ZnY 8组精子存活率,低渗肿胀率均明显回升,精子畸形率降低(P<0.05);MZD+ZnY8组血清锌水平明显回升(P<0.05);MZD+ZnY2组3β-HSD、CREB mRNA以及MZD+ZnY4组3β-HSD、P450scc mRNA相对表达量均明显回升(P<0.05)。结论锌可通过PKA/CREB信号通路调控性激素水平影响雄性小鼠生精功能;适量补锌能综合改善MZD小鼠精子质量。     

产前倍他米松对孕鼠和早产胎鼠IGF-的影响

目的:探讨倍他米松在促进早产胎鼠肺脏成熟的同时对孕鼠和早产胎鼠胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的影响。方法:18只孕鼠随机分为对照组(CT组)、倍他米松单剂量组(SD-BETA组)和倍他米松多剂量组(MD-BETA组),在孕鼠怀孕14,15d给予不同剂量的倍他米松,在孕鼠怀孕16.5d行剖宫产终止妊娠,放射免疫法测定孕鼠血清、胎鼠羊水中IGF-Ⅰ的含量,进行同组间的相关性分析;免疫组织化学法进行胎鼠肝脏和胎盘中IGF-Ⅰ表达测量,进行同组间胎鼠肝脏与胎盘中IGF-Ⅰ的相关性分析。结果:产前倍他米松应用在促进早产胎鼠肺脏成熟的同时可使孕鼠血清中IGF-Ⅰ含量明显下降,这与用药后孕鼠体重降低一致。孕鼠血清中IGF-Ⅰ和胎鼠羊水中IGF-Ⅰ无相关性。结论:倍他米松在促进早产胎鼠肺成熟的同时影响了孕鼠血清和胎鼠羊水中IGF-Ⅰ含量,影响孕鼠体重和胎鼠的生长发育。     

产前倍他米松对孕鼠和早产胎鼠IGF-I的影响

目的:探讨倍他米松在促进早产胎鼠肺脏成熟的同时对孕鼠和早产胎鼠胰岛素样生长因子-I(IGF-I)的影响.方法:18只孕鼠随机分为对照组(CT组)、倍他米松单剂量组(SD-BETA组)和倍他米松多剂量组(MD-BETA组),在孕鼠怀孕14,15d给予不同剂量的倍他米松,在孕鼠怀孕16.5d行剖宫产终止妊娠,放射免疫法测定孕鼠血清、胎鼠羊水中IGF-I的含量,进行同组间的相关性分析;免疫组织化学法进行胎鼠肝脏和胎盘中IGF-I表达测量,进行同组间胎鼠肝脏与胎盘中IGF-I的相关性分析.结果:产前倍他米松应用在促进早产胎鼠肺脏成熟的同时可使孕鼠血清中IGF-I含量明显下降,这与用药后孕鼠体重降低一致.孕鼠血清中IGF-I和胎鼠羊水中IGF-I无相关性.结论:倍他米松在促进早产胎鼠肺成熟的同时影响了孕鼠血清和胎鼠羊水中IGF-I含量,影响孕鼠体重和胎鼠的生长发育.     

超顺磁性纳米四氧化三铁对孕前期和孕中期小鼠生殖及胚胎发育的影响

目的探讨超顺磁性纳米四氧化三铁对孕前期和孕中期小鼠生殖及胚胎发育的影响。方法选取48只健康成年雌性ICR小鼠,按体重随机分为4组(孕前期对照组、孕前期染毒组、孕中期对照组和孕中期染毒组),分别在孕前期、孕中期经尾静脉注射方式染毒,均于孕18 d处死孕鼠剖取卵巢和胎鼠,测定胎鼠发育指标(胎鼠体重、体长、尾长、外观畸形率、内脏畸形率、骨骼畸形率、胎盘重及HE切片)和孕鼠生育力指标(孕鼠体重、子宫重、卵巢重及HE切片、活胎率、死胎率、吸收胎率)。结果孕前期建模组:孕鼠生育指标两组对比差异无统计学意义(P0.05)。与对照组相比,染毒组胎仔体长显著降低(P0.05),胎盘重及吸收胎率显著增加(P0.05),其余发育指标差异无统计学意义(P0.05);孕中期建模组:孕鼠生育指标两组对比差异无统计学意义(P0.05)。与对照组相比,染毒组胎盘重量显著降低(P0.05),其余发育指标差异无统计学意义(P0.05)。结论超顺磁性纳米四氧化三铁对孕前期和孕中期染毒小鼠的生育力无显著影响,对胚胎发育有一定的毒性作用。     

复方麦芽丸对多囊卵巢综合征模型大鼠3-β-羟甾脱氢酶、细胞色素P450酶表达的影响

目的研究复方麦芽丸(CMP)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠3-β-羟甾脱氢酶(3-β-HSD)、细胞色素P450酶(CYP450)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法 9日龄SD大鼠于颈背部皮下注射睾丸酮建立PCOS模型,随机分为模型组,阳性对照组和CMP低、中、高剂量组(分别相当于丸药量3.15、6.3、12.6 g·kg~(-1))(n=9),另设正常组(n=10)。CMP低、中、高剂量组按10 m L·kg~(-1)分别灌以相应浓度的中药煎剂,阳性对照组灌以炔雌醇环丙孕酮片水溶液,正常组和模型组均灌以等量的蒸馏水。观察大鼠动情周期及卵巢大体形态变化,运用免疫组化、Western blot、RT-q PCR测定卵巢组织3-β-HSD、CYP450的蛋白和m RNA表达。结果 CMP可以降低PCOS模型大鼠3-β-HSD表达水平(P<0.01),升高模型大鼠CYP450表达水平(P<0.01),均以高剂量组的作用效果最佳。结论 3-β-HSD和CYP450共同参与了PCOS模型大鼠卵巢的激素调节;CMP治疗PCOS的机制可能是通过调节卵巢组织3-β-HSD、CYP450的表达水平实现的。