大肠杆菌、金黄色葡萄球菌对利福定耐药与包膜屏障改变的关系

选用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及变形杆菌敏感株,经药物梯度平皿筛选得到耐药性突变株,测定细菌生长浊度变化。以利福定(RFD)或EDTA分别作用时,耐药菌的生长曲线不受影响,RFD和EDTA合用,则耐药菌的生长曲线受到明显抑制。以~3H-RFD分别掺入敏感菌及耐药菌,前者的药物掺入量明显高于后者。电镜观察见耐药菌菌体变得粗短,表面粗糙,外膜增厚,膜皱折增多。以上结果提示,细菌包膜屏障在耐药性产生中具有重要作用。     

大肠杆菌,金黄色葡萄球菌对利福定耐药与包膜屏障改变的关系

The Rifamdine (RFD) resistant strains were obtained from wild types of S. aureus NCTC 6571, E. coli NCTC 10418 and Proteus vulgaris by drug concentration gradient plate. The experiment indicated that the growth inhibition of resistant cells induced by synergism of EDTA acting with RFD. Such results did not occur effectively if EDTA or RFD was added separately. The amount of 3H-RFD incorporated into cells of susceptible and resistant strains of E. coli and S. aureus was compared. The amount of 3H-RFD incorporated into susceptible cells was much greater than that of the resistant strains in E. coli cells. Ultrastructure comparison of sensitive and resistant cells showed that the surface of resistant cells was coarser and shorter, the outer membrane thickened and electron density increased. These results have shown that there is a close relationship between the resistance of bacteria induced by RFD and the decrease in the permeability of cell envelope barrier to the drug.     

结核杆菌利福布汀耐药性测定临界药物浓度的初步研究

目的探讨应用改良罗氏培养基比例法测定结核杆菌利福布汀（rifabutin,RFB）耐药性的临界药物浓度,为该药物敏感性测定实验方法的建立提供基础依据。方法①依据利福布汀、利福平（rifampin,RFP）药效学、利福平药物敏感性实验方法及相关临床研究文献预设应用改良罗氏培养基比例法测定结核杆菌RFB耐药性的临界药物浓度。②根据预设浓度应用BACTECMGIT960系统分别对RFP敏感/RFB敏感、RFP耐药/RFB敏感、RFB耐药/RFB耐药三类结核分枝杆菌临床分离株进行最小抑菌浓度（MIC）测定,推断预设临界浓度的合理性。③按推断合理的预设临界浓度进行大样本量的临床验证。结果①对50株RFP耐药临床分离株在5、10、20、40 mg/L四个药物浓度水平进行RFB药物敏感性测试,设定20 mg/L为临界药物浓度。②10株RFP敏感/RFB敏感、30株RFP耐药/RFB敏感、10株RFP耐药/RFB耐药三类结核分枝杆菌临床分离株的MIC（mg/L）范围分别为0.02～0.10、0.20～0.40和0.80～1.40,其MIC值互不重迭,说明预设临界浓度具有较好的理论合理性。③对1401株临床分离结核杆菌株同时进行RFP、RFB药物敏感性测定,在343株RFP耐药株中119株对RFB敏感（占34.69%）,和有关临床研究报道结论相近;同时未发现RFB耐药株对RFP敏感。说明预设临床浓度具有较高的临床适用性。结论 20 mg/L可推荐作为改良罗氏培养基比例法测定结核杆菌利福布汀耐药性的临界药物浓度。     

利福定水溶液的稳定性研究简报

利福定即异丁基哌嗪力霉素,是一种人工半合成品,具有广谱抗菌作用,临床上主要用于治疗结核病和各型麻风病,也可用于其它敏感菌所致的感染。目前在临床上使用的剂型有片剂、胶囊剂、眼药水和长效眼用膜剂等。利福定眼药水的稳定性极差,在常温下贮存不久即变色,效价明显下降。加入抗氧剂维生素C,并     

细菌耐利福定与RNA多聚酶的关系

以药物梯度平皿筛选得到金黄色葡萄球菌NCTC6571、大肠杆菌NCTC10418及普通变形杆菌1065的耐利福定菌株。利福定能明显抑制~3H-尿苷掺入敏感菌株,而对耐药菌株的RNA合成无明显影响;利福定与利福平对标准RNA多聚酶活性的抑制随着药物剂量的增加而加强;提取及纯化RNA多聚酶,利福定能明显抑制敏感菌的酶活性,而对金黄色葡萄球菌NCTC6571与大肠杆菌NCTC10418耐药菌株的酶活性无明显影响。     

负载单宁酸的双层壳聚糖屏障膜的制备及其生物相容性的研究

目的 制备负载单宁酸的双层壳聚糖膜(CS@TA),测试其活性氧(ROS)清除能力、生物相容性及抗菌性能,研究其作为引导骨再生屏障膜的可行性。方法 采用自蒸发技术先制备出致密的单层壳聚糖(CS)膜,随后采用蒸发干燥、取向冷冻和冷冻干燥技术在单层CS膜上制备出多孔的CS层,从而得到双层CS膜,利用扫描电镜观察其微观结构。将制备好的CS双层膜先接枝4-羧基苯硼酸形成中间体,按不同比例接枝单宁酸(TA),使用傅里叶红外光谱仪(FITR)分析TA与CS双层膜的相互作用。通过1,1-二苯基-2苦基肼(DPPH)测试ROS清除能力,选取负载TA后ROS清除效率在90%以上的双层膜进行后续体外细胞实验,利用CCK-8及活死细胞染色测试其生物相容性,利用扫描电镜观察MC3T3-E1细胞在双层膜多孔面上的黏附情况,通过菌落计数测试其对金黄色葡萄球菌(E.coli)和大肠埃希菌(S.aureus)的抗菌性能。结果 CS@TA双层膜一面光滑致密,另一面粗糙疏松多孔,截面呈垂直薄膜方向的有序多孔结构,随着TA的加入,双层膜的ROS清除能力先迅速增加后缓慢稳定,CCK-8及活死细胞染色结果显示加入过多的TA会明显...     

抗菌肽LL-37对尿路上皮细胞跨膜屏障功能破坏的作用

目的 探索LL-37对膀胱尿路上皮细胞跨膜屏障功能破坏的具体作用,构建适于体外研究间质性膀胱炎（interstitial cystitis,IC）的细胞实验模型。方法 分别用不同浓度的LL-37处理人尿路上皮永生化细胞SVHUC-1,通过跨上皮电阻测量仪测量跨上皮细胞电阻,CCK-8检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期和钙离子浓度,RT-qPCR和WB检测葡萄糖胺聚糖（GAGs）关键成分硫酸乙酰肝素的表达水平。结果 体外细胞跨上皮电阻测量显示,100和200μg/mL LL-37可显著抑制细胞的跨上皮电阻,破坏SV-HUC-1细胞的跨膜屏障功能。CCK-8和PI染色流式细胞检测显示,100μg/mL以上的LL-37可显著降低SV-HUC-1细胞的增殖活力,提高SV-HUC-1细胞处于G0/G1期的比例（P <0.05）,提示细胞增值受到显著抑制。进一步流式细胞术检测SVHUC-1细胞中的钙离子浓度显示,LL-37处理后的尿路上皮细胞内钙离子浓度显著升高（P <0.05）,且增高量与LL-37浓度相关。RT-qPCR和WB检测证实经LL-37处理后SV-HUC-1细胞的G...     

琼脂糖/ε-PLL/CHA屏障膜的制备及其抑菌能力和生物性能评价

目的：制备琼脂糖/ε-聚赖氨酸（ε-PLL）/碳酸羟基磷灰石（CHA）新型牙周引导组织再生（GTR）屏障膜,并评价其生物相容性和抗菌性能。方法：首先采用水热法制备CHA,通过扫描电镜（SEM）和傅里叶红外光谱（FTIR）分析CHA的形态和构象;采用琼脂糖水凝胶包载CHA和ε-PLL制备屏障膜;流变仪检测屏障膜的机械性能;活细胞/死细胞（Live/Dead）染色检测生物相容性;抑菌环实验证实对金黄色葡萄球菌的抗菌性能。结果：SEM及FTIR分析表明成功合成中空柱状的CHA。CHA浓度的增加,显著增强其机械性能;Live/Dead染色结果显示屏障膜具有良好的生物相容性;在屏障膜周围可见明显的抑菌环。结论：成功制备琼脂糖/ε-PLL/CHA屏障膜,并证明其具有良好的生物相容性及抗菌性能。     

体外膜氧合再灌注猪心脏死亡供体后肠黏膜屏障功能的改变

目的:通过应用体外膜氧合技术（ECMO）再灌注猪心脏死亡供体腹腔器官,观察灌注过程中猪肠黏膜屏障功能的变化情况。方法: 选取巴马小型猪20头,建立马斯特里赫特（Maastricht）Ⅱ类猪心脏死亡模型,模型成功建立后,于腹主动脉和下腔静脉行ECMO插管,连接ECMO持续运行6 h。在ECMO运行过程中,持续观察猪小肠色泽、弹性及水肿情况,并于基础阶段、判定心脏死亡时、ECMO运行2 h、4 h及6 h时取血液标本检测内毒素、二胺氧化酶（DAO）及肠型脂肪酸结合蛋白（I-FABP）;切取猪小肠组织观察病理组织学变化。结果:血清学检测结果示,猪心脏死亡后,各项指标均比基础阶段显著升高（均P＜0.05）,ECMO运行至2 h时,血清内毒素、DAO和I-FABP分别为（0.305±0.034） EU/mL、（66.28±5.98）U/mL和（22.03±1.38）ng/mL,相比心脏死亡时均有所下降,内毒素和DAO下降更为显著（均P＜0.05）,I-FABP亦有所下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）,ECMO运行至4 h,血清内毒素、DAO和I-FABP分别为（0.243±0.021）EU/mL、（60.22±5.41）U/mL和（17.86±1.73）ng/mL,与运行ECMO 2 h相比均呈进一步下降趋势（均P＜0.05）,当ECMO运转至6 h时,血清内毒素、DAO和I-FABP分别为（0.251±0.023）EU/mL、（59.36±8.40）U/mL和（22.48±1.96）ng/mL,相比ECMO运行4 h,血清I-FABP水平明显上升（P＜0.05）,DAO、内毒素水平无明显差异。病理检查示,猪心脏死亡后,小肠绒毛部分脱落,黏膜腺体排列不规则,大量炎细胞浸润,随着ECMO的运行,肠壁血运逐渐恢复,猪小肠组织病理情况随时间逐渐好转,至ECMO运行4 h时,光镜下可见小肠绒毛偶见脱落,肠黏膜腺体排列大致规则,炎细胞浸润减轻,但ECMO继续运转至6 h时,小肠水肿严重,病理改变较前变差。结论:短期运行ECMO支持技术,对猪心脏死亡后肠黏膜屏障功能具体有一定的保护支持作用,随ECMO运行时间延长,可使肠黏膜屏障功能受到进一步损伤。     

沙棘茎皮醇粗提物抗肿瘤作用的初步实验研究(一)——对小鼠肿瘤H_(22)、S_(37)生长的影响

本文观察了陕西产沙棘茎皮醇粗提物对少鼠移植性肿瘤H_(22)、S_(37)生长的影响。台盼兰染色法提示:该提取物在体外对H_(22)有较强的杀伤作用.荷瘤小鼠口服提取物3g/kg日对H22细胞移植瘤的抑制率则为43.4%、51.0%、54.1%,疗效稳定;而对S_(37)移植瘤的抑制率则为7.3％、14.9％、20.5%疗效欠佳.实验证明:沙棘茎皮醇粗提物对动物实验性肿瘤有一定的抑制作用.     

聚合酶链反应对结核杆菌DNA重复序列的检测

本文用聚合酶链反应(PCR)检测结核杆菌(TB)DNA,在TB染色体DNA中的一个片段多次重复出现,将此片段作为靶DNA,用PCR技术进行扩增。引物的DNA核苷酸序列为5’CCT GCG AGC GTA GGC GTC GG3’和5’CTC GTC CAG CGC CGC TTC GG3’在反应中用94℃变性,68℃退火延伸,43个循环可将1fgTBDNA扩增到能通过凝胶电泳检测出其特异性产物,此产物在作为对照的其他细菌中不能检出,加入100ng人基因组DNA对检测效果无影响。本方法为快速、敏感、特异地检测临床标本中的TB打下了基础。     

手外伤伤口感染细菌分布及耐药性分析

目的：了解引起手外伤伤口感染的常见分离菌及耐药情况。方法：采用纸片扩散（KB）法对分离出的病原菌做药敏试验。结果：298株细菌中G-杆菌占62.75%,G＋球菌占33.9%,从药敏结果发现：G＋球菌中葡萄球菌对青霉素、复方新诺明、氨苄西林、阿奇霉素耐药率高达47.17%-94.44%,而肠球菌耐药率多数超过50%;G-杆菌中铜绿假单胞菌对氨苄西林、头孢曲松、头孢呋辛钠、耐药率〉50%,不动杆菌耐药率多数〉50%,大肠埃希菌耐药率相对较低。结论：手外伤伤口感染的常见分离菌为铜绿假单胞菌、凝固酶阴性葡萄球菌、洛菲不动杆菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肠球菌和大肠埃希菌,而且分离出的细菌存在严重耐药。     

细菌对苯噻唑力复霉素的耐药性与细菌膜屏障的关系

用EDTA处理对苯噻唑力复霉素耐药的大肠杆菌后,[~3H]-苯噻唑力复霉素掺入菌体的量增加,耐药菌对该药的敏感性提高,苯噻唑力复霉素抑制[~3H]-尿嘧啶核苷掺入菌体的作用增强。金色葡萄球菌和大肠杆菌的敏感菌株掺入[~3H]-苯噻唑力复霉素的量均明显高于耐药菌株。提示细菌对苯噻唑力复霉素的耐药性与细菌对该药的通透性下降有关。     

蛋白质能量营养不良小鼠腹腔巨噬细胞膜结构及吞噬功能的研究

喂小鼠去蛋白饲料造成小鼠蛋白质能量营养不良（ＰＥＭ），用扫描电镜（ＳＥＭ）和体外鸡红细胞吞噬试验观察其腹腔巨噬细胞（Ｍ）膜表面结构及吞噬功能变化。结果，随喂去蛋白饲料时间延长，小鼠体重下降，血清蛋白含量降低，Ｍ膜表面绒毛样凸起基本消失，Ｍ　的吞噬功能亦下降；改喂含１７％蛋白质的饲料后，其腹腔Ｍ　膜表面结构和吞噬功能均可逐步恢复正常．提示，蛋白质缺乏造成的ＰＥＭ直接导致了Ｍ　膜结构损伤和吞噬功能下降，但如及时补充蛋白质，这种损伤是可逆的．     

扁桃体摘除术后针刺合谷的止痛效果观察

将61例住院行扁桃体摘除术的患者随机分为观察组与对照组。观察组在术后1.0～1.5小时针刺双侧合谷穴,对照组在必要时予维生素片。结果:观察组的镇痛效果非常显著,与对照组比P<0.001;术后第一天白细胞计数及伤口白膜的形成与对照组比,均差异显著P<0.01,<0.05。表明针刺有镇痛、消炎及加速伤口愈合的作用。     

Ag－NOR分布形态和计数在淋巴结针吸细胞学诊断中的价值

对１２１例淋巴结针吸细胞涂片，进行银胶染色观察，将Ａｇ－ＮＯＲ分布形态分为五个类型，并复习有关文献。９４．１％良性病变，Ａｇ－ＮＯＲｓ均数≤２。孤立型分布仅见于良性病变，在恶性病变中未发现。９８．１％的恶性病变Ａｇ－ＮＯＲｓ均数≥２．１。Ａｇ－ＮＯＲ颗粒分布形态和平均数在细胞诊断中有价值。