鲜地龙平喘活性蛋白的质量标准研究

为了探讨鲜地龙平喘活性蛋白的质量标准研究方法,以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术建立鲜地龙平喘活性蛋白的指纹图谱,以此为基础对平喘活性蛋白进行定性鉴别;采用BCA蛋白含量测定法制订鲜地龙平喘活性蛋白的含量标准。结果,完成了对鲜地龙平喘活性蛋白电泳指纹图谱的初步构建,以此对活性蛋白进行定性鉴别;对BCA蛋白定量法进行了考察,该方法精密度高,稳定性好,可以对平喘活性蛋白的含量进行测定。说明该方法简单,稳定,灵敏度高,可以作为鲜地龙平喘活性蛋白质量评价依据。     

正交试验优选地龙水提取工艺

目的:优选地龙的水提取工艺条件。方法:以次黄嘌呤含量为指标,HPLC测定指标成分含量,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察加水量、提取次数、提取时间对次黄嘌呤含量的影响,优选地龙的水提取工艺。结果:各因素对水提取工艺的影响顺序为提取次数>提取时间>加水量;最佳水提取工艺为地龙药材加10倍量水回流提取1次,提取时间1 h。结论:优选的水提取工艺稳定可行。     

响应曲面法优化鲜地龙可溶性蛋白提取工艺

目的优化鲜地龙中可溶性蛋白的提取工艺。方法冰浴超声提取法,采用响应曲面Box-Benhnken设计,考察搅碎时间、料液比、提取液的p H对可溶性蛋白得率的影响,对鲜地龙可溶性蛋白冰浴超声提取工艺进行优化。结果冰浴超声提取鲜地龙蛋白的最佳工艺条件为加入2倍量p H 7.46的缓冲液后搅碎256 s,再加入4.63倍的缓冲液冰浴超声15 min,此条件下蛋白质得率为21.01%。结论冰浴超声法简单、快速、高效,工艺稳定可行,适用于鲜地龙可溶性蛋白提取。     

正交设计优选地龙的提取工艺

目的优选地龙的最佳提取工艺。方法通过琼脂纤维蛋白平板法测量溶圈面积,优选出用水匀浆法作为地龙的提取方法;综合考虑得率和溶圈面积这两个指标,采用正交实验对地龙的水匀浆工艺条件进行优化。结果最佳工艺参数为:即加入5倍量水,浸渍2h,以10000r/min转速在40℃下匀浆6h。结论优选出的工艺稳定可行。     

涤痰平喘胶囊中挥发油提取研究

目的:确立涤痰平喘胶囊中烈香杜鹃挥发油的最佳提取工艺。方法:采用正交试验设计,以挥发油的量为指标进行筛选。结果:挥发油最佳提取工艺为:烈香杜鹃浸泡3h,加入10倍量水,提取6h。结论:该提取工艺合理可行、效率高,为工业化生产提供了依据。     

闪式提取法提取鲜地黄的工艺研究

目的：采用正交试验法,以梓醇及固体提取物含量为评价指标,优选鲜地黄闪式提取的最佳工艺。方法：采用四因素三水平设计试验与正交试验相结合的方法进行提取工艺的优选,采用RP—HPLC法进行含量测定。结果：确定了最佳提取工艺,即溶质与溶剂比为1:3,提取时间为3分钟,提取次数1次。结论：优选出的工艺快速,科学合理。 关键词：鲜地黄 闪式提取 正交试验 梓醇 固体干燥物     

五味地龙汤平喘作用研究

目的:探讨五味地龙汤对动物哮喘的作用。方法:采用组胺喷雾致豚鼠哮喘法,肺溢流法,豚鼠离体气管平滑肌过敏性收缩实验法,离体气管片法,豚鼠肺支气管灌流法进行试验。结果:五味地龙汤水煎液对喷入组胺致喘的豚鼠,能使其哮喘潜伏期显著延长(P<0.01),肺溢流量减少(P<0.01),能使豚鼠离体气管平滑肌过敏性收缩有非常显著的抑制作用(P<0.01),对给予组胺后的豚鼠离体气管片引起的收缩有非常显著的舒张作用(P<0.01),能使肺支气管灌流液流速加快,灌流量增加(P<0.01)。结论:五味地龙汤水煎液对由各种过敏介质引起的哮喘,有显著的抑制作用。这可能是因为其对在体、离体气管平滑肌均有松弛作用,并拮抗组胺等过敏介质对气道的炎性反应和具有激动体内β-受体和免疫系统,从而发挥其作用的。     

地龙中蛋白质的提取工艺研究

目的确定地龙中的蛋白质含量的最佳提取工艺。方法以地龙中的蛋白质含量为评价指标,采用考马斯亮兰法检测地龙中有效成分蛋白质含量,在确定地龙的最佳提取次数的基础上,选择三因素（浸泡时间、加水量、提取时间）,三水平的正交试验方法,并结合得膏率,优化地龙的提取工艺。结果地龙的最佳提取工艺条件是适量的地龙药材加10倍量的水,浸泡40min,煎煮3次,第1次90min,第2,第3次分别为60min。结论该工艺操作方法简单,提取率高,适宜于大批量生产。     

广地龙饮片炮制工艺研究

目的:优选广地龙饮片最佳炮制工艺。方法:采用正交试验法,以次黄嘌呤的含量为考察指标,对加水量,淘洗时间,干燥方式3个因素进行研究。结果:广地龙饮片的最佳炮制工艺为加5倍量的水,淘洗3 min,40℃烘干。淘洗时间对次黄嘌呤的含量有显著性差异,加水量和干燥方式对次黄嘌呤的含量影响不显著。结论:本研究对规范广地龙饮片炮制工艺具有一定意义。     

全蝎蝎毒蛋白的提取工艺研究

以蝎毒蛋白的含量为指标，用紫外分光光度法测定其含量，研究全蝎水煎煮、乙醇回流两种不同的提取工艺，采用正交设计法进行提取工艺条件的筛选，比较两种不同工艺各自最佳提取工艺条件，结果最佳的工艺条件为每次用4倍量（指药材量的倍量）50％的乙醇回流提取30min，反复提取3次。     

地龙抗血栓有效部位的提取方法初探

目的:考察地龙中抗血栓有效部位的提取方法。方法:分别用水和50%、70%、80%乙醇,渗漉,水提取、50%醇沉以及稀HCl和磷酸缓冲液提取物进行体外对兔血凝血酶原时间的影响和抗凝血酶作用试验。结果:从抗凝血试验看,地龙的乙醇渗漉液优于地龙的水提液。结论:以70%乙醇对地龙进行渗漉提取方法简便,适于工业化生产。     

银杏叶有效成分的提取工艺

目的:优选银杏叶中有效成分的提取工艺条件。方法:用HPLC法测定有效成分含量,采用正交试验法,以干浸膏收率、总黄酮醇苷及萜类内酯含量为考察指标。结果:银杏叶的最佳提取条件为:提取温度70℃,70%乙醇提取2次,每次2.0h,第1次加12倍量乙醇,第2次加8倍量乙醇。结论:含量测定方法准确,提取工艺稳定可行。     

柴胡总皂苷提取工艺的优化

目的:考察柴胡总皂苷提取工艺。方法:以柴胡总皂苷量为指标,采用单因素和正交试验优选柴胡总皂苷的最佳提取工艺。结果:柴胡总皂苷最佳提取工艺为柴胡粉末(40目)加入8倍量80%乙醇,调节pH 8,80℃加热回流提取2次,每次60 min。结论:结果表明,该工艺简单、可靠、重复性好,适用于工业生产。     

纤维蛋白酶谱检测蚯蚓纤溶酶组分

 目的建立鉴定蚯蚓纤溶酶粗酶液中活性组分的方法。方法根据蚯蚓纤溶酶能水解纤维蛋白的性质,建立了纤维蛋白-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Fibrin-SDS-PAGE),优化了电泳条件,电泳后酶所在部位为透明区带。结果分离胶中纤维蛋白终质量浓度为0.4×10^-3mg·L^-1,电泳后胶板用2.5% TritonX-100复性30min,PBS缓冲液(pH7.2)保温30min,考马斯亮蓝R-250染色,7%醋酸脱色,可以得到清晰的酶谱。结论该方法灵敏度高,用2μg样品,就能准确检测出粗酶液中所有纤溶酶组分。     

西洋参水溶性蛋白的提取工艺研究

目的:优化西洋参水溶性蛋白的最佳提取工艺。方法:采用单因素考察和L9(34)正交试验,以西洋参水溶性蛋白的提取率为考察指标,优化最优的提取工艺。结果:采用pH值为7的缓冲溶液,料液比(w/v)1∶15,浸提两次,每次12h为西洋参水溶性蛋白的最佳提取工艺。结论:优化得到的提取工艺合理,重复性良好,可为西洋参水溶性蛋白提取工艺的确定提供实验依据。     

冻干鲜鱼腥草超临界CO2流体萃取工艺和提取物GC-MS分析

目的：优选超临界CO2流体萃取冻干鲜鱼腥草提取物的工艺，分析冻干鲜鱼腥草提取物的组成。方法：以甲基正壬酮含量为指标，采用正交试验法对超临界CO2流体萃取冻干鲜鱼腥草提取物的条件进行了优选，并用GC-MS法对提取物成分进行分析。结果：最佳萃取工艺：萃取压力15000kPa，萃取温度35℃，萃取时间20min。鉴定了冻干鲜鱼腥草提取物中出38种成分，并测定了其相对含量。结论：该工艺合理，能够有效保证提取物的质量。     

正交试验优选胆木中异长春花苷内酰胺提取工艺

目的:优选胆木心材中异长春花苷内酰胺的提取工艺。方法:以异长春花苷内酰胺提取得率为评价指标,以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和提取次数为考察因素,通过正交试验选取最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺为提取所用乙醇浓度为70%,乙醇加入量为药材的22倍,提取时间为4 h,提取次数为3次。结论:该工艺稳定、合理、可行,可为工业化提取胆木中异长春花苷内酰胺提供理论依据。     

正交试验设计优化野葛藤中异黄酮的提取工艺

目的优选野葛藤中异黄酮的提取工艺。方法以葛藤异黄酮得率为评价指标,通过正交试验设计优化葛藤异黄酮的提取工艺,并对最佳提取工艺进行工艺验证。结果葛藤异黄酮的最佳提取工艺为:乙醇浓度为50%,料液比1:20,超声提取时间30min,超声温度为20℃,异黄酮的提取率可达3.86%。结论采用正交试验设计优化对葛藤异黄酮提取条件进行优化合理可行。     

L_(16)(4~5)正交实验优化鲜生姜黄酮类物质提取工艺

目的:选用不同单因素水平,通过正交实验,研究从鲜生姜中提取黄酮物质的工艺条件。方法:选用芦丁作为标准对照,采用回流提取法,以紫外光度法测定其含量,选取切片厚度、乙醇浓度、提取温度、料液比等进行正交实验的方法学考察,得到最佳工艺流程。结果:鲜生姜原料切片厚2 mm,乙醇浓度85%,浸提温度80℃,固液比1:5 g/mL,在此条件下黄酮的收率最高。     

正交实验法优选葛花解酲片中挥发油的提取工艺

目的确定葛花解酲片中挥发油的提取工艺路线。方法采用正交设计实验,以挥发油提取量为指标筛选提取工艺。结果提取最优工艺条件为:药材混合粉碎成40目,加8倍量水,浸泡4 h,回流提取8 h。结论按上述工艺条件提取葛花解酲片中挥发油较为合理。