平和质慢性HBV携带者T淋巴细胞亚群及Th1/Th2型细胞因子分析

目的:通过对平和质慢性HBV携带者外周血中T淋巴细胞亚群及Th1/Th2型细胞因子的分析,了解平和质慢性HBV携带者的免疫状况。方法:对175例平和质慢性HBV携带者采用流式细胞术和酶联免疫吸附法,分别检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及Th1/Th2型细胞因子(IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10)水平。结果:与健康人比较,平和质慢性HBV携带者外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞百分率与CD4+/CD8+比值明显降低,Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ水平均明显偏低,而CD8+T淋巴细胞百分率及Th2型细胞因子IL-4和IL-10水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:平和质的慢性HBV携带者,其机体细胞免疫功能仍表现为明显的低下与失衡。     

尖锐湿疣中医证型与Th1/Th2细胞因子水平的关系研究

目的探讨尖锐湿疣(CA)患者不同中医证型与Th1/Th2细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10mRNA表达的相关性,为CA的客观化、微观化中医辨证分型提供理论依据。方法将CA患者随机分为Ⅰ型-湿热蕴结型(24例)和Ⅱ型-正虚邪恋型(18例),采用RT-PCR法检测两组患者外周血单个核细胞IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10mRNA表达水平,并与20例正常健康者作对照。结果湿热蕴结型患者Th1型细胞因子IFN-γmRNA表达增强,正虚邪恋型患者Th2型细胞因子IL-4mRNA表达增强(P<0.05)。结论CA患者存在Th1/Th2型细胞因子失衡现象。正虚邪恋型患者存在Th2漂移现象。根据CA患者机体的Th细胞亚群漂移状况,结合辨证分型论治,也许疗效更好。     

孕康口服液及其不同药效部位对肾虚流产大鼠外周血及Th1/Th2细胞因子的影响

目的:孕康口服液及其不同药效部位对肾虚流产大鼠外周血及Th1/Th2型细胞因子的影响。方法:采用羟基脲连续灌胃9天,第10,11天灌胃米非司酮制备肾虚流产孕鼠模型,计算孕鼠流产率,ELISA法观察孕鼠血清中β-HCG、P、E2表达,比较Th1/Th2细胞因子(TNF-α/IL-4和IL-2/IL-4)比值变化。结果:与模型组相比,孕康口服液12 ml/kg及其不同药效部位组(乙酸乙酯部位组,正丁醇部位组,水溶液部位组)12 ml/kg孕鼠流产率显著降低,血清中β-HCG、P、E2水平显著升高,TNF-α、IL-2表达明显降低,TNF-α/IL-4、IL-2/IL-4比值也明显降低,孕康口服液、乙酸乙酯组、水溶组孕鼠血清中IL-4表达明显升高。结论:孕康口服液及其不同药效部位对肾虚流产大鼠有显著的改善作用,其机制可能是通过调节Th1/Th2因子的动态平衡,达到抗流产作用。     

免疫性肝损伤小鼠Th1/Th2细胞的变化

目的:探讨Th1/Th2细胞在免疫性肝损伤小鼠中的作用.方法:应用尾静脉注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤小鼠模型,分离小鼠淋巴细胞,经佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能菌素刺激培养6小时后,收获细胞,利用细胞内细胞因子染色流式细胞术检测Th2/Th2比例;另外经刀豆蛋白A(ConA)刺激培养72h后,收集培养上清,ELISA法检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的水平,同时观察地塞米松对Th1/Th2细胞的影响.结果:在模型组,随着时间的延长,小鼠外周血PBMC中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平逐渐升高,Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平逐渐降低,Th1细胞的百分率逐渐升高,Th2细胞的百分率逐渐降低,Th1/Th2的比值逐渐增大,与肝组织损害程度呈现正相关.地塞米松能够抑制Th1型细胞因子的分泌,降低Th1细胞的百分率,恢复Th1/Th2的比例,对肝组织损害具有保护和改善作用(P＜0.05).结论:Th1/Th2细胞失衡是造成小鼠免疫性肝损伤的原因之一,Th1应答占主导地位.     

钩吻素子对小鼠CD4+T淋巴细胞Th1类及Th2类细胞因子分泌的影响

目的:研究钩吻素子(Koumine,Kou)对小鼠CD4 T淋巴细胞Th1类及Th2类细胞因子分泌的影响.方法:分离纯化小鼠脾脏CD4 T淋巴细胞,经刀豆球蛋白A(ConcanavalinA,ConA)刺激诱生细胞因子,然后加入不同浓度的Kou,继续培养24小时后离心收集细胞培养上清.用酶联免疫法(ELISA法)检测细胞上清中Th1类细胞因子IL2、IFN-γ以及Th2类细胞因子IL-4、IL-10的含量变化情况,观察药物对CD4 T淋巴细胞因子表达的影响.结果:对于Th1型细胞因子,各浓度组Kou作用24 h后均可显著降低IL-2、IFN-γ的水平,并呈剂量依赖性;对于Th2型细胞因子,Kou对IL-4表达影响不大,但中浓度组Kou(100μg/ml)可显著升高IL-10的水平.结论:对CD4 T细胞Th细胞因子分泌的调节可能是Kou治疗银屑病等T细胞活化异常炎症性疾病的免疫药理机制之一.     

补肾通脉方对2型糖尿病大鼠血清细胞因子及相关激素水平的影响

目的:探讨补学通脉方对2型糖尿病(DM)大鼠炎性细胞因子及相关激素水平的影响。方法:采用小剂量链脲佐菌素(STZ)加高热量饲养方法建立Wistar大鼠2型DM模型,并随机分为模型组、中药组及西药组,另设正常组;以葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FBG)、采用放射免疫测定法检测各组大鼠血清胰岛素(INS)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF一α)、胰高血糖素(Glu)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平,结果:与模型组比较,中药组大鼠FBG、INS均显著降低(P<0.05,P<0.01),而胰岛素敏感指数(ISI)增加(P<0.05);血清IL 1β、TNF-α显著降低(P均<0.05),Glu也明显降低(P<0.05),而IGF-1水平则显著提高(P<0.01)。结论:补肾通脉方能降低2型糖尿病大鼠炎性细胞因子TNF-α和IL-1β水平,调整糖代谢激素(Glu和IGF-1的平衡,并可能是其降低空腹血糖和高胰岛素血症、改善胰岛素抵抗的部分作用机制。     

保孕颗粒对流产大鼠模型血清Th1/Th2细胞因子影响的实验研究

目的:观察保孕颗粒对流产大鼠模型血清Th1/Th2细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ)的影响。方法:用羟基脲和米非司酮造SD大鼠流产模型,随机分为造模组、治疗组、空白对照三组,用药7d后处死,采外周血血清ELISA法检测IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ等细胞因子水平。结果:治疗组外周血中Th2细胞因子表达与造模组比较均较高,与对照组比较虽较低但无显著性差异。提示:保孕颗粒具有纠正肾虚流产大鼠外周血中Th1/Th2平衡反向偏移的作用,从而达到防治流产的目的。     

抵当汤调控深静脉血栓形成大鼠Th1/Th2信号漂移的实验研究

目的:探讨深静脉血栓形成(DVT)大鼠辅助性T细胞(Th)Th1/Th2信号漂移的变化规律及抵当汤的干预机制。方法:选取雄性Wistar大鼠120只,分为假手术组、模型组、抵当汤小剂量组和抵当汤大剂量组,每组30只,每组又根据术后第1、3、7日处死时间的不同随机平均分笼饲养。Reyers法制备DVT大鼠模型,造模成功后假手术组和模型组大鼠每日给予生理盐水灌胃,抵当汤大、小剂量组每日分别给予1.8、0.9g/100g体重抵当汤药液灌胃。于术后第1、3、7日灌胃2h后,取相应10只大鼠,腹腔麻醉,开腹,腹主动脉取血,检测Th1、Th2细胞因子的变化。结果:血栓形成后同一时相,模型组较假手术组的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)显著升高(P0.01)。随着干预天数的增加,模型组IL-10/TNF-α比值在第3天变小,第7天增大,而IFN-γ/IL-4比值在第3天增大,第7天回落。抵当汤治疗后TNF-α、IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值较模型组显著降低(P0.01),IL-4、IL-10水平及IL-10/TNF-α比值较模型组显著升高(P0.05,P0.01),且抵当汤大剂量组作用强于抵当汤小剂量组。结论:Th1/Th2信号漂移与DVT的发生密切相关,抵当汤呈剂量依赖性地升高Th2细胞因子的分泌,抑制Th1细胞因子表达,进而调节Th1/Th2信号平衡,达到治疗DVT的目的。     

复方莪术汤对子宫内膜异位症大鼠Th1/Th2平衡的调节作用

目的:观察复方莪术汤对子宫内膜异位症(EMS)模型大鼠辅助性T细胞1(Th1)与辅助性T细胞2(Th2)的比值(Th1/Th2)平衡的调节作用.方法:采用自体移植法制作EMS大鼠模型,复方莪术汤14.58,29.16 g?kg-1ig,28 d后,肝素抗凝抽取腹主动脉血,应用流式细胞技术检测EMS大鼠外周血CD4、CD8及CD4/CD8及Th 1/Th2.结果:模型组外周血CD4/CD8( 1.42±0.22)较空白对照组下降(P＜0.05),Th2型细胞较空白对照组显著升高,Th1/Th2(31.46±17.71)比值下降(P＜0.05).复方莪术汤组与模型组比较,外周血CD3,CD4,CD4/CD8(高、低剂量分别为2.30±0.67,2.02±0.53)上升,CD4 IL-4下降,Th1/Th2(高、低剂量分别为65.75±29.33,60.86±25.56)上升,差异有统计学意义(P＜0.05);复方莪术汤组与孕三烯酮组比较,各项指标无统计学差异.结论:EMS大鼠外周血呈Th2优势漂移现象,Th1/Th2失衡在EMS的发病机制中可能具有重要作用.复方莪术汤能有效调节EMS大鼠Th1/Th2失衡,在大鼠EMS治疗中参与了免疫调节.     

海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠Th1/Th2细胞的调节作用

目的:探讨海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠外周血Th1/Th2细胞平衡的调节作用。方法:应用尾静脉注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤小鼠模型,分离小鼠淋巴细胞,经佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能菌素刺激培养6h后,收获细胞,利用细胞内细胞因子染色流式细胞术检测Thl/Th2比例;另外经刀豆蛋白A(ConA)刺激培养72h后,收集培养上清,ELISA法检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的水平。结果:在模型组,小鼠外周血PBMC中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平升高,Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平降低,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05);Th1细胞的百分率升高,Th2细胞的百分率降低,Th1/Th2的比值增大,与肝组织损害程度呈现正相关。海珠益肝胶囊能够抑制Th1型细胞因子的分泌,降低Th1细胞的百分率,恢复Th1/Th2的比例,对肝组织损害具有保护和改善作用(P<0.05)。结论:Th1/Th2细胞失衡是造成小鼠免疫性肝损伤的原因之一,Th1应答占主导地位,海珠益肝胶囊能够调节Th1/Th2细胞平衡,对肝组织损害具有保护和改善作用,可能是其免疫药理机制之一。     

中医药防治哮喘与Th1/Th2的平衡调节

支气管哮喘(简称哮喘)属世界多发病,疑难病,其发病机制目前尚不十分明确。因此,对于哮喘的防治存在一定的困难。当今的研究表明:Th1/Th2的失衡与哮喘的发病有着密切的关系,但是西医对于这一失衡问题缺乏有效的解决方法,中医药运用多途径、多环节、多靶点的治疗特点能有效解决这一问题。回顾中医药防治哮喘的相关研究,结合中医理论与西医发病机理,探讨中医药防治哮喘与Th1/Th2的平衡调节关系,以期为哮喘的防治开辟新思路与方法。     

通络止痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠Th1/Th2的调节作用

目的从分子水平研究通络止痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠Th1/Th2的调节作用。方法按随机原则将50只Wistar大鼠分为正常组、模型组,以及通络止痛胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组10只。用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测大鼠外周血细胞因子IFN-γ和IL-4的表达情况。结果与正常组比较,模型组Th1明显升高(P<0.01)、Th2明显降低(P<0.01),Th1/Th2显著升高(P<0.01);通络止痛胶囊治疗组Th1细胞数较模型组明显降低,Th2细胞数明显升高,Th1/Th2显著降低,均以高剂量组最为显著。结论通络止痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠外周血Th1、Th2细胞数及其比值的调节保持Th1/Th2平衡,从而起到治疗佐剂性关节炎的作用。     

Th1/Th2平衡紊乱与中医证本质之关系

辨证论治是中医论治思想的精华所在。将现代医学理论同中医证本质联系，是实现中西医理论结合的基础。以往学者从自主神经功能紊乱、激素分泌失调、免疫功能紊乱、第二信使分子类物质（如cAMP和cGMP）、微量元素含量等各方面对中医证的本质进行研究，发现其都不能全面地解释与代替证的内涵。在前人研究的基础上，不难发现中医的证反应的是神经、内分泌、免疫等多系统综合功能的变化，因此证的本质应是患病时机体各方面变化的基础反应。一些学者提出了中医证的本质是细胞因子，认为其基本发病机制是由于细胞因子网络的平衡紊乱。     

针灸对常年性变应性鼻炎患者外周血单个核细胞Th1/Th2细胞因子的影响

目的观察针灸上迎香、上星、足三里穴,对常年性变应性鼻炎患者临床症状、体征、Th1/Th2细胞因子的影响,以及对Th1/Th2的平衡失调的调控作用,以期为针灸治疗本病提供客观依据,进而探讨其作用机制。方法(1)选择符合诊断标准的30例常年性变应性鼻炎患者为针灸治疗组(30例),设30例健康人为正常对照组。(2)治疗前、第1疗程后、第2疗程后进行以下项目的观察:①临床症状和体征的评分。②采用鼻额镜观察鼻黏膜。(3)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定外周血单个核细胞(PBMC)经PHA诱导培养后上清液中的白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)以及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的含量。结果(1)针灸治疗组的变应性鼻炎患者治疗前的IL-4、GM-CSF水平均显著高于健康组(P<0.01),而IFN-γ水平显著低于正常对照组(P<0.01)。(2)针灸治疗组的GM-CSF水平与IL-4呈正相关(P<0.01),与IFN-γ呈负相关(P<0.01)。(3)针灸治疗组经治疗后IL-4和GM-CSF水平较治疗前均有显著性下降(P<0.01),IFN-γ水平升高(P<0.05),且治疗后IL-4、GM-CSF、IFN-γ水平均与正常对照组无显著性差异(P>0.05)。结论(1)针灸上迎香、上星、足三里穴对常年性变应性鼻炎患者症状及体征有明显的改善作用,并且能够加强机体免疫力。(2)针灸上迎香、上星、足三里穴可以通过调节患者体内Th1和Th2细胞因子的表达,纠正失衡的Th1/Th2的细胞因子网络而对常年性变应性鼻炎产生治疗作用。     

中药复肝液体外抗乙肝病毒及对Th1/Th2细胞平衡的调节作用

目的 探讨中药复肝液体外抗乙肝病毒作用及对Th1／Th2细胞平衡的调节作用。方法 观察不同浓度复肝液对HepG2．2．15细胞株HBV抗原、DNA表达及对Th1／Th2细胞平衡调节的影响。采用ELISA法测定HBsAg、HBeAg、INF-1及IL-4定量，采用荧光定量PCR法测定HBVDNA定量。结果 复肝液不同浓度组体外抗乙肝病毒存在显著差异，80μg／ml浓度复肝液可明显抑制培养HepG2．2．15细胞HBsAg、HBeAg表达及分泌HBVDNA，复肝液对各组（患者、正常对照PBMC）Th1／Th2平衡调节无显著差异。结论复肝液有明显的体外抗乙肝病毒活性作用，对Th1／Th2平衡无明显影响。     

Propolis effect on Th1/Th2 cytokines production by acutely stressed mice

Aim of the study

Propolis has gained special attention due to its biological properties, however, little is known about its immunomodulatory effects in stress conditions. The purpose of this study was to investigate propolis effect on Th1/Th2 cytokines production by spleen cells of acutely stressed mice. Serum corticosterone concentration was determined as a stress indicator.

Materials and methods

Male BALB/c mice were submitted to restraint stress and treated with propolis (200 mg/kg) for 3 days. Supernatants of splenocytes cultures were assessed for Th1/Th2 cytokines determination.

Results

Regarding Th1 cytokines production, no alterations were seen in IL-2 production; however, IFN-γ production was inhibited in stressed mice, even when treated with propolis. As to Th2 cytokines, IL-4 was inhibited in stressed mice, but normal levels were seen when these animals were treated with propolis. No significant differences were found in IL-10 production between the experimental groups. Stressed groups (treated or not with propolis) showed higher corticosterone concentrations in comparison to control group.

Conclusions

Data suggest that propolis treatment was not able to counteract the stress-induced immunosuppressive effect on IFN-γ production; however, propolis showed an immunorestorative role, increasing IL-4 production in stressed mice, favoring humoral immune response during stress. Since the exact mechanisms of this natural product on immune system are still unclear, further studies are still required for a better comprehension of propolis use as a therapeutic alternative against the stress-induced negative effects that could lead to the development of various diseases.     

中药对Th1/Th2细胞因子平衡调节作用的研究进展

概述中药对Thl/Th2平衡的调节作用,主要包括中药对自身免疫疾病Th1/Th2平衡的影响、对肿瘤Th1/Th2平衡的影响、对变态反应性疾病Th1/Th2平衡的影响以及对不同中医证型Th1/Th2平衡的影响等。     

补肾中药对哮喘缓解期患儿Th1/Th2平衡的影响

目的探讨补肾中药调节T1／Th2平衡治疗哮喘的分子机制。方法哮喘缓解期儿童20例,抽取静脉抗凝血分离单个核细胞（peripheral blood mononuelear cells,PBMC）。每份血样均分为3部分,分为空白组、喘可治（CKZ）Ⅰ组和CKZⅡ组,加入不同浓度的药物体外培养48h,分别收集细胞沉淀。荧光定量PCR检测T—bet mRNA、GATA-3 mRNA的表达强度及细胞因子IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA的表达水平。结果不同剂量CKZ干预后,PBMC中T—bet mRNA的表达均较空白组显著增强,以CKZⅡ组的差异更为明显（P〈0．01）;CKZ组与空白组比较,GATA-3 mRNA的表达强度差异无显著性;CKZ组的IFN-γ mRNA的表达较空白组增强,其中CKZⅡ组与空白组比较差异有显著性（P〈0．05）;CKZⅡ组IL-4 mRNA的表达强度较空白组显著减低（P〈0．01）。CKZ组的T—bet／GATA-3比值与空白组比较,差异无显著性（P〉0．05）;CKZ组的IFN-γ／IL-4的比值较空白组上升,其中CKZⅡ组与空白组相比显著升高（P〈0．05）。结论补肾中药CKZ可以通过转录因子和细胞因子多个环节,增强Th1细胞的功能,同时抑制Th2细胞的功能,对Th1／Th2平衡具有多层次的调节作用。     

益肺调血汤对变应性鼻炎大鼠血清Th1/Th2水平的影响

目的:观察自拟益肺调血汤对实验性变应性鼻炎(AR)大鼠血清Th1/Th2水平的影响.方法:采用二异氰酸甲苯酯(TDI)对大鼠进行实验性AR造模,50只大鼠,随机分为正常组、模型(AR)组、辛芩颗粒对照组及中药复方高、低剂量治疗组5组,每组10只.灌胃治疗2周后,处死,腹主动脉取血,检测血清中IFN-γ、IL-4水平的变化.结果:用药各组,Th1/Th2水平明显高于AR组,与正常组无明显差异.结论:益肺调血汤通过调节Th1和Th2细胞因子的表达,可纠正失衡的Th1/Th2的细胞因子网络而对AR产生治疗作用.     

千佛菌对老龄小鼠Th_1/Th_2漂移的影响

目的:通过研究千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠外周血Th1、Th2型细胞因子(IFN-γI、L-4)水平及I FN-γ/I L-4比值的影响,探讨千佛菌对衰老机体的免疫调节作用。方法:将小鼠随机分为正常对照组、衰老模型组、千佛菌大、小剂量组。除正常组外,其余均腹腔注射D-半乳糖制备衰老模型。千佛菌大、小剂量组分别以100%和50%药液每只每日0.4 mL灌胃,其余等量生理盐水灌胃。测定血清中IFN-γI、L-4含量并计算IFN-γ/IL-4比值,测定脾脏及胸腺指数。结果:模型组小鼠血清IFN-γI、L-4水平I、FN-γ/IL-4比值、脾脏及胸腺指数均明显降低,与正常组比较P0.001;与模型组比较,千佛菌大、小剂量组IFN-γI、L-4水平、脾脏及胸腺指数均明显升高P0.001I,FNγ/IL-4比值恢复;千佛菌大、小剂量组间IFN-γI、L-4比较P0.001。结论:千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠Th1、Th2型细胞因子水平及IFN-γ/IL-4比值具有升高作用,并能够显著增加小鼠的脾脏及胸腺指数,对D-半乳糖导致衰老的Th1/Th2免疫失衡具有一定的调节作用,能使之趋向恢复正常。