海人酸致痫大鼠海马CA3区神经元线粒体损伤及caspase 3的表达

目的：观察海人酸（kanic acid,KA）诱导的癫痫持续状态（status epilepticus,SE）大鼠海马CA3区神经元线粒体超微结构的损伤及caspase 3表达的变化。方法：用KA诱导大鼠SE 2?h,分别于SE终止后第3、6、24?h取脑,用电镜观察海马CA3区线粒体的超微结构,同时用免疫组化方法检测相同部位caspase 3表达的变化。结果：SE终止后3?h可见到海马线粒体超微结构损伤,从肿胀到膜的完整性破裂。caspase 3的表达在SE后6?h开始增加,于第24小时明显增高。结论：在实验性SE模型中,海马线粒体的超微结构在早期即有损伤,caspase 3在线粒体损伤后数小时才出现表达,并于SE后24?h明显增高。     

海人酸致痫大鼠海马CA3区神经元线粒体超微结构损伤的观察

目的 观察海人酸（KA）诱导的癫痫持续状态（SE）大鼠海马CA3区线粒体超微结构的损伤。方法 选用成年雄性Wistar大鼠40只,随机分为KA组和生理盐水对照组（NS组）。用KA诱导大鼠SE持续2h,分别于SE终止后第1、3小时制作脑切片,采用光镜观察神经元的大体变化,并用电镜进一步观察线粒体的超微结构。结果 SE终止后3h,大鼠海马线粒体出现了不同程度的损伤：从嵴的肿胀到膜的崩解。结论 KA诱导的SE在早期即可导致海马神经元线粒体的损伤,这可能是SE后神经元损伤的关键环节。     

线粒体信号转导途径参与海人酸致痫大鼠海马神经元凋亡

目的:研究海人酸(KA)致痫大鼠海马神经元凋亡、线粒体功能和线粒体凋亡通路相关蛋白的表达,探讨线粒体凋亡通路在KA致痫大鼠海马神经元损伤中的作用. 方法:40只雄性SD大鼠随机分为2组,分别为模型组:32只,采用一侧海马注射KA(2μg/Kg)制备;等渗盐水对照组,8只,一侧海马注射等量的等渗盐水.模型组根据点燃时间又分为6h、1d、3d和7d,每组8只.采用高效液相色谱(HPLC)测定大鼠海马组织CA3区中谷氨酸(glutamic acid, Glu)的含量;流式细胞仪及原位末端标记法(TUNEL)测定神经元凋亡情况;JC-1荧光检测线粒体膜电位;Fluo-3荧光染色检测细胞质内Ca2+浓度;Western blot检测各组海马细胞内细胞色素C(cyctochrome C)和caspase-9表达. 结果:①模型组大鼠海马组织中Glu含量自KA注射后3d开始增加,第7d达到高峰.与对照组比,差异有显著性统计学意义.②KA注射6 h始海马神经元内Ca2+浓度升高,线粒体膜电位下降,凋亡细胞数增高,至第7d最为显著.③对照组大鼠海马细胞色素C和caspase-9均有一定量表达,模型组KA注射后6h,海马细胞色素C和caspase-9表达即显著增加,分别为对照组的1.78和2.14倍,与对照组比,差异有显著性统计学意义.至第7d达到高峰,分别为对照组的4.37和3.20倍,与对照组比,差异有显著性统计学意义. 结论:线粒体凋亡通路参与KA致痫大鼠海马神经元损伤.     

妥泰对红藻氨酸致痫大鼠模型海马和颞叶皮层神经细胞caspase-3表达的影响

目的观察红藻氨酸(KA)的致痫作用并探讨妥泰(TPM)对KA致痫大鼠模型海马和颞叶皮层caspase-3表达的影响。方法取21～30日龄SD大鼠60只,随机分为3组:对照组、模型组和观察组,每组20只。对照组给予生理盐水;模型组仪用KA制作癫痫模型;观察组用KA制作癫痫模型后,加用TPM治疗。观察癫痫大鼠的行为表现、脑电图表现和病理学表现。用免疫组织化学法显示各组大鼠脑切片海马和颞叶皮层caspase-3表达的变化,并用HPIAS-2000显微图像定量分析系统进行图像分析。结果致痫大鼠的行为、脑电图和病理学改变符合癫痫的典型表现。对照组海马和颞叶皮层内存在少量caspase-3基础表达,模型组和观察组注射TPM 6 h后可见海马和颞叶皮层有少量棕褐色caspase-3阳性神经元,3 d时明显增多并达到高峰。与对照组比较,模型组和观察组相同时间点海马和颞叶皮层caspase-3阳性细胞计数均增多(P<0.05),观察组海马和颞叶皮层caspase-3阳性神经元计数与模型组相同时间点比较均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组和观察组海马和颞叶皮层caspase-3阳性神经元平均光密度值测定结果显示各相同时间点与对照组相比较所得数值显著增高,且有统计学意义(P<0.05),观察组海马和颞叶皮层caspase-3阳性神经无平均光密度值低于模型组(P<0.05)。结论KA的致痫作用很强,妥泰能抑制癫痫大鼠海马和颢叶皮层caspase-3表达,对癫痫发作大鼠具有神经细胞保护作用。     

线粒体分裂蛋白抑制剂对匹鲁卡品致痫大鼠海马神经元的保护作用

目的：研究线粒体分裂蛋白抑制剂（Mdivi-1）对匹鲁卡品（PILO）致痫大鼠海马神经元的保护作用及其机制。方法：121只雄性SD大鼠随机分成对照（ CON）组、PILO组、PILO＋DMSO组和PILO＋Mdivi-1组,PILO组又分为癫痫持续状态（ SE）2 h、8 h、24 h和72 h 4个亚组。观察各组大鼠行为学改变,并分别采用Nissl染色法检测神经元损伤,比色法检测SOD活力及MDA含量,Western blot和RT-PCR法检测Drp1、细胞色素C（ Cyt C）、凋亡诱导因子（AIF）和cleaved-半胱天冬酶3（caspase-3）表达水平。结果：与PILO组（114．571±5．420）相比,PILO＋Mdivi-1组海马神经元数目增加[（157．429±6．183）;F ＝68．693,P ＜0．001]。与 PILO 组 SE 24 h 亚组[（113．429±4．980）,（6．102±0．193）]相比,PILO＋Mdivi-1组SOD活力增加[（138．571±3．380）;F＝21．779,P＜0．001], MDA含量减少[（4．353±0．231）;F＝27．226,P＜0．001]。与PILO组[（0．594±0．020）,（1．099±0．015）]相比, PILO＋Mdivi-1组线粒体Cyt C 增加[（0．897±0．015）;F＝296．177,P＜0．001],细胞质Cyt C 减少[（0．433±0．010）;F＝562．684,P＜0．001]。与PILO组[（0．878±0．037）,（1．465±0．076）]相比,PILO＋Mdivi-1组线粒体AIF增加[（1．279±0．051）;F＝59．298,P＜0．001],细胞核AIF减少[（0．896±0．044）;F＝46．424,P＜0．001]。与PILO组（0．587±0．192）相比,PILO ＋Mdivi-1组 cleaved caspase-3减少[（0．463±0．022）;F ＝40．500,P ＜0．001]。结论：Mdivi-1对癫痫大鼠海马神经元有保护作用,其机制可能与降低氧化应激,抑制Cyt C释放、AIF移位及caspase-3激活有关。     

锂-匹鲁卡品致痫大鼠杏仁核神经元损伤及Mg2+的脑保护作用

目的:观察锂-匹鲁卡品(LPC)致痫大鼠杏仁核神经元的形态学改变,并观察Mg2 的脑保护作用。方法:选用成年雄性Wistar大鼠75只,并随机分为LPC组、Mg2 组和生理盐水对照组。用LPC诱发癫痫持续状态(SE)3h,在痫性发作终止后第72h将动物处死。将大鼠脑组织制成切片,分别用光镜和电镜观察杏仁核神经元形态学改变。而Mg2 组大鼠在注射匹鲁卡品前腹腔内注射硫酸镁100mg/kg,其余处理同LPC组。结果:两组大鼠在第72h时杏仁核区均出现了嗜酸性神经元,但Mg2 组神经元损伤程度明显低于LPC组。结论:LPC诱导的SE激活了促进程序性细胞死亡的机制,导致杏仁核神经元坏死,而Mg2 对杏仁核神经元具有保护作用。     

海人酸致痫SD大鼠海马神经元树突棘的可塑性变化

目的 分析癫痫敏感形成期海马齿状回颗粒细胞和CA1区锥体细胞树突棘的可塑性变化特征,探讨树突可塑性在神经环路重组形态学机制中的作用。方法 本研究采用SD大鼠颈部皮下注射海人酸[KA,10 mg/（2mL·kg）]癫痫模型,对照组注射生理盐水。24只动物随机分成正常对照组（NS组）、癫痫发作3 d组（KA3d组）和癫痫发作7 d组（KA7d组）。癫痫动物发作达4级为造模成功,鼠脑经高尔基染色和火棉胶包埋与切片,在光镜水平检测海马齿状回分子层和CA1腔隙层树突棘的形态和密度。结果 KA3d组齿状回分子层内带和外带树突棘密度分别为（26.8±4.06）个/50 μm和（29.1±4.40）个/50 μm,显著高于对照组（P<0.05）;KA7d组分别为（30.7±6.78）个/50 μm和（32.8±8.59）个/50 μm,显著高于KA3d组（P<0.05）,其中KA3d和KA7d组无颈短棘密度均明显高于对照组,相反,KA3d组分子层内带有颈长棘密度未见显著变化,但其平均长度明显下降。KA7d组分子层内、外带有颈长棘密度明显高于对照组和KA3d组。齿状回分子层内带和外带的比较分析发现KA3d组齿状回分子层内带树突棘密度明显低于外带树突棘密度。KA7d组内、外带树突棘密度无明显差别,但外带的有颈长棘密度以及其在树突总数中的比例均显著高于内带。在海马CA1区腔隙层,KA3d组树突棘密度为（0.79±0.278）个/μm出现下降趋势,KA7d组树突棘密度为（0.69±0.313）个/μm明显低于对照组和KA3d组（P<0.05）。结论 海马结构内树突棘可塑性变化可能参与了癫痫敏感性形成的形态学机制。     

妥泰治疗癫痫的临床观察

目的观察及评价妥泰对各型癫痫的疗效及不良反应。方法对2002年2月~2004年10月在我院确诊的65例癫痫患者予妥泰添加或单药治疗,观察其疗效及不良反应,在完成20周初始研究后再作追踪随访1年以上。结果妥泰单药和添加治疗总有效率分别为85.7%和76.7%,对全身性强直-阵挛发作的疗效优于部分性发作,而复杂部分性发作优于单纯部分性发作。不良反应发生率单药治疗组仅为11.4%,添加治疗组为23.3%。结论妥泰是一种广谱、有效、安全的抗癫痫药,不良反应轻,对临床各型癫痫均有较好疗效,但治疗剂量应个体化。     

托吡酯对海人酸致癫痫状态大鼠海马caspase-3表达的影响

观察海人酸（KA）诱导的癫痫持续状态（SE）大鼠海马区caspase 3表达的变化及托吡酯（TPM）对其的影响。方法：用TPM预处理;用KA诱导成年雄性Wistar大鼠SE模型。分别于SE终止后第3、12、24、48?h取脑,行HE染色做海马普通病理检查,并用免疫组化方法检测caspase 3的表达变化。结果：嗜酸性神经元在SE后24～48?h最多;caspase 3的表达亦于SE后同一时点明显增加;TPM在SE后24和48?h?点明显降低caspase 3的表达。结论：在实验性SE模型中,TPM可降低海马caspase 3的表达,从而减轻SE后脑损伤。     

癫痫持续状态大鼠海马线粒体分裂、融合的变化

目的 探讨癫痫持续状态大鼠海马线粒体分裂、融合的变化。方法 将50只Wistar大鼠随机分为正常对照组和癫痫组,癫痫组分为癫痫持续状态后4、8、24和72h组,观察癫痫持续状态后不同时间点大鼠海马线粒体分裂、融合的变化。Western blotting、PCR分析海马线粒体中Drp1、hFis1、 Mfn1、Opa1的表达;免疫组化分析海马CA3区神经细胞Drp1、Opa1的表达。结果 Drp1、 hFis1在癫痫持续状态后4h时开始升高,24h达高峰,72h仍处于较高水平;Mfn1、Opa1在癫痫持续状态后4h时出现短暂的升高,随即表达下降,并于24h时达最低水平。癫痫持续状态后24h时,大鼠海马CA3区Drp1阳性神经元数目显著高于对照组(P＜0.05),Opa1阳性神经元数目显著低于对照组(P＜0.05)。结论 癫痫持续状态大鼠海马线粒体分裂、融合失衡,主要表现为线粒体分裂增强、线粒体融合抑制。     

大鼠癫癎持续状态后海马神经元凋亡的研究

目的：通过美解眠诱导鼠癫癎持续状态后观察海马神经元的细胞凋亡现象。　材料和方法：给ＳＤ大鼠腹腔注射美解眠（２０ ｍ ｇ／ｋｇ）,２４ ｈ 后在光镜和电镜下观察大鼠海马神经元的形态学改变,并以ＤＮＡ 末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测海马神经元的凋亡。　结果：ＳＤ大鼠注射美解眠后出现典型的癫癎发作,光镜和电镜下可观察到海马神经元有典型的细胞凋亡现象,包括细胞体皱缩、胞质浓缩、染色质凝聚成块状、有边集现象, 同时有少量凋亡小体形成。ＴＵＮＥＬ检测发现海马结构内可见ＴＵＮＥＬ染色阳性细胞,其分布不均匀,有区域性差异,以ＣＡ３ 区最为多见。致癎组海马ＣＡ３ 区ＴＵＮＥＬ阳性细胞数的平均百分率（７５．１４％ ）与对照组（９．４％ ）相比有极显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）。　结论：癫癎发作可诱导大鼠海马神经元发生凋亡。     

托吡酯对红藻氨酸致癫痫状态大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 观察托吡酯(topiramate,TPM)对红藻氨酸(kainic acid,KA)致癫痫持续状态(status epilepticus,SE)大鼠海马神经元凋亡的影响.方法 取大鼠120只,随机分为TPM组、KA组及生理盐水(NS)对照组,每组再分为四个小组,分别用于SE后3 、12 、24 和48 h四个时点.每小组10只大鼠.TPM组用TPM预处理.采用KA诱导大鼠SE.进行行为学评估、HE染色及TUNEL染色,并用免疫组化方法检测海马caspase-3的表达变化.结果 TPM组大鼠的癫痫发作迟于KA组.HE及TUNEL染色显示,TPM组大鼠海马的病理损伤轻于KA组.免疫组化结果显示,TPM组caspase-3的表达明显低于KA组.结论 TPM对KA诱导的SE发作具有抑制作用,并能显著降低海马caspase-3的表达,从而减轻癫痫所致的海马神经元损伤.     

他罗利姆对癫痫持续状态大鼠海马的影响及脑保护作用

目的研究免疫抑制剂他罗利姆（FK506）对癫痫持续状态（SE）大鼠海马组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的影响及其脑保护作用。方法随机将162只Wistar大鼠分为癫痫组、FK506干预组、对照组各54只。采用匹鲁卡品腹腔注射制作SE模型,FK506干预组在注射匹鲁卡品之前24、1?h 2次腹腔注射FK506,对照组注射等体积生理盐水;采用比色法和羟胺法分别检测海马组织中NO、MDA含量、NOS、SOD活性;采用免疫组化法检测海马组织神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的表达;采用HE染色观察神经元形态变化。结果与癫痫组相比,FK506干预组NO、MDA含量、NOS活性明显降低（P均＜0.01）,SOD活性在癫痫发作后12?h以内降低（P＜0.05）,在3?d之后升高（P＜0.01）;海马nNOS的表达降低（P＜0.01）,存活神经元增加。结论FK506可能通过抑制NOS/NO途径发挥抗癫痫和脑保护作用。     

大鼠癫癎持续状态中海马神经元bcl-2、bax、p53的表达

目的 :采用贝美格腹腔注射制作大鼠急性癫持续状态 ( SE)模型 ,观察海马神经元中 bcl- 2、bax、p5 3的表达。　方法 :通过将 SD大鼠脑海马切片行 bcl- 2、bax、p5 3的免疫组化染色 ,观察肿瘤相关基因在大鼠 SE模型海马中的作用。　结果 :bcl- 2在正常大鼠海马中不表达 ,发作高峰期在 CA 3区有弱表达 ;bax在正常大鼠海马中弱表达 ,在发作高峰期 CA3区强表达 ;p5 3(突变型 )在正常大鼠海马及 SE模型中均不表达。　结论 :急性癫持续状态可造成海马神经元的凋亡 ,其部位主要位于 CA 3、CA1区 ,而且肿瘤相关基因 bcl- 2、bax在 SE过程中发挥作用 ,而p5 3(突变型 )不发挥作用     

氯硝西泮治疗癫癎持续状态的临床疗效分析

目的　探讨氯硝西泮对癫持续状态的临床疗效。方法　 81例癫持续状态的患者分为两组 ,A组 38例 ,应用地西泮 +苯巴比妥联合治疗 ;B组 43例 ,单用氯硝西泮治疗。结果　A组总有效率为 71.1% ,B组总有效率为86.0 % ,A组与B组疗效有显著差异 (P <0 .0 1) ;且B组不良反应发生率明显低于A组 (P <0 .0 1)。结论　氯硝西泮可以考虑作为各类癫持续状态的首选用药 ,尤其是West综合征、Lennox -Gastaut综合征等难治性癫 ,氯硝西泮疗效更显     

丁苯酞对氯化锂-匹鲁卡品诱发的癫痫大鼠海马神经元损伤的作用

目的〓〖HTK〗探讨丁苯酞对颞叶癫痫大鼠海马神经元的保护作用。 〖HTW〗方法〓〖HTK〗随机将30只雄性成年Wistar大鼠分为丁苯酞组、癫痫组和空白对照组。丁苯酞组和癫痫组先分别给予丁苯酞80mg/kg、等量生理盐水腹腔注射,再分别给予氯化锂、匹鲁卡品建立癫痫模型,在癫痫发作终止后3、24h时将动物处死,分别取出海马在光镜和电镜下观察,并检测超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量。 〖HTW〗结果〓〖HTK〗丁苯酞组能明显延长癫痫发作的潜伏期,增加超氧化物歧化酶的活力（P＜0.01,P＜0.05）,降低丙二醛的含量（P＜0.05,P＜0.01）,细胞结构基本正常,但核仁有边聚、间隙肿胀,部分线粒体膜有断裂和嵴缺失现象。癫痫组细胞肿胀、破裂,神经元数目明显减少, 胞质中线粒体变形、肿胀, 线粒体嵴缺失。 〖HTW〗结论〓〖HTK〗丁苯酞能减轻颞叶癫痫对海马神经元造成的损伤,其作用机制可能与丁苯酞对神经元线粒体的保护有关。     

老年癫痫持续状态死亡相关危险因素的研究

正癫痫持续状态(status epilepticus,SE)是神经系统的急危重症,死亡率极高,老年期是最容易发生癫痫的年龄段之一。目前与SE死亡预测有关的研究大多以普通人群为研究对象,缺乏对老年人群的分析。目前我国已有癫痫持续状态严重程度评分量表(status epilepticus severity score,STESS)[1-2]用于预测成年患者癫痫持续状态的预后,但该量表在老年