鼠疫耶尔森氏菌质粒提取方法的改进

大多数鼠疫耶尔林菌均含有三种质粒，分子量分别为６５，４５和６Ｍｄａｌ。其中两种属大质粒，分离提取较困难。本实验在参照Ｃａｓｓｅ法基础上对质粒提取中诸多影响因素逐一进行测试比较，选择出质粒提以的最适条件：细菌培养于２８℃，１８－２２小时，菌液浓度为２００ｍｇ／ｍｌ，溶菌液ＳＤＳ终浓度２％，每１０ｍｌ溶菌液加０．１ＮＮａＯＨ１．３５ｍｌ，４５℃温育３０－４０分钟。建立了一种简便，快速且重复性较高的提取     

云南西南部的鼠疫流行及鼠疫菌质粒DNA特征

近两年,云南西南部鼠疫动物病几度复燃,流行迅猛并波及人间。从1990年至1993年7月,先后有8个县发生12起鼠疫流行。本文检查了分离自这些地区的全部鼠疫菌株的质粒DNA特征,并与西部德宏地区家鼠鼠疫菌株的质粒DNA进行比较,结合鼠疫流行史和近年流行情况,探讨了鼠疫菌质粒DNA特征在流行病学上的意义。     

四种提取细菌质粒DNA方法的比较

四种提取细菌质粒ＤＮＡ方法的比较叶枫，董兴齐，彭何碧（云南省流行病防治研究所大理６７１０００）捉取细菌质粒ＤＮＡ的方法有多种，目前广为应用的是ＳＤＳ裂解法，根据提出质粒的目的要求，ＳＤＳ法又可分为：ＳＤＳ法、ＳＤＳ改进Ⅰ法，ＳＤＳ改进Ⅱ法，强碱法，碱...     

运动省鼠疫疫源地鼠疫菌质粒DNA种类及分子流行病学研究

用琼脂糖凝胶电泳技术，检查了分离自云南省的８２８株鼠疫菌质粒ＤＮＡ特征。结果表明，云南鼠疫菌可到分子量为３．９３，６．０５，２２．９７，３５．６５，４５．６４，４５．３５，６４．８２，７４．５９，１１１．３６和１２９．５５Ｍｄａｌ九种质粒，按粒组成可划分为Ｉ－Ｘ种粒图谱。被检菌株中，９９．１５％具有６．０５，４５．３５和６４．８２Ｍｄａｌ三种规范化质粒，还发现２１．６２％，４．５９％，１．４５Ｔ５     

鼠疫菌大质粒与生长关系的研究

本试验观察了携带大质粒和消除大质粒鼠疫菌株在28℃培养时的生长情况。结果证实消除大质粒的菌株比携带大质粒的菌株生长速度快。     

鼠疫菌特异性质粒快速检测方法的研究——敏感性与特异性实验

快速提取鼠疫菌特异性质粒,可以用于鼠疫的诊断和鉴别诊断。当鼠疫菌量达15×10~7个菌体时呈阳性结果,与大肠杆菌、假结核杆菌、小肠结肠炎杆菌、变形杆菌分别混合无交叉反应。     

鼠疫菌质粒及变异分析

不同鼠疫疫源地的鼠疫菌所携带的质粒种类是不同的,大部分鼠疫菌通常携带规范的质粒,即携带6、45和65Mdal3种质粒。最大一类质粒变异较大,而且独自规律地分布在特定的地理位置,具有分类属性。鼠疫菌携带的质粒,在自然界中和在试验环境下发生变异的情况报道甚少。本试验是测定攻击蚤以后强毒鼠疫菌质粒,证实从蚤体分离出的鼠疫菌,有些菌株的大质粒发生变异,原菌株65Mdal大质粒变成92Mdal。     

新疆鼠疫自然疫源地鼠疫菌质粒图谱分析

测了新疆四大片鼠疫自然疫源地内不同宿主、不同年代的１０９株鼠疫菌的质粒，发现除一株１９７０年分离自玛纳斯灰早獭的菌株自然缺失６Ｍｄａｌ质粒、只携带４５和６５Ｍｄａｌ二种质粒、并伴随鼠疫杆菌素表型丧失外，其余所有的菌株均携带三种质粒。其中８０％的菌携带６、４５和６５Ｍｄａｌ质粒。     

罗平县鼠疫菌质粒特征及流行病学意义

云南省罗平县鲁布革乡多依村于2 0 0 1年 6月下旬发生动物鼠疫流行。我们检查了分离自罗平的 6株鼠疫菌的质粒组成 ,分析了质粒特征所具有的流行病学意义。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　菌株来源　 2 0 0 1年分离自云南省曲靖市罗平县共 6株鼠疫菌 ,其中分离自黄胸鼠 5株 ,褐家鼠 1株。1.1.2　质粒 Mr标准　大肠埃希菌V5 17为青海省地病所惠赠 ,具有 Mr为 1.4、1.8、2 .0、2 .6、3.4、3.7、4.8和35 .8Mdal的 8种质粒。鼠疫 EV株携有 Mr为 6、45、6 5 Mdal的 3种质粒。鼠疫菌 (屏边 N0 .19、临沧 N0 .793 )含有相对分子质量 ( Mr)分别…     

鼠疫菌36Mdal质粒的发现及鉴定

云南省瑞丽县的一株鼠疫菌,除具有已知的6、45和65Mdal三种质粒外,尚可检出另外一种36Mdal质粒。     

RP4质粒转移给鼠疫菌的研究

利用携带ＲＰ４质粒的大肠杆菌与鼠疫菌进行了转移实验，获得了接合子，证实ＲＰ４质粒向鼠疫菌转移频率为１０＾６，ＲＰ４质粒能随鼠疫菌传代，鼠疫菌所含的６５Ｍｄａｌ、４５Ｍｄａｌ、１３Ｍｄａｌ、６Ｍｄａｌ质粒与ＲＰ４质粒相容。未发现ＲＰ４质粒诱动鼠疫菌质粒ＤＮＡ。鼠疫菌自身质粒不能自行转移。     

鼠疫菌质粒与四种毒力因子关系

本文报道147008菌株的各突变株的质粒图型与鼠疫菌四种毒力因子的关系。通过实验证实66Mdal大质粒决定Fra的产生,45Mdal决定VWa的产生和钙依赖,小质粒6Mdal决定Pst的产生,Pgm与已知的质粒无关。     

宁夏鼠疫菌质粒生物学特征研究

目的 研究宁夏126株鼠疫菌的质粒、毒力决定因子与毒力的关系，预测动物鼠疫的流行。方法 质粒凝胶电泳、毒力因子测定和半数致死量(LD50)试验。结果 被试菌株多数含有6，13，45，65MD质粒，具有4种毒力因子；在流行末期分离的菌株毒力较弱。结论 质粒分析可用于鼠疫菌的鉴别诊断。     

云南省鼠疫疫源地鼠疫菌质粒DNA种类及分子流行病学研究

用琼脂糖凝胶电泳技术，检查了分离自云南省的８２８株鼠疫菌质粒ＤＮＡ特征。结果表明，云南鼠疫菌可观察到分子量为３．９３、６．０５、２２．９７、３５．６５、４５．３５、６４．８２、７４．５９、１１１．３６和１２９．５５Ｍｄａｌ九种质粒，按质粒组成可划分为Ⅰ～Ⅹ种质粒图谱。被检菌株中，９９．１５％具有６．０５、４５．３５和６４．８２Ｍｄａｌ三种规范化质粒，还发现２１．６２％、４．５９％、１．４５％和３．５％的菌株分别尚存３．９３、２２．９７、３５．６５和１１１．３６Ｍｄａｌ质粒，这些质粒有特定的分布区域，具有重要的分子流行病学意义。根据质粒图谱，可将我省鼠疫现有疫区初步划分成滇西北山地、保山盆地、大盈江、陇川江、南定河、澜沧江下游和红河元江段流域七大相对独立的疫源区。本研究的结果结合既往流行病学资料，似可说明：①质粒组成可作为云南省鼠疫疫源地中疫源地划分的重要指标；②云南家、野鼠两型疫源地菌株具有共同的遗传变异性；③近几年之间鼠疫有复燃也存在异地传播；④云南西南部存在鼠疫疫源。     

快速诊断鼠疫菌方法的研究

本方法用ＮＳ裂解液，通过琼脂糖凝胶电泳快速检测鼠疫菌和异性质粒ＤＮＡ，用于对鼠疫的诊断，该方法简便，快速，特异性强，诊断阳性率１００％，对非典型鼠疫菌尤为适用。     

鼠疫菌4Mdal质粒的分布特征

1990～ 1994年董兴齐等发现 99.15 %的鼠疫菌都含有 6、45和 6 5 Mdal 3种规范质粒 ,其中 179株 (澜沧县 42株、勐海县49株、临沧县 73株、景洪县 15株 )还具有一种 4Mdal的新质粒[1 ] 。我们对 1995～ 1999年新分离的 134株鼠疫菌质粒 DNA进行了检查 ,其结果报告如下。1　材料和方法1.1　菌株来源 :云南省 1995～ 1999年 8个地州 2 6个县市新分离鼠疫菌 134株 ,其中鼠 119株 ,蚤 13株 ,人 2株。1.2　对照菌株 :大肠杆菌 V5 17,含有 1.4～ 35 .8Mdal8种质粒 ;鼠疫 EV株含有 6、45和 6 5 Mdal3种质粒。1.3　试验方法 :参照 Kado法 [2 ] …     

青藏铁路沿线鼠疫菌质粒的研究

目的 检测青藏铁路沿线鼠疫菌携带的质粒种类及相对分子质量.方法 采用碱裂解,酚一氯仿抽提法提取鼠疫菌质粒,经琼脂糖凝胶电泳进行检测并分析质粒的相对分子质量.结果 所检测的18株鼠疫菌具有6×106,45×106,52×106,65×106,92×106质粒,其中大质粒的变化范围在52×106～92×106.结论 青藏铁路沿线鼠疫菌除具有规范的质粒图谱外,鼠疫菌最大质粒的变化有一定的规律性,具有分类属性,对研究鼠疫自然疫源地空间结构和鼠疫菌的遗传学特性具有重要意义.