Ryanodine对离体大鼠心脏缺血—再灌注损伤的影响

了解经典的钙通道阻断剂维拉帕米和调节内钙释放的药物Ｒｙａｎｄｉｎｅ对心肌细胞内钙超载的影响。方法；通过离体大鼠心脏缺血－再灌注方法。结果：发现维拉帕米对钙超载无阻断作用，而高浓度Ｒｙａｎｄｉｎｅ能比较好的地阻断钙超载。     

蜂毒素对豚鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的测定蜂毒素引起的豚鼠心肌细胞内游离钙浓度变化。方法分离成年豚鼠心肌细胞，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光试剂，测定蜂毒素引起的心肌细胞内钙浓度变化。结果蜂毒素３．５×１０－１３ｍｏｌ／Ｌ，使心肌细胞内钙浓度增加，维拉帕米（１０－６ｍｏｌ／Ｌ作用５ｍｉｎ），未明显拮抗蜂毒素引起的细胞内钙增加。结论蜂毒素可促进细胞内钙浓度增加，可能与维拉帕米所阻断的钙通道无关。     

阿司匹林和维拉帕米对兔心肌缺血/再灌注损伤保护作用的超微结构研究

目的：应用离体兔心Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ灌注动物模型，研究阿司匹林和维拉帕米对心肌缺血／再灌注损伤的保护作用。方法：１４只兔随机分为对照组和实验组。离体兔心缺血４０ｍｉｎ后再灌注，分别取再灌注１５、３０、６０、３６０ｍｉｎ左室游离壁心肌，做超微结构观察。结果：实验组心肌超微结构改变轻，而对照组改变明显。结论：阿司匹林和维拉帕米对心肌缺血／再灌注损伤具有明显的保护作用。     

槲皮素对缺血再灌注大鼠心肌损伤的保护作用

采用大鼠心肌缺血再灌注模型 ,观察槲皮素对缺血再灌注心肌损伤的保护作用。实验大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、槲皮素组和维拉帕米组。观察槲皮素对各组大鼠血清肌酸磷酸激酶 (CPK)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)以及ATP酶的影响 ,并通过光镜及电镜观察病理学改变。结果表明 :槲皮素可显著降低CPK活性 ,升高GSH Px和ATP酶活性。提示 :槲皮素对缺血再灌注心肌具有保护作用 ,病理结果进一步证实了这一点。推测其机制可能与抗脂质过氧化反应及增强心肌的能量代谢、减轻钙超载有关     

吲哒帕胺,维拉帕米对心肌再灌注损伤保护作用的实验研究

目的：应用离体兔心Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌注模型,比较吲哒帕胺和维拉帕米对心肌再灌注损伤的保护作用,为临床应用提供实验依据。方法：２１只雄性家兔随机分为对照组、维拉帕米组和吲哒帕胺组;全心缺血４０ｍｉｎ后再灌注,分别取再灌注１５、３０、６０和３６０ｍｉｎ左室壁心肌标本,做超微结构和肌动蛋白（ａｃｔｉｎ）免疫组化观察。结果：对照组超微结构和ａｃｔｉｎ改变明显,而维拉帕米组和吲哒帕胺组改变轻微。结论：     

维拉帕米对缺血再灌注心肌细胞BCL-2基因蛋白表达的影响

目的：观察维拉帕米对缺血再灌注心肌细胞BCL－2基因蛋白的影响。从分子水平探讨维拉帕米对心肌缺血再灌注损伤发挥心肌保护作用的可能机制。方法：建立家兔心肌缺血再灌注模型，根据心肌缺血再灌注的不同时限对33只家兔进行分组，采用免疫组织化学法检测同一剂量维拉帕米（0．2mg/kg静脉注射）对缺血再灌注不同时限心肌细胞BCL－2基因蛋白的表达情况。结果：与假手术组和生理盐水组比较，维拉帕米能显著上调缺血再灌注心肌细胞BCL－2基因蛋白的表达（P＜0．001）。结论：维拉帕米对缺血再灌注心肌的保护机制可能是通过其促进缺血再灌注心肌细胞BCL－2基因蛋白的表达来实现的。     

维拉帕米对人单核巨噬细胞蛋白质、DNA、RNA合成的影响

目的：观察维拉帕米对人单核巨噬细胞ＤＮＡ、ＲＮＡ及蛋白质合成过程的影响。方法：维拉帕米与人单核巨噬细胞孵育２４ｈ或４ｄ，测定细胞３Ｈ－ＴｄＲ、３Ｈ－ＵＲ、３Ｈ－Ｌｅｕ掺入人单核巨噬细胞状态及细胞内蛋白质含量。结果：维拉帕米在低浓度时对ＤＮＡ、ＲＮＡ合成有抑制作用，呈浓度依赖性；高浓度时作用明显，对ＲＮＡ作用较ＤＮＡ显著（Ｐ＜０．０５）；对蛋白质合成在高浓度时有抑制作用。维拉帕米与成熟过程中人单核巨噬细胞作用４ｄ，细胞蛋白含量显著降低（Ｐ＜０．０５），并呈浓度依赖性。结论：此作用可能为维拉帕米抑制细胞生长及动脉粥样斑块形成逆转心肌肥厚的机制之一。     

利多卡因和维拉帕米对心肌缺血-再灌注性心律失常及血流动力学的干预作用

目的：探讨利多卡因和维拉帕米对在体SD大鼠心肌缺血-再灌注性心律失常（RA）及血流动力学的干预作用.方法：SD大鼠48只随机分为4组：假手术组,生理盐水（1.0mL/kg）处理组,利多卡因（10.0mg/kg）处理组,维拉帕米（2.0mg/kg）处理组.用丝线阻断左冠状动脉中段20min,在再灌注前2min经静脉分别给予生理盐水、利多卡因或维拉帕米.松开丝线实现再灌注20min.记录实验全过程中动物的左室收缩（舒张）压（LVSP/LVDP）、压力/时间微分（±dp/dt）以及标Ⅱ导联心电图.结果：比较再灌注20min后（30min）与再灌注开始时（10min）,药物干预对于LVSP和±dp/dtmax的影响具有统计学意义（P〈0.05,P〈0.05,P〈0.01）;而对LVDP的影响无统计学意义;药物干预对于QRS波群时程（DQRS）和ST段抬高平均值（MST）的影响具有统计学意义;药物干预对于HR和PRI的影响具有统计学意义（P〈0.01,P〈0.01）.结论：用利多卡因和维拉帕米对RA进行干预时,具有一定的抗心律失常和减少心肌耗氧量的作用：利多卡因可显著缩短DQRS,维拉帕米可显著减轻ST段抬高,并可减慢心率、减少心肌耗氧量;但是两者对心肌功能均有较大的影响,易造成血流动力学的紊乱.     

钌红、维拉帕米对去甲肾上腺素诱导的心肌c-fos、c-myc表达的影响

目的了解经典的钙通道阻断剂维拉帕米和肌浆网Ca2 释放抑制剂钌红对去甲肾上腺素(NE)诱导的心肌c-fos、c-myc基因表达的影响.方法通过离体心脏灌流,采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,测定左心室c-fos、c-myc表达水平.结果钌红明显降低NE诱导的c-fos、c-myc表达,维拉帕米部分阻断NE诱导的c-fos表达,但对c-myc基因表达无明显影响.结论 NE诱导的心肌c-fos、c-myc基因表达有赖于细胞内钙([Ca2 ];)的增高.     

雌二醇对离体大鼠心脏缺血——再灌注损伤的保护作用

目的 探讨雌二醇对心肌缺血——再灌注损伤的保护机制。方法 在离体大鼠心脏灌流模型上观察雌二醇对缺血——再灌注心脏组织钙超载和脂质过氧化影响。结果 雌二醇能改善心脏收缩功能，显著抑制缺血——再灌注损伤心肌脂质过氧化和钙超载。结论 雌二醇对缺血——再灌注损伤心肌具有保护作用，其机制与抑制脂质过氧化和钙超载有关。     

雷诺定受体与心律失常

雷诺定受体是心肌细胞内的钙释放通道，对心肌细胞内游离钙离子浓度有重要影响。在心脏缺血或肥大等病理过程中雷诺定受体的功能和数量也会发生明显变化，通常是数量减少但敏感性增加。交感神经过度兴奋会引起雷诺定受体过度磷酸化，使其敏感性异常增高。肌浆网(SR)内Ca^2 超载可引起SR在舒张期异常释放钙离子增加，导致钠钙交换及其内向电流加强，后者与钙震荡电流、早后除极、迟后除极、甚至尖端扭转型心律失常的产生有关，是导致心律失常的重要原因之一。     

胰岛素对钙超载心肌细胞葡萄糖代谢的影响

目的：探讨不同浓度胰岛素对钙超载心肌细胞葡萄糖摄取的量效关系.方法：采用伊屋诺霉素构建不同程度成年大鼠心肌细胞钙超载模型; 应用同位素示踪技术观察不同浓度（0,0.01,20U/L）胰岛素刺激大鼠心肌细胞的葡萄糖摄取效应,评价钙超载后心肌细胞的葡萄糖摄取与胰岛素剂量之间的关系.结果：心肌细胞活性比率分别为73.0±2.4,70.5±2.0（P〉0.05）.对照组心肌细胞静息[Ca2＋]i为（115±21）nmol/L,经伊屋诺霉素（1.0μmol/L）处理1h,实验组心肌细胞[Ca2＋]i为（376±29）nmol/L（P〈0.05）.对照组不同浓度的胰岛素（0,0.01,20U/L）刺激心肌细胞葡萄糖摄取30min,心肌细胞葡萄糖摄取分别为（18±9）μmol/（105cells.10min）,（32±6）μmol/（105cells.10min）,（54±10）μmol/（105cells.10min）,实验组不同浓度的胰岛素（0,0.01,20U/L）刺激心肌细胞葡萄糖摄取30min,心肌细胞葡萄糖摄取分别为（14±7）μmol/（105cells.10min）,（18±4）μmol/（105cells.10min）,（26±9）μmol/（105cells.10min）（组间P〈0.05）.结论：钙超载心肌细胞葡萄糖摄取能力降低,但保留了胰岛素的反应性.胰岛素能促进钙超载心肌细胞的葡萄糖摄取,并呈剂量依赖关系.     

NMDA受体和IP3受体介导NMDA诱导的小脑颗粒神经元内Ca2＋超载

目的探讨N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）诱导的小脑颗粒神经元（CGNs）钙超载与NMDA受体（NMDAR）及细胞内钙库受体三磷酸肌醇受体（IRR）和兰尼定受体（RyR）之间的关系。方法取出生后8dSD大鼠小脑进行颗粒神经元体外培养。用NMDA（100μmol／L）急性损伤神经元,在激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）扫描开始前30min,或扫描开始后4,9,14min分别加入NMDAR、IRR、RyR拮抗剂MK．80l、2-APB和DAN,检测神经元内Ca^2＋浓度的动态变化。结果MK-801预孵育神经元经NMDA急性刺激后,神经元内ca2’的荧光强度不再升高,NMDA刺激后加入MK-801,上升的ca^2＋水平立即下降,最终下降至基线水平;NMDA急性刺激2-APB预孵育神经元,神经元内ca^2＋的荧光强度升高,但升高幅度明显低于未经NMDA刺激组,NMDA刺激后加入2-APB,细胞内升高的Ca^2＋水平急剧下降,最终下降至接近基线水平;DAN预孵育的神经元经NMDA急性刺激后,胞内ca^2＋的荧光强度急剧升高,达到NMDA刺激组水平,NMDA刺激后加入DAN,神经元内ca^2＋水平无明显下降。结论NMDA诱导的神经元ca^2＋超载,主要由细胞膜钙通道NMDAR和细胞内钙释放通道IP3R介导,而细胞内钙释放通道RyR不起主导作用．     

钙超载大肠系膜血管平滑肌细胞钙离子稳态调节的改变

目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞内是否存在钙离子（Ｃａ＾２＋）稳态调节异常。方法 以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋批示剂,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,比较钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）与正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）静息态的胞浆与核内游离Ｃａ＾２＋水平（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ,〖Ｃａ＾２＋〗ｎ）,以及在多各药物刺激下Ｃａ＾２＋稳态调节的差异。结果 两种Ｖ     

急性肺损伤新生大鼠肺泡上皮细胞内钙离子变化的研究

目的:探讨钙超载在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)发病机制中的作用。方法:采用内毒素(LPS)腹腔注射的方法复制新生大鼠急性肺损伤(ALI)模型,应用荧光测定法检测肺上皮细胞〔Ca2+〕i的水平。结果:ALI组的肺上皮细胞〔Ca2+〕i随着病程的进展呈逐渐升高的趋势,2 h时开始〔Ca2+〕i已显著高于对照组(P<0.05),至8 h时达高峰,之后虽略有下降,但仍明显高于对照组(P<0.05)。结论:肺上皮细胞胞浆内钙超载是导致ALI肺上皮细胞变性坏死的重要机制。     

尼莫通对脑缺血神经元凋亡作用的实验研究

目的：观察钙超载与神经元凋亡的关系及钙通道阻滞的治疗作用。方法：采用大鼠全脑缺血模型，观察脑缺血／再灌流后突触体游离钙、神经元凋亡的变化及尼莫通对上述的影响。结果：脑缺血／再灌流可以导致突触体游离钙增加及神经元的凋亡，尼莫通可以阻止上述变化。结论：钙超载参与了脑缺血／再灌流诱导的神经元调亡，钙通道阻滞剂可以阻滞上述变化。     

粉防己碱改善维生素D3引起的钙超载大鼠的心肌顿抑

目的：探讨大鼠钙超 载心肌顿抑时心脏收缩功能的变化及粉防己碱(Tet)的保护作用。方法：将46只成年SD大鼠随机分成对照、心肌缺血、心肌顿抑、大剂量和小剂量Tet组，另10只 大鼠用于确定钙超载。给大鼠注射维生素 D3(Vit D3, 30万U/kg)和烟酸，16 d后检测 心肌细胞Ca2+浓度(［Ca2+］i)。确认达到钙超载标准后，结扎左前降支，至2 0 min心肌缺血 +60 min再灌注，动态监测dp/dtmax和Vmax，实 验结束后测定各组心肌［Ca2+］i。Tet组在注射Vit D3的同时及以后每日分别给予 Tet 62.2和93.6 μmol/kg，(灌胃），16 d后，致心肌缺血和再灌注，测定心肌收缩功能和 ［Ca2+］i 。结果：给Vit D3后第16天， ［Ca2+］i 较对照水平增加2.6倍［(146.8±10.8)对(368.5±22.6) nmol/L，(P<0.01)］；Tet组 ，分别为(210.8±16.4)和(198.6±15.3) nmol/L，明显低于钙超载组(P<0.01)。缺血 前钙超载组心脏收缩功能明显低于对照组(dp/dtmax和Vmax 分别 为对照组的76.6%和68.4%)。20 min心肌缺血致各组dp/dtmax和Vma x均明显下降(P<0.01)，以顿抑组和钙超载组最为明显。再灌注后心肌收缩功能逐步 恢复。在Tet组，各时间点dp/dtmax和Vmax均高于顿抑组和钙超 载组，大剂量时较小剂量时更为明显。在再灌注60 min后，顿抑组、钙超载组、小剂量和大 剂量Tet组dp/dtmax分别为对照组的49.7%、51.5%、71.0%和83.4%，V max分别为对照组的55.0%、49.8%、73.9%和77.5%。结论：Vit D 3引起钙超载大鼠心肌收缩功能减退，在钙超载基础上致心肌顿抑；在缺血阶段，心肌功 能受损害程度与单纯顿抑者相似，表明此时缺血比钙超载对心肌收缩功能的影响更大；长期 给予Tet可改善短暂心肌缺血所致的钙超载和心肌顿抑。     

褪黑素在大鼠离体心脏急性钙超载损伤中的作用

目的：观察褪黑素(melatonin,Mel)对大鼠离体心脏急性钙超载损伤的保护作用。方法：将32只大鼠随机 分为4组：对照组(Control)、褪黑素组(Mel)、钙反常组(calcium paradox,CaP)和Mel干预钙反常组(Mel+CaP)。大鼠离 体心脏行Langendorff灌流,建立钙反常模型;观察左室发展压、心肌梗死面积、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活性、细胞色素c及caspase-3蛋白的表达变化;HE染色观察心肌纤维形态学变化。结果：与Control组相比, CaP组心肌几乎全部梗死(P<0.01),冠状动脉流出液中LDH活性显著增加(P<0.01),心肌纤维排列紊乱,细胞色素c和 caspase-3蛋白表达均上调(P<0.01);Mel(10 μmol/L)干预钙反常组心脏损伤各项指标均明显降低(P<0.01)。结论：Mel可 明显减轻大鼠离体心脏急性钙超载诱导的损伤。     

猪活体脑片钙离子荧光强度的测定及对停循环后脑缺血损伤的评价

目的　通过应用激光共聚焦显微镜检测活体脑片Ca2 + 荧光强度来探讨停循环后脑损伤的机制。方法　将 16只小型幼猪分别经过单纯深低温停循环 (DHCA)或上腔静脉逆行灌注 (RCP)90min后复灌 12 0min。制备活体脑片 ,检测脑片Ca2 + 荧光强度 ,并进行组织病理和电子显微镜检查。结果　RCP组小脑Ca2 + 荧光强度灰度值为 9± 4 ,DHCA组为 32± 2 1,两者比较P <0 .0 0 1;视网膜Ca2 +荧光强度灰度值为 2 1± 14 ,DHCA组为 4 4± 2 1,两者比较P <0 .0 5。相关分析显示活体脑片Ca2 + 荧光强度与中重度嗜酸性变性有相关性 (r =0 .86 1,P <0 .0 5 )。结论　Ca2 + 超载参与了DHCA后神经细胞的损伤过程 ,RCP能明显减轻Ca2 + 超载 ,对脑组织起到保护作用     

脑缺血/再灌注神经元钙离子通道的研究进展

脑缺血/再灌注损伤主要与自由基过度形成、兴奋性氨基酸毒性作用、炎性反应、细胞内Ca2+超载及细胞凋亡等密切相关,其中Ca2+超载及其触发的一系列有害代谢反应是导致脑缺血/再灌注时神经元损伤和死亡的关键因素。该文通过总结生理情况下神经元胞内外的钙离子通道和缺血再灌注时神经元钙离子通道的变化,揭示脑缺血/再灌注时神经元钙超载的机制,为临床脑缺血类疾病的治疗提供新的靶点。