小鼠胚胎干细胞分化为精子细胞的研究进展

胚胎干细胞(ESCs)是一种具有分化发育为三个胚层组织细胞潜能的全能性细胞,哺乳动物的精子起源于原始生殖细胞(PGCs),ESCs可分化为PGCs,并进一步分化为精子细胞。通过在培养基中添加诱导分化因子(如维甲酸等)或与希望诱导分化的目的细胞(如Sertoli细胞等)共培养,并通过鉴别ESCs分化为生殖细胞的各阶段特异性基因标志物c-kit、VASA、DAZL、fragilis、miwi、mil1和mil2等,获取不同阶段的生殖细胞。鼠的ESCs已诱导出了不成熟的精子细胞,但到目前为止尚无成熟精子培养成功,且诱导分化的效率很低。     

睾丸/精子细胞特异表达的硫氧还蛋白研究进展

硫氧还蛋白(thioredoxins,Trx)是一组具有氧化还原活性的蛋白质,对维持和调节细胞的氧化还原内环境有着重要的作用。本综述集中讨论了四种仅在睾丸/精子细胞中特异表达的硫氧还蛋白Sptrx-1、Sptrx-2、Sptrx-3和SSP411,以及一种除了在睾丸组织中大量表达外,还在肺和其他具纤毛结构的组织中表达的硫氧还蛋白Txl-2的最新研究进展,并对它们潜在的应用前景进行了展望。     

雷公藤单体T4对大鼠变态期精子细胞核蛋白转换的影响

大鼠喂服雷公藤单体Ｔ４７周后，取睾丸分离长形精子细胞核，取附睾分离精子核，提取总碱性核蛋白（ＴＮＢＰ），经电泳扫描后分析，发现长形精子细胞核ＴＨ／ＲＰ（总组蛋白／大鼠精核蛋白）比值升高，糖核蛋白含量下降，附睾精子核碱性蛋白也发生类似的改变，表明睾丸变态期精子细胞组蛋白一精核蛋白取代反应受阻，进而导致附睾精子核蛋白异常，这可能是Ｔ４导致大鼠不育的重要原因。文中还对精核蛋白与生育力的关系予以讨论。     

中药二仙汤及其拆方对老年大鼠精子细胞和精子的亚微结构和SDH的作用

本文观察了二仙汤及其温肾药和泻火药两个拆方对老年(20月龄)大鼠睾丸精子细胞、精子的亚微结构,以及精子尾部中段琥珀酸脱氢酶(SDH)的作用。结果证明,老年对照组大鼠精子细胞和精子退化显著,精子细胞顶体形成障碍,高尔基体多消失;精子顶体薄窄,尾部中段线粒体鞘多变性、缩窄,SDH 反应颗粒减少,甚至消失。二仙汤及其拆方具有不同程度地改善老年大鼠精子细胞和精子的亚微结构,使SDH 反应颗粒增多。     

MTT法体外测定化疗药物对非小细胞肺癌的敏感性

目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血淋巴细胞(PBL)抗癌药敏试验与化疗疗效的相关性,为临床肿瘤个体化化疗提供依据。方法:应用MTT吸光度法测定30例非小细胞肺癌患者外周血标本对临床常用的6种化疗药物的敏感性或耐药性,比较其差异。结果:非小细胞肺癌化疗敏感性个体差异较大,各药物对淋巴细胞平均抑制率由高到低的顺序与临床一致,各用药方案间比较存在差异(P<0.05)。结论:PBL抗癌药敏试验有助于指导临床肿瘤个体化化疗和预测化疗疗效。     

一组外用杀精剂对人精子细胞化学的影响

本文选择已生育子女的25～35岁正常男子的精液标本,分成正常对照及分别经洗必泰(2mg/ml)、NP-9(0.25mg/ml)、MN-863(0.2mg/ml)、Ⅲ号原药(0.05mg/ml)和复方Ⅰ号(0.1mg/ml)处理的六组。用组织化学、免疫组织化学、荧光染色等方法分别显示精子DNA、RNA、磷脂、糖类,SDH、LDH、AP、ATPase、hCG、IgM、Y小体等成分,比较用药前后的变化,从而评价上述几种外用杀精剂的作用与机制。实验结果表明此组外用杀精剂不损害人的精子细胞核及DNA、RNA、磷脂以及Y小体的形态。洗必泰可破坏精子质膜的脂糖蛋白,明显干扰精子的多种酶活性;MN-863、Ⅲ号原药、复方Ⅰ号可损害精子质膜功能,干扰用能酶的活性;NP-9可损伤精子质膜的脂糖蛋白,干扰其用能与供能酶的活性。这组人精子细胞化学定位的方法,可有效地检测人精子的缺陷与损伤。     

人冷冻精液巴氏染色法的应用评价

目的:探讨人冷冻精液应用巴氏染色法的染色效果。方法:30例人精液标本冷冻保存后,冷冻精液涂片应用巴氏(Papanicolaou)染色法进行染色,观察精子和非精子细胞的染色效果,检测冷冻精子畸形率。应用透射电镜观察冷冻精子头部(n=8)超微结构的改变。结果:冷冻保存后的精子畸形率,与冷冻前的比较无统计学差异(P>0.05)。冷冻精子头、颈、尾部,各种形态类型精子以及非精子细胞的着色效果与新鲜精液的对比无明显不同。冷冻精液涂片后自然干燥所需的时间较长。透射电镜观察到冷冻精子头部浆膜及顶体发生肿胀和破损。结论:巴氏染色法可以应用于冷冻精液的涂片染色,实际应用时需注意冷冻精液含有甘油等的特点。     

小鼠精母细胞在体外分化为精子细胞

目的:探讨未成熟小鼠生精细胞在体外培养条件下的分化情况。方法:用支持细胞(TM4)条件培养液培养出生后14d的BALB/c小鼠睾丸细胞,对照组采用添加1%胎牛血清的MEM培养液维持细胞存活,在不同时段收获细胞,实时定量RT-PCR分析精子细胞特异性基因Tnp2表达的变化。结果:实时定量RT-PCR显示,在体内,Tnp2的表达随小鼠日龄增长而升高,与精子细胞发生过程同步;在睾丸细胞体外培养过程中,Tnp2的表达在TM4条件培养液培养d5显著升高(P<0.05),而对照组始终无变化。结论:在TM4条件培养液的作用下,小鼠精母细胞在体外分化为精子细胞。     

非糖尿病性巨大胎儿368例临床分析

目的 分析非糖尿病性巨大胎儿的相关危险因素,为临床预测巨大胎儿及选择恰当的分娩方式提供依据.方法 回顾性分析南京军区南京总医院2006年1月至2007年12月期间出生的368例非糖尿病性巨大胎儿的临床资料,分析孕母的年龄、身高、基础体重、孕周、孕产次、分娩时体重、孕期增重、宫高、腹围及胎儿的股骨长、双顶径、分娩方式等,并与新生儿出生体重进行相关及回归分析.结果 非糖尿病性巨大胎儿的发生率为13.23%(368/2781).基础体重、分娩时体重、孕期增重、宫高、腹围、双顶径、股骨长、宫高+腹围、双顶径+股骨长是产前诊断非糖尿病性巨大胎儿的相关因素,而宫高及双顶径+股骨长相关性最为显著.非糖尿病性巨大胎儿与正常体重儿分娩方式差异无统计学意义.结论 结合宫高及双顶径+股骨长能够提高非糖尿病性巨大胎儿的产前预测率.巨大胎儿并不是剖宫产的绝对指征.     

孕产妇和非孕产妇脑血管病发病的分析

本文以我院近５年来收住的年龄在２０￣４５岁之间的孕产妇５６０４例为观察组，随机抽样的同期同年龄组住院非孕产妇５６０４例为对照组。发现孕产妇脑血管病发病２６例，发病率０．４６％。非孕产妇脑血管病发病１５例，发病率０．２７％。两组比较有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。引起孕产妇较非孕产妇脑血管病发病升高的病种主要为产后上矢状窦血栓形成，其次为各种类型的脑出血及蛛网膜下腔出血。本文认为无论孕产妇或非孕产妇，     

精液细胞DNA倍体分析结合生精细胞检查鉴别梗阻性与非梗阻性无精子症

目的：拟通过比较梗阻（OA）和非梗阻性无精子（NOA）症患者精液细胞DNA倍体分析与细胞学检查结果的特点,以期建立一种无创的诊疗方案以鉴别OA与NOA。方法：NOA患者20例和OA患者10例,按照WHO方法进行精液分析诊断,获取其精液标本,液化后离心取沉淀物,1份采用体积分数70％冰乙醇重悬精液沉淀,4~C固定后用PI染色,采用流式细胞仪进行DNA倍体分析。同时,取另1份精液沉淀涂片,进行Diff-Quick染色和免疫细胞化学染色。结果：DNA倍体分析结果表明,20例NOA患者精液中均存在单倍体（1Y）、二倍体（2N）和四倍体（4N）细胞,其中2N细胞含量最高,约占71．25±8．73％。1N细胞的百分比含量为5．46±2．93％,4N细胞含量为3．28±2．54％。10例OA患者精液中有8例只存在2N细胞,含量为71．67±13．09％,未检测到1N和4N,2例未检测到各种倍体细胞。精液细胞学检查结果表明,20例NOA患者中有15例患者精液中可检测出生精细胞,5例患者精液中未检出生精细胞。10例OA患者精液中均未检出生精细胞,其中2例没有任何细胞。结论：精液细胞DNA倍体分析与细胞学检查作为2种无创的检查方法,均可作为评估患者生精功能的辅助诊疗手段,两者结合可作为鉴别OA和NOA的辅助诊断指标。     

弱精不育患者与正常生育能力者精浆蛋白质的双向电泳图谱分析

目的:探讨2-DE技术在人类正常与弱精不育者精浆全蛋白中筛选差异蛋白的应用。方法:先用IPG-DALT技术对12例弱精不育与5例正常精浆蛋白进行分离,银染后,经PDQUest2D比较二者间差异蛋白点。结果:在不育精浆中高丰度存在而正常精浆中低表达的有55个蛋白斑点(3个在正常缺失),在正常精浆中存在而在不育精浆中低表达的有43个(3个在不育缺失)。结论:成功建立了正常与弱精不育精浆蛋白的2-DE图谱并分析表达差异蛋白,为弱精症精浆差异表达蛋白的质谱鉴定奠定了基础。     

外阴鳞癌59例临床分析

目的:探讨外阴鳞癌的临床特征、手术方式的选择及预后情况。方法:对2006年2月—2012年10月在中国医科大学附属盛京医院进行手术治疗的59例外阴鳞癌患者进行回顾性分析。结果:59例患者中,不同病理分期和临床分期患者的生存率差异有统计学意义,ⅠA期患者预后最好;不同年龄组中,发病年龄45岁者预后最差;不同手术方式在随访患者中生存率差异有统计学意义。结论:外阴鳞癌的预后与发病年龄、肿瘤的部位、肿瘤的浸润深度及大小、病理类型、手术方式、术前术后是否辅助放化疗等多种因素有关,治疗应个体化。     

子宫内膜透明细胞癌24例临床分析

目的:探讨子宫内膜透明细胞癌的临床特点及治疗方法。方法:回顾性分析24例子宫内膜透明细胞癌患者的临床表现、病理特征和治疗结果。结果:24例患者确诊为子宫内膜透明细胞癌时的平均年龄57.5岁。术前诊刮的准确率为62.5%。单独化疗12例,放疗2例,孕激素治疗1例,放疗联合化疗7例,放疗或化疗联合孕激素治疗各1例。行彻底肿瘤切除术患者1例术后死亡,余患者平均随访时间29.3个月无复发。手术未切净的5例患者中1例失访,余复发。结论:子宫内膜透明细胞癌晚期病例多,发病年龄与子宫内膜样癌相仿,诊刮准确率低。治疗宜采取全面的手术病理分期、以铂类为主的化疗及盆腔、阴道放疗,预后恶劣。     

42例卵巢恶性生殖细胞肿瘤临床特征及预后分析

目的:探讨卵巢恶性生殖细胞肿瘤的临床特征与预后的关系。方法:收集我院2006年8月至2012年2月收治的42例卵巢恶性生殖细胞肿瘤的临床资料,分析其肿瘤类型、分期、治疗方案等预后相关因素,研究其临床特征与不良预后的关系。结果:42例卵巢恶性生殖细胞肿瘤包括混合性生殖细胞肿瘤16例(38.1%)、未成熟畸胎瘤12例(28.6%)、无性细胞瘤6例(14.3%),卵黄囊瘤4例(9.5%)、绒毛膜癌1例(2.4%)及胚胎癌1例(2.4%)等。42例患者全部进行手术治疗,其中30例在初次手术中保留了生育功能,34例在术后给予BEP方案(博来霉素+依托泊苷+顺铂)或BVP方案(博来霉素+长春新碱+顺铂)化疗。2年生存率97.5%(39/40),死亡1例(Ⅳ期混合性生殖细胞肿瘤),复发率37.5%(15/40),混合性生殖细胞肿瘤复发占66.7%(10/15);5年生存率88.2%(15/17),死亡2例(均为恶性混合性生殖细胞肿瘤)。不同病理分期、肿瘤直径、肿瘤类型和手术方式的5年生存率比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:保留生育功能手术及规范化的BEP或BVP方案化疗,5年总体生存率较高,但混合性生殖细胞肿瘤预后相对较差。卵巢恶性生殖细胞肿瘤的病理分期、肿瘤直径及肿瘤类型与生存率的关系还需进一步研究。     

切除颌下腺对大鼠生精细胞影响的流式细胞分析

颌下腺是表皮生长因子（ＥＧＦ）的主要分泌器官。本实验应用流式细胞术对大鼠切除颌下腺后３０和４８天的睾丸生精细胞ＤＮＡ含量进行了分析。结果表明：切除颌下腺４８天时，１Ｃ细胞群（精子细胞和精子）比例明显低于对照组（Ｐ＜０．０１），平均减少１２．２２％，３０天和４８天时２Ｃ细胞群（精原细胞和次级精母细胞等）比例明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），平均增加１４．３９％和２９．３１％，切除颌下腺３０天时对４Ｃ细胞群（初级精母细胞）的比例影响不大，但４８天时４Ｃ细胞群明显减少（Ｐ＜０．０１）。同时ＰＩ值明显降低（Ｐ＜０．０１）。提示切除颌下腺后导致体内ＥＧＦ缺乏，可影响生精过程中的多个阶段并延缓生精细胞的增殖。     

卵巢恶性生殖细胞肿瘤预后因素分析

目的:分析影响卵巢恶性生殖细胞肿瘤(MOGCT)预后的相关因素.方法:回顾性分析天津医科大学总医院和天津市人民医院1987年1月至2004年12月的65例MOGCT的临床和随访资料,探讨影响MOGCT预后的相关因素.结果:MOGCT总的2年和5年生存率分别为53.64%和51.85%,差异无统计学意义(P0.05).MOGCT的预后因素包括:肿瘤病理类型、FI.GO分期、腹水量和术后残存瘤灶直径.无性细胞瘤和未成熟畸胎瘤是预后较好的病理类型(P0.05),早期预后好于进展期(P0.01),腹水量100 ml(P0.05)和残存瘤灶直径≤2 cm(P0.01)具有较好预后.结论:应重视MOGCT初次治疗时的临床分期、病理类型和腹水量,施行彻底的减瘤术和规范的辅助化学治疗可改善预后,提高患者的生存率和生活质量.     

高效液相色谱法测定子宫内膜细胞释放的前列腺素F_(2α)

目的:建立测定子宫内膜细胞在缩宫素(OT)存在的条件下分泌PGF2的方法。方法:采用柱α前衍生法对荧光衍生化试剂4-溴甲基-6,7-二甲氧基香豆素(BDMC)与PGF2的反应条件进行研α究。探讨荧光产物的色谱分离条件。结果:建立了测定子宫内膜分泌的微量PGF2的方法,测定了αOT诱导的大鼠子宫内膜细胞产生的PGF2。结论:本方法灵敏,最小检测限可达0.1ng,精密度α高,重复性强,可用于细胞水平或其他生物样品中前列腺素F2的测定。α     

卵巢颗粒细胞瘤72例临床分析

目的 探讨卵巢颗粒细胞瘤的临床特点及预后相关因素。方法 总结７２例卵巢颗粒细胞瘤患者的临床资料,比较不同期别、不同原发肿瘤大小的卵巢颗粒细胞瘤患者应用不同方法治疗后的５年及１０年存活率。结果 卵巢颗粒细胞瘤患者的５年及１０年存活率随临床分期的增加而降低,但与原发肿瘤的大小无明显相关关系。Ｉ期病人应用不同治疗方法对存活率也无明显影响。结论 临床分期是影响卵巢颗粒细胞瘤患者预后的主要因素,Ｉ期患者术后