miR-17-5p调控PTEN对大鼠中动脉阻塞的神经保护作用研究

目的探究microRNA-17-5p(miR-17-5p)在中动脉阻塞(MCAO)中的神经保护作用及其可能机制。方法将60只清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(MCAO组)、MCAO+mimic组、MCAO+inhibitor组和MCAO+BPV组,每组12只。采用线栓法建立MCAO大鼠模型。建模24 h后,检测大鼠神经功能和脑组织含水量;HE染色观察大鼠脑组织病理学损伤;TUNEL染色检测大鼠脑组织神经元细胞凋亡情况;RT-PCR检测miR-17-5p和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)的mRNA表达水平,预测两者是否存在连续的结合位点;Western blot检测脑组织通路蛋白磷酸化水平。结果MCAO+mimic组和MCAO+BPV组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、神经细胞凋亡率、PTEN的mRNA和蛋白表达水平均低于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05);MCAO+mimic组和MCAO+BPV组脑组织病理学损伤明显改善,miR-17-5p和PTEN存在连续结合位点,而这2组的miR-17-5p表达水平、AKT和mTOR磷酸化水平高于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05);MCAO+inhibitor组神经功能评分、脑组织含水量、神经细胞凋亡率、PTEN的mRNA和蛋白表达水平高于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05);MCAO+inhibitor组脑组织病理学损伤加重,同时AKT和mTOR磷酸化水平低于MCAO组。结论miR-17-5p表达上调对MCAO大鼠神经具有保护作用,其功能发挥可能与介导调控PTEN信号通路相关。     

miR-142-3p通过调控Hmgb1抑制雨蛙素诱导的大鼠胰腺外分泌细胞系AR42J凋亡

目的 探讨miR-142-3p调控Hmgb1对大鼠胰腺外分泌细胞系AR42J凋亡的影响。方法 将AR42J细胞分为空白组(blank)、急性胰腺炎模型组(AP,100 nmol/L雨蛙素作用24 h),再分别用miR-142-3p mimics、 mimics NC、miR-142-3p inhibitor和inhibitor NC转染模型组细胞,记为miR-142-3p mimics组、 mimics NC组、miR-142-3p inhibitor组和inhibitor NC组。用RT-qPCR检测细胞中miR-142-3p表达;Western blot检测HMGB1、caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达;Hoechst染色测定细胞凋亡;流式细胞测量术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验明确miR-142-3p和Hmgb1的靶向关系。结果 与空白组相比,AP组中miR-142-3p表达水平显著下调(P<0.01),HMGB1、caspase-3蛋白表达量上调(P<0.05),Bax蛋白表达量显著上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量显著降低(P&l...     

miR-17-5p调控PTEN对大脑中动脉闭塞大鼠的神经保护作用

目的本文建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠,研究miR-17-5p(microRNA-17-5p)对模型大鼠的神经保护作用及其可能机制。方法大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组)、模型组(MCAO组)、MCAO+mimic组、MCAO+inhibitor组和MCAO+BPV组。采用线栓法建立MCAO大鼠模型。建模24 h后,检测大鼠脑含水量和神经功能;HE染色观察大鼠脑组织病理学改变;TUNEL染色检测大鼠脑组织神经元细胞凋亡情况;预测miR-17-5p和PTEN是否存在连续的结合位点,RT-PCR检测两者mRNA表达水平;Western blot检测脑组织中PTEN、AKT和哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)的磷酸化水平。结果 miR-17-5p和PTEN存在连续结合位点。与模型组比较,MCAO+mimic组和MCAO+BPV组大鼠神经功能评分、脑含水量、神经细胞凋亡率、PTEN的m RNA和蛋白表达水平均显著降低(P0.01),脑组织病理学损伤也明显改善,而miR-17-5p、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR表达水平显著增加(P0.01)。此外,MCAO+inhibitor组上述指标则正好相反(P0.05或P0.01)。结论 miR-17-5p表达上调对MCAO大鼠具有神经保护作用,其功能发挥可能与介导调控PTEN信号通路相关。     

针刺对脑缺血再灌注损伤模型大鼠海马细胞凋亡的影响

目的:探讨针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠海马区细胞凋亡的影响及机制。方法:SD大鼠共75只，随机分为假手术组(sham)、脑缺血再灌注损伤模型组(CIRI)和针刺治疗组(CIRI+AC),利用大脑中动脉栓塞法制备CIRI大鼠模型，CIRI+AC组大鼠接受针刺“大椎”、“水沟”、“百会”穴治疗。Garcia评分法检测大鼠神经功能，TTC染色法检测大鼠脑梗死面积，免疫组织化学染色检测海马区caspase-3阳性细胞数量，Western Blot检测海马区caspase-9表达，TUNEL检测细胞凋亡。结果:针刺前，CIRI组和CIRI+AC组神经功能评分较sham组显著降低(P<0.01);针刺24、72 h后，CIRI+AC组神经功能评分较CIRI组显著升高(P<0.01),脑梗死面积比缩小(P<0.05),患侧脑组织细胞凋亡率降低(P<0.01);与针刺24 h后比较，72 h后CIRI组患侧脑组织细胞凋亡率及海马区caspase-3阳性细胞数量增加(P<0.05),CIRI+AC组患侧脑组织细胞凋亡率及海马区caspase-3阳性细胞数量明显降低...     

辛伐他汀预处理对脑缺血再灌注损伤Bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨辛伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:随机将48只雄性SD大鼠分为4组:空白对照组、假手术组、缺血再灌注组和辛伐他汀预处理组。辛伐他汀预处理组在模型制备前用辛伐他汀20mg/kg连续灌胃10d,1次/d;假手术组及缺血再灌注组用相同体积的等渗盐水连续灌胃10d。以线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,于缺血2h再灌注24h后行5分制神经功能评分,并断头取脑分别测定脑梗死体积、凋亡细胞数及Bcl-2、Bax表达。结果:与空白对照组和假手术组比较,缺血再灌注组和辛伐他汀预处理组神经功能缺损较为严重,脑梗死体积增大,凋亡细胞数目增多,Bcl-2、Bax表达增加(均P0.01)。与缺血再灌注组相比,辛伐他汀预处理组神经功能有不同程度改善,脑梗死体积明显减小,凋亡细胞数及Bax表达降低,Bcl-2表达增高,比较差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:辛伐他汀预处理对大鼠脑缺血再灌注有神经保护作用,其作用机制可能与辛伐他汀上调脑组织中Bcl-2、下调Bax表达,抑制细胞凋亡有关。     

高血脂大鼠脑缺血再灌注损伤后Bcl-2和Bax的表达变化及灯盏乙素的影响

目的 观察高血脂大鼠缺血侧大脑皮质额叶内B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达变化,探讨灯盏乙素对高血脂大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。 方法 大鼠建立高血脂模型后,线栓法阻塞大脑中动脉建立脑缺血再灌注损伤模型,HE染色观察大脑皮质额叶的病理变化,免疫组织化学和免疫印迹法观察Bcl-2、Bax蛋白的表达变化,同时结合神经行为学评分和2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色观察大鼠的神经行为及脑梗死灶体积的变化。 结果 与假手术组相比,生理盐水组大鼠脑组织损伤加重,Bcl-2的表达明显减少,Bax的表达明显增高,同时大鼠的神经行为学评分和脑组织梗死灶体积明显增加（P<0.05）。与生理盐水组相比,灯盏乙素治疗组脑组织损伤减轻,Bcl-2的表达明显增多,Bax的表达明显减少,同时大鼠的神经行为学评分和脑组织梗死灶体积明显降低（P<0.05）。 结论 灯盏乙素对高血脂大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用可能是通过促进Bcl-2的表达,抑制Bax的表达实现的。     

杜仲水提物对脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响

目的 探索杜仲水提物对脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响。 方法 将 40 只大鼠随机分为对照 组、 模型组、 杜仲水提物组和 Ravoxertinib 组, 各 10 只。 HE 染色检测大鼠大脑皮质损伤、 TUNEL 染色检 测大鼠大脑皮质细胞凋亡、 ELISA 法检测氧化应激指标超氧化物歧化酶 ( SOD)、 丙二醛 (MDA) 和半胱 氨酸天冬氨酸蛋白酶 3 (Caspase-3) 水平; Western 印迹检测大鼠大脑皮质中 ERK1 / 2 信号通路。 结果 HE 染色结果显示, 对照组大鼠脑组织无明显病理变化, 模型组大鼠脑组织病理损伤显著增加 (P< 0. 05), 杜 仲水提物组和 Ravoxertinib 组大鼠脑组织病理损伤明显减轻 (P< 0. 05); 与对照组大鼠相比, 模型组大鼠神 经细胞凋亡率、 Caspase-3 和 MDA 水平、 p-ERK1 / 2 / ERK1 / 2 和 Bax 表达水平明显升高, SOD 水平明显降低 (P< 0. 05); 与模型组大鼠比较, 杜仲水提物组大鼠和 Ravoxertinib 组大鼠神经细胞凋亡率、 Caspase-3 和 MDA 水平、 p-ERK1 / 2 / ERK1 / 2 和 Bax 表达水平明显下降, SOD 含量明显上升 (P< 0. 05); 与杜仲水提物 组大鼠比较, Ravoxertinib 组大鼠上述指标无明显差异 (P > 0. 05)。 结论 杜仲水提物通过调控 ERK1 / 2 信 号通路, 改变大鼠脑组织神经细胞生物学行为, 调节氧化应激反应, 从而对脑梗死发挥治疗作用。     

针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马circRNA＿011989和circRNA＿009775表达

目的:观察针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠缺血侧海马组织circRNA＿011989和circRNA＿009775表达的影响。方法:以SD大鼠为受试对象,通过线栓法制备CIRI模型,通过针刺(AC)手段进行治疗。采用Garcia评分法对大鼠神经功能进行评定,TTC染色法检测脑梗死体积比,运用靶点预测网站预测circRNA＿011989、circRNA＿009775结合的miRNAs及对应mRNAs,并采用Cytoscape构建circRNA-miRNA-mRNA共表达网络,通过qRT-PCR法检测缺血侧海马区circRNA＿011989、circRNA＿009775、miR-466b-5p、miR-3065-3p、Rims1、Slc30a3的表达。结果:与CIRI组相比,CIRI+AC处理组大鼠Garcia评分明显增加(P<0.01),梗死区体积缩小,患侧海马区circRNA＿011989、circRNA＿009775、Rims1、Slc30a3表达上调(P<0.05,P<0.01),miR-466b-5p、miR-3065-3p表达下降(P<0.05)。...     

miR-150-5p抑制TLR-5/NF-κB p65信号通路对大脑中动脉阻塞模型大鼠的神经保护效应

文题释义： 缺血性脑梗死：临床常见的一种中枢神经系统疾病,是由于脑组织局部供血动脉血流的减少或停止,造成脑组织缺血、缺氧导致脑组织坏死,具有较高的死亡率和致残率,严重威胁人类的健康和生存质量。 微小RNA：是一类长度为18-25 nt的非编码单链小分子RNA,广泛存在于从病毒到人类的各种生物中,能够与mRNA互补结合调控蛋白编码基因的表达,与细胞的生物学行为密切相关。 背景：缺血性脑梗死的病变组织中发生炎症反应,且miR-150-5p表达明显下降,miR-150-5p是否经Toll样受体5/核因子κB途径抑制炎症因子释放并减轻缺血性脑梗死组织损伤尚不清楚。 目的：探讨微小RNA-150-5p(miR-150-5p)在大鼠缺血性脑梗死中的作用及初步机制。 方法：①构建大脑中动脉阻塞模型大鼠,建模后将大鼠分为5组：对照组、miR-150-5p agomir 组、agomir control、miR-150-5p antagomir组和antagomir control组;②对照组大鼠给予生理盐水脑室注射,后4组大鼠脑室分别给予miR150-5p agomir(miR150-5p激动剂)、agomir阴性对照、miR150-5p antagomir (miR150-5p抑制剂)和antagomir阴性对照;③干预7 d后进行神经功能缺损程度(mNNS)评分,磁共振检测法测量脑梗死体积,苏木精-伊红染色观察脑组织病理学变化,qRT-qPCR法、ELISA法和免疫印迹法检测分别检测脑组织中miR-150-5p、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Toll样受体5和核因子κB p65表达情况,通过检索生物信息学网站Targetscan预测miR-150-5p与Toll样受体5的结合位点,荧光素酶试验验证二者的靶向关系。 结果与结论：①与对照组比较,miR-150-5p agomir组大鼠神经功能损伤评分、脑组织中白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平及Toll样受体5、核因子κB p65蛋白表达明显降低(P < 0.05);miR-150-5p antagomir组生理评分及生化指标均明显升高(P < 0.05);②苏木精-伊红染色显示,对照组神经细胞排列紊乱、轮廓模糊不清,神经细胞明显变性坏死;上述病理变化在miR-150-5p agomir组明显减轻,而在miR-150-5p antagomir组中明显加重。而agomir control 组和antagomir control组与对照组各指标比较差异均无显著差异(P > 0.05);③TargerScan网站预测结果和荧光素酶报告基因分析显示,miR-150-5p与Toll样受体5存在靶向结合位点;④结果证实,miR-150-5p可抑制缺血所致脑损伤过程中Toll样受体5/核因子κB p65炎性信号通路,降低炎性反应,从而减轻神经功能损害,发挥保护作用。 ORCID: 0000-0003-4635-0842(谢媛媛) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

哈巴苷通过Wnt/β-catenin通路改善大鼠脑缺血再灌注损伤

目的 探究哈巴苷干预大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及其对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 18只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和哈巴苷干预组，每组6只，对各组大鼠进行神经功能评估。再灌注7d后，TTC染色法检测大鼠脑梗死体积；干湿重法检测大鼠脑组织含水量；TUNEL染色检测大鼠脑组织神经细胞凋亡；荧光探针检测大鼠脑组织神经细胞ROS水平；Western blot检测大鼠脑组织β-catenin和active β-catenin表达水平。结果 与对照组相比，模型组大鼠神经功能评分下降，脑梗死体积和脑含水量增加。加入哈巴苷干预后，大鼠神经功能评分提高，脑梗死体积减小，脑水肿减轻。与对照组相比，模型组大鼠神经细胞凋亡率增加，活性氧水平增加；加入哈巴苷干预后，大鼠神经细胞凋亡率下降，活性氧释放减少。与对照组相比，模型组大鼠β-catenin和active β-catenin表达水平提高，加入哈巴苷后其表达水平进一步升高，Wnt/β-catenin信号通路被激活。结论 哈巴苷能够通过激活Wnt/β-catenin信号通路减轻缺血再灌注导致的大鼠脑损伤。     

辛伐他汀对大鼠脑出血后热休克蛋白70及细胞凋亡的影响

目的:观察辛伐他汀对大鼠脑出血模型血肿周围热休克蛋白70(HSP70)及细胞凋亡的影响。方法:应用Ⅶ型胶原酶诱导法建立脑出血大鼠模型,72只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、脑出血组(ICH组)、辛伐他汀组(SIM组)。分别于6、12、24、48 h对各组大鼠进行神经功能评分后处死留取脑组织,采用干/湿重法检测脑组织含水量;免疫组织化学法检测HSP70、Bax和Bcl-2阳性产物的分布情况;Western Blot检测HSP70、Bax和Bcl-2蛋白表达量,并计算Bcl-2/Bax的比值。结果:与假手术组相比,脑出血组大鼠脑组织含水量及神经功能评分增加(P0.05),血肿周围HSP70、Bax和Bcl-2表达明显上调(P0.05),且HSP70、Bax和Bcl-2三种蛋白的表达高峰分别出现在48 h、24 h及12 h,Bcl-2/Bax比值降低。与脑出血组相比,辛伐他汀治疗组脑组织含水量与神经功能评分显著降低(P0.05),血肿周围HSP70和Bcl-2表达进一步上调(P0.05),而Bax表达下调(P0.05),但三种蛋白的表达趋势未发生改变,Bcl-2/Bax比值增加。结论:辛伐他汀可以促进脑水肿及神经功能的恢复,其可能通过增加血肿周围HSP70表达,抑制脑组织细胞凋亡而发挥神经保护作用。     

虫草素对大脑中动脉局灶性脑缺血模型大鼠氧化应激和脑损伤的影响

目的　研究虫草素对大脑中动脉局灶性脑缺血模型大鼠氧化应激指标和脑组织Caspase-3和p53表达的影响。 方法　首先，给药组大鼠每天分别腹腔注射虫草素5、10、20 mg/kg，连续10 d；然后，采用改良Zea Longa线栓法制备大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型；造模24 h后，盲法进行神经功能评分，称重法检测脑含水量，HE染色观察脑组织病理损伤，Tunnel染色检测脑细胞凋亡，RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Caspase-3和p53 mRNA表达，Western blotting检测Bcl-2、Bax、Caspase-3和p53蛋白表达，试剂盒检测SOD，MDA，GSH水平。 结果　给药组与MCAO组相比，神经功能评分显著降低，脑含水量显著减少，细胞损伤减轻，细胞凋亡率显著减少，Bax mRNA及蛋白表达显著下调，Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著上调，MDA含量显著下降，SOD和GSH含量显著上升，Caspase-3和p53 mRNA及蛋白表达显著下调，且这些效果随着虫草素给药量的增加更加显著。 结论　虫草素能够缓解大脑中动脉局灶性脑缺血引起的神经功能障碍和降低脑缺血引起的脑含水量升高，并能抑制大脑中动脉局灶性脑缺血模型大鼠氧化应激和细胞凋亡，从而减缓大脑中动脉局灶性脑缺血造成的损伤。     

敲低miR-34c-5p抑制低氧诱导的大鼠骨髓间充质干细胞的凋亡

目的 探讨敲低miR-34c-5p对提高骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)存活率的作用。方法 将大鼠BM-MSCs分为常氧组(normoxia组)、低氧组(hypoxia组)、常氧抑制剂阴性对照组(normoxia inhibitor NC组)、低氧抑制剂阴性对照组(hypoxia inhibitor NC组)、常氧微RNA(miR)抑制剂组(normoxia miR inhibitor组)和低氧miR抑制剂组(hypoxia inhibitor miR组);Lipofectamine^TM2000将miR-34c-5p inhibitor转染至BM-MSCs细胞;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA检测miR-34c-5p、IGF、HGF、bFGF和VEGF表达;流式细胞测量术和TUNEL检测细胞凋亡,Western blot检测cleaved caspase-3,-9,Bcl-2和Bax蛋白水平;生化试剂盒检测ATP/ADP。流式细胞测量术检测细胞摄取葡萄糖能力。结果 与hypoxia inhibitor NC组相比,敲低miR-34c-5p可明显抑...     

高脂血症大鼠脑缺血/再灌注后p38 MAPK活化及对Bax和Bcl-2表达的影响

目的 检测高脂血症大鼠脑缺血/再灌注(I/R)损伤后大脑皮质内磷酸化p38 MAPK (p-p38 MAPK)、Bax和Bcl-2表达变化，及SB203580对p-p38 MAPK、Bax和Bcl-2表达的影响，研究在高脂血症脑I/R损伤中p38 MAPK活化对Bax和Bcl-2表达的影响。方法 大鼠高脂血症模型建立后，将其随机分为3组，假手术组(sham)、手术组(I/R)、SB203580处理组(SB+I/R),每组10只。线栓法建立左侧大脑中动脉栓塞I/R模型，神经行为学评分观察大鼠神经行为损伤症状，2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色显示脑梗死灶，TUNEL染色观察凋亡细胞，免疫组织化学法分析p-p38 MAPK、Bax和Bcl-2相对表达水平。结果 与sham组比较，I/R组大鼠脑梗死体积百分比、细胞凋亡指数和神经行为学评分均显著升高，且p-p38 MAPK、Bax表达明显增高，Bcl-2表达明显降低，差异均具有统计学意义(P<0.05)。与I/R组比较，SB+I/R组大鼠脑组织损伤减轻，梗死灶明显缩小，细胞凋亡指数明显降低，p-p38 MAPK表达明显降低，Ba...     

miR-214-5p靶向PAK4对缺血再灌注大鼠的心肌损伤和免疫反应的调节作用

目的:探讨微小RNA-214-5p(miR-214-5p)靶向p21活化蛋白激酶4(PAK4)对缺血再灌注(I/R)大鼠的心肌损伤和免疫反应的作用。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组、I/R组、Ad-Scramble组和Ad-miR-214组(n=9)。在大鼠左心室前壁6个不同的位点注入腺病毒;4 d后,缝合左前部下行冠状动脉构建I/R模型。RT-qPCR检测miR-214的表达水平,HE染色观察心肌损伤,ELISA检测心肌损伤标志物(CK-MB、Mb和cTnI)和炎症因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)的水平,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,试剂盒检测MDA含量和SOD活性,基因软件预测靶基因并通过双萤光素酶报告验证,Western blot检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax、PAK4、p-Akt和p-mTOR表达水平。结果:miR-214在I/R大鼠心肌细胞中低表达(P<0.01);miR-214-5p过表达减轻I/R大鼠心肌损伤程度,下调CK-MB、Mb和cTnI表达,降低心肌细胞凋亡率,上调Bcl-2表达,下调Bax、caspase-3和caspase-9表达,提高SOD活性,降低MDA、IL-6、IL-1β和TNF-α的含量(P<0.01);miR-214-5p与PAK4在3’-UTR存在结合位点,miR-214-5p过表达上调PAK4、p-Akt和p-mTOR表达(P<0.01)。结论:miR-214-5p过表达靶向PAK4减轻I/R大鼠的心肌损伤,并抑制心肌细胞凋亡、氧化应激反应和炎症反应,同时激活PI3K/Akt/mTOR通路。     

miR-24对肺癌A549细胞化疗敏感性的影响

目的:探究微小RNA(miR)-24对肺癌细胞A549化疗敏感性的影响及可能的作用机制。方法:Real-time PCR实验检测肺腺癌细胞系A549及肺腺癌耐药细胞株A549/DDP中miR-24的表达情况。转染miR-24抑制序列(miR-24 inhibitor)下调A549/DDP细胞中的miR-24后,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、细胞色素C(Cyt C)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和P53的蛋白水平。双荧光素酶报告基因实验预测及验证miR-24可能的靶基因。结果:耐药细胞株A549/DDP中miR-24的表达水平明显高于A549细胞(P0.05)。miR-24 inhibitor可诱导肺腺癌耐药细胞株A549/DDP的凋亡,增加细胞对顺铂的敏感性;此外还可下调Bcl-2/Bax比值,同时上调P53、p-ERK、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3及Cyt C的蛋白水平。而应用ERK特异性抑制剂U0126可部分恢复miR-24 inhibitor转染的细胞活力。生物信息学分析显示p53是miR-24的可能作用靶点基因,在A549/DDP细胞中共转染miR-24 inhibitor和P53 siRNA可部分逆转miR-24 inhibitor对细胞活力的影响。结论:下调肺腺癌耐药细胞株A549/DDP中miR-24的表达可增加细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与靶向p53基因同时激活ERK/P53信号通路后促进细胞经线粒体途径的凋亡有关。     

骨形态发生蛋白-7对大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3表达的影响

目的 观察骨形态发生蛋白-7（BMP-7）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的影响及其机制。方法 将40只SD雄性大鼠随机分为实验组、对照组和假手术组,采用改良线栓法制作大脑中动脉栓塞缺血再灌注（MCAO/R）模型,实验组在缺血2h再灌注后尾静脉注射BMP-7（0.1mg/kg）250μl,对照组和假手术组尾静脉注射等量生理盐水,运用Bederson评分法进行神经功能缺失评分。再灌注24h后将大鼠处死,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法观察梗死灶范围,并计算梗死灶体积占半球体积的百分比;HE染色观察脑组织病理变化,原位缺口末端标记法（TUNEL）计数神经元凋亡数量,免疫组织化学染色观察缺血脑组织内Caspase-3表达。结果 BMP-7组大鼠Bederson评分（1.7±0.5）比对照组（2.7±0.5）明显降低（t =4.66,P ＜0.01）,脑梗死体积百分比（7.6±1.4）比对照组（22.3±4.5）明显降低（t =6.98,P ＜0.01）。与对照组相比,HE染色显示BMP-7组大鼠缺血侧大脑皮质脑组织损伤明显减轻。BMP-7组缺血侧大脑皮质、纹状体及海马TUNEL阳性细胞数（分别为3.6±0.6、7.4 ±1.1、5.0±0.7）明显低于对照组同一区域（分别为13.4±1.1、17.8±1.5、15.4±1.1,P ＜0.01）。BMP-7组缺血侧大脑皮质、纹状体及海马Caspase-3阳性细胞数（分别为7.6±0.9、5.8±0.8、10.6±1.1）明显低于对照组同一区域（分别为15.4±0.6、14.0±1.2、17.2±0.8,P ＜0.01）。结论 BMP-7可通过下调Caspase-3表达而抑制大鼠脑缺血再灌注损伤引起的细胞凋亡,起到神经保护作用。     

lncRNA HCG18调节miR-3619-5p/ITGB2轴对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lnc RNA)人类白细胞抗原复合体18(HCG18)能否通过调控微小RNA(mi R)-3619-5p/整合素β2(ITGB2)轴参与乳腺癌细胞的迁移和侵袭。方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞系及人乳腺上皮MCF-10A细胞系，qRT-PCR和Westernblot检测lncRNAHCG18、miR-3619-5p、ITGB2的表达水平；Starbase数据库预测lncRNA HCG18、ITGB2与miR-3619-5p的结合位点；利用转染技术将MCF-7细胞分为Control组、si-NC组、siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组、si-HCG18+miR-3619-5p inhibitor组、miR-NC组、miR-3619-5p mimics组、miR-3619-5p mimics+pcDNA-NC组、miR-3619-5p mimics+ITGB2组，qRT-PCR和Western blot技术检测各组lncRNA HCG18、miR-3619-5p与ITGB2的表达水平，CCK-8、细胞划痕和Transwell实验分别...     

circTRIM33-12调控miR-191/DAB2轴对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡及上皮-间质转化的影响

目的 探讨circTRIM33-12通过miR-191/DAB2轴对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡及上皮-间质转化（EMT）的影响及其作用机制。方法 RT-qPCR法检测circTRIM33-12、miR-191和DAB2在脑胶质瘤细胞CHG-5和人正常脑胶质上皮细胞HEB中的表达。将培养的CHG-5细胞进行分组：siRNA NC组、circTRIM33-12 siRNA组、DAB2 siRNA组;mimics NC组、miR-191 mimics组;circTRIM33-12 WT+mimics NC组、circTRIM33-12 WT+miR-191 mimics组、circTRIM33-12 MUT+mimics NC组、circTRIM33-12 MUT+miR-191 mimics组;inhibitor NC组、miR-191 inhibitor组;pcDNA+mimics NC组、pcDNA-TRIM33-12+mimics NC组、pcDNA+miR-191 mimics组、pcDNA-TRIM33-12+miR-191 mimics组;DAB2 WT+mimics NC组、DA...     

NF—kB、Bcl-2和Bax蛋白在大鼠脑缺血预处理脑组织中的表达及意义

目的探讨核转录因子-kB（NF—kB）、凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax在大鼠局灶性脑缺血预处理脑组织中的表达及意义。方法线栓法阻断SD大鼠大脑中动脉建立脑缺血预处理及脑缺血模型。TTC染色法测量脑梗死体积，免疫组织化学方法检测前脑皮质、基底核NF—kB、Bcl-2和B＆x蛋白的表达。结果与缺血组相比，预处理缺血组脑梗死体积明显减小（p〈0．01），NF—KB蛋白和Bax蛋白表达的细胞数减少（p〈0．001），Bcl-2蛋白表达细胞数明显增加（p〈0．001）。结论缺血预处理可有效抑制NF—kB的激活并减少神经元的凋亡，Bcl-2蛋白表达增加和Bax蛋白表达下降可能是缺血预处理产生耐受的原因之一。