噬菌体生物扩增法检测脓肿型颈部淋巴结结核患者脓液中结核分枝杆菌

目的探讨噬菌体生物扩增法在检测脓肿型颈部淋巴结结核患者脓液中结核分枝杆菌的临床应用价值,寻找一快速检测方法。方法采用噬菌体生物扩增技术对21例脓肿型颈部淋巴结结核患者的脓液标本进行检测,同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养。结果噬菌体生物扩增法阳性率为47.6%（10/21）,涂片抗酸染色阳性率为28.6%（6/21）,罗氏培养阳性率为42.8%（9/21）。检验所需时间：传统的罗氏培养法需8周,而噬菌体生物扩增法仅需2d。结论噬菌体生物扩增法检测颈淋巴结脓液中结核分枝杆菌阳性率高于传统方法,且耗时明显缩短。 关键词：颈部淋巴结结核;结核分枝杆菌;噬菌体生物扩增法     

淋巴结结核脓液中结核分枝杆菌的培养和药敏

目的：利用淋巴结穿刺和手术切除的淋巴结脓液进行结核菌的培养和药敏实验，寻求提高结核菌培养阳性率的方法以及淋巴结核菌的耐药性分析。方法：将穿刺和采取的脓液分别用直接接种法和2％H2SO4处理法接种于改良罗氏培养基上，观察生长情况，对生长的结核菌进行药敏实验。结果：用2％H2SO4处理法接种的脓液标本阳性率明显高于直接接种法。药敏实验敏感23例，敏感率54．8％，耐药19例。耐药率45．2％，耐药率较高。结论：利用2％H2S04处理可以提高结核分枝杆菌培养的阳性率。淋巴结核结核分枝杆菌培养的药敏情况说明，产生耐药的原因主要与用药不规范、化疗措施不得力有关。应加强规范管理；在一线药物耐药的情况下，应注意二、三线药物的应用。     

荧光定量聚合酶链反应技术检测痰结核分枝杆菌DNA及其临床应用研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(fluoreseenee quantitative PCR，FQ-PCR)技术在肺结核诊断中的临床价值。方法对144例活动性肺结核的痰及30例健康对照者的痰进行FQ-PCR检测，并与痰涂片检查法、改良罗氏培养法结果进行比较。结果FQ-PCR检测痰结核分枝杆菌阳性率、痰涂片抗酸检查法阳性率、改良罗氏培养法阳性率分别为61．1％(88／144)、51．4％(74／144)、55．6％(80／144)，以FQ-PCR检测痰结核分枝杆菌阳性率为最高，FQ-PCR检测特异性为100％。结论FQ-PCR技术检测痰结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性．该方法快速、准确．对肺结核的诊断有一定价值。     

BacT/ALERT 3D结核分支杆菌快速培养系统在脊柱结核诊断中的应用

目的 分析BacT/AIERT 3D法培养脊柱结核病灶标本的结果,探讨其在脊柱结核诊断中的价值.方法 对符合本实验要求的53例脊柱结核患者的43例进行手术治疗,术中收集结核肉芽肿、脓液及硬化骨作为标本,标本预处理后分别接种于三个BacT/ALERT 3D液体培养基和三个罗氏培养基进行培养;另10例患者行CT引导下脓肿或病椎穿刺.标本用BacT/ALERT 3D法培养,抗痨2周后术中取同样标本再用BacT/ALERT3D法培养.阳性者萋-尼抗酸染色镜检后,接种PNB和TCH培养基进行菌种鉴定.结果 43例患者BacT/ALERT 3D法培养阳性19例(人型结核杆菌为16例,牛型结核杆菌为3例),罗氏培养法阳性11例,阳性率分别为44%、25%,差异有统计学意义(P<0.005);阳性结果平均报告时间分别为16d和30d.其余10例患者入院即行CT引导下脓肿或病椎穿刺后BacT/ALERT 3D法培养,结果9例阳性,均为人型结核杆菌,阳性率90%,化疗2周后术中取同样标本经BacT/ALERT 3D法培养仅2例阳性,阳性率20%,化疗前后结核分枝杆菌BacT/ALERT 3D法培养阳性率差异有统计学意义(P<0.05).BacT/ALERT 3D法培养标本阳性率在结核肉芽肿(44%)、脓液(23%)和硬化骨(9%)差异有统计学意义(P<0.05).结论 BacT/ALERT 3D法是临床脊柱结核病原菌分离培养的较好方法,培养阳性率与培养物的取材时间、标本种类有直接关系.     

BACTECMGIT960培养及分子菌种鉴定技术在脊柱结构诊断中的应用

目的 探讨BACTECMGIT960系统，分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用价值。方法 对31例脊柱结核标本分别应用BACTECMGIT960及罗氏培养基培养，对所得分离株行IS986扩增及16SrRNAPCR-SSCP分析进行菌种鉴定，并与常规方法对照。结果 BACTECMGIT960系统，罗氏培养法分支杆菌培养阳性率分别为83.87%,61.29%，两者平均报告时间分别为11.3d,26.7d；分子菌种鉴定结果与常规方法一致。结论 BACTECMGIT960系统是临床脊柱结核病原菌分离培养的较好方法，快速培养与分子菌种鉴定联合应用可能是目前结核病临床细菌学诊断的较佳策略。     

荧光定量聚合酶链反应技术检测痰结核分枝杆菌DNA及其临床应用研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)技术在肺结核诊断中的临床价值。方法对144例活动性肺结核的痰及30例健康对照者的痰进行 FQ-PCR 检测,并与痰涂片检查法、改良罗氏培养法结果进行比较。结果 FQ-PCR 检测痰结核分枝杆菌阳性率、痰涂片抗酸检查法阳性率、改良罗氏培养法阳性率分别为61.1%(88/144)、51.4%(74/144)、55.6%(80/144),以 FQ-PCR 检测痰结核分枝杆菌阳性率为最高,FQ-PCR 检测特异性为100%。结论 FQ-PCR 技术检测痰结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性,该方法快速、准确,对肺结核的诊断有一定价值。     

结核分枝杆菌培养及初始耐药监测

目的：分析结核分枝杆菌的耐药情况,为结核病的治疗提供依据。方法180例痰涂片抗酸杆菌阳性肺结核患者的痰液标本使用改良酸性罗氏（ L-J）培养基进行培养。药物敏感试验采用绝对浓度法的间接法,分析其耐药性。结果罗氏培养阳性率为95.00％。171株结核杆菌耐药率46.8％,耐多药率为14.6％。结论黑龙江省结核病患者耐药情况比较严重。     

结核分枝杆菌荧光PCR试剂盒的研制及临床试验

目的：用荧光PCR(fluorescence PCR,F-PCR)方法研制结核分枝杆菌（TB）DNA检测试剂盒，通过临床试验评价其性能，并与其他方法进行比较。方法：F－PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法。由于采用完全闭管荧光检测，避免了PCR后处理导致的假阳性污染；又采用了荧光检测技术，可以提高检测的灵敏性。应用F－PCR检测了297份肺结核病人和249份非结核对照者的痰液标本，以改良罗氏培养法、金胺荧光染液涂片法、Abbott公司LCx试剂盒检测作为对照。结果：设计合成了TB F－PCR诊断试剂盒。检测阳性率49．1％，灵敏性89．2％，特异性98．8％，符合率93．6％。结论：F－PCR在灵敏上显著优于培养法和涂片法，与LCx试剂盒检测无显著差异。F－PCR试剂盒可以检测TB的真实感染情况，对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义。     

新型液体培养基用于结核分枝杆菌快速培养的研究

目的以新鲜椰子汁和马血清为基础成分,研制一种快速培养结核分枝杆菌的新型液体培养基。方法将300份肺结核患者痰液标本进行直接涂片镜检,按涂阳和涂阴标本配对接种在新型液体培养基和改良罗氏培养基上,比较两种培养基培养的阳性率和阳性结果出现的时间。结果在新型液体培养基与改良罗氏培养基上结核分枝杆菌培养总阳性率分别为36.0%、37.0%,直接涂片镜检阳性痰液标本在新型液体培养基与改良罗氏培养基培养阳性率分别为94.55%、96.36%,直接涂片镜检阴性的培养阳性率分别为2.1%、2.6%,组组各自比较差异均无显著性(P均>0.05);新型液体培养基平均(9.66±3.14)d出现阳性结果,而改良罗氏培养基平均(27.56±7.74)d出现阳性结果,两者差异有显著性(P<0.01)。结论新型液体培养基能快速培养出结核分枝杆菌,其制作方便,价格低廉,操作简单,适合于广大基层医疗机构使用。     

广州地区临床分离非结核分枝杆菌菌种鉴定及耐药结果分析

目的 分析广州地区临床分离的非结核分枝杆菌(NTM)的菌种鉴定结果及耐药情况.方法 用改良罗氏培养基培养法分离680例疑似结核病患者痰液,对确诊为NTM的38例,用传统生化反应进行菌种鉴定,采用以罗氏培养基为基础的绝对浓度法做NTM药物敏感试验.结果 38株NTM按Runyon分类法,检出感染菌种分布为Ⅰ群1株(2.6...