溶血磷酯酸诱导白细胞介素13受体α2 mRNA表达并抑制胶原蛋白合成

目的探讨溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对人肺成纤维细胞(HFL-1)白细胞介素-13受体α2(IL-13Rα2)表达和Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,COLAⅠ)合成的影响。方法细胞培养,显微镜观察LPA对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,用RT-PCR检测LPA对HFL-1细胞IL-13Rα2 mRNA和COLA I mRNA表达的影响。用免疫组化方法检测LPA和白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)对HFL-1细胞COLA I蛋白表达的影响。图像分析RT-PCR电泳条带和免疫组化图像,统计学处理。结果①LPA诱导HFL-1细胞IL-13Rα2 mRNA的表达,并呈时间依赖性。②1μmol.L-1 LPA刺激HFL-1细胞,IL-13Rα2 mR-NA的表达增强。③LPA作用HFL-1细胞,对IL-13Rα1的表达无影响。④LPA抑制HFL-1细胞COLA I mRNA的表达,IL-13促进COLA I mRNA的表达,LPA+IL-13混合组COLA I mRNA表达水平比LPA组高,比IL-13组低。⑤免疫组化结果与RT-PCR结果一致。结论溶血磷脂酸诱导人肺成纤维细胞表达IL-13 Rα2 mRNA,并下调人肺成纤维细胞合成COLAⅠ。     

重组人白细胞介素-1受体拮抗剂对大鼠胶原性关节炎的治疗作用

目的　研究重组人白细胞介素 1受体拮抗剂 (recom binanthumaninterleukin1receptorantagonist, rhIL 1ra)对大鼠胶原性关节炎 (collagen inducedarthritis,CIA)的治疗作用。方法　SD大鼠随机分为 6组:正常对照组、模型组、rhIL 1ra3个剂量组和进口IL 1ra组;采用Ⅱ型胶原(CⅡ)乳剂皮内注射诱导大鼠CIA模型;每周测体重观察体重变化;足爪容积法测量大鼠足爪肿胀度;测定CⅡ的迟发性变态反应(DTH);ELISA法检测血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平;同时进行病理组织学的检查。结果　CIA大鼠在致炎d10,出现关节红、肿,体重减轻,血清抗CⅡ抗体水平升高,关节病理可见滑膜增生,炎性细胞浸润,血管翳形成,软骨和骨的破坏等。rhIL 1ra(7 5, 30, 120mg·kg-1 )和阳性对照组anakinra(120mg·kg-1 )皮下注射,连续 7d,能明显抑制CIA大鼠足肿胀;rhIL 1ra(30, 120mg·kg-1 )皮下注射,连续 7d,可以明显减轻CⅡ诱发的迟发性变态反应 (DTH);另外,rhIL 1ra也可明显降低CIA大鼠血清中抗CⅡ抗体的水平;病理学检查表明,rhIL 1ra大剂量能明显减轻CIA大鼠关节滑膜炎症和滑膜增生,减轻血管翳和软骨破坏。结论　rhIL 1ra对CIA具有治疗作用。     

白细胞介素4和白细胞介素13基因多态性对哮喘患儿IgE表达量的影响

目的:探讨白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-13(IL-13)基因多态性对哮喘患儿Ig E表达的影响。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)检测173例哮喘患儿及56例健康儿童的IL-4和IL-13基因限制性长度片段,及不同基因型患儿Ig E的表达水平。结果:哮喘患儿IL-4基因-589位点基因多态性和等位基因与健康对照儿童比较差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘患儿IL-13基因+1923位点基因多态性和等位基因与健康对照儿童比较差异有统计学意义(P<0.01)。IL-4基因-589和IL-13基因+1923位点T等位基因患儿Ig E水平显著高于C等位基因患儿(P<0.01)。结论:哮喘患儿IL-13基因多态性与健康儿童不同,IL-4基因-589位点和IL-13基因+1923T等位基因是导致哮喘患儿Ig E水平升高的可能原因。     

三氧化二砷对成纤维细胞的生长抑制及细胞周期的影响

目的探讨三氧化二砷(AS2O3)对成纤维细胞的增殖及细胞周期的影响。方法用含AS2O3浓度分别为0、2、4μmol/L的培养液分别作用于成纤维细胞,24 h和48 h后,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布。结果 AS2O3可显著抑制成纤维细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性(P<0.01);AS2O3可使细胞周期G0/G1期比例增加(P<0.01),G2/M期减少(P<0.01)。结论 AS2O3具有抑制成纤维细胞的增殖及阻止细胞周期进展的作用。     

白细胞介素4和13与哮喘的关系

支气管哮喘 (简称哮喘 )是多种炎症细胞包括肥大细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞等参与的一种气道慢性炎症 ,其特征是间歇性、可逆性的气道阻塞 ,吸入非特异性刺激物时气道反应性增高 ,是严重威胁公众健康的一种慢性变态反应性疾病。随着分子生物学技术的发展 ,哮喘的遗传学研究已成为国际热点。现认为哮喘是一种多基因遗传性疾病 ,是由一些基因与环境因素共同作用而致病 ,其遗传度为 70 %～80 %。细胞因子如IL4 (白细胞介素 4 )和IL13(白细胞介素 13)在其发病中起着重要的作用 ,现将国内外的研究的进展综述如下。1　IL4和哮喘IL4主要由TH2…     

白细胞介素-13诱导原癌基因c-myc表达的研究

目的:研究重组人白细胞介素-13(rhIL-13)诱导Dami细胞分化中c-myc表达。方法:Dami细胞20h无血清培养,rhIL-13分别作用不同时间,RT-PCR检测Dami细胞GPIIbmRNA,c-mycmRNA的表达。结果:①IL-13促进巨核细胞表面标志物GPIIbmRNA表达;②IL-13下调原癌基因c-mycmRNA。结论:白细胞介素-13诱导Dami细胞并抑制c-myc的表达。     

碱性成纤维细胞生长因子对干眼小鼠模型眼表白细胞介素-10和白细胞介素-1β蛋白表达的影响北大核心CSCD

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)对干眼小鼠模型眼表白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的影响。方法将30只BALB/c小鼠构建干眼小鼠模型,并将建模成功的25只小鼠分为模型组(n=8,16眼)、阳性对照组(n=8,16眼)和实验组(n=9,18眼),另选10只未给予任何处理的BALB/c小鼠作为正常组。实验组给予b FGF滴眼,每次5μL,每天3次,阳性对照组给予普拉洛芬滴眼,每次25μL,每天3次,模型组和正常组给予无菌生理盐水滴眼,连续干预5 d。观察小鼠干眼症状指标水平,用苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠眼球角膜组织病理变化;用过碘酸-希夫(PAS)染色法观察小鼠结膜杯状细胞数量;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠眼表组织中IL-10和IL-1β蛋白表达。结果干预后,实验组角膜荧光素钠染色评分、角膜炎症指数、泪膜破裂时间(BUT)和泪液分泌实验(SIt)分别为(10.22±2.06)分,0.09±0.02,(4.52±0.26)s,(5.26±0.52)mm/5 min,模型组分别为(11.02±2.25)分,0.52±0.06,(2.02±0.21)s,(4.00±0.32)mm/5 min,差异均有统计学意义(均P<0.01)。实验组和阳性对照组角膜上皮细胞完整、光滑,结膜穹窿部杯状细胞数量较模型组明显增多。实验组小鼠眼表组织中IL-10和IL-1β蛋白含量分别为(573.15±22.13),(174.25±12.36)μg·g^(-1),模型组分别为(236.48±41.28),(223.51±23.48)μg·g^(-1),差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 b FGF对小鼠干眼模型具有一定的治疗作用,可缓解干眼小鼠临床症状,抑制眼表鳞状上皮化生,其机制可能与其能够调节干眼眼表炎症反应有关。     

基因重组白细胞介素—2的研究开发

综述了重组白细胞介素-2(rIL-2)的理化性质、生物效应,以及研究开发,包括工程菌发酵、分离纯化、活性测定等工艺开发及质量控制的进展。     

左旋西替利嗪对咳嗽变异性哮喘患者血清白细胞介素13与白细胞介素18的影响

目的 探讨左旋西替利嗪对咳嗽变异性哮喘患者血清白细胞介素13（IL-13）与白细胞介素18（IL-18）的影响。方法70例咳嗽变异性哮喘患者随机分为35例用左旋西替利嗪治疗的治疗组，35例用氯苯那敏治疗的对照组。检测治疗前后IL-13与IL-18的变化。结果治疗组治疗后患者的咳嗽评分有明显改善。治疗组治疗后IL-13与IL-18分别为（46．7±17．3）ng／L和（145．2±27．1）ng/L，对照组分别为（98．5±30．7）μg／L和（179．6±30．5）μg／L，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论左旋西替利嗪可能通过改善IL-13与IL-18而改善咳嗽变异性哮喘患者的病情。     

重组人白细胞介素21表达条件的探讨

目的探讨重组人白细胞介素21工程菌诱导表达的最佳条件。方法用摇瓶发酵的方法探索不同诱导条件(诱导温度、诱导时间、接种量I、PTG浓度等)对目的蛋白质表达的影响。结果该工程菌表达目的蛋白质的最佳温度是42℃;高密度接种更有利于目的蛋白质的表达。结论建立了BL21/pET-30a(+)-IL21工程菌最佳诱导表达条件,为重组人白细胞介素21的制备奠定了基础。     

三氧化二砷对三阴性乳腺癌细胞增殖及凋亡的抑制作用

目的探讨三氧化二砷对人三阴性乳腺癌细胞HCC1937的抑制作用。方法体外培养人乳腺癌HCC1937细胞,利用MTT法及倒置荧光显微镜观察三氧化二砷对人乳腺癌HCC1937细胞生长的抑制作用。结果不同浓度的三氧化二砷均可抑制人乳腺癌HCC1937细胞的增殖,促进其凋亡。三氧化二砷20μg/m1对肿瘤细胞作用72h,其生长抑制率达80.51%。结论三氧化二砷可有效抑制人乳腺癌HCC1937细胞生长,且呈时间、剂量依赖关系。     

三氧化二砷对人胃癌细胞株癌相关基因表达

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对人胃癌细胞株癌相关基因的影响，探讨：以As2O3作用于体外培养的人胃癌细胞株，通过免疫组化技术对P53、Cyclin-D,PCNA基因编码蛋白的表达进行检测。结果：经As2O3作用的人胃癌细胞P53、Cyclin-D,PCNA基因编码蛋白表达减少，结论：初步证实As2O3具有下调P53、Cyclin-D,PCNA基因编码蛋白表达，抑制肿瘤的增殖和转移，从而具有抗肿瘤作用。     

白花丹醌和亚砷酸对白血病荷瘤小鼠作用的比较。

目的观察白花丹醌对白血病异种移植瘤的体内作用。方法用NB4细胞构建白血病小鼠模型,白花丹醌组(2mg/(kg.d)),亚砷酸组(4mg/(kg.d)),分别腹腔给药15d,计算抑瘤率,凋亡指数(AI)并进行病理组织学检查。结果白花丹醌组抑瘤率为40.49%(P<0.01),AI为(8.52±1.49)%(P<0.01),未出现明显的病理组织损伤。亚砷酸组则无明显的抑瘤作用,凋亡作用不明显(P>0.05),部分伴有心肌组织的损伤。结论 :白花丹醌具有抑制肿瘤生长,诱导凋亡的作用,可能成为白血病治疗的新选择。     

三氧化二砷对人大肠癌LoVo细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)在人大肠癌细胞株LoVo中的表达及三氧化二砷(As2O3)对其表达的影响.方法 应用实时定量PCR法和免疫细胞化学法检测As2O3干预前后LoVo结肠癌细胞中VEGF mRNA及VEGF蛋白表达.结果 LoVo大肠癌细胞表达VEGF,VEGF基因表达与蛋白表达呈正相关,且VEGF表达随着As2O3剂量的增加而下降.结论 VEGF在人结肠癌细胞LoVo中表达,As2O3可显著抑制VEGF的表达,呈剂量依赖性,表明As2O3具有抑制肿瘤血管生成的作用.     

Antitumor effect of arsenic trioxide in human K562 and K562/ADM cells by autophagy

Arsenic trioxide (As₂O₃) has been reported to have potent antitumor effects in vitro and in vivo by inducing cell death via cell cycle arrest and apoptosis in leukemia cells, but the mechanisms of As₂O₃-mediated cell death are not fully understood. In this study, we provided in vitro evidence that As₂O₃ was a potent inducer of autophagy in leukemia K562 and its drug-resistant line K562/ADM cells. As₂O₃ significantly activated autophagic cell death (programmed cell death type II) in leukemia cell lines. Numerous large cytoplasmic inclusions, abundant autophagic vacuoles, phagocytizing cytoplasm and organelles were observed in As₂O₃-treated cells using electron microscope. MDC-labeled autophagic vacuoles were observed by fluorescent inverted phase contrast microscopy and the enhanced MDC fluorescent staining was detected by flow cytometry in As₂O₃-treated cells. Furthermore, real-time quantitative RT-PCR revealed that the expression levels of Beclin-1 and LC3 genes, which play key roles in autophagy, increased in As₂O₃ treated samples than in controls, indicating that autophagy can potentially be involved in the antitumor properties of As₂O₃. The expression level of Bcl-2 gene, an anti-apoptotic molecule, decreased in As₂O₃ treated samples than in controls, suggesting that Bcl-2 may be involved in accumulating Beclin-1 and triggering autophagic cell death in As₂O₃-treated leukemia cells. Western blotting also showed that As₂O₃ up-regulated Beclin-1. Altogether, our data provide direct evidence that autophagic cell death is critical for the effects of As₂O₃ on acute myelogenous leukemia cells.     

三氧化二砷逆转乳腺癌细胞株MCF-7/ADM多药耐药的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)体外逆转人乳腺癌细胞多药耐药性的作用及机制。方法采用MTT法检测As2O3的细胞毒作用和处理前后耐药细胞对化疗药物的敏感性,用流式细胞仪检测细胞内阿霉素浓度,通过RT-RCR检测MDR1基因的表达。结果 As2O3在0.25mg/L以下剂量时对MCF-7和MCF-7/ADM耐药细胞株的抑制率均小于15%,半数抑制率(IC50)分别为1.01m/L和1.28mg/L,无细胞毒剂量0.2mg/L的As2O3能部分逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性。同时无细胞毒剂量0.2mg/L的As2O3能使MCF-7/ADM细胞内阿霉素浓度明显增加,MDR1表达下降。结论 As2O3具有体外部分逆转人乳腺癌细胞多药耐药性的作用,可能与增加细胞内药物积累、下调MDR1表达有关。     

三氧化二砷对人肺癌A549细胞凋亡及耐药基因表达的影响

目的研究三氧化二砷（As2O3）对人肺癌细胞株的诱导凋亡作用及对耐药基因LRP表达的影响。方法应用人肺腺癌A549细胞株,运用体外细胞培养法、MTT法、流式细胞术检测As2O3对人肺癌细胞株抑制及诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测LRP mRNA的表达。结果As2O3对人肺癌A549细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系。不同浓度的As2O3均可诱导凋亡。1．0μmol／L、3．0μmol／L的As2O3可下调LRPmRNA的表达。结论As2O3具有抑制肿瘤细胞生长及诱导细胞凋亡作用,其机制与下调LRPmRNA表达有密切关系。     

三氧化二砷对大肠癌LoVo细胞生长及Bcl-2、Bax表达的影响

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对人大肠癌细胞株LoVo中的生长及三氧化二砷对Bcl-2、Bax表达的影响.方法 采用不同浓度的As2O3处理LoVo细胞,MTT法测定细胞的生长抑制效应;免疫细胞化学法检测人结肠癌细胞LoVo中Bcl-2、Bax的表达.结果 MTT结果示As2O3对大肠癌LoVo细胞的生长有抑制作用,且有时间-剂量依赖性(P<0.05或P<0.01);免疫细胞化学法结果示As2O3可使LoVo细胞中Bcl-2表达下降,Bax表达升高(P<0.01).结论 三氧化二砷对大肠癌细胞生长有抑制作用,且呈时间、剂量依赖性;其机制可能与改变Bcl-2和Bax的表达水平有关.     

三氧化二砷与氟尿嘧啶、吉西他滨对胰腺癌细胞作用的对照研究

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对人胰腺癌细胞的抑制作用.方法 应用Cell Counting Kit-8法(CCK-8法)测定As2O3对人胰腺癌PC-3细胞株的抑制率,并与氟尿嘧啶(5-Fu)、吉西他滨(GEM)进行比较.结果 与5-Fu、GEM相比,As2O3抑瘤作用最强(P＜0.01或P＜0.05).结论 As2O3体外试验能有效抑制人胰腺癌PC-3细胞株的生长;As2O3对人胰腺癌PC-3细胞株生长的抑制作用强于5-Fu、GEM.As2O3较强的抗胰腺癌细胞能力可能与其广泛而独特的抗癌机制有关.